免疫核酸抗沙门氏菌感染的实验研究

观察了抗癌免疫核酸对抗沙门氏菌实验感染的作用。结果表明：津白Ⅱ号小鼠皮下注射ｉＮＡ，每日１ｍｇ以上，连续保护３天，对明尼苏达沙门氏菌５０１３９株活菌，剂量１０８的攻击有不同程度的保护作用。其抗感染强度与剂量呈正相关。该实验还观察了免疫核酸与庆大霉素抗沙门氏菌感染的差别，并进一步探讨了ｉＮＡ抗感染作用的机理。

抗癌免疫核酸制剂中核酸生物活性的参考指标

目的：拟建立一种抗癌免疫核酸生物活性的相对参考指标。方法：用癌细胞与细菌共同致敏动物到相当滴度后，提取之抗癌兼抗菌的免疫核酸制剂，用此保护小鼠后，再用细菌攻击。结果：免疫核酸保护组动物存活率明显高于对照组。说明免疫核酸制剂在制备过程中抗菌部分的核酸有相当多的分子没有降解失活，所以能表现出明显的抗菌活性。因此同一制剂中同时存在的抗癌核酸也应保留有相当多的分子不降解失活。另外，我们的动物实验也证实了免疫核酸制剂有明显的抑制肿瘤生长的作用。结论：试用免疫核酸制剂的抗菌活性作为其抗癌活性的相对参考指标。

抗金葡萄球菌免疫核酸诱生细胞毒因子的研究

用抗金黄色葡萄球菌免疫核酸致敏家兔,发现兔血清中含有直接杀伤L929细胞的细胞毒因子。就其成分进行了探讨,推测其中主要成分为肿瘤坏死因子(TNF)。并可有淋巴毒素及起协同作用的少量干扰素等其他一些成分。分别用体外细胞毒实验即结晶紫染色法及地~125I—UDR掺入法,计算细胞毒指数,评估结果,对两种检测手段进行了比较,染色法虽不如同位素法灵敏度高,但无放射性污染、不易保存等缺点。应用放线菌酮可以使细胞毒作用放大,便于检测到较微弱的细胞毒活性,而且实验条件易于控制,结果也较稳定。

人参皂甙与免疫核糖核酸对癌基因表达的协同抑制作用

应用斑点杂交技术对癌细胞(Lc株)的两种癌基因(c-Ha-ras和cmyc)进行检测,证明这两种基因表达可被人参皂甙和免疫核糖核酸的协同作用所抑制。单独用人参皂甙处理细胞,两种癌基因无明显受抑制现象;单独用免疫核糖核酸作用2 h,然后除去作用因素,对两种癌基因表达亦无明显影响。但用免疫核糖核酸作用2 h,除去作用因素培养24 h之后再加入人参皂甙继续作用一定时间,则对两种基因的表达均产生明显的抑制作用并呈现时间和剂量效应。RNA的Northern blot分析表明转录物的结构在处理前后未发生改变。

核酸免疫可特异地诱发小鼠对乙型肝炎病毒表面抗原S+PreS1免疫反应

运用改造后的乙型肝炎病毒表面抗原Ｓ＋ＰｒｅＳ１融合基因（将ＰｒｅＳ１区肝细胞受体结合位点（２１－４７ａａ）编码基因融合到Ｓ蛋白Ｃ端２２３位残基下游），构建了一系列真核表达载体，并在ＣＨＯ细胞上有效表达了分泌型的、具有Ｓ＋ＰｒｅＳ１双重抗原性的融合蛋白颗粒。用上述质粒ＤＮＡ肌肉免疫Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ小鼠，成功地检测到了抗－ＨＢｓ和抗－ＰｒｅＳ１抗体，加强免疫能显著改善免疫效果。本研究还建立了检测抗－ＰｒｅＳ１的竞争抑制法和羊抗人ＨＢｓＡｇ封闭法，两种方法符合率达９６％，但后者更为敏感。用羊抗人ＨＢｓＡｇ封闭法测得抗－ＰｒｅＳ１滴度最高可达１：１２８０以上。

壳聚糖纳米载体提高抗乙肝免疫核糖核酸免疫活性的研究

目的:通过制备抗乙肝免疫核糖核酸(iRNA)的壳聚糖纳米载体,提高其免疫活性。方法:复凝聚方法制备壳聚糖免疫核糖核酸纳米粒,扫描电镜、原子力显微镜、Zeta电位/粒度分析仪观察测定壳聚糖免疫核糖核酸纳米粒形态、粒径和表面电位;核糖核酸酶(RNase)保护试验观察壳聚糖对包裹的iRNA的保护作用;白细胞黏附抑制(LAI)试验测定壳聚糖免疫核糖核酸纳米粒免疫活性。结果:壳聚糖与iRNA形成表面带正电荷的纳米粒,iRNA未被RNase的降解,白细胞黏附抑制率增高。结论:壳聚糖纳米载体提高了抗乙肝免疫核糖核酸的免疫活性。

分光光度-白细胞黏附抑制法测定免疫核糖核酸的活性

目的建立免疫核糖核酸活性测定方法。方法细胞浓度在 2× 10 6～ 2× 10 7,波长 415nm处吸收值与细胞浓度呈线性关系 ,可用吸收值测出细胞浓度 ,求出免疫核糖核酸的黏附抑制率。结果此法与细胞计数 白细胞黏附抑制 (LAI)实验有良好的相关性 ,r=0 .96 ,P <0 .0 1,重复性实验结果为 :板内RSD值为 6 .3% ,板间RSD值为 5 .4% ,不同实验次数RSD值为 9.4% ,灵敏度 0 .4mg/ml并能反应出免疫核糖核酸的抗原特异性。结论此法特异、简便并具有良好的重复性 。

丙型肝炎病毒DNA核酸免疫的初步探讨

目的：探索ＨＣＶＤＮＡ核酸免疫效应。方法：将构建的重组体ｐＣＤＨＣＶｓ免疫Ｂａｌｂ／ｃ小鼠，用ＥＬＩＳＡ和３ＨＴｄＲ掺入法检测了免疫鼠血清抗体、脾细胞和ＰＢＭＣ对ＨＣＶ抗原的增殖反应。结果：重组体ｐＣＤＨＣＶ１、ｐＣＤＨＣＶ２和ｐＣＤＨＣＶ３均可诱导小鼠（ｎ＝６）产生抗体（０．６６５～０．７０７，ＯＤ值）和脾细胞对ＨＣＶ抗原增殖反应（ｎ＝６，ＳＩ为３．８９～４．４７），但各重组体间的免疫效应无显著性差异（Ｐ＞０．０５）；免疫鼠（ｎ＝１２）血清经４０倍和３２０倍稀释后，抗体阳性率分别为１００．０％和１６．６％；重组体还可诱导鼠ＰＢＭＣ对ＨＣＶ抗原的增殖反应（３．６９～４．０７，ＳＩ）。结论：ｐＣＤＨＣＶｓ重组体可诱导小鼠产生免疫反应，该结果对进一步开展ＨＣＶＤＮＡ疫苗研制将具有重要意义。

抗肿瘤免疫核糖核酸诱生细胞毒因子的研究

应用人肺癌细胞制备免疫核糖核酸(i-RNA)再用i-RNA致敏家兔诱生细胞毒因子,通过结晶紫染色法检测其细胞毒因子对L929细胞的杀伤作用。结果,用抗肿瘤细胞i-RNA能诱生杀伤作用较强的细胞毒因子。血清稀释1:800时,仍具有50％以上的杀伤作用。

核酸免疫及其在寄生虫学领域中的应用

核酸免疫是一项新的疫苗研究技术，动物实验研究结果表明，它能全面诱导机体的体液和细胞免疫应答，显示出引人注目的应用前景。本文对核酸免疫的产生、在寄生虫病和传染病免疫预防中的应用研究近况及其优点等作简单介绍。现代免疫学研究证明，抗原进入机体引起免疫反应有...

昆明鼠对猪轮状病毒核酸免疫的抗体应答

将昆明鼠随机分为A、B两组,分别肌肉注射含有猪轮状病毒(RV)JL94株VP7基因的重组真核表达质粒pcDNA-VP7和真核表达载体pcDNA3.1(+),每只鼠100μg·(100μL)-1,共免疫3次,每次间隔2周。首次免疫第0,14,21,28,35,39,47,54天采血分离血清用ELISA法检测抗体动态变化。A组小鼠血清在首免后第14天即可检出阳性抗体(P/N≥2.0)。

保护性特异性抗肿瘤免疫核糖核酸纳米粒制备及质量评价

目的:研究一种具有保护性的特异性肿瘤免疫核糖核酸(iRNA)纳米粒的制备方法。方法:从接种了H22细胞的小鼠腹水中分离肿瘤细胞,裂解后加弗氏完全佐剂充分乳化制备成免疫原,接种于小鼠,1个月后取小鼠的免疫器官提取核糖核酸,复凝聚方法制备壳聚糖-免疫核糖核酸纳米粒,并检测理化特性。结果:提取的肝、脾iRNA为RNA纯品,iRNA白细胞黏附抑制率大于30%,壳聚糖与iRNA形成表面带正电荷的纳米粒,iRNA得到保护不易被破坏。结论:该方法提取并制备的iRNA纳米粒携带供体肿瘤特异性免疫信息,并得到良好保护,能提高抗肿瘤疗效。

核酸免疫制备豇豆胰蛋白酶抑制剂抗体的制备及初步应用

通过构建pcDNA3.1-CpTI真核表达载体,肌肉注射免疫Balb/c纯系小鼠,获得特异性的核酸免疫CpTI 抗体,其效价达1:800,所获抗体可与纯化的CpTI蛋白发生特异性反应,检测OD405值和包被蛋白量相关系数为0.9961;间接法测定转cpti基因水稻结果表明,核酸免疫制备的抗体能与转基因水稻CpTI蛋白产生特异性反应, 可用于转基因水稻cpti基因表达的定性测定。

免疫核糖核酸对巨细胞病毒感染母亲所生新生儿3～5年反复呼吸道感染患病率的影响

目的 探讨抗巨细胞病毒 免疫核糖核酸 (抗CMV iRNA)对巨细胞病毒 (CMV)感染母亲所生新生儿 3～ 5年反复呼吸道感染 (RRI)患病率的影响。方法 将CMV感染母亲所生新生儿随机分成治疗组 2 5例 ,对照组 15例。治疗组予抗CMV iRNA 3mg/次溶于 2 0ml生理盐水中 ,腹腔注射 ,连用 3d ,对照组不用。 结果 治疗组RRI患病率 3～ 5年内明显低于对照组。结论 抗CMV iRNA可降低CMV感染母亲所生新生儿 3～5年内RRI患病率。

汉坦病毒包膜糖蛋白基因核酸免疫的初步研究

目的将克隆有汉坦病毒包膜糖蛋白基因M片段及G1、G2基因的重组质粒免疫动物，了解上述目的基因在核酸疫苗中的应用价值。方法大量制备已构建好的pcDNA3．1-M、pcDNA3．1-G1、pcDNA3．1-G2重组质粒DNA及对照空质粒pcDNA3．1。然后用这四组质粒DNA通过肌肉注射的方法免疫6～8周龄的BALB／c小鼠（每组5只），每4周免疫一次，共免疫3次，每次免疫前及最后一次免疫后2周断尾取血，用免疫荧光的方法检测基因免疫的体液免疫应答效果。结果重组质粒pcDNA3．1-G1免疫小鼠有4只血清抗汉坦病毒抗体为阳性，重组质粒pcDNA3．1-G2以及重组质粒pcDNA3．1-M免疫小鼠各有1只血清抗汉坦病毒抗体为阳性。结论汉坦病毒糖蛋白基因核酸免疫动物后可刺激机体产生特异性的体液免疫应答。

丙肝核酸疫苗免疫的CTL活性检测

目的 :探讨丙肝核酸疫苗的细胞免疫应答效果。方法 :用丙肝核酸疫苗pSVL HCV C +E1 通过皮下注射途径免疫BALB C小鼠 ,以绿色荧光载体重组体pEGFP N1 HCV C +E1 转染的小鼠骨髓瘤细胞SP2 0作为靶细胞 ,采用51 Cr释放法 ,以(Na) 2 51 CrO4 标记靶细胞进行标准的 4h杀伤试验检测其CTL活性。结果 :CTL杀伤率达 4 0 7%。结论

干扰灵联合免疫核糖核酸治疗慢性乙肝疗效分析

采用干扰灵联合抗乙肝免疫核糖核酸治疗慢性乙肝２６例，并与１８例对照组比较。结果表明：治疗结束时，ＨＢｓＡｇ转阴率１５４％（４／２６），ＨＢｅＡｇ转阴率７７２％（１７／２２），ＨＢＶＤＮＡ转阴率５７７％（１５／２６），明显高于对照组（Ｐ＜０．０１）；随访一年１例患者ＨＢｅＡｇ、ＨＢＶＤＮＡ转阴，２例患者ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、ＨＢＶＤＮＡ转阴后变阳，其有效率仍显著高于对照组（Ｐ＜０．０１）。上述结果表明：干扰灵联合抗乙肝免疫核糖核酸疗法能明显抑制ＨＢＶ复制，提高抗病毒疗效。本文并对影响抗病毒疗效的诸多因素进行了分析。

免疫核糖核酸治疗肿瘤的研究

免疫核糖核酸(iRNA)既可传递体液免疫,又可传递细胞免疫,无明显种属特异性。它能介导淋巴细胞对肿瘤细胞特异细胞毒作用。同种或异种 iRNA 均能在体内使非致敏动物获得免疫信息,抑制或破坏肿瘤生长。在体外使致敏淋巴细胞变成效应细胞,对肿瘤细胞起免疫反应。临床以抗肿瘤 iRNA 治疗恶性肿瘤较多,取得了肯定疗效,而 iRNA 作为恶性肿瘤的手术治疗或放疗的辅助疗法更能奏效,在防止肿瘤术后复发和转移方面具有良好的前景。