基于复发性阿弗他溃疡免疫特征基因的溃疡性结肠炎生物标志物鉴定及潜在小分子药物筛选

目的 通过生物信息学多芯片联合分析方法和机器学习技术探讨复发性阿弗他溃疡(recurrent aphthous ulcer, RAU)免疫特征基因在溃疡性结肠炎(ulcerative colitis, UC)中的临床价值。方法 从基因表达综合(Gene Expression Omnibus, GEO)数据库下载RAU和UC的转录组数据,免疫相关基因列表从免疫学数据库和分析门户(Immunology Database and Analysis Portal, IMMPORT)获得。利用加权基因共表达网络分析(weighted gene co-expression network analysis, WGCNA)、差异分析和功能富集分析筛选评估RAU疾病基因及其功能,通过LASSO-Cox回归和随机森林筛选RAU免疫特征基因。验证RAU免疫特征基因在UC样本中的表达水平并进行Friends分析,通过多层感知机(multi-layer perception, MLP)人工神经网络鉴定其诊断效能。基于免疫特征基因使用一致性聚类算法对UC样本进行分子分型,探讨不同亚型免疫细胞浸润水平和生物学特征。最后利用药物转录图谱平台(Integrated Traditional Chinese Medicine, ITCM)进行靶向药物筛选,CB-dock2和SwissADME平台进行分子对接验证和模拟药物代谢动力学分析。结果 共鉴定出324个RAU疾病基因。生物功能富集分析显示,RAU疾病基因主要与免疫炎症、微生物感染和炎症性肠病等危险因素有关。进一步筛选验证确定防御素β4A(defensin beta 4A,DEFB4A)、骨髓基质细胞抗原2(bone marrow stromal cell antigen 2,BST2)、胸苷磷酸化酶(thymidine phosphorylase, TYMP)和神经胶质成熟因子γ(glia maturation factor gamma, GMFG)为高表达免疫特征基因,并对UC具有诊断价值[曲线下面积(area under the curve, AUC)=0.915]。RAU和UC存在相同的T细胞紊乱基础,免疫特征基因可将UC区分为代谢型和免疫型两个亚型,且免疫型具有更高的特征基因表达和T细胞亚群浸润水平。筛选获得10个天然小分子药物,分子对接显示其均与免疫特征基因翻译蛋白质有良好结合活性,且湖贝甲素具有良好的药代动力学参数,可能是潜在的UC防治药物。结论 基于RAU的免疫特征基因可以很好地区分UC样本并进行亚型鉴定,可为消化道炎症性疾病基础研究、临床疾病辅助筛查和潜在防治药物筛选提供一定理论依据和新思路。

肺腺癌免疫微环境特征基因对患者生存时间及ICB疗效的预测价值

目的探讨肺腺癌免疫微环境特征基因以及相关基因对患者生存时间及免疫检查点抑制剂(ICB)疗效的预测价值。方法使用非负矩阵分解(NMF)聚类分析在癌症基因图谱(TCGA)数据库肺腺癌患者测序数据集(TCGA-LUAD)中鉴定不同的免疫亚型,并对免疫亚型进行肿瘤纯度评估、免疫应答评分(TIDE评分)、肿瘤突变负荷(TMB)分析以及基因组DNA拷贝数变异(CNV)分析。对GSE136961数据集和TCGA-LUAD数据集中的基因表达进行加权基因共表达网络分析(WGCNA)。使用R语言中ClusterProfiler包对获得的基因进行基因本体论(GO)富集分析和京都基因与基因组数据库(KEGG)通路分析;利用Cytoscape的regulon模块进行转录调控网络分析;使用SPSS 25.0统计软件绘制Kaplan-Meier曲线进行生存分析。结果TCGA-LUAD数据集中鉴定出C1、C22种免疫亚型。2种免疫亚型中,C2免疫亚型的免疫应答评分显著高于C1免疫亚型(P<0.05);C2免疫亚型TIDE评分、TMB低于C1免疫亚型(均P<0.05)。对GSE136961数据集和TCGA-LUAD数据集进行WGCNA分析共获得10种与免疫耐受以及生存相关的基因。GO富集分析和KEGG通路分析结果显示10种基因主要与DNA损伤以及细胞周期通路相关。转录调控网络分析结果显示E2F4是与免疫耐受相关5个基因(BRCA1、BRCA2、FOXM1、MELK、TUBB)的转录调控因子。2种免疫亚型中进行E2F4及与免疫耐受相关5种基因的表达及生存分析结果显示,E2F4、BRCA1、BRCA2、FOXM1、MELK、TUBB在免疫活性低以及免疫应答差的C1亚型显著高表达。结论转录调控因子E2F4及与免疫耐受相关5个基因(BRCA1、BRCA2、FOXM1、MELK、TUBB)高表达预测肺腺癌患者具有较短的生存时间和较差的免疫疗效。

The relationship between Bag-1 and gastric cancer clinicopathologic characteristic

Objective： The aim of our study was to investigate Bcl-2 antanogene-1 （Bag-l） expressions in gastric cancer and evaluate their clinical significance. Methods： Bag-1 expressions were studied by the immunohistochemical streptavidin- perosidase （S-P） method in 62 samples of gastric cancer tissues, 11 normal gastric tissues, and their clinical significance was analyzed. Results： The positive rate of Bag-1 expression in the gastric carcinoma tissues was 41.94% （26/62）, while it was 9.09% （1/11） in the normal gastric tissues （P = 0.046）. Though Bag-1 was positively related to the tumour pathological grade, lymph node metastasis and prognosis （P 〈 0.05）, it was not related to the sex, age, location, tumour diameter, depth of invasion （P 〉 0.05）. Conclusion： There are over expression of Bag-1 gene protein in gastric cancer, it is significance in prognosis of gastric cancer.