小反刍兽疫病毒双抗原夹心时间分辨荧光免疫测定方法的建立

通过优化大肠埃希菌密码子、优化表达条件等方法,在大肠埃希菌表达系统中成功获得了可溶性的N蛋白与NH融合蛋白。进一步基于纯化的可溶性N蛋白与NH融合蛋白建立了小反刍兽疫病毒双抗原夹心时间分辨荧光免疫测定方法。该方法敏感性高,特异性强,能够特异性的检测羊血清中的小反刍兽疫病毒抗体,与其他相关疫病病原无交叉反应;重复性试验组内与组间变异系数均小于10%。对292份临床血清样品进行检测,与法国IDVET竞争ELISA试剂盒比较,阳性样品符合率为92.47%,阴性样品符合率为97.26%,总的符合率为94.86%。该方法与传统的ELISA方法相比,具有敏感性、特异性相当,操作简单、快速,具有较高的推广应用价值。

动物源性食品中磺胺类药物的多残留酶联免疫测定方法研究进展

综述了动物源性食品中磺胺类药物多残留检测的酶联免疫测定方法研究进展。分别对磺胺药物特异性抗体制备的基本原理,载体与半抗原的连接方法,异源系统在磺胺药物多残留检测中的应用现状进行了详细阐述。

重组鲈鱼生长激素的酶联免疫测定方法

建立了重组鲈鱼生长激素 (jspGH)的间接ELISA ,以 jspGH的小鼠多克隆抗体作为一抗 ,HRP羊抗鼠IgG作为二抗 ,在抗体及酶标二抗的稀释液中加入 4 %PEG ,从而提高检测灵敏度至 4 0ng/ml,抗原浓度在 4 0～ 10 0 0ng/ml范围内与OD4 50nm 值成线性关系。此法较简便、灵敏 ,可用于检测基因工程菌发酵液中的jspGH含量。

小麦中T—2毒素酶联免疫吸附测定法(ELISA)

本文建立了测定小麦中 T—2毒素的简便、灵敏、快速的酶联免疫吸附测定法。样品经三氯甲烷—无水乙醇(4:1)提取,用中性氧化铝/活性碳柱净化,制备成样液,供 ELISA 检测之用。表方法的最低检出量为0.1ng/检测孔(1ng/ml),检测的线性范围为1—1000ng/ml。小麦中 T—2毒素含量在1、10、50、100、200、和500ppb六个水平时,回收率为80.4—110.7%,变异系数为4.7—19.2%。共检测10份赤霉病污染的小麦样品,均为阳性,T—2含量为78—126ng/_ 。

CA50时间分辨荧光免疫分析的方法学及临床应用评价

目的 建立CA50的时间分辨荧光免疫分析（TRFIA）法，并对CA50 TRFIA方法学及临床应用价值进行评价。方法 用稀土离子Eu^3＋标记CA50单克隆抗体，以96孔微孔板为载体，固相夹心法建立CA50 TRFIA；通过对67例消化道恶性肿瘤和良性病变患者以及213例健康人血清CA50的测定，应用临床诊断试验评价方法，系统地对CA50 TRFIA方法学和临床应用价值进行评价。结果 CA50 TRFIA在精密度、重复性、线性范围和回收率等方面均获得较为满意的结果；该方法对消化道恶性肿瘤的灵敏度为35．00％，特异度为95．77％，准确度为90．56％，阳性预示值为43．75％，阴性预示值为94．00％。结论 CA50 TRFIA是一种新的免疫标记技术，该方法对消化道肿瘤具有较高的特异度和准确度，是一种较为可靠和特异的方法，可用于肿瘤普查、诊断、预后和转归，评价疗效和高危人群随访观察，且无放射性污染，更适应于临床的应用，值得推广应用。

化学发光免疫法测定血清孕酮的研究

本文报道以化学发光反应为显示系统的血清孕酮免疫测定方法。用化学发光化合物氨基丁基乙基异鲁米诺(ABEEI)标记孕酮,以牛血清白蛋白-孕酮连接物为免疫原,免疫家兔制备孕酮抗血清,经过优选抗血清稀释度、标记物用量和温育时间,建立了孕酮的化学发光免疫测定法;经方法学评价,该测定方法的灵敏度达每管17.6fmol,批内变异系数为6.4％,批间变异系数为15.9％,平均回收率为104％。对41例血清标本的测定结果表明,化学发光免疫测定法与~3H-孕酮的放射免疫测定法相关良好,其相关系数为0.953。

维生素D及其代谢产物水平测定研究的进展

维生素D是人体必需的营养素,血清维生素水平影响着人体内钙和磷的正常代谢,与心血管疾病、免疫系统疾病、糖尿病、肿瘤、神经系统疾病等密切相关,对人体健康发挥着重要作用。因此,维生素D水平的测量对诊断、治疗和预防维生素相关疾病有重要意义。25-羟基维生素D[25-（OH）D]不仅是维生素D在体内的主要表现形式也是评价体内维生素含量的重要指标。

游离型PSA时间分辨荧光免疫分析法的建立

目的：建立血清游离型前列腺特异性抗原（F-PSA）的时间分辨荧光免疫分析法（TRFIA）.方法：以抗PSA单克隆抗体101#包被96孔微孔板,用Eu3＋标记抗 F-PSA单克隆抗体201#,夹心法建立F-PSA的时间分辨荧光免疫分析法.标准曲线由TRFIA检测仪自带的Log-Log_B函数处理.结果：F -PSA批内和批间CV分别为1.12%和5.36%,效点均值ED20、ED50和ED80分别为2.866、12.01和38.13 ng/mL.可测范围为0.02～78 ng/mL.回收率为103.58%.试剂经冻干后-30 ℃保存6个月后免疫反应参数基本未改变.结论：建立的F-PSA TRFIA有良好的健全性,定量分析效果较好.

电化学发光免疫法和时间分辨荧光免疫法检测血清TSH的比较

【目的】比较电化学发光免疫法和时间分辨荧光免疫法两者在检测血清TSH上的优势。【方法】利用两法分别检测血清促甲状腺激素(TSH)并进行精密度、准确度、病人结果可报告范围,分析灵敏度、特异性、回收率等几方面的比较。【结果】两法检测血清TSH的敏感度分别为0.05mIu/L和0.100mIu/L,病人可报告范围分别为0.05～100.00mIu/L和0.10～80.00mIu/L,电化学发光免疫法精密度和准确度优于时间分辨荧光免疫法。【结论】电化学发光免疫法检测血清TSH在精密度、敏感度、稳定性,病人可报告范围等方面更优于时间分辨荧光免疫法。

甲胺磷人工抗原的合成和鉴定(英文)

目的 合成和鉴定甲胺磷人工抗原。方法 用磷酸化方法偶联氧、硫二甲基硫代磷酚氯到牛血清蛋白上,然后做一系列的实验,如:测定磷、紫外、31P核磁共振光谱和兔疫小鼠等。结果 人工抗原的偶联比是16,人工抗原的紫外光谱图与牛血清蛋白质相比发生改变,人工抗原和标准甲胺磷的31P核磁共振光谱具有相同的化学位移峰,被免疫的小鼠产生了抗甲胺磷的抗体。结论 甲胺磷人工抗原合成成功,为其免疫测定方法的建立提供了条件。

Sysmex CA-1500自动血凝仪常见故障及排除

SysmexCA-1500自动血液凝血分析仪是利用凝结、产色和免疫测定方法来检测分析的全自动血凝仪．其为液晶触摸屏，全英文操作，测定结果重复性好且测试速度快。仪器出现故障时会自动报警并提示错误信息，易于排除。但在本人一年多的使用过程中除了一些常见的错误提示外，还出现过以下几种根据仪器提示无法排除的故障，经检查分析，我们找到故障原因及排除方法．现介绍如下。

ELISA检测错误原因分析

EUSA即酶联免疫吸附试验，是一种常用的固相酶免疫测定方法。ELISA的基本原理是：①使抗原（或抗体）结合到某种固相载体表面，并保持其免疫活性；②使抗原（或抗体）与某种酶联结成酶标抗原（或抗体），而且此酶标抗原（或抗体）既保留其免疫活性，又保留其酶活性；③测定时将受检标本（抗体或抗原）和酶标抗原（或抗体）按不同步骤与固相载体表面的抗原或抗体进行反应，再用洗涤方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其它物质分开，最后结合在固相载体上的酶量与标本中受检的抗体或抗原量成一定比例；

49例儿童脊髓灰质炎疫苗初免抗体

为了解我市近年来脊髓灰质炎疫苗的免疫效果,我站选择鄞县初免儿童49例作免疫监测,服苗前采末稍血一次,全程服苗后再隔一个月采第二次末稍血。服用的脊髓灰质炎三价糖丸疫苗,系由昆明生物制品研究所生产,批号097—152—3,效期1990年9月。

鸡肠炎沙门氏菌抗体的检测

鸡肠炎沙门氏菌感染严重危害着人们健康,因此,该病的监测显得尤为重要。菲律宾学者建立了间接ELISA和化学发光免疫测定方法(CLIA),用于监测肉鸡群肠炎沙门氏菌(SE)感染情况。应用特异性,SE抗原(FG抗原)比较了两种方法的特异性与敏感性。

男性免疫性不育的诊断

男子免疫性不育的诊断,目前凭借于抗精子抗体将测定。1959年Rumke和Hellinga首次在不育男子中测定到该类抗体。嗣后,许多测定方法相继产生,有些是直接测定,有些是间接判断。Mandelbaum于1987年对诸多的检测方法有过一个简略的归纳,现将主要方面摘录如下:

胶体金法与增强化学发光免疫分析法检测CEA在中老年体检中的应用价值

目的探讨胶体金法和增强化学发光免疫分析法检测CEA在中老年健康体检中的应用价值。方法对本院704例中老年健康体检者同时应用胶体金法和增强化学发光免疫分析法测定CEA,对结果进行统计分析。结果胶体金法测定的阳性率为9.23%,增强化学发光免疫分析法测定的阳性率为7.95%,2者具有高度一致性。结论虽然CEA并不是肿瘤的特异性指标,但是通过将癌胚抗原作为中老年人群健康体检的常规项目,先用胶体金法进行定性筛查,对阳性结果再用增强化学发光免疫分析法进行定量,可以降低成本,提高准确率,有利于检测出早期恶性肿瘤及与CEA升高相关的非肿瘤疾病,对患者的及时诊治有重要临床价值。

ELISA和金标记免疫层析法检测乙肝HBsAg的实验室评价

本文对1968例血清标本分别用ELISA和金标记免疫层析法检测乙肝HBsAg,对结果进行分析,并对二法不一致的标本进行中和实验,以中和实验结果为确诊结果,旨在对检测HBsAg的两种实验室常规方法进行评价,指导临床诊断。

大鼠出生后发育过程中视网膜Nogo受体蛋白表达的研究

目的观察Nogo受体（NgR）蛋白在大鼠出生后发育过程中视网膜上的表达及其意义。方法使用免疫荧光组织化学技术及激光共聚焦显微镜观察48只大鼠出生后0、3、7、14、21、35、49、63d视网膜NgR蛋白的表达情况。每组6只大鼠。结果NgR蛋白在出午后整个发育过程中的大鼠视网膜上表达均为阳性，荧光染色位于细胞膜及突起。结论NgR蛋白的阳性表达提示髓磷脂蛋自抑制因子和NgR之间的相瓦作用对神经元塑形的过程可能不仅是抑制作用，而是促进和抑制双向作用。从而达到埘神经元塑形过程的调控。