病毒感染和免疫清除中的C型凝集素

树突状细胞和朗罕氏细胞是人体防御病毒入侵的第一道屏障,这些细胞表达的C型凝集素对于细胞发挥抗原免疫清除和细胞之间的黏附有重要作用。其中DC-SIGN和DC-SIGNR在HIV等多种病毒的感染中发挥重要作用。随着基因组学的发展鉴定了许多新的C型凝集素,它们在免疫清除和病毒感染中都可能发挥重要作用。

慢性HBV感染者复发期和免疫清除期在不同年龄阶段的临床病毒学特征

目的:研讨慢性乙型肝炎在不同年龄阶段免疫耐受期和复发期临床病毒学特征.方法:随机选取免疫清除期和复发期慢性乙型肝炎患者570(免疫清除期患者300例和复发期患者270例).按年龄分为:<20岁组,20-40岁组,>40岁组.用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)及时间分辩荧光免疫分析(TRFIA)技术检测其血清中HBVDNA、HBeAg含量,用速率法检测ALT水平.同时对患者肝脏进行B型超声探查.结果:复发期患者主要在>40岁组(166/270),其比例显著高于其他组,而且,男性比女性比例明显高(P=0.000,0.002).在270例复发期患者中,ALT水平低于2倍正常值水平的患者占有相当的比例(12.59%,45.93%).免疫清除期患者主要分布于20-40岁组(153/300),对300例免疫清除期患者随访10-50mo,结果显示193例患者实现了有效的血清转换(HbeAg-antiHBe),血清转换主要发生在20-40岁组(P=0.003,0.002),而且越年轻转换时间越短(P=0.001,0.004).结论:在不同的年龄阶段,免疫耐受期和复发期存在完全不同的临床病毒学特征.

升麻葛根汤治疗免疫清除期慢性乙型肝炎临床研究

目的:研究升麻葛根汤治疗免疫清除期慢性乙型肝炎(CHB)的疗效。方法:100例免疫清除期CHB患者随机分为治疗组60例和对照组40例,治疗组患者采用升麻葛根汤,1剂/d,水煎分两次服;对照组患者服用双虎清肝颗粒12g/次,2次/d;24周为1个疗程。对比观察治疗前后两组患者症状体征、ALT、AST、Alb、TBil,HBV-M(HBV标志物)、HBV DNA。结果:治疗组总有效率优于对照组(P<0.05)。两组患者治疗前后症状体征均有显著改善,胁肋疼痛和食欲不振方面,治疗组改善更优于对照组(P<0.05)。两组患者TBil、AST、ALT与治疗前比较,差异均有显著性意义(P<0.05),与对照组比较,治疗组患者肝功能指标下降水平更优(P<0.05)。两组患者病毒学应答治疗组优于对照组(P<0.05)。结论:升麻葛根汤治疗免疫清除期CHB,能够改善患者临床症状、体征及肝功能,能够抑制病毒复制,疗效可靠。

慢性HBV感染免疫耐受期与免疫清除期肝组织微小RNA表达谱差异分析

目的探索慢性HBV感染免疫耐受期及免疫清除期肝组织微小RNA(miRNA)表达谱的差异并探讨其临床意义。方法应用miRNA芯片筛选9例HBV感染免疫耐受期、8例HBV感染免疫清除期及6例健康对照者肝组织miRNA分子表达谱,进行组间两两比较后,筛选出肝组织中差异表达的miRNA。结果与健康对照组相比,慢性HBV感染免疫耐受期肝组织中miRNA分子上调9个,下调6个;慢性HBV感染免疫清除期肝组织中miRNA分子上调8个,下调6个。与慢性HBV感染免疫耐受期相比,免疫清除期肝组织中miRNA分子上调6个,下调1个。结论慢性HBV感染免疫耐受期和免疫清除期肝组织差异表达的miRNA可能与HBV感染后的免疫清除过程密切相关,有可能成为临床鉴别慢性HBV感染免疫耐受和免疫清除状态的新型分子标记。

免疫清除期慢性乙型肝炎患者外周血T细胞程序性坏死因子-1表达及其意义

目的明确程度性坏死因子(PD-1)在免疫清除期慢性乙型肝炎患者外周血T细胞表达状态及其对患者病毒载量水平和生化指标的影响。方法 45例ALT升高的慢性乙型肝炎患者被纳入本研究。应用流式细胞术对所有患者的外周血总CD8+T细胞和CD4+T细胞PD-1表达百分比和表达强度进行检测,其中18例患者接受肝组织活检,并应用免疫组织化学方法对肝内PD-1配体(PD-L1)表达水平进行检测。结果免疫清除期慢性乙型肝炎患者外周血总CD8+T细胞和CD4+T细胞PD-1表达百分比以及单细胞PD-1表达强度均明显高于健康对照组(P<0.05);外周血总T细胞PD-1表达百分比和单细胞表达强度与患者病毒载量间均无明显相关性;ALT水平与外周血总CD8+T细胞单细胞PD-1表达强度之间有明显正相关性(r=0.338,P=0.02);ALT水平以400IU/L为分界线将患者分为两组,两组病例外周血总CD8+T细胞PD-1单细胞表达强度之间差异有统计学意义(P=0.02),但两组CD4+T细胞PD-1单细胞表达强度之间差异无统计学意义;慢性乙型肝炎患者肝内PD-L1高表达,且与肝脏炎症程度和纤维化程度正相关。结论在免疫清除期慢性乙型肝炎患者T细胞免疫调节中,PD-1单细胞表达强度起着重要作用,而并非由PD-1表达与否或表达百分比决定。PD-1单细胞表达强度与宿主炎症反应强度之间具有正相关性。

HBV感染者免疫清除期乙肝表面抗原定量与HBV-DNA定量的相关性研究

目的主要针对HBV感染者免疫清除期乙肝表面抗原定量与HBVDNA定量的关系进行深度的探究和分析,明确免疫清除期时患者体内乙肝表面抗原定量数值与HBVDNA定量数值之间的关系。方法选取本院2013年10月-2014年11月期间在我院感染科住院免疫耐受期乙肝患者210例,选取同期免疫耐受期患者100例为对照组,同时对这两组患者进行HBV表面抗原定量和HBV-DNA定量检测,分别采用化学发光法、荧光定量PCR(FQ-PCR)和ELISA三种检验的方法,并分析其定量的数值关系是否具有一定的相关性。结果免疫清除期HBV感染者乙肝表面抗原定量与HBV DNA的定量关系具有良好的正相关性。结论乙肝表面抗原定量的高低能正确快速的反映出患者乙肝病毒复制的活跃程度,与HBV DNA定量呈正相关,本关系有助于HBV感染者的病情的观察与治疗指导,有实际意义。

乙型肝炎免疫清除期肝组织炎症分级和纤维化分期与轻度血清甲胎蛋白升高的相关性研究

目的为了弄清慢性乙型肝炎自然病程中,免疫清除期肝组织的炎症分级和纤维化分期与血清甲胎蛋白水平之间的关系。方法检测和两两比较乙型肝炎免疫清除期肝组织炎症分级1、2、3和4级和纤维化Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ期的血清甲胎蛋白水平。结果肝组织炎症分级1、2、3和4级的血清甲胎蛋白水平分别为(4.42±1.80)、(10.49±13.72)、(88.42±140.63)和(142.23±317.12)μg/L,四级之间两两比较,肝组织炎症分级1与4级、2与3级和2与4期存在差异(分别P=0.034、0.049和0.005)。肝组织纤维化分期Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ期的血清甲胎蛋白水平分别为(11.31±18.07)、(7.93±5.24)、(72.91±133.31)和(149.46±296.39)μg/L,四期之间两两比较肝组织纤维化Ⅰ与Ⅳ期和Ⅱ与Ⅳ期存在差异,(P=0.007和0.003)。结论在慢性乙型肝炎的自然病程中,免疫清除期肝组织炎症分级和纤维化分期与轻度甲胎蛋白升高相关,提示肝组织重度炎症或/和肝组织纤维化发展至第Ⅳ期(早期肝硬化)时,肝细胞伴随有异型增生。

慢性乙型肝炎免疫清除期患者HBsAg基因多态性研究

目的探讨慢性乙型肝炎免疫清除期患者乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）基因多态性。以寻找与乙型肝炎病毒免疫清除相关的变异位点。方法回顾性分析我院2008年2月~2011年12月感染性疾病科门诊及住院的慢性乙型肝炎免疫清除期患者10例,并设计特异性引物,于10例患者血清中扩增S基因片段,TA克隆法克隆到T载体中,随机选择克隆测序。结果共20个克隆被测序,20个克隆S蛋白发现12个不同位点的32次变异。主要集中在T细胞表位,B细胞表位及a决定簇。结论慢性乙型肝炎免疫清除期患者存在HBsAg变异,可能仍然存在HBsAg免疫耐受。

实时剪切波弹性成像检测免疫清除期慢性乙型肝炎患者肝纤维化程度的研究

目的探讨实时剪切波弹性成像(SWE)在检测免疫清除期慢性乙型肝炎患者肝纤维化程度中的临床应用价值。方法应用SWE技术测量213例免疫清除期慢性乙型肝炎患者的肝脏弹性模量值,以病理结果为金标准,分析免疫清除期慢性乙型肝炎患者肝脏纤维化分期与SWE测值间的相关性;应用ROC曲线分析SWE诊断≥S2期肝纤维化的效能。结果 213例患者肝纤维化S0、S1、S2及S3~S4期的弹性模量值分别为(6.73±2.04)k Pa、(7.06±2.60)k Pa、(88.34±4.12)k Pa及(12.82±6.63)k Pa,差异有统计学意义(F=22.141,P<0.01)。肝脏弹性模量值与免疫清除期肝纤维化程度呈正相关(r=0.488,P=0.000)。SWE诊断≥S2期肝纤维化的ROC曲线下面积为0.739,截断值为8.81 k Pa,敏感性为58.8%,特异性为81.9%。结论 SWE技术可为诊断免疫清除期慢性乙型肝炎患者肝纤维化分期提供参考依据,为进一步治疗及预后提供一定帮助。

升麻葛根汤治疗免疫清除期慢性乙型肝炎的临床分析

目的研究升麻葛根汤治疗免疫清除期的慢性乙型肝炎患者的临床效果。方法选取82例病情处于免疫清除期的慢性乙型肝炎患者,随机将患者分为对照组和治疗组各41例。对照组采用阿德福韦酯进行治疗,治疗组采用阿德福韦酯联合升麻葛根汤进行治疗。比较两组治疗总有效率、药物不良反应发生情况、用药前后肝功能指标水平、肝功能恢复正常时间。结果治疗组药物治疗总有效率为90.2%,显著高于对照组68.3%,差异有统计学意义(P<0.05);治疗组药物不良反应与对照组比较,无显著性差异(P>0.05);治疗组用药后肝功能水平显著优于对照组,且肝功能恢复正常时间显著短于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论以升麻葛根汤对免疫清除期慢性乙型肝炎进行治疗,可以使患者的临床症状及肝功能相关指标得到显著改善,对机体的免疫功能进行调节,从而抑制病毒复制,使治疗效果更加理想,且不会产生明显的毒副作用。

免疫清除期乙肝病毒携带者的免疫治疗研究

乙型肝炎（HBV）是我国最严重的公共卫生问题之一，乙肝病程长、病情迁延反复，又无特效的治疗手段，给家庭、患者乃至社会带来了沉重的经济负担。在2008年意大利米兰举行的第43届欧洲肝病年会中，专家认为在慢性乙肝治疗中，表面抗原（HBsAg）发生清除和转换，是目前临床中所能获得的最接近“治愈”的状态，被誉为目前慢性乙肝治疗中的“金牌”。

抗结核药诱导乙肝免疫清除期的治疗观察

目的:观察乙肝免疫耐受期合并结核病患者在抗结核治疗过程中,对肝功能及乙肝免疫耐受期的影响,为临床医生判断和治疗抗结核药物致急性药物性肝损伤诱发的乙肝免疫清除提供思路。方法:回顾性分析乙肝免疫耐受期合并结核病患者,在抗结核治疗期间肝功能及乙型肝炎病毒载量(HBV-DNA)的变化。结果:86例患者,肝损害发生率为60.5%,其中有40.7%出现重度肝损害,停用抗结核药物并加强保肝治疗,连续3个月肝功能及HBV-DNA持续波动,加用拉米夫定抗病毒治疗2个月后肝功能及HBV-DNA逐步恢复正常,调整抗结核药物,至疗程结束。结论:乙肝免疫耐受期合并结核病患者在抗结核治疗期间,更易诱发严重肝损害,应提高警惕,一旦诱发乙肝免疫清除,应积极给予抗病毒药物,减少病毒对肝脏的进一步损害。

双环醇治疗免疫清除期慢性HBV感染者血清前白蛋白的观察

目的观察和分析双环醇治疗免疫清除期慢性HBV感染者血清前白蛋白的临床效果。方法选择我院2012年1月~2013年11月收治的50例免疫清除期慢性HBV感染的患者为研究对象,将其随机分成两组,每组25例,观察组患者采用双环醇进行治疗,对照组患者采用甘草酸二胺胶囊进行治疗,比较两组患者治疗前后血清前白蛋白的变化。结果随着时间的推移,两组患者的前蛋白蛋水平均得到了有效改善,观察组患者的改善程度明显高于对照组,数据差异显著,具有统计学意义(P<0.05)。结论双环醇治疗免疫清除期慢性HBV感染者可以有效改善患者的血清前白蛋白水平,具有较强的干细胞保护作用,对缓解患者的病情,提高患者的生活质量具有重要意义。

免疫清除性化疗结合自体外周血造血干细胞移植治疗重症系统性红斑狼疮

重症SLE4例,分别合并狼疮性肾炎、狼疮脑、狼疮心或股骨头坏死。干组胞动员用环磷酰胺加重组人粒细胞集落因子(G-CSF);预处理为回输前3天每天应用环磷酰胺50mg/kg+回输后3天每天用抗胸腺细胞球蛋白5mg/kg。回输单个核细胞数(3.33～4.27)×10~8/kg,CD34细胞(3.96～4.90)×10~6/kg。结果:回输后2周内获造血重建。随访4～12个月,临床症状没有复发倾向。狼疮细胞相关抗体全部转阴。

西黄丸抗肿瘤作用及其免疫清除功能的实验研究

目的:探讨西黄丸对荷瘤大鼠的抗肿瘤作用及其对荷瘤机体免疫清除功能的影响。方法:采用Walker256建立大鼠荷瘤模型,随机分为空白对照组、模型对照组、香菇多糖组、西黄丸低、中、高剂量组,每组10只。造模后连续治疗给药14d。腹主动脉取血,取瘤,计算抑瘤率;采用流式细胞技术(FCM)检测外周血中CD3+,CD4+,CD8+T细胞及黏附分子B7-1(CD80)的含量;ELISA测定外周血IL-2,IFN-γ表达水平。结果:西黄丸高剂量组抑瘤率为33.1%;与对照组比较,模型组大鼠外周血中IL-2,IFN-γ水平及CD3+,CD4+,B7-1含量明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,西黄丸高剂量组大鼠外周血中IL-2,IFN-γ水平及CD3+,CD4+,B7-1含量增高(P<0.05)。结论:西黄丸可通过提高外周血IL-2,IFN-γ水平及CD3+,CD4+,B7-1含量,增强免疫清除功能,发挥其抗肿瘤作用。

免疫清除期慢性乙型肝炎患者血清HBsAg水平与肝组织炎症分级及纤维化分期的关系

目的探讨处于免疫清除期（IC）的慢胜乙型肝炎（CHB）患者血清HBsAg水平与肝组织炎症分级和纤维化分期的关系。方法2009年3月至2011年6月确诊为IC期的CHB患者，同步进行肝组织病理学检查、血清HBsAg定量及生物化学指标检测。Spearman等级相关分析法判断HBsAg水平与肝组织炎症分级和纤维化分期之间的相关性；logistic回归分析法分析相关指标的诊断意义，并构建肝脏纤维化诊断预测模型，受试者工作曲线（ROC）法评价模型的诊断价值。结果共165例IC期CHB患者纳入本研究。炎症G1、G2、G3、G4级患者的血清HBsAg水平分别为（27716．07±32870．69）IU／ml、（34478．75±40899．55）Iu／ml、（19408．09±24881．07）Iu／ml、（14286．31±28610．14）IU／ml，G2、G3、G4级患者间HBsAg水平差别有统计学意义（X2=10．508，P〈0．05）；纤维化S1、S2、S3、s4期的血清HBsAg水平分别（41337．23±43236．39）IU／ml、（27264．32±32517．29）IU／ml、（11541．77±11538．93）IU／ml、（11447．37±22215．44）IU／ml，不同纤维化分期患者的HBsAg水平差异有统计学意义（x2=22．005，P〈0．01）。Spearman等级相关分析结果显示，HBsAg水平与炎症分级及纤维化分期均呈负相关关系（r值分别为-0．244和-0．365，P值均〈0．01）。HBsAg≤32995IU／ml判断纤维化s≥4的特异度为95．16％，灵敏度35．92％。二元logistic回归分析结果显示，年龄、白蛋白、胆碱酯酶和HBsAg水平的组合模型有助于判断s≥4，建立诊断模型：S=6．3087＋0．0492×年龄（岁）-0．5827×HBsAg（log10IU／ml）-0．1109×白蛋白（g／L）-0．0003×胆碱酯酶（IU／L），其灵敏度为75．73％，特异度为69．35％。结论Ic期CHB患者的血清HBsAg水平与肝脏炎症分级和纤维化分期呈负相关关系，且随病理分级的增加而呈阶梯状降低。HBsAg水平可作为无创性判断肝脏纤维化状态的一项重要指标。

248例慢性乙型肝炎病毒感染者免疫清除期演变规律的研究

目的阐明慢性乙型肝炎病毒（HBV）感染自然病程中免疫清除期不同阶段血清学及肝脏病理的演变规律。方法将处于免疫清除期的慢性乙型肝炎（CHB）患者，按照其肝组织纤维化分期由轻到重（SO、s1、s2、s3-s4）将免疫清除期划分为初、早、中、后4个阶段，统计不同阶段患者年龄、丙氨酸氨基转移酶（A1．T）、HBVDNA定量、肝组织炎症分级及肝组织乙型肝炎核心抗原（HBcAg）分布的关系。结果符合免疫清除期纳入标准患者248例，男性187例，女性61例，平均年龄（31．7±7．5）岁。处于初、早、中、后4个阶段的患者分别为15例、141例、54例、38例，相应年龄分别为（27．40±4．87）岁、（30．74±6．12）岁、（32．85±9．40）岁、（35．45±8．38）岁，ALT分别为（64．73±38．81）U／L、（103．06±82．54）U／L、（165．83±263．73）U／L、（146．34±168．23）U／L，血清HBVDNA载量分别为（7．36±1．30）lgIU／ml、（7．26±0．92）lgIU／ml、（6．92±1．08）lgIU／ml、（6．47±1．10）lgIU／ml。不同阶段患者年龄、ALT、HBVDNA载量、肝组织炎症分级及HBcAg分布差异均有统计学意义（P值均〈0．05）。结论免疫清除期是肝组织炎症逐渐活跃，HBVDNA载量持续下降的演变过程。随着不同阶段的进展，肝组织HBcAg分布进展到以浆型为主。

西黄丸氯仿提取物对荷瘤大鼠免疫清除功能的影响

目的研究西黄丸氯仿提取物对Walker256荷瘤大鼠免疫清除功能的影响,探讨其抗肿瘤作用机制。方法 70只Wistar大鼠随机选取10只作为空白对照组,剩余60只建立荷瘤大鼠模型后随机分为阴性对照组、香菇多糖对照组、西黄丸氯仿提取物高、中、低剂量组、西黄丸组。各实验组灌胃给药14 d后腹主动脉采血;ELISA法检测外周血白细胞介素2(IL-2)、干扰素γ(IFN-γ)水平的变化;流式细胞术检测外周血黏附分子B7-1、CD3+、CD4+、CD8+T细胞的变化,观察西黄丸氯仿提取物对荷瘤大鼠免疫清除功能的影响。结果与阴性对照组比较,西黄丸氯仿提取物中剂量组大鼠外周血IL-2、IFN-γ含量明显增高,黏附分子B7-1、CD3+、CD4+、CD8+T细胞比例显著升高,差异具有统计学意义(P<0.05);氯仿提取物中、低剂量组荷瘤大鼠外周血中CD3+、CD4+T细胞比例明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论西黄丸氯仿提取物能通过促进T淋巴细胞的增殖与活化增强荷瘤机体的免疫清除功能。

HBeAg阳性慢性HBV感染者免疫耐受期和免疫清除期的误判

慢性乙型肝炎病毒（ HBV ）感染的自然史分为5期，分别是免疫耐受期、免疫清除（活动）期、低复制期、HBeAg阴性慢性乙型肝炎（ CHB）和HBsAg阴性期［1］。免疫耐受期的特征是 HBeAg 阳性、HBV DNA 高水平、丙氨酸转氨酶（ ALT）正常或稍高、肝脏无或存在轻微炎症以及无或存在轻微纤维化；免疫清除期的特征是HBeAg阳性、HBV DNA水平较免疫耐受期稍低、ALT升高、肝脏炎症和（或）纤维化程度明显［1］。肝脏穿刺活检（肝活检）主要用于CHB疾病阶段的判定［2］，这其中包括免疫耐受期和免疫清除期的判定，以决定下一步的诊疗方案。然而，临床上并不是每位患者均进行肝活检，再加上HBV DNA水平高低没有一个准确的界限较难把握，ALT水平可能会受多种非HBV因素影响，因此在无肝活检的情况下，慢性HBV感染免疫耐受期和免疫清除期可能会被误判，导致后续治疗失败、耐药和疾病进展恶化等不良后果。本研究拟对郑州大学与延安大学附属医院两个中心的394例经肝活检确定免疫耐受期和免疫清除期的HBV感染者进行分析，研究在有或无肝活检时免疫耐受期和免疫清除期诊断准确率的差别。