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整合REV-LTR基因的MDV活疫苗与亲本CVI988/Rispens株的免疫效力比较
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作者 张秀梅 宋翠萍 +6 位作者 谭磊 孙英杰 刘炜玮 廖瑛 丁铲 仇旭升 罗廷荣 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2024年第1期73-81,共9页
利用同源重组技术将禽网状内皮组织增生症病毒(REV)的长末端重复序列(LTR)整合进CVI988/Rispens疫苗株基因组中所构建成的重组马立克氏病病毒株(r MDV-LTR株),具有较高的增殖效率。为比较r MDV-LTR株与亲本CVI988/Rispens株的免疫效力差... 利用同源重组技术将禽网状内皮组织增生症病毒(REV)的长末端重复序列(LTR)整合进CVI988/Rispens疫苗株基因组中所构建成的重组马立克氏病病毒株(r MDV-LTR株),具有较高的增殖效率。为比较r MDV-LTR株与亲本CVI988/Rispens株的免疫效力差异,开展了对这两种疫苗的比较试验。试验将这两种疫苗分别按照三个不同剂量经颈背部皮下接种1日龄SPF鸡。接种后第7 d,攻毒马立克氏病强毒株rMd5,连续观察60 d后进行剖检。临床病理观察结果发现,以不低于250 PFU/羽剂量的rMDV-LTR株或CVI988/Rispens株免疫SPF雏鸡都可以提供大于80%的免疫保护效率;以125 PFU/羽剂量的两种疫苗虽均不能提供大于80%的免疫保护效力,但rMDV-LTR株免疫组试验鸡未出现死亡,仅有2只鸡出现消瘦,剖解脏器无肿瘤,而CVI988/Rispens株免疫组鸡出现2只死亡,其中1只剖解后检出肿瘤。rMDV-LTR株和CVI988/Rispens株免疫组的免疫保护指数分别为77.78%和66.67%。由实验结果可见,在较小免疫剂量下,rMDV-LTR株免疫保护率高于亲本CVI988/Rispens疫苗株。说明重组毒rMDV-LTR疫苗株可以作为一种安全的、有效的新型MDV疫苗。 展开更多
关键词 马立克氏病 重组病毒 禽网状内皮组织增生症病毒的长末端重复序列 攻毒保护 免疫效力
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猪支原体肺炎灭活疫苗免疫效力与兔体免疫抗体效价平行试验研究
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作者 李秋菊 张玉晶 沈青春 《当代畜禽养殖业》 2024年第3期20-23,共4页
本研究对抗原含量接近标准要求的猪支原体肺炎(MPS)灭活疫苗(S株),采用不同浓度梯度免疫健康仔猪后进行攻毒,观察仔猪肺脏病变结果;同时,使用该批次疫苗免疫健康家兔测定间接血凝试验(IHA)抗体效价水平。结果表明:使用兔体免疫测定IHA... 本研究对抗原含量接近标准要求的猪支原体肺炎(MPS)灭活疫苗(S株),采用不同浓度梯度免疫健康仔猪后进行攻毒,观察仔猪肺脏病变结果;同时,使用该批次疫苗免疫健康家兔测定间接血凝试验(IHA)抗体效价水平。结果表明:使用兔体免疫测定IHA抗体阳性率的方法可以作为MPS灭活疫苗替代动物的效力检验标准。本试验为MPS灭活疫苗的研究提供了数据支持。 展开更多
关键词 免疫效力 抗体效价 平行试验
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马链球菌兽疫亚种重组表面蛋白rSeseC-02147免疫效力评价
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作者 林永进 冯佩然 +6 位作者 杨亚林 郭政 李亚娟 李舜 孙芹芹 黄云飞 付强 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期1843-1853,共11页
【目的】通过原核表达系统制备马链球菌兽疫亚种(SEZ)重组表面蛋白rSeseC-02147,并系统评价其抵御SEZ感染的免疫效力,为SEZ亚单位疫苗的研发提供候选抗原。【方法】构建原核表达载体pCold I-SeseC-02147,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细... 【目的】通过原核表达系统制备马链球菌兽疫亚种(SEZ)重组表面蛋白rSeseC-02147,并系统评价其抵御SEZ感染的免疫效力,为SEZ亚单位疫苗的研发提供候选抗原。【方法】构建原核表达载体pCold I-SeseC-02147,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞后进行异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,纯化回收重组蛋白rSeseC-02147并免疫BALB/c小鼠,以SEZ灭活疫苗为阳性对照、PBS为阴性对照,二免后第14 d于小鼠颌下静脉采集血清,分别采用Western blotting和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测重组蛋白rSeseC-02147反应原性及小鼠血清抗体效价和抗体亚型属性;并通过小鼠免疫保护试验、腹腔灌洗液细菌载量测定及脏器组织病理学观察,系统评估重组蛋白rSeseC-02147对小鼠的免疫保护力。【结果】构建的原核表达载体pCold I-SeseC-02147经IPTG诱导能成功表达获得重组蛋白rSeseC-02147,其纯化后的浓度为2.86 mg/mL。重组蛋白rSeseC-02147能与免疫组和阳性对照组小鼠血清发生特异性反应,而与阴性对照组小鼠血清未发生特异性反应,表明重组蛋白rSeseC-02147具有良好的反应原性与特异性;以重组蛋白rSeseC-02147免疫小鼠产生的血清抗体效价远高于SEZ灭活疫苗,且IgG1亚型极显著高于IgG2a亚型(P<0.01,下同)。重组蛋白rSeseC-02147可为小鼠提供抵御SEZ感染的免疫保护力,攻毒后14 d内的存活率60%;此外,重组蛋白rSeseC-02147免疫小鼠后的腹腔灌洗液细菌载量极显著低于阴性对照组小鼠,且肺脏、肾脏和脾脏等组织的病理损伤程度较轻。【结论】通过原核表达系统制备获得的重组蛋白rSeseC-02147具有良好的特异性与反应原性,通过抑制SEZ增殖及减轻SEZ对机体脏器的损伤而发挥免疫保护作用。可见,重组蛋白rSeseC-02147具有开发成SEZ亚单位疫苗的潜力。 展开更多
关键词 马链球菌兽疫亚种(SEZ) 表面蛋白 SeseC-02147基因 免疫效力 亚单位疫苗
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伪狂犬病病毒gE/gI缺失株CY-6的构建及免疫效力初步研究
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作者 曲信芹 魏波 +5 位作者 徐丽丽 刁治君 韩成昊 蔡青秀 丛雁方 马爱琴 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2024年第3期9-18,共10页
构建针对伪狂犬病病毒gE和gI基因缺失的重组转移质粒pBL-gI-gE,将PRV-CY-ΔgI/gE-GFP病毒、pBL-gI-gE转移载体和Lipofectamin 2000转染试剂共转染BHK-21细胞,蚀斑筛选纯化法得到重组病毒PRV-CY-ΔgI/gE,命名为CY-6株。将CY-6株C1代在BHK... 构建针对伪狂犬病病毒gE和gI基因缺失的重组转移质粒pBL-gI-gE,将PRV-CY-ΔgI/gE-GFP病毒、pBL-gI-gE转移载体和Lipofectamin 2000转染试剂共转染BHK-21细胞,蚀斑筛选纯化法得到重组病毒PRV-CY-ΔgI/gE,命名为CY-6株。将CY-6株C1代在BHK-21细胞增殖并传至10代,测定生长曲线、病毒含量、基因鉴定、特异性、纯净、毒力和免疫原性。结果CY-6株的生长曲线与亲本CY株无明显变化,C1~C10代毒的病毒含量为10^(8.17)~10^(8.68) TCID50/mL,基因鉴定显示gE基因无366 bp的目的条带,gD基因有1条217 bp的目的条带,gI基因无331 bp的目的条带,特异性检验显示均能被伪狂犬病病毒特异性阳性血清中和;纯净检验该毒种无菌、支原体及外源病毒污染;毒力试验试验猪均5/5健活,免疫原性试验免疫组5/5保护,CY株攻毒对照组5/5发病,其中3/5死亡。以上结果表明伪狂犬病病毒CY-6株符合生产用毒种的初步要求,为研制新型伪狂犬病病毒基因缺失灭活疫苗奠定基础。 展开更多
关键词 伪狂犬病病毒 基因缺失 免疫效力
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不同厂家猪肺炎支原体灭活疫苗免疫效力对比实验
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作者 王鹏江 曹剑 +9 位作者 刘强德 王钢 候凤 李新萍 袁科 丁占强 武天增 连凡平 张志鹏 贺笋 《中国动物保健》 2024年第4期104-105,共2页
本研究旨在评价不同厂家猪肺炎支原体灭活疫苗的免疫攻毒保护效果。选择4周龄仔猪25头,随机分为5组,每组5头猪,分别免疫四种猪肺炎支原体灭活疫苗(即疫苗A组、疫苗B组、疫苗C组、疫苗D组),E组为攻毒对照组,不做任何处理,在同等条件下隔... 本研究旨在评价不同厂家猪肺炎支原体灭活疫苗的免疫攻毒保护效果。选择4周龄仔猪25头,随机分为5组,每组5头猪,分别免疫四种猪肺炎支原体灭活疫苗(即疫苗A组、疫苗B组、疫苗C组、疫苗D组),E组为攻毒对照组,不做任何处理,在同等条件下隔离饲养。各疫苗按照对应的说明书进行免疫,免疫后第14、28天进行采血,检测支原体抗体水平,一免后28 d时,所有免疫组连同攻毒对照组,各气管注射猪肺炎支原体CJ株5 m L/头(含0.01 g肺组织毒)。攻毒后饲养观察28 d,对所有实验组动物进行观察临床症状。A组实验动物攻毒后未出现咳嗽、腹式呼吸等支原体临床症状,B-D组实验猪攻毒后偶尔出现轻微间隔性咳嗽,E组实验动物攻毒后出现连续性咳嗽,个别猪出现腹式呼吸等临床症状。攻毒后第28天进行病理剖检。结果表明,攻毒对照组猪4/5头出现典型猪肺炎支原体病变,在肺脏尖叶、心叶、膈叶前1/3部位以及中间叶,出现“肉样”或“胰样”实质样病变,界限明显。B~D组解剖后个别猪出现典型猪肺炎支原体病变,A组实验动物解剖后个别猪肺脏出现零星病变,剩余实验动物肺脏均未出现猪肺炎支原体病变。根据肺部病变较少率计算,A~D组病变率分别为71.4%、42.8%、60.7%、44.6%。实验表明,4种猪肺炎支原体灭活疫苗均具有保护效果,但A组灭活疫苗与其他免疫组相比较,免疫效果明显优于其他免疫组,在猪群免疫中能够起到更好的免疫效果。 展开更多
关键词 猪肺炎支原体毒 灭活疫苗 免疫效力 对比
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伪狂犬活/灭活病毒接种小鼠诱导免疫效力及差异因子比较 被引量:2
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作者 章晨昕 于晓明 +6 位作者 侯立婷 张元鹏 乔绪稳 侯继波 黄克和 郑其升 陈瑾 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期106-111,共6页
[目的]本研究旨在比较活/灭活病毒进入体内后对免疫系统活化的差异,为免疫增强剂的筛选和评价建立高效动物模型。[方法]本试验利用伪狂犬病毒(PRV)Bartha-K61株建立小鼠伪狂犬人工感染模型,筛选活/灭活病毒接种小鼠后免疫相关差异因子。... [目的]本研究旨在比较活/灭活病毒进入体内后对免疫系统活化的差异,为免疫增强剂的筛选和评价建立高效动物模型。[方法]本试验利用伪狂犬病毒(PRV)Bartha-K61株建立小鼠伪狂犬人工感染模型,筛选活/灭活病毒接种小鼠后免疫相关差异因子。将PRV Bartha-K61活毒以不同剂量、不同方式感染小鼠,通过计算小鼠存活率确定最佳感染剂量与感染方式;将筛选的最佳剂量的伪狂犬病毒活毒与相同剂量下灭活病毒按照前述筛选的最佳感染方式接种小鼠,利用ELISA试剂盒检测免疫7 d后小鼠血清中TNF-α、IL-1β、IFN-β和IL-6水平;利用PRV gB ELISA检测免疫7 d后小鼠血清PRV特异性gB抗体水平;利用灭活PRV作为特异性抗原进行淋巴细胞增殖试验并计算各组淋巴细胞刺激指数(SI)。[结果]在保证小鼠存活的前提下,6~8周龄小鼠的PRV的安全感染剂量为5×104TCID50;同等剂量下,相比于肌肉和腹腔注射,皮下注射为最安全的感染方式;同等剂量的活毒和灭活病毒接种小鼠后,与灭活病毒组相比,活病毒感染7 d后小鼠血清中TNF-α、IL-1β和IFN-β水平显著升高(P<0.001,P<0.01),与灭活病毒组相比,活病毒组小鼠血清PRV gB特异性抗体IgG水平和SI也显著升高(P<0.05,P<0.001);不同灭活方式间各细胞因子和SI差异不显著(P>0.05)。[结论]成功建立小鼠伪狂犬人工感染模型,明确活/灭活伪狂犬病毒接种小鼠后,机体早期存在与免疫相关差异因子,为后续免疫增强剂的评价筛选提供依据。 展开更多
关键词 伪狂犬病毒 小鼠模型 免疫效力 差异因子
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肠道微生物群对疫苗免疫效力的影响及可能机制 被引量:1
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作者 黄碧青 李兰娟 《协和医学杂志》 CSCD 2023年第5期939-944,共6页
疫苗接种是防止传染病传播最有效的方法,但其诱导的免疫反应在不同地区个体和人群之间存在显著差异。最新研究表明,肠道微生物群的组成和功能在疫苗接种后的免疫反应中发挥关键作用。本文旨在阐述肠道微生物群在接种疫苗的不同人群、动... 疫苗接种是防止传染病传播最有效的方法,但其诱导的免疫反应在不同地区个体和人群之间存在显著差异。最新研究表明,肠道微生物群的组成和功能在疫苗接种后的免疫反应中发挥关键作用。本文旨在阐述肠道微生物群在接种疫苗的不同人群、动物间的差异,探讨肠道微生物群对疫苗免疫效力的影响及可能机制,并阐述靶向肠道微生物群改善疫苗有效性的策略。 展开更多
关键词 肠道微生物群 疫苗 免疫效力
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伪狂犬病病毒TK、gE双基因缺失传代致弱株的安全性及免疫效力研究
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作者 朱来旭 许梦微 +5 位作者 张传健 郭容利 王志胜 陈赛赛 费荣梅 王继春 《畜牧与兽医》 CAS 北大核心 2023年第2期50-55,共6页
为获得安全、有效的伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)变异株弱毒疫苗,在前期研究的基础上,对PRV变异株TK、gE双基因缺失株(PRV LA1206株)进行传代致弱,在鸡胚成纤维细胞上连续传代75次,后经连续5代挑取单个病毒蚀斑克隆而得F_(80)... 为获得安全、有效的伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)变异株弱毒疫苗,在前期研究的基础上,对PRV变异株TK、gE双基因缺失株(PRV LA1206株)进行传代致弱,在鸡胚成纤维细胞上连续传代75次,后经连续5代挑取单个病毒蚀斑克隆而得F_(80)代,毒种命名为PRV LA1206-80株,并对其进行安全性及免疫效力评价。生长动力学试验结果显示,PRV LA1206-80株与PRV LA1206株生长动力学相似。仔猪安全性试验结果显示,滴鼻接种1日龄PRV抗体阴性仔猪后所有仔猪均未出现发热及临床症状,表明该毒株对1日龄仔猪安全。攻毒保护试验结果显示,28~35日龄仔猪肌肉注射接种PRV LA1206-80株或PRV LA1206株7 d后进行变异株PRV AH02LA株滴鼻攻毒,可产生良好保护,所有仔猪均未出现体温反应、临床症状和排毒。而PRV Bartha K61株免疫猪7 d后攻毒,均出现了体温反应,其中1头发病,且鼻拭子样品均检出病毒。综上所述,相较于PRV LA1206株,在鸡胚成纤维细胞上连续传代后获得的PRV LA1206-80株已进一步致弱,对1日龄PRV抗体阴性仔猪安全,且该PRV TK、gE双基因缺失传代致弱株对PRV变异株的保护效果显著优于PRV Bartha K61株,是极具应用价值的PRV弱毒疫苗候选株。 展开更多
关键词 伪狂犬病病毒 基因缺失 传代致弱 安全性 免疫效力
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非洲猪瘟病毒K205R蛋白重组腺病毒载体的构建及小鼠免疫效力评价
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作者 何宇恒 刘雪婷 +6 位作者 庞忠宝 翟文竹 黄颖 蒋思文 吉日木图 贾红 李焕荣 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2023年第5期12-18,共7页
为了研制安全有效的非洲猪瘟(ASF)疫苗,本研究根据非洲猪瘟病毒(ASFV) Georgia 2007/1株基因组序列合成ASFV K205R基因,通过同源重组技术构建重组腺病毒Ad5-ASFV-K205R,使用Western blot检测K205R非结构蛋白的表达情况,PCR检测其遗传稳... 为了研制安全有效的非洲猪瘟(ASF)疫苗,本研究根据非洲猪瘟病毒(ASFV) Georgia 2007/1株基因组序列合成ASFV K205R基因,通过同源重组技术构建重组腺病毒Ad5-ASFV-K205R,使用Western blot检测K205R非结构蛋白的表达情况,PCR检测其遗传稳定性,腺病毒滴度检测试剂盒测定其滴度。使用重组腺病毒免疫BALB/c小鼠,通过ELISA测定血清K205R特异性抗体,采用多因子检测试剂盒测定血清中IFN-γ和IL-4细胞因子含量,采用CCK8法检测淋巴细胞的增殖情况。结果显示,成功包装出重组腺病毒Ad5-ASFV-K205R,能够正确表达K205R融合蛋白;接种293T细胞并连续传代20代,均可稳定遗传,病毒滴度可达9.5×1010PFU/mL;ELISA结果显示,小鼠一免后7~21 d可检测到K205R特异性抗体,并在二免后14 d内产生更高的抗体水平;K205R蛋白能显著刺激免疫小鼠脾脏淋巴细胞分泌IFN-γ和IL-4,同时也能显著刺激脾脏淋巴细胞增殖(P<0.05)。结果表明,Ad5-ASFV-K205R重组腺病毒免疫小鼠能诱导机体的体液免疫应答和细胞免疫应答,具有很好的应用潜能,为进一步研发ASF疫苗提供基础。 展开更多
关键词 非洲猪瘟 K205R 重组腺病毒 免疫效力
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一株禽流感(H9亚型)病毒细胞毒与鸡胚毒的免疫效力对比试验 被引量:1
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作者 郭林涛 闫红涛 《北方牧业》 2023年第2期19-19,共1页
为了解禽流感(H9亚型)病毒鸡胚毒接种获得的细胞毒抗原与鸡胚毒抗原免疫效力的差异,本试验分别采用禽流感(H9亚型)病毒HA效价≥1∶256或病毒含量≥107.5EID50/0.1毫升的细胞毒抗原和禽流感(H9亚型)病毒鸡胚毒抗原制备成两批灭活疫苗,分... 为了解禽流感(H9亚型)病毒鸡胚毒接种获得的细胞毒抗原与鸡胚毒抗原免疫效力的差异,本试验分别采用禽流感(H9亚型)病毒HA效价≥1∶256或病毒含量≥107.5EID50/0.1毫升的细胞毒抗原和禽流感(H9亚型)病毒鸡胚毒抗原制备成两批灭活疫苗,分别免疫SPF鸡,进行免疫效力比较试验。对比试验结果显示,禽流感(H9亚型)病毒细胞毒灭活疫苗与禽流感(H9亚型)病毒鸡胚毒灭活疫苗免疫SPF鸡后HI抗体效价均高于鸡新城疫、禽流感(H9亚型)二联灭活疫苗禽流感部分质量标准。 展开更多
关键词 免疫效力 灭活疫苗 鸡胚毒 EID50 SPF鸡 抗原制备 HI抗体效价 禽流感
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鸭疫里氏杆菌二价灭活疫苗免疫效力分析
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作者 张向阳 《河南畜牧兽医》 2023年第21期38-40,共3页
鸭疫里氏杆菌二价灭活疫苗接种后能够显著提高动物体内的抗体水平和细胞免疫应答水平,同时保护动物免受病原体感染或减轻疾病症状。活体保护实验、病原体清除能力和病程延长实验的结果证实了疫苗的保护效果和调节能力。通过现有资料分析... 鸭疫里氏杆菌二价灭活疫苗接种后能够显著提高动物体内的抗体水平和细胞免疫应答水平,同时保护动物免受病原体感染或减轻疾病症状。活体保护实验、病原体清除能力和病程延长实验的结果证实了疫苗的保护效果和调节能力。通过现有资料分析,旨在为养鸭业从业人员提供参考建议。 展开更多
关键词 灭活疫苗 免疫效力 分析
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自制猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗(XJL03株)与商品化灭活疫苗的免疫效力比较
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作者 王鹏江 曹剑 +9 位作者 张伟 候凤 李俊辉 刘强德 袁科 孙彦军 高扬毅 张盼 周涛 贺笋 《广东畜牧兽医科技》 2023年第5期75-79,共5页
该研究旨在评价自制猪繁殖与呼吸综合征全病毒灭活疫苗(XJL03株)与商品化疫苗的免疫攻毒保护效果。选择4周龄仔猪20头,随机分为4组,每组5头猪,分别免疫三种全病毒灭活疫苗(即疫苗A组、疫苗B组、疫苗C组),同时设置非免疫猪为对照组。各... 该研究旨在评价自制猪繁殖与呼吸综合征全病毒灭活疫苗(XJL03株)与商品化疫苗的免疫攻毒保护效果。选择4周龄仔猪20头,随机分为4组,每组5头猪,分别免疫三种全病毒灭活疫苗(即疫苗A组、疫苗B组、疫苗C组),同时设置非免疫猪为对照组。各疫苗按照对应的说明书进行免疫,3周后加强免疫1次。实验猪10周龄时,所有仔猪按照颈部肌肉注射和滴鼻途径接种PRRSV⁃XJL03株,3×10^(4.5)TCID_(50)/头。攻毒后饲养观察21 d,在规定时间采集血液样本和鼻拭子,并记录直肠温度和死亡情况。所有存活仔猪在攻毒后21天进行病理剖检。结果表明,对照组猪4/5(未接种疫苗)发病,3种灭活疫苗不能显著减轻病毒血症和临床症状,疫苗A、疫苗B和疫苗C对仔猪保护作用分别为20%(1/5)、20%(1/5)和60%(3/5)。实验表明,全病毒灭活疫苗的保护效果有限,C疫苗能够保护60%仔猪免受高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒的攻击,能够提供与商品化疫苗相当的保护效果。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 灭活疫苗 免疫效力 对比
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一株鸡新城疫病毒细胞毒抗原与鸡胚毒抗原免疫效力比较研究
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作者 郭微凤 《北方牧业》 2023年第1期17-18,共2页
为了了解鸡新城疫病毒La Sota株鸡胚毒接种获得的细胞毒抗原与鸡胚毒抗原免疫效力的差异,本试验分别采用鸡新城疫病毒La Sota株HA效价为1∶256或病毒含量不低于108.0EID50/0.1毫升的细胞毒抗原和鸡新城疫La Sota株病毒含量不低于108.0EI... 为了了解鸡新城疫病毒La Sota株鸡胚毒接种获得的细胞毒抗原与鸡胚毒抗原免疫效力的差异,本试验分别采用鸡新城疫病毒La Sota株HA效价为1∶256或病毒含量不低于108.0EID50/0.1毫升的细胞毒抗原和鸡新城疫La Sota株病毒含量不低于108.0EID50/0.1毫升的鸡胚毒抗原各制备成两批灭活疫苗,分别免疫SPF鸡,进行免疫效力比较试验。对比试验结果表明,鸡新城疫病毒La Sota株细胞毒与鸡新城疫病毒La Sota株鸡胚毒制备的灭活苗免疫SPF鸡后,HI抗体效价均高于鸡新城疫部分质量标准。 展开更多
关键词 鸡新城疫病毒 EID50 抗原免疫 免疫效力 SPF鸡 鸡胚毒 灭活疫苗 细胞毒
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猪瘟病毒持续感染对母猪繁殖性能及仔猪猪瘟疫苗免疫效力的影响 被引量:27
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作者 宁宜宝 王琴 +5 位作者 丘惠深 张广川 宋立 赵耘 王在时 沈青春 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期449-453,共5页
利用来源于同一猪场的2头猪瘟病毒(HCV)持续感染的带毒母猪及所产35头仔猪(包括13头死胎)和6头阴性对照猪,观察母猪的胎儿发育成活状况、仔猪HCV带毒率及HCV垂直传播对仔猪猪瘟兔化弱毒疫苗(HCLV)免疫效力的干扰作用,同时进行水平传播... 利用来源于同一猪场的2头猪瘟病毒(HCV)持续感染的带毒母猪及所产35头仔猪(包括13头死胎)和6头阴性对照猪,观察母猪的胎儿发育成活状况、仔猪HCV带毒率及HCV垂直传播对仔猪猪瘟兔化弱毒疫苗(HCLV)免疫效力的干扰作用,同时进行水平传播试验和观察HCV持续感染对母猪繁殖功能的影响。结果表明:HCV持续感染对其中1头母猪的胎儿发育和成活有明显影响,而对另1头母猪的胎儿发育没有明显影响;HCV持续感染母猪可经过胎盘垂直传播病毒给仔猪,传播率达45%~86%;吃初乳和接种HCLV不能阻止带毒仔猪的死亡,9头带毒仔猪在45d内死亡4头;免疫HCLV不能使带毒仔猪产生免疫保护力,5头猪在强毒攻击后死亡4头;HCV垂直传播的带毒猪可发生水平传播,并引起3/4感染猪死亡;HCV持续感染可引起母猪生殖系统病理变化,导致繁殖障碍。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 持续感染 母猪 繁殖性能 仔猪成活率 疫苗 免疫效力
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3种非猪瘟病毒单独或混合感染对猪瘟弱毒疫苗免疫效力的影响 被引量:41
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作者 宁宜宝 赵耘 +5 位作者 王琴 宋立 张广川 丘惠深 沈青春 王在时 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期112-114,共3页
将 2 0头 9月龄左右猪瘟、伪狂犬、猪繁殖与呼吸障碍综合征抗原、抗体阴性猪分成 6组 ,分别利用猪细小病毒(PPV)、猪伪狂犬病毒 (PRV)和猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒 (PRRSV)单独或混合感染。 7d后连同对照猪 4头 ,免疫接种猪瘟兔化弱毒... 将 2 0头 9月龄左右猪瘟、伪狂犬、猪繁殖与呼吸障碍综合征抗原、抗体阴性猪分成 6组 ,分别利用猪细小病毒(PPV)、猪伪狂犬病毒 (PRV)和猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒 (PRRSV)单独或混合感染。 7d后连同对照猪 4头 ,免疫接种猪瘟兔化弱毒疫苗 (HCL V) ,13d后连同 4头阴性对照猪一起攻击猪瘟石门强毒。整个试验期间分别每天测温 ,观察临床症状 ,每周采集扁桃体和血样做各种病毒抗原及抗体检测。结果表明 ,非猪瘟病毒感染 7d后 ,所有各组猪均从体内检测到了相应感染的病原 ,表明 3种非猪瘟病毒感染成功。在攻击猪瘟石门强毒后 2周 ,感染了非猪瘟病毒后接种 HCL V疫苗的 4个免疫组 12头猪除 1头外 ,11头全为猪瘟病毒 (HCV)抗原检测阳性 ,且多呈强阳性 ;而单一 HCL V疫苗免疫组在猪瘟强毒攻击后检测不到 HCV;所有 HCL V疫苗免疫猪均存活 ,而非免疫对照组 4头猪全部在攻毒 16 d内死亡。 展开更多
关键词 非猪瘟病毒 猪瘟弱毒疫苗 免疫效力 单独感染 混合感染
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H5亚型禽流感重组鸡痘病毒活载体疫苗的构建及其遗传稳定性与免疫效力 被引量:20
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作者 贾立军 彭大新 +7 位作者 张艳梅 刘红旗 刘秀梵 程坚 陈素娟 韦栋平 黄勇 张如宽 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期722-727,共6页
以鹅源H5亚型禽流感病毒 (AIV)基因组为模板 ,用RT PCR扩增血凝素 (Hemaggluti nin ,HA)基因 ,克隆入鸡痘病毒表达载体pFG1 1 75 ,转染鸡痘病毒感染的鸡胚成纤维细胞 ,通过蓝斑筛选和间接免疫荧光检测 ,获得表达HA基因的重组鸡痘病毒 (R... 以鹅源H5亚型禽流感病毒 (AIV)基因组为模板 ,用RT PCR扩增血凝素 (Hemaggluti nin ,HA)基因 ,克隆入鸡痘病毒表达载体pFG1 1 75 ,转染鸡痘病毒感染的鸡胚成纤维细胞 ,通过蓝斑筛选和间接免疫荧光检测 ,获得表达HA基因的重组鸡痘病毒 (Recombinantfowlpoxvir us,rFPV HA)。rFPV HA经鸡胚成纤维细胞连续传 1 5代后 ,报告基因LacZ和HA基因可稳定表达。用 1 0 3PFU和 1 0 5PFU的rFPV HA免疫无特定病原体的 (Specificpathogenfree,SPF)鸡 ,免疫后 2 2d血凝抑制 (Hemagglutinininhibition ,HI)抗体监测阳性率分别为 0 %和 2 0 % ,但均抵御了H5亚型毒株的致死性攻击 ,保护率为 1 0 0 %。结果表明 ,构建了表达HA基因的重组鸡痘病毒 ,该重组病毒具有良好遗传稳定性 ,免疫鸡可提供完全保护 ,显示出了一定的应用前景。 展开更多
关键词 H5亚型 禽流感 血凝素基因 重组鸡痘病毒 遗传稳定性 免疫效力
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抗禽流感病毒多表位DNA疫苗的构建及其免疫效力研究 被引量:23
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作者 彭金美 童光志 +1 位作者 王云峰 仇华吉 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期623-627,共5页
多表位DNA疫苗是建立在常规DNA疫苗基础上的一种新型疫苗。它是用表位作免疫原 ,这样就比较容易在一个表达载体上克隆病原体的多个抗原基因中具有免疫活性的部分。本试验以H5N1亚型禽流感病毒的HA和NP基因及其表位为基础构建了 4个重组... 多表位DNA疫苗是建立在常规DNA疫苗基础上的一种新型疫苗。它是用表位作免疫原 ,这样就比较容易在一个表达载体上克隆病原体的多个抗原基因中具有免疫活性的部分。本试验以H5N1亚型禽流感病毒的HA和NP基因及其表位为基础构建了 4个重组质粒 :1 pIRES HA(表达全长的HA基因 ) ;2 pIRES tHA(只表达HA基因的主要抗原表位区 ) ;3 pIRES tHA NPep(融合表达HA基因的抗原表位区和NP基因的 3个CTL表位 ) ;4 pIRES tHA NPep IFN γ(用鸡的IFN γ基因取代质粒pIRES tHA NPep中的neo基因 )。分别用这 4个重组质粒和空载体质粒pIRES1neo肌注免疫 30日龄SPF鸡。免疫 3次 ,间隔为 2周 ,每次每只鸡的剂量为 2 0 0 μg。第 3次免疫后两周以高致病性禽流感病毒H5N1强毒攻击 ,免疫及攻毒前后均采血检测HI抗体效价和外周血CD4 + 、CD8+ T细胞的变化。结果发现 ,攻毒前各质粒免疫组均检测不到HI抗体 ,攻毒后 1周存活鸡HI抗体效价迅速升高到 6 4~ 2 5 6。流式细胞仪检测显示外周血CD4 + 、CD8+ T细胞在疫苗免疫后都有不同程度的升高。空载体质粒对照组鸡 (10只 )在攻毒后 3~ 8d内全部死亡 ,其他各重组质粒免疫组鸡都获得了部分保护 ,保护率分别是 :pIRES HA组为 5 4 5 % (6 11) ,pIRES tHA组为 30 % (3 10 ) ,pIRES 展开更多
关键词 禽流感病毒 多表位 DNA疫苗 免疫效力
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携带新城疫病毒DNA疫苗的鼠伤寒沙门氏菌及其安全性与免疫效力 被引量:16
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作者 潘志明 焦新安 +6 位作者 黄金林 殷月兰 唐丽华 张辉 张晓明 张小荣 刘秀梵 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期937-941,共5页
根据GenBank中发表的新城疫病毒(NDV)融合蛋白(F)基因序列,设计一对引物,通过RTPCR扩增出鹅源新城疫病毒分离株JS5F基因,测序确认后,将其克隆入真核表达载体pVAX1,获得重组真核表达质粒pVAX1F。将pVAX1F转化减毒鼠伤寒沙门氏菌SL7207,... 根据GenBank中发表的新城疫病毒(NDV)融合蛋白(F)基因序列,设计一对引物,通过RTPCR扩增出鹅源新城疫病毒分离株JS5F基因,测序确认后,将其克隆入真核表达载体pVAX1,获得重组真核表达质粒pVAX1F。将pVAX1F转化减毒鼠伤寒沙门氏菌SL7207,构建成携带DNA疫苗的重组沙门氏菌SL7207(pVAX1F)。重组菌以不同剂量口服免疫1日龄雏鸡,结果表明,细菌对雏鸡具有良好的安全性,且不影响鸡的增重。将SL7207(pVAX1F)分别以108CFU和109CFU的剂量3次口服免疫1日龄商品代伊莎褐蛋鸡,抗体检测结果显示,在三免后1周,SL7207(pVAX1F)109CFU剂量组的血清抗体效价与空载体组之间存在显著性差异(p<0.05)。重组菌两个剂量组在首免后2周开始出现粘膜抗体,并于二免后2周和3周达到较高水平。免疫保护试验结果显示,SL7207(pVAX1F)109CFU剂量组的保护率为77.27%,与空载体组之间存在显著性差异(p<0.05)。 展开更多
关键词 减毒沙门氏菌 DNA疫苗 新城疫病毒 安全性 免疫效力
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表达H9亚型禽流感病毒血凝素基因的重组鸡痘病毒及其免疫效力 被引量:26
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作者 程坚 刘秀梵 +1 位作者 彭大新 刘红旗 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期442-447,共6页
以RT PCR法扩增获得H9亚型禽流感病毒 (AIV)分离株 (A Chicken China F 1 998)的血凝素 (HA)基因 ,将其定向插入鸡痘病毒转移载体 1 1 75的痘苗病毒启动子P7 5的下游 ,得到重组转移载体 1 1 75HA。以脂质体转染法将 1 1 75HA转染至已感... 以RT PCR法扩增获得H9亚型禽流感病毒 (AIV)分离株 (A Chicken China F 1 998)的血凝素 (HA)基因 ,将其定向插入鸡痘病毒转移载体 1 1 75的痘苗病毒启动子P7 5的下游 ,得到重组转移载体 1 1 75HA。以脂质体转染法将 1 1 75HA转染至已感染鸡痘病毒 2 82E4疫苗株(wt FPV)的鸡胚成纤维细胞 (CEF)中 ,通过在含X gal的营养琼脂上连续挑选蓝色病毒蚀斑获得并纯化rFPV HA。以间接免疫荧光法证实感染rFPV HA的CEF表达了HA。rFPV HA在免疫 7日龄SPF鸡 7天后即能诱生可检出的血凝抑制 (HI)抗体 ,1 4天后诱生的HI抗体到达高峰 ,且诱生的HI抗体保持较高水平达 5 5天。在 7日龄SPF鸡及含抗FPV母源抗体的商品鸡上进行的免疫效力试验表明 ,rFPV HV能显著抑制静脉攻毒后免疫鸡从泄殖腔的排毒 ,效果与AIV全病毒灭活苗相当。 展开更多
关键词 表达 H9亚型禽流感病毒 血凝素基因 重组鸡痘病毒 免疫效力
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H5亚型高致病性禽流感疫苗的免疫效力 被引量:21
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作者 贾立军 刘秀梵 +3 位作者 卢建红 张艳梅 彭大新 张如宽 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期542-545,共4页
利用表达H5亚型禽流感病毒血凝素基因(HA)的重组鸡痘病毒(rFPV-HA)和全病毒灭活疫苗免疫商品鸡,比较两种疫苗的保护效力。结果发现,利用103PFU和106PFU的rFPV-HA免疫无母源抗体商品鸡和含母源抗体商品鸡,HI抗体应答水平均低于灭活疫苗... 利用表达H5亚型禽流感病毒血凝素基因(HA)的重组鸡痘病毒(rFPV-HA)和全病毒灭活疫苗免疫商品鸡,比较两种疫苗的保护效力。结果发现,利用103PFU和106PFU的rFPV-HA免疫无母源抗体商品鸡和含母源抗体商品鸡,HI抗体应答水平均低于灭活疫苗免疫组。利用H5亚型禽流感病毒经肌肉注射攻毒后,rFPV-HA免疫的无母源抗体商品鸡获得了完全保护(100%),高于灭活疫苗保护率(94.7%);但rFPV-HA免疫含母源抗体商品鸡诱导的保护率(11.4%~15.8%)低于灭活疫苗免疫组的保护水平(68.4%)。结果表明,rFPV-HA诱导HI抗体的能力低于灭活疫苗;但rFPV-HA免疫无母源抗体商品鸡的保护率完全达到灭活疫苗保护水平,显示出了良好的应用前景;灭活疫苗和rFPV-HA均受到母源抗体的干扰,不适于在母源抗体处于高峰期时使用。 展开更多
关键词 H5亚型高致病性禽流感疫苗 免疫效力 血凝素基因 重组鸡痘病毒 全病毒灭活疫苗
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