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Cbl-b基因沉默增强T细胞对人喉鳞癌细胞Hep-2的免疫杀伤效果
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作者 陈赛明 李智群 +1 位作者 周利民 张云霞 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期554-560,共7页
目的研究泛素连接酶(Cbl-b)基因沉默对H9人T淋巴细胞免疫杀伤人喉鳞癌细胞Hep-2作用的影响和相关机制。方法选择12例喉鳞癌患和12例健康对照者,用磁性细胞分离技术分离外周血CD4+T细胞应用RT-PCR法检测Cbl-b的表达水平。同时,将人T淋巴... 目的研究泛素连接酶(Cbl-b)基因沉默对H9人T淋巴细胞免疫杀伤人喉鳞癌细胞Hep-2作用的影响和相关机制。方法选择12例喉鳞癌患和12例健康对照者,用磁性细胞分离技术分离外周血CD4+T细胞应用RT-PCR法检测Cbl-b的表达水平。同时,将人T淋巴细胞H9接种培养于96孔板,分为4组:以脂质体转染法将Cbl-b-siRNA重组序列转染人T淋巴细胞H9,作为Cbl-b-siRNA组;Cbl-b-siRNA重组序列转染T细胞成功后,在其培养液中加入IL-2中和抗体,作为anti-IL-2+Cbl-bsiRNA组;以脂质体转染法将随机阴性对照序列转染的人T淋巴细胞H9作为阴性组(NC组);以不做任何处理人T淋巴细胞H9为空白组(BC组)。采用倒置荧光显微镜观察人T淋巴细胞H9的转染效率、以实时荧光定量PCR法和蛋白免疫印迹法检测各组人T淋巴细胞H9中Cbl-b mRNA和蛋白表达情况。以细胞计数试剂盒(CCK-8)检测各组人T淋巴细胞H9对Hep-2细胞的杀伤作用;流式细胞仪检测各组人T淋巴细胞H9表面活化分子CD69、CD25阳性表达率;采用ELISA法检测T细胞上清液中白介素-2(IL-2)、γ干扰素(INF-γ)水平。结果 Cbl-b mRNA在喉鳞癌患者CD4+T细胞中表达升高,与健康对照差异有显著性(P<0.05)。Cbl-b-siRNA组和阴性组的转染效率分别为(78.30±6.06)%、(77.25±6.38)%,转染效果良好;Cbl-b-siRNA组人T淋巴细胞H9的Cbl-b mRNA和蛋白相对表达量与anti-IL-2+Cbl-b-siRNA组无显著差异(P>0.05),但显著低于空白组和阴性组(P<0.05);不同效靶比时,Cbl-b-siRNA组Hep-2肿瘤细胞杀伤率均显著高于anti-IL-2+Cbl-b-siRNA组、阴性组和空白组(P<0.05)。Cbl-b-siRNA组人T淋巴细胞H9表面活化分子CD69、CD25阳性表达率均显著高于anti-IL-2+Cbl-b-siRNA组、空白组和阴性组(P<0.05);Cbl-b-siRNA组人T淋巴细胞H9上清液中INF-γ、IL-2水平均显著高于空白组和阴性组(P<0.05);空白组与阴性组人T淋巴细胞H9的Cbl-b mRNA和蛋白相对表达量、肿瘤细胞杀伤率、表面活化分子CD69、CD25阳性表达率、上清液中IL-2、INF-γ水平比较差异均不显著(P>0.05)。结论应用siRNA技术沉默T细胞Cbl-b基因可有效增强人T淋巴细胞H9对人喉鳞癌细胞株Hep-2体外免疫杀伤作用,其机制可能与T细胞Cbl-b基因沉默促进人T淋巴细胞H9分泌IL-2、加强T淋巴细胞激活有关。 展开更多
关键词 基因沉默 泛素连接酶 人喉鳞癌 免疫杀伤
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杀伤细胞免疫球蛋白样受体基因检测专家共识 被引量:1
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作者 中国输血协会人类组织抗原专业委员会 深圳市血液中心 +4 位作者 邓志辉 朱发明 汤敏中 王珏 鲍晓晶 《中国输血杂志》 CAS 2023年第7期557-562,共6页
杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR)基因家族具有复杂的遗传多态性,既有等位基因水平的多态性,同时还存在KIR单体型组成、基因拷贝数的差异性。为了规范KIR基因检测,中国输血协会人类组织抗原专业委员会与深圳市血液中心组织专家依据国内外... 杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR)基因家族具有复杂的遗传多态性,既有等位基因水平的多态性,同时还存在KIR单体型组成、基因拷贝数的差异性。为了规范KIR基因检测,中国输血协会人类组织抗原专业委员会与深圳市血液中心组织专家依据国内外文献和实践经验,制定了此专家共识,对KIR基因多态性检测方法、质量控制、检测报告和应用等进行了阐述,旨在提高KIR基因检测的准确性。 展开更多
关键词 杀伤细胞免疫球蛋白样受体 基因家族 多态性 专家共识
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IL-12基因修饰树突状细胞体外诱导免疫杀伤肝癌细胞 被引量:5
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作者 李宝金 殷晓煜 +2 位作者 吕明德 王亮 向邦德 《中华外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期315-316,共2页
关键词 IL-12 基因修饰 树突状细胞 体外诱导 免疫杀伤肝癌细胞 T淋巴细胞
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T细胞人类白细胞抗原-G过表达对T细胞共培养胃癌MGC-803细胞的免疫杀伤作用 被引量:2
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作者 谭业儒 伍小平 李跃华 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期133-135,149,共4页
目的研究T细胞人类白细胞抗原-G(HLA-G)过表达后对共培养胃癌MGC-803细胞的免疫杀伤作用。方法处死各组小鼠后分离淋巴细胞,通过免疫磁珠纯化T淋巴细胞,其纯度用流式细胞仪测定。将转染试剂、NC质粒、HLA-G重组载体分别转染至T淋巴细胞... 目的研究T细胞人类白细胞抗原-G(HLA-G)过表达后对共培养胃癌MGC-803细胞的免疫杀伤作用。方法处死各组小鼠后分离淋巴细胞,通过免疫磁珠纯化T淋巴细胞,其纯度用流式细胞仪测定。将转染试剂、NC质粒、HLA-G重组载体分别转染至T淋巴细胞分为对照(Control)组、NC转染组、HLA-G转染组,细胞转染效率用荧光显微镜和流式细胞仪测定。以蛋白质印迹(WB)法测定各组细胞中HLA-G蛋白表达水平;以酶联免疫吸附(ELISA)法测定各组细胞上清液中γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-2(IL-2)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平;转染48 h后以CCK-8法检测HLA-G转染组、NC转染组、Control组与胃癌MGC-803细胞共培养时肿瘤免疫杀伤效率。结果HLA-G转染组细胞中HLA-G蛋白表达(1.08±0.09)明显高于Control组(0.18±0.04)和NC转染组(0.17±0.05,P<0.05)。与Control组、NC转染组相比,HLA-G转染组细胞中IFN-γ、IL-2、TNF-α水平均明显降低(均P<0.05)。效靶比为10∶1、20∶1、40∶1时,与Control组、NC转染组相比,HLA-G转染组胃癌细胞免疫杀伤率均显著降低(P<0.05)。结论T细胞过表达HLA-G后可减弱对胃癌细胞MGC-803体外免疫作用,当效靶比为40∶1时,T细胞对胃癌细胞MGC-803免疫杀伤作用最显著。 展开更多
关键词 T细胞 人类白细胞抗原-G 胃癌 免疫杀伤效率
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沙培林对脾切除后实验性胃癌大鼠免疫杀伤细胞的活性作用
5
作者 丁尔迅 王元和 +5 位作者 高瀚 徐学俊 孔宪涛 徐建明 张玲珍 张浩 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 1996年第1期9-9,共1页
通过观察沙培林(OK-432)对脾切除后胃癌大鼠免疫杀伤的细胞作用,发现OK-432小剂量长期治疗后,外周血淋巴细胞(PBL)的NK和ADCC细胞活性分别显著高于生理盐水非治疗组。OK-432治疗同时保留脾脏,PBL的NK和ADCC细胞活性更加显著地高于切脾... 通过观察沙培林(OK-432)对脾切除后胃癌大鼠免疫杀伤的细胞作用,发现OK-432小剂量长期治疗后,外周血淋巴细胞(PBL)的NK和ADCC细胞活性分别显著高于生理盐水非治疗组。OK-432治疗同时保留脾脏,PBL的NK和ADCC细胞活性更加显著地高于切脾非免疫治疗组。在OK-432腹腔注射大鼠中,模拟切脾组的PBL的NK和ADCC的细胞活性均高于切脾组。提示在腹腔注射OK-432治疗中,保留脾脏有提高免疫杀伤细胞活性的趋势。 展开更多
关键词 沙培林 胃肿瘤 脾切除 免疫杀伤细胞
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脾多肽注射液增强胃癌大鼠脾脏免疫杀伤细胞活性的机制 被引量:9
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作者 张志斌 秦思达 +3 位作者 张佳 杜宁 张靖 任宏 《中国现代应用药学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期675-680,共6页
目的探讨脾多肽注射液增加胃癌大鼠脾脏免疫杀伤细胞活性的机制。方法取75只大鼠,其中60只用N-甲基-N-硝基-亚硝基胍(MNNG)诱导建立大鼠胃癌模型,采用随机数表法将其分为模型组和低、中、高剂量组;剩余15只健康大鼠给予正常饮用水为对... 目的探讨脾多肽注射液增加胃癌大鼠脾脏免疫杀伤细胞活性的机制。方法取75只大鼠,其中60只用N-甲基-N-硝基-亚硝基胍(MNNG)诱导建立大鼠胃癌模型,采用随机数表法将其分为模型组和低、中、高剂量组;剩余15只健康大鼠给予正常饮用水为对照组。第36周起,低、中、高剂量组分别尾静脉注射0.06,0.18,0.54 mL·kg-1脾多肽注射液,对照组和模型组尾静脉注射生理盐水,每日1次,持续35d。处死大鼠后观察胃组织病理学变化;对比各组脾脏指数、脾脏NK细胞杀伤活性;对比各组胃组织及脾脏中NK细胞占比及其表面活化受体(NKG2D)的表达、胃组织中NKG2D配体组织相容性复合体Ⅰ类相关基因A(MICA)mRNA及蛋白相对表达量。结果模型组胃黏膜固有层有大量炎性细胞浸润,癌化细胞多,黏膜腺体排列严重紊乱;低、中、高剂量组胃黏膜固有层炎性细胞减少,黏膜腺体排列紊乱,癌细胞数量减少,其中中剂量组减少最为显著;脾脏指数、脾脏NK细胞杀伤活性、脾脏及胃组织中NK细胞占比及NKG2D表达、MICAmRNA和蛋白相对表达量组间比较,对照组最高,中剂量组其次,低、高剂量组稍低,模型组最低,并且除低、高剂量组之间比较差异无统计学意义外,其他每2组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论脾多肽注射液可增强胃癌大鼠脾脏NK细胞杀伤活性,其中0.18 mL·kg-1的脾多肽注射液增强效果最佳,可能与促进NK细胞增生、上调NK细胞活化性受体NKG2D及其配体MICA mRNA和蛋白表达有关。 展开更多
关键词 脾多肽注射液 胃癌 脾脏 免疫杀伤细胞活性
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广东汉族人群杀伤免疫球蛋白样受体基因的表达频率 被引量:10
7
作者 尹晓林 郭坤元 +4 位作者 马红京 尚振川 肖露露 叶欣 赵阳 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2004年第12期1416-1418,共3页
目的检测杀伤免疫球蛋白样受体(KIR)基因在广东汉族人群中的分布。方法对96例广东汉族以SSP法检测其KIR表型,统计不同KIR基因在人群中的表现频率,并与白种人、北印度人、日本人比较。结果不同KIR的表现表率分别为:2DL1(0.85)、2DL2(0.12... 目的检测杀伤免疫球蛋白样受体(KIR)基因在广东汉族人群中的分布。方法对96例广东汉族以SSP法检测其KIR表型,统计不同KIR基因在人群中的表现频率,并与白种人、北印度人、日本人比较。结果不同KIR的表现表率分别为:2DL1(0.85)、2DL2(0.12)、2DL3(0.58)、2DL4(1)、2DL5(0.24)、3DL1(0.96)、3DL2(1)、3DL3(1)、2DP1(0.97)、2DP2(0.98)、2DS1(0.10)、2DS2(0.30)、2DS3(0.02)、2DS4(0.28)、1D(0.65)、2DS5(0.19)、3DS1(0.23)。比较同一HLA配体相应的KIR,抑制性KIR频率均高于活化性KIR。与白种人和北印度人相比,除KIR2DS4外,广东汉族人群的活化性KIR频率均较低。结论不同KIR基因在广东汉族人中有不同的表达频率。与其他人种比较,KIR基因的分布有着明显的种族差异。 展开更多
关键词 杀伤免疫球蛋白样受体 基因频率 广东汉族
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杀伤细胞免疫球蛋白样受体及其配体HLA-C基因多态性与不明原因早期复发性流产的相关性 被引量:10
8
作者 徐金娥 杨晓菊 +2 位作者 张云 江秀丽 陈子江 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期420-424,共5页
目的:探讨杀伤细胞免疫球蛋白样受体及其配体HLA-C基因多态性与不明原因早期复发性流产易感性的关系。方法:留取不明原因早期复发性流产患者(38例,URSA组)及正常早孕妇女(35例,对照组)的蜕膜、绒毛组织,抽提基因组DNA,序列特异性引物聚... 目的:探讨杀伤细胞免疫球蛋白样受体及其配体HLA-C基因多态性与不明原因早期复发性流产易感性的关系。方法:留取不明原因早期复发性流产患者(38例,URSA组)及正常早孕妇女(35例,对照组)的蜕膜、绒毛组织,抽提基因组DNA,序列特异性引物聚合酶链反应检测蜕膜组织14种KIR基因的表达;DNA测序法分析绒毛滋养细胞HLA-C1、HLA-C2基因多态性。结果:14种KIR基因均以不同频率表达;KIR2DS1基因的频率在URSA组与对照组中分别为60.27%vs41.18%,两组相比,差异有显著性(P=0.03)。两组基因HLA-C1、HLA-C2在绒毛组织中呈不平衡表达,以HLA-C1基因占明显优势。URSA组与对照组HLA-C1基因频率分别为66.67%、81.03%,两组相比差异无显著性,P=0.657;URSA组HLA-C2的基因频率为33.33%,对照组HLA-C2的基因频率为19.07%,两组相比差异有显著性,P=0.007。结论:蜕膜NK细胞活化性KIR基因频率升高,与绒毛滋养细胞的HLA-C2基因结合,传递活化性信号活化NK细胞,可能是引起URSA发病的免疫遗传学因素之一。 展开更多
关键词 复发性自然流产 杀伤细胞免疫球蛋白样受体 HLA-C 基因 滋养细胞
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杀伤细胞免疫球蛋白样受体基因多样性与中国南方汉族人群鼻咽癌相关性的研究 被引量:4
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作者 卢亮 金士正 +2 位作者 王大明 高素青 邓志辉 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2011年第3期798-800,共3页
本研究探讨杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR)基因多样性与中国南方汉族人群鼻咽癌的相关性。采用序列特异性引物-PCR(PCR-SSP)方法,对67名临床诊断为鼻咽癌(NPC)的南方汉族患者的血样和77例随机健康对照组血样进行KIR基因定型,并采用Wolf... 本研究探讨杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR)基因多样性与中国南方汉族人群鼻咽癌的相关性。采用序列特异性引物-PCR(PCR-SSP)方法,对67名临床诊断为鼻咽癌(NPC)的南方汉族患者的血样和77例随机健康对照组血样进行KIR基因定型,并采用Wolf法计算相对危险度值。结果表明,与对照组相比KIR2DL3基因频率在患者组显著降低(χ2>3.84,p<0.05,RR=0.08),具有统计学差异;KIR2DS5和KIR2DL5B基因频率在患者组显著升高(χ2>3.84,p<0.05,RR值均>1),具有统计学差异,而其它各KIR基因频率差异无统计学意义。结论 :南方汉族人群NPC患者中KIR2DL3、KIR2DS5和KIR2DL5B基因可能与NPC发病相关。 展开更多
关键词 杀伤细胞免疫球蛋白样受体 基因多态性 鼻咽癌 危险系数
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江苏地区汉族献血员杀伤细胞免疫球蛋白样受体基因多态性研究 被引量:7
10
作者 何成涛 李丽 +4 位作者 张建琼 潘宁 许金环 钟山亮 樊卫民 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期208-211,共4页
目的分析江苏地区汉族献血员杀伤细胞免疫球蛋白样受体(K IR)基因多态性、基因型及单倍型,为研究K IR基因与疾病相关性提供依据。方法采用序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)对江苏地区163名汉族献血员进行K IR基因低分辨率检测和基... 目的分析江苏地区汉族献血员杀伤细胞免疫球蛋白样受体(K IR)基因多态性、基因型及单倍型,为研究K IR基因与疾病相关性提供依据。方法采用序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)对江苏地区163名汉族献血员进行K IR基因低分辨率检测和基因型、单倍型分析。结果共检出除框架基因及假基因外的12个K IR基因,其中2DL1和2DL3存在于所有个体,3DL1和2DS4较为常见;其次为1D、2DL5、2DS1、3DS1及2DS5;2DS2、2DL2及2DS3基因频率较低;检出的17种基因型中,以AJ(2,2)和AF(1,2)型最为常见,其次为AH(5,2)和AG(1,1)型。有3种基因型(New1、New11及New19)在白人中未见报道,其中New19国内未见报道;163例个体中明确检出9种单倍型,最常见的是单倍型2,其次是单倍型1。结论江苏地区汉族人群有其独特的K IR基因频率、基因型频率和单倍型频率分布,并有可能存在新的基因型和单倍型。 展开更多
关键词 杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR) 基因多态性 基因型 单倍型
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蜕膜杀伤细胞免疫球蛋白样受体谱表达与原因不明性流产的关系 被引量:7
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作者 洪燕 林其德 汪希鹏 《现代妇产科进展》 CSCD 北大核心 2005年第3期214-217,共4页
目的:探讨蜕膜中杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR)谱表达对妊娠结局的影响。方法:将95例自然或人工流产者分为3组:组1包括41例正常早孕人流妇女;组2包括16例原因不明的习惯性流产妇女;组3包括38例原因不明的1次自然流产妇女。用PCR-SSP方... 目的:探讨蜕膜中杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR)谱表达对妊娠结局的影响。方法:将95例自然或人工流产者分为3组:组1包括41例正常早孕人流妇女;组2包括16例原因不明的习惯性流产妇女;组3包括38例原因不明的1次自然流产妇女。用PCR-SSP方法检测蜕膜中KIR谱的表达。结果:组2蜕膜中KIR2DL2基因表达比组1明显增加(P<0·05),与组3无明显差异,而KIR3DL1基因表达比组1及组3明显下降(P<0·01);组2蜕膜KIR2DS5基因表达比组3明显增加(P<0·05),但与组1无明显差异。组3蜕膜中KIR2DL3和KIR2DS5基因表达分别比组1明显下降(P均<0·05),而KIR2DL3基因与组2无明显差异(P>0·05)。所有自然流产患者(组2+组3)蜕膜中的KIR2DL3和KIR3DL1基因表达与正常早孕组(组1)比较均明显下降(P<0·05,P<0·01)。结论:子宫蜕膜的KIR谱表达异常在导致妊娠失败的病理生理中起重要作用。 展开更多
关键词 杀伤细胞免疫球蛋白样受体 流产 蜕膜 聚合酶链反应
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中国江苏地区汉族人群杀伤细胞免疫球蛋白样受体基因的多态性 被引量:7
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作者 戴宇东 董瑞萍 杜海林 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2010年第3期776-779,共4页
本研究探讨杀伤细胞免疫球蛋白样受体(killer cell immunoglobulin-like receptor,KIR)在江苏汉族人群中的分布规律。用PCR-SSP方法对江苏地区269名汉族非亲缘健康人群行KIR基因分型。结果表明:在江苏人群中检出了目前已知的所有KIR基因... 本研究探讨杀伤细胞免疫球蛋白样受体(killer cell immunoglobulin-like receptor,KIR)在江苏汉族人群中的分布规律。用PCR-SSP方法对江苏地区269名汉族非亲缘健康人群行KIR基因分型。结果表明:在江苏人群中检出了目前已知的所有KIR基因,共发现江苏汉族人群KIR基因型34种;15种基因型在浙江和香港人群中亦有报道(AA1、BX2、BX3、BX4、BX5、BX6、BX8、BX9、BX11、BX13、BX33、BX68、BX69、BX70、BX75);19种基因型未见于浙江和香港人群(BX10、BX12、BX17、BX23、BX26、BX27、BX28、BX31、BX35、BX42、BX47、BX57、BX72、BX74、BX79、BX154、BX188、BX231、BX370)。在江苏汉族人群中发现仅在希腊人群中罕见的基因型BX42和仅在瑞典人群罕见的基因型BX231,及仅在马其顿人群中罕见的基因型BX370。结论:在江苏汉族人群中检出了目前已知的所有的16个KIR基因,总计发现了KIR基因型34种,其中BX42、BX231和BX370是罕见的KIR基因型。 展开更多
关键词 江苏汉族人群 杀伤细胞免疫球蛋白样受体 基因分型 基因多态性
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桥本甲状腺炎患者杀伤细胞免疫球蛋白样受体与人类白细胞抗原基因对频率的分析 被引量:5
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作者 李建婷 郭成 +9 位作者 侯岩峰 焦玉莲 赵跃然 孙慧 徐进 曹铭锋 高聆 赵家军 张海清 李明龙 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期110-113,共4页
目的:探讨杀伤细胞免疫球蛋白样受体(Kill cell immunoglobulin-like receptor,KIR)与人类白细胞抗原(Human leukocyte antigen,HLA)组成的受体-配体基因对与桥本甲状腺炎(Hashimoto’s thyroiditis,HT)的关联性。方法:选择散发HT患者4... 目的:探讨杀伤细胞免疫球蛋白样受体(Kill cell immunoglobulin-like receptor,KIR)与人类白细胞抗原(Human leukocyte antigen,HLA)组成的受体-配体基因对与桥本甲状腺炎(Hashimoto’s thyroiditis,HT)的关联性。方法:选择散发HT患者44例和健康对照43例,提取全血基因组DNA,序列特异性引物聚合酶链反应检测4个KIR基因和8个HLA-C基因,根据受体-配体特异识别原则组成KIR2DL1+HLA-C2、KIR2DL2/2DL3+HLA-C1、KIR2DS1+HLA-C2和KIR2DS2+HLA-C1共4对KIR/HLA-C基因对,分析各基因对频率在两组人群中的差别。结果:活化性KIR2DS2+HLA-C1基因对在HT患者组与对照组频率差异有显著性(36.36%vs 16.28%,P<0.05)。其余基因对在两组间未见明显差异。结论:HT患者活化性KIR/HLA-C基因对频率升高,传递活化性信号活化NK细胞和T细胞,可能是HT发病的免疫遗传学因素之一。 展开更多
关键词 杀伤细胞免疫球蛋白样受体 人类白细胞抗原 基因 甲状腺炎 自身免疫性疾病
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Graves病患者杀伤细胞免疫球蛋白样受体基因型分析 被引量:3
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作者 张海清 赵家军 +3 位作者 赵跃然 管庆波 高聆 宋怀东 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期699-701,共3页
目的:探讨杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR)基因型在Graves病(GD)患者中的分布规律。方法:采用序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)的方法,分析96例Graves病患者和96例正常对照人群的KIR基因型。结果:GD患者中2DS2-,2DL2-,2DL3+,2DL1+,3D... 目的:探讨杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR)基因型在Graves病(GD)患者中的分布规律。方法:采用序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)的方法,分析96例Graves病患者和96例正常对照人群的KIR基因型。结果:GD患者中2DS2-,2DL2-,2DL3+,2DL1+,3DL1+,3DS1-,2DL5-,2DS3-,2DS5-,2DS1-,2DS4-基因型频率高于对照组(6.25%vs0,P<0.05);对照组中,基因频率最高的基因型为2DS2-,2DL2-,2DL3+,2DL1+,3DL1+,3DS1-,2DL5-,2DS3-,2DS5-,2DS1-,2DS4+,该基因型的基因型频率较GD患者组高,且有显著性差异(28.13%vs10.42%,P<0.01);GD患者组不携带活化性KIR基因的基因型频率较对照组明显升高(10.42%vs0%,P=0.001)。结论:KIR基因型在GD患者与正常人群分布的差异可能与GD的发病有关。 展开更多
关键词 杀伤细胞免疫球蛋白样受体 基因 格雷夫斯病
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人鼻咽癌细胞株CNE2对NK细胞KIR/NKG2D受体的免疫编辑作用及其对NK细胞杀伤功能的影响 被引量:8
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作者 郭坤元 梅家转 姚开泰 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期247-249,共3页
目的探讨NK细胞与表达NKG2D配体的人鼻咽癌细胞株CNE2混合培养后4、24、48h时KIR、NKG2D的变化及其对NK细胞杀伤CNE2细胞活性的影响。方法PCR-SSP法检测CNE2细胞HLA-A、B、Cw表型、NK细胞KIR表型(选择3例健康者为试验对象),流式细胞仪... 目的探讨NK细胞与表达NKG2D配体的人鼻咽癌细胞株CNE2混合培养后4、24、48h时KIR、NKG2D的变化及其对NK细胞杀伤CNE2细胞活性的影响。方法PCR-SSP法检测CNE2细胞HLA-A、B、Cw表型、NK细胞KIR表型(选择3例健康者为试验对象),流式细胞仪检测对照组(新鲜分离的NK细胞)KIR2DL1、KIR2DL3、KIR3DL1、NKG2D的表达情况。IL2组(IL2培养的NK细胞)、CNE2组(CNE2、IL2、NK细胞混合培养)培养后4、24、48h时KIR2DL1、KIR2DL3、KIR3DL1、NKG2D的表达情况,LDH释放法测定IL2组及CNE2组培养24h后的NK细胞对CNE2细胞的杀伤活性。结果CNE2细胞表面HLA-A、B、Cw表型为A2,24;B18,35;Cw4,7。3例健康者均表达KIR2DL1、KIR2DL3、KIR3DL1。CNE2组4、24、48h时KIR2DL1、KIR2DL3表达较对照组、IL2组明显升高(P<0.01),NKG2D表达较对照组、IL2组明显降低(P<0.01),KIR3DL1表达与对照组、IL2组相比无明显变化(P>0.05)。IL2组4、24、48h时KIR2DL1、KIR2DL3、KIR3DL1及NKG2D表达与对照组相比无明显变化(P>0.05)。IL2组、CNE2组培养24h后的NK细胞对CNE2细胞的杀伤活性在效靶比10∶1时分别为(26.96±1.47)%和(2.74±1.64)%,两者相比差异有统计学意义(P<0.01);效靶比20∶1时分别为(35.74±3.59)%和(4.57±2.41)%,两者相比差异有统计学意义(P<0.01)。结论NK细胞与NKG2D配体阳性的肿瘤细胞持续性接触,下调NK细胞表面NKG2D表达,上调NK细胞表面与HLAI类分子相结合的KIR表达,导致NK细胞对靶细胞杀伤活性减低。本研究阐明了编辑后的NK细胞杀伤活性减低的分子基础,同时提示阻断HLAI类分子与KIR的结合或者增强NK细胞表面NKG2D的表达将有利于提高NK细胞杀伤肿瘤细胞的活性。 展开更多
关键词 鼻咽肿瘤 自然杀伤细胞 NKG2D 杀伤细胞免疫球蛋白样受体 免疫编辑
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江苏汉族人群杀伤细胞免疫球蛋白样受体及其特异性配体HLA分析 被引量:4
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作者 蒋立新 许联红 +1 位作者 戚传平 王永仿 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期863-865,868,共4页
目的:分析杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR)及其特异性配体HLAⅠ类分子在江苏地区汉族人群的分布特点。方法:分别利用real-time PCR法和PCR-SSP方法对173例无血缘关系的江苏汉族健康人群进行KIR和HLA-Cw,HLA-Bw4分型,并分析KIR/HLA配对组... 目的:分析杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR)及其特异性配体HLAⅠ类分子在江苏地区汉族人群的分布特点。方法:分别利用real-time PCR法和PCR-SSP方法对173例无血缘关系的江苏汉族健康人群进行KIR和HLA-Cw,HLA-Bw4分型,并分析KIR/HLA配对组合的类型和数量。结果:江苏汉族人群中,>92%的个体同时表达四种抑制性KIR(iKIR)(2DL1,2DL2/3,3DL1,3DL2)。2DL2/HLA-C1,2DL3/HLA-C1,2DL1/HLA-C2,3DL1/Bw4的频率分别依次分别为0.243,0.971,0.457,0.590;2DS1/HLA-C2,2DS2/HLA-C1的频率为0.162,0.231。54.3%的个体只表达2DL1而不表达相应的配体HLA-C2,32.9%的个体只表达3DL1而缺乏配体HLA-Bw4,另有5.8%的个体只表达HLA-Bw4而不表达3DL1。27.7%的个体同时表达3种iKIR/HLA,26%的个体同时表达两种iKIR/HLA,25.4%的个体只遗传一个iKIR/HLA配对,未发现3种iKIR/HLA同时缺失的个体。结论:在江苏汉族人群中,存在KIR与HLA表型分离现象,抑制性KIR/HLA配对表达高于刺激性KIR/HLA配对,约1/4个体只表达单个iKIR/HLA配对。 展开更多
关键词 杀伤细胞免疫球蛋白样受体 人类白细胞表面抗原 KIR/HLA
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白血病患者杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR)基因多态性分析 被引量:2
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作者 张艳 刘晟 +4 位作者 叶世辉 刘孟黎 沈春梅 齐君 王波 《第四军医大学学报》 北大核心 2009年第17期1597-1599,共3页
目的:探讨杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR)基因型与白血病发病之间的关系.方法:采用序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)法对263例白血病患者和239例健康正常对照的KIR基因多态性进行检测,比较KIR基因型频率在白血病患者和健康正常对照... 目的:探讨杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR)基因型与白血病发病之间的关系.方法:采用序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)法对263例白血病患者和239例健康正常对照的KIR基因多态性进行检测,比较KIR基因型频率在白血病患者和健康正常对照之间、不同白血病类型之间的差异.结果:263名白血病患者和239名正常对照中KIR2DL4,3DL2,3DL3,3DP1的基因频率均为1.000.其中KIR2DL1,2DL3,3DL,2DP1基因频率较高,而2DL5B基因频率较低.白血病患者和正常对照中KIR2DS4基因频率分别为0.5101,0.3901,2组组间差异具有统计学意义(P<0.01),其余基因频率2组组间差异均无显著性.慢性粒细胞白血病(CML)、急性非淋巴细胞白血病(NALL)、急性淋巴细胞白血病(ALL)3组患者中,KIR2DS4基因频率分别为0.6050,0.4017,0.4569;CML组KIR2DS4频率明显高于NALL,ALL组和正常对照组(P<0.05);NALL,ALL组与正常对照组之间KIR2DS4频率差异无显著性.CML,NALL,ALL组中其余基因频率差异均无统计学意义.结论:激活型KIR2DS4可能与慢性粒细胞白血病发病有一定的关联. 展开更多
关键词 白血病 杀伤细胞免疫球蛋白样受体 基因多态性
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自然杀伤细胞免疫球蛋白样受体基因与白血病的关联性研究 被引量:1
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作者 刘佳 王全立 +2 位作者 刘广贤 孙雪冬 谭燕 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期794-796,共3页
目的分析自然杀伤细胞免疫球蛋白样受体(killer cell immunoglobulin-like receptor,KIR)基因与白血病的关联性。方法采用序列特异性引物PCR法(PCR-SSP)对46例白血病患者和46例健康人行KIR基因低分辨率检测,统计不同KIR基因在2种人群中... 目的分析自然杀伤细胞免疫球蛋白样受体(killer cell immunoglobulin-like receptor,KIR)基因与白血病的关联性。方法采用序列特异性引物PCR法(PCR-SSP)对46例白血病患者和46例健康人行KIR基因低分辨率检测,统计不同KIR基因在2种人群中的表现频率,并进行比较。结果健康人群和白血病患者中,2DL4、3DL2、3DL3、2DP1基因的表现频率均为100%,存在于所有个体,除2DL2与2DS2以外其余的KIR基因表现频率都相似;健康人群2DL2与2DS2的表现频率均为47.8%,白血病患者2DL2与2DS2的表现频率均为89.1%,明显高于健康人群(P<0.01),其余基因表现频率无显著性差异。结论2DL2、2DS2基因频率升高可能与白血病发生相关。 展开更多
关键词 杀伤细胞免疫球蛋白样受体 白血病 基因频率
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杀伤细胞免疫球蛋白样受体基因多态性与原发性胆汁性肝硬化的相关性分析 被引量:2
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作者 郑立明 许联红 +3 位作者 何梅芳 史琼英 李欣 王永忠 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期85-88,92,共5页
目的探讨江苏汉族人群杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR)基因多态性与原发性胆汁性肝硬化(PBC)的相关性。方法收集2011-06-01/2013-07-31期间江苏省常州三院住院的PBC患者122例和198例相匹配的无血缘关系健康人群外周血标本。采用实时荧光... 目的探讨江苏汉族人群杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR)基因多态性与原发性胆汁性肝硬化(PBC)的相关性。方法收集2011-06-01/2013-07-31期间江苏省常州三院住院的PBC患者122例和198例相匹配的无血缘关系健康人群外周血标本。采用实时荧光定量PCR检测KIR基因多态性,分析KIR基因及基因型频率在2组人群间的差异。结果 PBC患者KIR2DL2和2DS2基因频率比对照组显著性降低,与降低疾病的患病风险有关。共检测出55种KIR基因型,其中PBC组24种,对照组47种。最常见的基因型为AA1,其次为BX2、BX8、BX4、BX14。对存在于5个或以上个体的11个基因型进行分析,未发现PBC组与对照组之间有显著性差异。结论 KIR2DL2和2DS2的缺失可能是江苏地区汉族人群PBC发病潜在的保护因子。 展开更多
关键词 杀伤细胞免疫球蛋白样受体 基因多态性 基因型 原发性胆汁性肝硬化
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HLA相合亲缘供受者自然杀伤细胞免疫球蛋白样受体基因的分析 被引量:2
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作者 朱发明 姜侃 +4 位作者 吕沁风 章伟 何吉 许先国 严力行 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2007年第6期1276-1280,共5页
本研究分析HLA相合亲缘关系供受者自然杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR)基因分布情况并探讨其KIR相合的可能性。采用Luminex流式技术和测序方法检测HLA-A,-B,-Cw和-DRB1位点;利用序列特异性引物PCR法(PCR-SSP)检测KIR基因。结果表明:在HLA... 本研究分析HLA相合亲缘关系供受者自然杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR)基因分布情况并探讨其KIR相合的可能性。采用Luminex流式技术和测序方法检测HLA-A,-B,-Cw和-DRB1位点;利用序列特异性引物PCR法(PCR-SSP)检测KIR基因。结果表明:在HLA-A,-B,-Cw和-DRB1等8个位点相合的27对亲缘关系供受者样本中检出17个KIR基因,其中KIR3DL3、KIR3DP1、KIR2DL4和KIR3DL2基因存在于所有个体;检出20种KIR基因型和12种单倍体,常见基因型为2,2,频率为29.6%;最常见单倍体是2,频率为53.0%,样本以A型单倍体为主,频率为67.2%;12对(44.4%)供者KIR与受者KIR基因型和单倍体完全相同,13对(48.1%)供者KIR与受者KIR存在1个单倍体相同,2对(7.4%)供者KIR与受者KIR基因型和单倍体完全不同;1对供者KIR2DL1与受者HLA-Cw(Lys80)配基完全相合,17对供者KIR2DL2/2DL3与受者HLA-Cw(Asn80)配基完全相合,5对供者KIR3DL1与受者HLA-B(Bw4)配基完全相合。结论:HLA相合亲缘关系供受者KIR匹配的错配率比较高。 展开更多
关键词 HLA相合亲缘供受者 自然杀伤细胞免疫球蛋白样受体 KIR错配
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