IgG3酶联免疫分析方法的建立及初步应用研究

目的：建立IgG3酶联免疫分析（ELISA）方法，探讨IgG3在炎症性疾病患者血清中的水平变化。方法：用兔抗人IgG3的多克隆抗体包被成固相酶标板，以识别结合待测标本中的IgG3，再用此多克隆抗体标记生物素（Bio-Ab），用亲和素标记辣根过氧化物酶（HRP-A），向固相酶标板中加入标准品或待测品，反应、洗涤后，加入Bio-Ab，反应、洗涤后，加入HRP-A，反应、洗涤后，酶标板上形成Ab-Ag-Ab-Bio-A-HRP复合物，加酶底物显色，用酶标仪在相应波长下测定光密度（OD值），根据标准曲线，计算出待测标本中的IgG3含量。结果：该法测定范围为（1．875-60）ng／ml，最低检出量1．5ng／ml，批内和批间误差分析〈8％和10％。用该法测得正常青年人血清IgG3含量为（12.91±4．25）ng／ml（n=64），风湿病患者为（11．23±4．64）ng/ml（n=64），肺部感染患者为（9．32±2．00）ng／ml（n=24），后两组血清IgG3水平均显著低于正常青年人（P〈0．05）。结论：我们建立的IgG3 ELISA方法稳定、简便，特异性和灵敏度高，适于检测人血清ISG3水平的变化。