大鼠免疫球蛋白样转录物3过表达腺病毒载体的构建及鉴定

目的构建免疫球蛋白样转录物3(immunoglobulin-like transcript 3,ILT3)过表达腺病毒载体,以期进一步研究ILT3基因功能及其在心血管疾病中的作用。方法针对大鼠ILT3设计引物,通过PCR扩增获取目的基因,以琼脂糖凝胶电泳鉴定,行胶回收与PCR产物纯化。使用限制性内切酶Bam HⅠ与AgeⅠ对载体质粒以及纯化后的PCR产物进行双酶切,将酶切后的PCR产物与载体连接,连接产物加入至感受态细胞培养后挑取菌落进行PCR鉴定、测序、比对及质粒抽提。将ILT3重组质粒与腺病毒辅助包装质粒共转染至HEK293细胞,获取病毒粗提液并进行扩增、纯化,终点稀释法进行病毒效价检测,在荧光显微镜下观察腺病毒转染效率。结果 PCR与测序鉴定表明GV314-ILT3重组质粒构建成功。终点稀释法测得病毒效价为1×109PFU/ml,荧光显微镜下观察显示病毒转染效率较高。结论携带ILT3基因的腺病毒载体构建成功,获取的腺病毒具有较高的效价与转染效率。

免疫球蛋白样转录物3,4与移植耐受的关系

免疫球蛋白样转录物3和4是表达于单核细胞、巨噬细胞和树突状细胞表面的一种抑制性受体,在耐受性树突状细胞及抑制性T细胞级联的形成中起着非常重要的作用。研究它们的功能将有助于了解免疫耐受及移植耐受的机制,并寻找一条新的减轻移植排斥反应的途径。

免疫球蛋白样转录物3和4在移植耐受中的作用

免疫球蛋白样转录物 3和 4是新近发现的表达在单核细胞、巨噬细胞和树突状细胞表面的免疫球蛋白超家族抑制性受体。研究表明 ,免疫球蛋白样转录物 3和 4具有抑制CD4 + Th细胞活化的能力而在器官移植中发挥抑制排斥反应的重要作用。

免疫检查点T细胞激活抑制物免疫球蛋白可变区结构域、人内源性逆转录病毒-H长端重复相关蛋白2在子宫内膜癌中的表达及临床意义

目的分析免疫检查点T细胞激活抑制物免疫球蛋白可变区结构域(VISTA)、人内源性逆转录病毒-H长端重复相关蛋白2(HHLA2)在子宫内膜癌(EC)中的表达及临床意义。方法选取2017年9月至2019年10月唐山市妇幼保健院收治的120例的EC患者作为研究对象,收集其的EC组织和癌旁正常组织。检测EC组织和癌旁正常组织VISTA、HHLA2的表达;采用Spearman分析免疫检查点VISTA、HHLA2的相关性;Kaplan-Meier分析VISTA、HHLA2与预后的关系;Cox回归分析影响EC患者预后的危险因素。结果EC组织中VISTA、HHLA2阳性表达率显著高于正常癌旁组织(P<0.05)。Spearman相关性结果显示EC组织中VISTA与HHLA2表达呈正相关性(r=0.587,P<0.05)。EC组织中VISTA、HHLA2表达与临床病理特征有关(P<0.05)。Kaplan-Meier曲线结果显示VISTA阳性表达患者3年生存率低于阴性表达患者(χ^(2)=11.864,P<0.05),HHLA2阳性表达患者3年生存率低于阴性表达患者(χ^(2)=4.975,P<0.05)。Cox回归分析结果显示VISTA和HHLA2是影响EC患者预后的危险因素(P<0.05)。结论免疫检查点VISTA、HHLA2在EC中高表达,其是影响EC预后的危险因素,二者可能是有价值的预后标志物。

IL-1、CRP、免疫球蛋白及补体C3、C4检测在冠状动脉粥样硬化性心脏病诊疗中的临床应用

目的探讨炎症因子白细胞介素6(IL-6)、C反应蛋白(CRP)、免疫球蛋白IgG、IgM、IgA以及补体C3、C4在冠状动脉粥样硬化性心脏病中的诊断价值。方法选取2020年1月—2022年3月于沛县人民医院入院诊治的冠状动脉粥样硬化性心脏病患者100例作为研究组,同时随机选取本院同时段的健康体检者100例作为健康对照组。比较两组患者的IL-6、CRP、IgG、IgM、IgA与补体C3、C4的水平,并分析各项指标单一检测以及联合检测的阳性检出率。结果研究组的炎症因子IL-6、CRP、免疫球蛋白IgG、IgM、IgA以及补体C3、C4指标均高于健康组(P<0.05);联合检测的阳性检出率为86%,均高于IL-6、CRP、免疫球蛋白及补体C3、C4的任一单一检测结果(均P<0.05)。结论在冠状动脉粥样硬化性心脏病患者中炎症因子IL-6、CRP、免疫球蛋白IgG、IgM、IgA以及补体C3、C4各项指标与健康者相比均有不同程度升高,所有指标联合检测的诊断效能高于任一指标的单一检测。联合检测可作为临床冠心病病情评估的重要诊断依据。

免疫球蛋白样转录物3和4在肾移植受者树突状细胞中表达的意义

目的 探讨免疫球蛋白样转录物3和4（ILT3和ILT4）在肾移植受者外周血树突状细胞（DC）中的表达情况,并分析其在移植免疫低反应中的作用.方法 选择肾移植后存活5年以上肾功能稳定和慢性排斥反应的受者各10例,分别作为肾功能稳定组和慢性排斥组;另选择10例健康志愿者作为正常对照组.用粒-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）和白细胞介素4（IL-4）刺激各组研究对象的外周血单核细胞,诱导培养获得DC.用流式细胞仪测定DC表面分子ILT3和ILT4的表达,并分析各组DC表达的差异;用酶联免疫吸附试验法测定各组血清中ILT3和ILT4的配体HLA-G5的表达水平.结果 ILT3在肾功能稳定组DC中表达水平上调,与正常对照组和慢性排斥组比较,差异有统计学意义（P＜0.05）,而ILT4的表达在各组间比较,差异无统计学意义（P＞0.05）;肾功能稳定组血清中HLA-G5的表达水平较正常对照组和慢性排斥组显著升高,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 长期存活的肾功能稳定受者外周血中高表达ILT3和其配体HLA-G,说明它们可能在外周免疫耐受的诱导和维持中起非常重要的作用.

免疫球蛋白样转录物5在胶质母细胞瘤中的表达及对患者预后的评估价值

目的探讨免疫球蛋白样转录物5(ILT5)在胶质母细胞瘤中的表达情况,分析其与患者临床特征的关系及对预后的评估价值。方法取92例胶质母细胞瘤患者的胶质瘤组织,同期取40例行正常脑组织切除减压术患者的正常脑组织。采用实时荧光聚合酶链反应(PCR)检测ILT5 mRNA的相对表达量;免疫组化法检测ILT5蛋白的表达情况,并分析其与患者临床特征及预后的关系。结果胶质瘤组织中ILT5 mRNA的相对表达量和ILT5蛋白表达率均低于正常脑组织,差异有统计学意义(P<0.05)。不同年龄、组织学分级、肿瘤直径和肿瘤部位ILT5 mRNA的相对表达量比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。不同年龄、组织学分级及肿瘤直径胶质母细胞瘤患者ILT5蛋白表达情况比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。ILT5蛋白低表达患者中位生存时间为20.1个月(95%CI:17.4~22.8个月),短于ILT5蛋白高表达患者的28.1个月(95%CI:25.3~31.0个月);ILT5蛋白高表达患者3年生存率44.1%,高于ILT5蛋白低表达患者的22.4%,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论ILT5在胶质母细胞瘤中低表达,可能与年龄、WHO分级、肿瘤直径及预后等密切相关,有望成为胶质母细胞瘤诊疗的新靶点。

免疫球蛋白样转录物在麻风病中的研究进展

麻风病是传统慢性传染病中的一种，是由麻风分枝杆菌感染所致。麻风杆菌感染机体后以皮肤和外周神经受累为主，其主要临床表现为皮疹，脱眉，神经粗大，痛温触觉减退，溃疡，爪形指，垂腕，角膜溃疡等。麻风病是人类主要的致残疾病之一，在全球范围内因感染麻风病导致残疾的人数有300万至400万人。国内由此病致残总人数约为12万人，其中已经完全丧失劳动力的大约有4万人。

TACI融合蛋白对免疫球蛋白A肾病大鼠肾脏损害的影响

目的探讨TACI融合蛋白(TACI-Ig)对免疫球蛋白A肾病(IgAN)大鼠肾脏损害的影响。方法将24只SD大鼠随机分为对照组、模型组、TACI-Ig组、药物对照组,每组6只。正常对照组、模型组给予生理盐水,TACI-Ig组给予TACI-Ig(14.36 mg/kg),药物对照组给予醋酸泼尼松(5 mg/kg)。比较各组24 h尿蛋白定量(24h-UP)、血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、低半乳糖基化IgA1(Gd-IgA1)、Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(MyD88)、核转录因子κB(NF-κB)蛋白及mRNA水平,并分析TACI-Ig对肾脏损害的影响。结果模型组24h-UP水平显著高于正常对照组,而TACI-Ig组、药物对照组24h-UP水平显著低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。TACI-Ig组血清Scr水平低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。TACI-Ig组、药物对照组肾组织系膜区沉积免疫复合体的增加受到明显抑制。模型组大鼠血清Gd-IgA1水平高于正常对照组,而低于TACI-Ig组,差异有统计学意义(P<0.01)。药物对照组血清Gd-IgA1水平低于模型组,而高于TACI-Ig组,差异有统计学意义(P<0.01)。TACI-Ig组TLR4、MyD88、NF-κB蛋白水平低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。药物对照组TLR4、MyD88蛋白水平高于TACI-Ig组,差异有统计学意义(P<0.05)。TACI-Ig组TLR4、MyD88、NF-κB mRNA水平低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论TACI-Ig对IgAN有较好的治疗作用,可改善IgAN大鼠肾功能,抑制肾小球系膜基质扩张和系膜细胞增殖。

免疫球蛋白样转录子3研究进展

免疫球蛋白样转录子3(ILT3)是ILT超家族中的抑制性受体,特异性表达于单核细胞、巨噬细胞和树突状细胞等,通过免疫受体酪氨酸抑制基序(ITIM)传导抑制信号,发挥免疫抑制作用。该文主要综述ILT3对免疫细胞、肺癌、胃癌、卵巢癌、白血病、心脏和胰岛等器官移植以及自身免疫性疾病的影响,并探讨影响ILT3表达的因素,以期为ILT3进一步的研究与开发应用提供理论依据。

T细胞免疫球蛋白和黏蛋白结构域3及其单抗在肿瘤中的临床应用现状

T细胞免疫球蛋白和黏蛋白结构域3(Tim-3)是TIM家族中的一员,广泛表达于各种细胞表面,可以参与自身免疫、感染和癌症等疾病的发生发展。临床试验发现联合阻断Tim-3和程序性死亡蛋白-1(PD-1)可提高晚期癌症患者的抗癌免疫反应水平,消退肿瘤。本文就Tim-3的基本生物学结构、相应配体和其在肿瘤微环境中的作用进行综述,以及总结正在进行的药物临床试验,这些数据表明Tim-3可以作为一个具有潜在意义的免疫检查点受体应用于未来抗肿瘤治疗中。

叉头盒O1(FoxO1)调节RAW264.7巨噬细胞白细胞相关免疫球蛋白样受体1(LAIR-1)启动子转录活性

目的研究叉头盒O1(FoxO1)对RAW264.7巨噬细胞白细胞相关免疫球蛋白样受体1(LAIR-1)启动子转录活性的调控作用。方法采用100 ng/m L脂多糖(LPS)刺激RAW264.7巨噬细胞6、12、24 h,流式细胞术观察RAW264.7细胞活化过程中LAIR-1、CD11b以及细胞吞噬功能的变化。软件预测FoxO1与LAIR-1启动子之间存在结合位点。构建FoxO1fl/fl/Lys M-Cre小鼠,观察FoxO1敲除后,RAW264.7巨噬细胞LAIR-1的水平变化。构建LAIR-1基因启动子荧光素酶报告基因载体,转染FoxO1观察对其转录活性的影响。结果 LPS刺激后RAW264.7细胞活化,CD11b表达升高,吞噬能力增强,LAIR-1水平下调。成功构建了髓系细胞FoxO1基因敲除小鼠FoxO1fl/fl/Lys M-Cre,该小鼠LAIR-1 mRNA水平显著降低。软件预测发现在LAIR-1基因启动子区域存在潜在的FoxO1转录因子结合位点,荧光素酶报告基因证实FoxO1可激活LAIR-1启动子转录活性。结论 FoxO1可激活巨噬细胞LAIR-1启动子转录活性。

系统性红斑狼疮患者外周血自然杀伤T细胞免疫球蛋白样转录物2水平变化和临床意义

目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血自然杀伤T细胞(NKT)细胞的免疫球蛋白样转录物2(ILT2)表达水平和疾病活动的相关性及与感染的关系。方法选取2022年1月至7月于福建医科大学省立临床医学院风湿免疫科住院的SLE患者50例,健康对照者24名,流式细胞术检测NK、NKT细胞和ILT2+NK、ILT2+NKT细胞的水平,并结合临床资料分析。随访其中6例SLE合并感染患者,观察感染控制后ILT2+NKT细胞的水平的变化。采用t检验及Pearson相关性分析统计数据。结果SLE患者外周血中NKT细胞比率较健康对照组降低[(1.5±1.7)%与(2.5±1.2)%,t=2.54,P=0.013]。SLE患者的ILT2+NKT细胞的比率显著增加[(70±17)%与(54±20)%,t=3.43,P=0.001]。ILT2+NKT细胞的比率与SLEDAI(r=0.28,P=0.046)、血清肌酐(r=0.30,P=0.031)呈正相关,与补体C3呈负相关(r=-0.32,P=0.022)。存在感染或感染病史的SLE患者ILT2+NKT细胞的表达水平高于无感染的SLE患者[(79.2±12.4)%与(65.1±1.0)%,t=2.84,P=0.007]。6例合并感染的SLE患者,经过治疗后,复测外周血ILT2+NKT细胞较治疗前下降[(85±7)%与(69±6)%,t=3.45,P=0.001]。结论SLE患者NKT细胞的ILT2高表达可能参与了SLE疾病的发生发展,并可能与感染有关。

血清唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素7、半乳凝集素-3联合MELD评分在失代偿期肝硬化患者预后评估中的临床预测价值

目的探讨血清唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素7(Siglec-7)、半乳凝集素-3(Gal-3)联合终末期肝病模型(MELD)评分对失代偿期肝硬化患者预后的评估价值。方法选择2017年1月至2020年12月中南大学湘雅医学院附属海口医院消化内科收治的248例失代偿期肝硬化患者为研究对象,对所有患者出院后进行1年时间的随访,并根据患者预后状况分为存活组169例和死亡组79例。采用多因素Logistic回归分析失代偿期肝硬化患者死亡的独立危险因素,并绘制受试者工作特征(ROC)曲线,分析各指标联合应用对失代偿期肝硬化患者死亡评估的预测价值。结果死亡组红细胞分布宽度(RDW)、中性粒细胞、降钙素原(PCT)、总胆红素(TBiL)、凝血酶原时间(PT)、国际标准化比值(INR)、Siglec-7、Gal-3水平以及MELD评分显著高于存活组(P均<0.05),而血小板、淋巴细胞、前白蛋白(PA)、白蛋白(ALb)水平显著低于存活组(P均<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,上消化道出血、肝肾综合征、RDW、TBiL、Siglec-7、Gal-3、MELD评分是失代偿期肝硬化患者死亡的独立危险因素(P<0.05)。Siglec-7、Gal-3联合MELD评分对失代偿期肝硬化患者死亡预测的ROC曲线下面积(AUC)为0.912,敏感度为0.899、特异度为0.870,高于各指标单独检测。结论上消化道出血、肝肾综合征、RDW、TBiL、Siglec-7、Gal-3、MELD评分是失代偿期肝硬化患者死亡的危险因素,Siglec-7、Gal-3联合MELD评分对失代偿期肝硬化患者死亡的预测价值较高。

黄芪甲苷对非小细胞肺癌A549细胞增殖侵袭迁移及免疫球蛋白样转录子4表达的影响

目的:观察黄芪甲苷(Astragaloside Ⅳ)对非小细胞肺癌A549细胞增殖侵袭迁移及免疫球蛋白样转录子4(Immunoglobulin-like Transcript 4,ILT4)的信使核糖核酸(Msessenger RNA,mRNA)和蛋白表达水平的影响,初步探讨黄芪甲苷抑制非小细胞肺癌增殖侵袭迁移的机制。方法:A549细胞常规培养于含血清DMEM培养基中,四唑盐(Methy Thiazolyl Tetrazolium,MTT)实验设置对照组(加入完全培养基)与加药组(分别加入浓度为20μmol/L、40μmol/L、80μmol/L、100μmol/L的黄芪甲苷溶液),测其24 h、48 h、72 h的光密度(Optical Density,OD)值,进而检测黄芪甲苷对A549细胞增殖影响;Transwell实验设置对照组(上室加入不含胎牛血清的DMEM培养液)与加药组(上室加入用不含胎牛血清的DMEM培养液配制的浓度为40μmol/L的黄芪甲苷溶液),观察穿过小室的细胞数量的多少,进而检测黄芪甲苷对A549细胞侵袭能力的影响;划痕实验检测黄芪甲苷对A549细胞迁移的影响;细胞传代后继续培养24小时,分为对照组(加入完全培养基)与加药组(加入完全培养基稀释的浓度为40μmol/L的黄芪甲苷溶液),采用实时荧光定量(Quantitative Real-time,qRT)-聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)、免疫印迹试验(Western Blot,WB)法检测ILT4的mRNA和蛋白表达水平。结果:MTT实验、Transwell实验、qRT-PCR、Western blot实验均证实,黄芪甲苷组与对照组比较,黄芪甲苷组明显抑制了A549细胞增殖、侵袭与迁移,且其作用具有时间-浓度依赖性;ILT4蛋白与m RNA表达水平均显著降低(P<0.05)。结论:黄芪甲苷可抑制非小细胞肺癌细胞的增殖、侵袭与迁移,其机制可能为通过调控免疫球蛋白样转录子4的mRNA和蛋白表达,抑制非小细胞肺癌细胞的增殖、侵袭与迁移能力。

咳嗽变异性哮喘患儿血清25羟基维生素D3、免疫球蛋白E、血清淀粉样蛋白A水平与预后的相关性

目的探讨咳嗽变异性哮喘(cough variant asthma,CVA)患儿血清25羟基维生素D3[25-Hydroxyvitamin D3,25-(OH)D3]、免疫球蛋白E(immunoglobulinE,IgE)、血清淀粉样蛋白A(serumamyloidA,SAA)水平变化,及其对患儿预后的评估价值。方法选取2017年10月至2019年6月河南科技大学第三附属医院洛阳东方医院收治的80例CVA患儿为观察组,同时按照随机数表法选取同期40例健康体检儿童为对照组。根据患儿病情轻重程度分为重度组(28例)和轻度组(52例),同时根据预后情况分为预后良好组(62例)和预后不良组(18例)。检测各组血清25-(OH)D3、IgE、SAA水平,分析血清25-(OH)D3、IgE、SAA水平与CVA患儿病情及预后的关系。结果①观察组血清25-(OH)D3水平明显低于对照组,血清IgE、SAA水平则显著高于对照组(P<0.05);②随着CVA病情的加重,重度组血清25-(OH)D3水平逐渐降低,血清IgE、SAA水平则显著升高(P<0.05);③血清25-(OH)D3水平与CVA患儿病情显著负相关,血清IgE、SAA与CVA患儿病情呈明显正相关(P<0.05);④预后不良组血清25-(OH)D3水平显著低于预后良好组,而预后不良组血清IgE、SAA水平则高于预后良好组(P<0.05);⑤血清25-(OH)D3、IgE、SAA对CVA患儿预后不良的预测灵敏度和特异度差异无显著性(P>0.05)。结论血清25-(OH)D3、IgE、SAA水平与CVA病情及预后密切相关,检测以上指标有助于评估CVA患儿的预后。

桥本甲状腺炎合并甲状腺乳头状癌患者中Toll样受体3和核转录因子-κB的表达及相关性分析

目的分析桥本甲状腺炎(Hashimoto thyroiditis,HT)合并甲状腺乳头状癌(PTC)患者Toll样受体3(toll-like receptor 3,TLR3)和核转录因子-κB(nuclear transcription factor-κB,NF-κB)表达及相关性。方法收取邯郸市中心医院2020年3月~2022年3月收治的130例行手术切除的甲状腺标本,其中正常甲状腺组织标本43例,HT标本47例,HT合并PTC标本40例,分析TLR3和NF-κB在正常甲状腺组织、HT组、HT合并PTC组中的表达,分析HT合并PTC组中TLR3和NF-κB表达与临床病理参数关系,Pearson相关性分析TLR3和NF-κB的关系。结果TLR3在正常甲状腺组织、HT组、HT合并PTC组中的阳性表达率分别为0(0/43)、80.85%(38/47)、90.00%(36/40);NF-κB在以上三组中的阳性表达率分别为0(0/43)、68.09%(32/47)、85.00%(34/40)。TLR3和NF-κB在HT组、HT合并PTC组中的阳性表达率均高于正常甲状腺组织(P<0.05),TLR3和NF-κB表达与性别、年龄、HT合并PTC病理学特征、病灶类型、淋巴结转移、甲状腺包膜侵犯差异比较均无统计学意义(P均>0.05)。TLR3和NF-κB呈显著正相关(r=0.589,P<0.05)。结论TLR3和NF-κB在HT合并PTC组织中的阳性率高于正常甲状腺组织,且二者表达呈正相关。

大动脉炎患者中白细胞免疫球蛋白样受体A3多态性及蛋白表达

目的探讨大动脉炎(Takayasu arteritis,TAK)患者血细胞中白细胞免疫球蛋白样受体A3(leucocyte immunoglobulin like receptor A3,LILRA3)基因上单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点rs103294的基因多态性及血清中LILRA3蛋白表达,以及LILRA3与血管分型和单核细胞数的相关性。方法收集山西白求恩医院2015—2020年门诊或病房确诊的大动脉炎患者52例,性别、年龄匹配的79例健康对照者,采用一代(Sanger)测序方法分析LILRA3基因的SNP位点rs103294的基因多态性,比较两组基因型和等位基因频率。采用ELISA检测TAK患者和健康对照者血清中的LILRA3蛋白水平,采用χ^(2)检验和相关性分析的方法分析基因分型与血管分型和单核细胞的相关性。结果TAK患者与健康对照LILRA3的SNP rs103294基因型频率和等位基因频率相比差异无统计学意义(基因型:χ^(2)=0.429,P>0.05;等位基因:χ^(2)=0.245,P>0.05),两组间LILRA3蛋白表达量差异无统计学意义(Z=-1.07,P>0.05)。TT、CT和CC不同基因型间LILRA3蛋白表达量无统计学差异(P>0.05)。TAK不同血管分型间基因型分布无统计学差异(χ^(2)=6.95,P>0.05)。与健康对照组相比,TAK组单核细胞数升高(P<0.05),但TAK患者单核细胞数增高与LILRA3蛋白表达无相关性(r=0.04,P>0.05)。结论TAK患者LILRA3的SNP rs103294基因多态性及蛋白水平无明显差异;TAK患者基因型与大动脉炎的血管分型无关,LILRA3蛋白表达量与单核细胞升高无相关性。

大黄酸对免疫球蛋白A肾病的改善作用及机制研究

目的基于信号转导与转录激活因子3(STAT3)信号通路,研究大黄酸改善免疫球蛋白A肾病(IgAN)模型大鼠的作用及机制。方法将大鼠随机分为正常对照组、IgAN模型组和大黄酸治疗组(100 mg/kg),每组10只。IgAN模型组和大黄酸治疗组采用牛血清白蛋白+脂多糖+四氯化碳联合法复制IgAN模型。造模第7周开始,大黄酸治疗组大鼠灌胃相应药物,正常对照组和模型组大鼠灌胃等量生理盐水,连续4周。末次给药后,检测大鼠尿红细胞数、24 h尿蛋白(24 h-UTP)以及血清中免疫球蛋白A(IgA)、小肠黏液中分泌型IgA(sIgA)的水平;观察大鼠肾皮质和小肠黏膜Peyer结的病理形态学变化以及肾皮质中IgA沉积情况;检测大鼠小肠黏膜Peyer结中白细胞介素17(IL-17)、IL-6和转化生长因子β(TGF-β)的表达水平;检测Peyer结中STAT3和维甲酸受体相关孤儿受体γt(RORγt)mRNA的表达水平;检测Peyer结中磷酸化STAT3(p-STAT3)和RORγt蛋白的表达水平。结果与正常对照组比较,IgAN模型组大鼠尿红细胞数、24 h-UTP以及血清中IgA、小肠黏液中sIgA水平均显著升高(P<0.01);肾皮质中肾小体增大,肾小囊扩张,球内系膜增生、纤维化明显;小肠黏膜Peyer结体积和生发中心增大;肾皮质中IgA沉积明显;小肠黏膜Peyer结中IL-17、IL-6、TGF-β、STAT3 mRNA、RORγt mRNA以及p-STAT3、RORγt蛋白的表达水平均显著升高(P<0.01)。与IgAN模型组比较,大黄酸治疗组大鼠上述指标水平均显著降低(P<0.01),肾皮质病理损伤有所改善,小肠黏膜Peyer结体积和生发中心减小,肾皮质中IgA沉积减弱。结论大黄酸对IgAN模型大鼠具有较好的改善作用,其作用机制可能与抑制STAT3信号通路活性、调控小肠黏膜Peyer结内的免疫功能有关。

渗入脑内的免疫球蛋白G与外周脂多糖引起大鼠脑内Toll样受体4的表达

目的探讨从血循环中渗入到脑内的自体内源性免疫球蛋白G(IgG)对外周脂多糖(LPS)刺激引起的中枢神经系统内Toll样受体4(TLR4)表达的作用。方法将SD大鼠20只随机分为4组,每组5只。LPS+生理盐水组:腹腔注射LPS100μg/kg,6h后尾静脉给予生理盐水15μg/kg;AD组:尾静脉给予盐酸肾上腺素(AD)15μg/kg;LPS+AD组:先腹腔给予LPS,6h后静脉注射AD;对照组大鼠静脉注射生理盐水作为对照。最后一次注射后30min处死动物,取脑,分别用免疫荧光染色和RT-PCR方法检测脑内TLR4的表达。结果免疫荧光染色显示,单独给予AD的动物中IgG免疫阳性产物呈斑片状分布于脑实质。LPS+生理盐水组的IgG免疫阳性产物仅限于血管周围;在LPS+AD组,IgG渗出区域内可见TLR4免疫阳性产物与小胶质细胞标志物Iba-1共存,双标的细胞分散于脑实质及血管附近,而LPS+盐水组TLR4阳性细胞呈内皮细胞样。RT-PCR结果显示,LPS+AD组TLR4的表达显著高于LPS+生理盐水组、AD单独注射组以及生理盐水对照组。结论大鼠血循环中的IgG渗入脑内可促进外周LPS引起的脑内TLR4表达。