IL-6免疫放射检测方法的建立及其应用

采用B淋巴细胞杂交瘤技术,建立分泌抗人IL-6单抗的杂交瘤细胞株;诱生腹水法制备单抗;Protein G免疫亲合层析法纯化单抗;改良的氯胺T法进行单抗的^(125)Ⅰ标记;在对单抗识别抗原位点鉴定的基础上,建立了稳定、可靠的IL-6免疫放射检测方法(Immunoradio assay,IRA)。其灵敏度为5 pg/ml,检测范围为5～200 pg/ml。采用该法分析的多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)患者血清中IL-6的含量平均为356 pg/ml,明显高于正常对照组的16.9 pg/ml(P<0.01)。

可溶性白细胞介素-6受体结合链免疫放射检测方法的建立及应用

目的 建立一种可溶性白细胞介素 6受体结合链 (IL 6Rα)免疫放射检测方法。方法采用B淋巴细胞杂交瘤技术获取分泌鼠抗人可溶性IL 6Rα单抗的杂交瘤细胞株 ;经体内诱生腹水法制备单抗 ;免疫亲合层吸法纯化单抗 ;用 12 5I标记单抗后 ,采用竞争抑制分析法对单抗识别的抗原表位进行鉴定 ,选择识别不同抗原表位的 2株单抗H12 6和SI10分别作为包被单抗和检测单抗 ,建立双单抗夹心的可溶性IL 6Rα免疫放射检测方法。分析该检测方法与可溶性IL 6Rα相关的细胞因子白细胞介素 6 (IL 6 )及可溶性IL 6信号传导链 (IL 6Rβ ,也称gp130 )的交叉反应性 ;采用加入 回收法对检测方法的准确性进行鉴定 ,并绘制标准工作曲线 ,然后测定正常人及多发性骨髓瘤患者血清中可溶性IL 6Rα的含量。结果 建立的可溶性IL 6Rα免疫放射检测方法的灵敏度为 10ng/ml,具有良好线性关系的检测范围是 10～ 4 0 0ng/ml,与IL 6及可溶性gp130 (sgp130 )无交叉反应性 ,加入重组可溶性IL 6Rα的回收率在 92 %～ 10 8%之间。正常人血清中可溶性IL 6Rα的含量为 (81 96± 7 2 3)ng/ml,多发性骨髓瘤患者血清中可溶性IL 6Rα的含量为 (2 37 5 8± 70 96 )ng/ml,明显高于正常对照组 (P <0 0 1)。结论 该检测方法能够对血液中可溶性IL 6Rα进行?

Research on Comparison of Gas Chromatography and Liquid Chromatogram Detecting Pesticide Residue

The existing methods of detecting pesticide residue include gas chromatography, high performance liquid chromatography, gas chromatograph-mass, liquid chromatograph-mass, capillary electrophoresis, radioimmunoassay, biosensor and rapid detection on the spot. The paper analyzes the comparison of gas chromatography and liquid chromatogram detecting pesticide residue, for achieving the development tendency and the future goal of analyzing pesticide residue.