多价抗体免疫电镜法的应用研究

检测轮状病毒,常用ELISA和聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)法,但有时出现组间抗原不交叉和电泳图型变异,还要靠电镜检查证实;检测与腹泻有关的其它病毒,由于细胞培养和血清学方法尚未建立,电镜检查仍然是发现和鉴别它们的主要手段。为了捕获急性腹泻病人粪便中可能存在的各种病毒,发展一种具有广谱性和高灵敏性的多价抗体免疫电镜(PAbI-EM)法实属必要。(一)

单克隆免疫球蛋白轻链相关性肾病的超微结构及免疫电镜研究

目的:探讨电镜及免疫电镜方法在单克隆免疫球蛋白轻链相关性肾病包括轻链沉积病(lightchaindepositiondisease,LCDD)和轻链型淀粉样变(amyloidosis,AL)诊断中的作用。方法:对我院1994 1～2002 12间接受的肾活检病例进行系统的电镜观察,对疑为LCDD及早期AL的病例进行轻链(κ、λ)的免疫电镜标记。结果:7例符合LCDD的诊断,45例符合AL的诊断。LCDD肾活检组织电镜下可见肾小管基底膜(TBM)外侧、肾小球基底膜(GBM)内侧、鲍曼囊外侧及小血管壁基底膜外侧的点状、颗粒状电子致密物质沉积,其中2例早期病例表现颗粒状物质节段性分布;免疫电镜标记,颗粒状物质被单种轻链标记,其中,κ轻链5例,λ轻链2例。AL肾活检组织电镜下可见肾小球系膜区、GBM及小动脉壁基底膜上的细纤维物质呈团片状或束状分布,其中15例早期病例表现系膜区或 及GBM的细纤维呈节段性分布;15例早期AL的免疫电镜标记结果,细纤维被单种轻链标记,其中,κ轻链4例,λ轻链11例。结论:肾脏LCDD及早期AL的诊断需依赖于电镜检查,免疫电镜检查对肾脏早期LCDD及早期AL的确诊具有不可替代的作用。

淀粉样管型肾病的临床病理特征分析

目的探讨轻链淀粉样管型肾病(light chain amyloid casts,LCAC)的临床病理学特征,加深对LCAC的认识。方法回顾2018年1月至2021年6月在广州金域医学检验中心肾脏病理诊断为LCAC的患者,将患者分为单纯LCAC(pure light chain amyloid casts,I-LCAC)组和LCAC合并轻链淀粉样变性肾病(light chain amyloid casts with light chain amyloid nephropathy,LCAC&AL)组,所有患者均进行了光镜、免疫荧光、电镜和免疫电镜检查,对两组患者的肾脏病理进行半定量评分进行分析,评估两组患者的临床病理学特征。结果同期诊断为轻链管型肾病(light chain cast nephropathy,LCCN)的患者共131例,其中15例诊断为LCAC(11.5%),包括ILCAC组10例和LCAC&AL组5例;LCAC有9例临床确诊为多发性骨髓瘤,其中I-LCAC组7例,LCAC&AL组2例,两组差异无统计学意义;与LCAC&AL组相比,I-LCAC组患者血肌酐水平[(766.1±472.5)μmol/L比(82.8±22.5)μmol/L]和发生贫血的比例(100%比40%)更高(P<0.05);ILCAC组患者的肾组织内每平方毫米的平均淀粉管型数[(7.3±5.0)个/mm²比(0.3±0.1)个/mm²]显著多于LCAC&AL组(P<0.05),管型的轻链类型以λ型多见;每平方毫米的平均淀粉管型数与患者的血肌酐水平呈正相关(R2=0.593)。结论LCAC的病因以多发性骨髓瘤最常见,管型多呈同心圆和分层状,中心区域染色较浅,而边缘嗜银呈“睫毛状”的病理形态特征和刚果红染色阳性,偏振光镜下有黄绿色双折光的染色特性,I-LCAC病理类型患者较LCAC&AL组更容易肾功能损伤,每平方毫米的平均淀粉管型数越多肾功能越差。

以普通狨猴作为人类甲型肝炎动物模型的初步研究

本文报道以不同剂量的不同 HAV 毒株经静脉和胃肠道分别接种普通狨(Callthrix jacchus)和白须狨(Saguinus mystax)后,其血清 ALT、AST 和 LDH 活性均升高。对酶活性比接种前增加 X+3 SD 值的6只狨猴作肝活组织检查,见有与急性病毒肝炎相一致的组织病理变化。用免疫电镜法检出狨猴粪便中 HAV 粒子,狨猴接种 HAV 后36天,血清 IgM 类和总抗 HAV 抗体均阳转。上述结果提示,普通狨猴有可能作为研究甲型肝炎的理想动激模型。

高温对培养细胞RME的影响

采用免疫电镜方法观察高温情况下胶体金标记的刀豆素A(ConA-Au)与游离培养的大鼠腹腔巨噬细胞表面受体结合、内吞及其在巨噬细胞中转运情况,探讨高温对RME的影响。实验组(A、B、C、D、E)收集大鼠腹腔巨噬细胞与ConA-Au共同在恒温水浴箱中孵育,温度分别为39、40、41、43、45℃,于不同时间间隔(、10、20、30、60、120 min)常规电镜制样;对照组分别为腹腔注射ConA-Au(F)及胶体金(G)。结果表明:随着温度升高RME抑制逐渐增强,45℃时RME完全受到抑制,低于41℃时可见到溶噬现象。

我国北亚蜱传斑点热的发现、证实和研究

1.在我国首次从病人中分离出西伯利亚立克次体(Rickettsia Sibirica),从而新发现了一个病种——北亚蜱传斑点热(North Asia Tick Borne Spotted Fever,简称北亚热North Asia Fever)。

人乳腺癌细胞(MCF-7)相关抗原超微结构的定位观察

本文以二种免疫电镜法对人乳腺癌细胞系—MCF-7细胞肿瘤相关抗原进行定位观察: 1.直接免疫铁蛋白法。采用戊二醛二步结合法制备铁蛋白偶联人乳腺癌单克隆抗体6C_6B_1B_7A_(12)结合物,并以直接法对MCF-7细胞进行包埋前免疫染色。 2.间接免疫酶标电镜法。以6C_6B_1B_7A_(12)单克隆抗体为第一抗体,过氧化物酶标记兔抗小鼠IgG抗体的结合物为第二抗体对MCF-7细胞进行包埋前免疫染色。 电镜观察结果表明,该肿瘤相关抗原仅分布于MCF-7细胞表面。抗原的存在可能与细胞周期或细胞群体的变异性有关。

蚊虫传播乙型肝炎作用的研究 Ⅰ自然采集和人工喂血蚊携带HBsAg的研究

对南宁市居民家庭调查蚊虫季节消长,蚊虫密度高峰为2～3月和10～11月。蚊虫种属以致乏库蚊为主。自然采集蚊虫394批。用RPHA、ELISA 和 SPRIA 检测,HBsAg 阳性率为14.5%,其中以 SPRIA 敏感度最高,发现 HBsAg 阳性与蚊虫的吸血有关。未吸血蚊虫和怀孕蚊虫均未发现 HBsAg 阳性。在不同的种属中,以三带喙库蚊、搔扰阿蚊和致乏库蚊的 HBsAg 阳性率较高。采集点中,以采自肝炎病房的蚊虫 HBsAg 阳性率较高。由实验室饲养致乏库蚊喂以 HBsAg 阳性血。发现蚊虫携带 HBsAg 时间为1～4天,血液消化以后,HBsAg 也消失,HBsAg 阳性蚊的排泄物、卵、幼虫、蛹、第一代成蚊均未检出 HBsAg。自然采集的 HBsAg 阳性蚊虫10组中用免疫电镜法查出7组 HBsAg 阳性,由人工喂养阳性血液的蚊虫10组,用免疫电镜法查出5组阳性。HBsAg 颗粒均可被其特异血清凝集,对照组均未发现 HBsAg 样颗粒。本文结果支持蚊虫可通过机械性传播乙型肝炎,而不作为生物学媒介。

人胎儿大脑皮质Broca氏区含GABA神经元的发育

本文用r-氨基丁酸(r-aminobutyric acid,GABA)免疫细胞化学的方法对胎龄从17周到足月的人胎儿大脑皮质Broca氏区含GABA神经元的分布、大小和形态的变化进行了研究,并用免疫电镜法对足月胎儿含GABA神经元及其突触的超微结构进行了观察和分析.光镜结果显示17周胎儿Broca氏区第一层、皮质板、套层和室管膜下层已有GABA阳性神经元存在,以第一层的密度最高.

172例戊型肝炎病毒抗体检测结果分析

1989年东京国际会议正式确认戊型肝炎(HE)至今,对戊型肝炎的检测,目前有免疫电镜法,免疫荧光法,ELISA法,免疫荧光试验阻断法等,一般医院用得较多的是ELISA法,我们用Diagnostic Biotechnology(Pte)Ltd. Singapore生产的戊肝抗体测定试剂盒(珠海丽珠试剂厂提供),作了172例病人血清标本的抗体测定,并对戊肝抗体阳性的标本作甲、乙、丙型抗俸险测。 1、对象与方法 1.1 对象为我院门诊和传染病科的各类肝病患者。

戊型肝炎实验诊断研究进展

戊型肝炎(HE)是一种经粪——口传播的急性传染病,以前曾称为肠道传播的非甲非乙型肝炎。在1989年9月东京国际肝炎学术会议上,将肠道传播的非甲非乙型肝炎命名为戊型肝炎。

日本一起C群轮状病毒所致小学生腹泻的研究

1991年4月,日本东京一所小学学生发生了一起症状相同的胃肠炎,研究人员怀疑是食物中毒所致,并进行了流行病学调查。调查结果表明,患者主要是小学一、二年级的学生。

加里佛尼亚雏番鸭暴发番鸭细小病毒病

在美国加里佛尼亚州,1—4周龄番鸭群暴发疫病,发病率30—80％,死亡率15—50％。尸体剖检,主要病损为腿肌、心肌苍白;在肝被膜上有纤维素性渗出物,腹腔腹水增多。无菌采取病料,接种SPF番鸭胚,分离出番鸭细小病毒(Muscovy duck parvovirus,MDPV);用病料制片负染电镜观察可见细小病毒;用免疫电镜法,

诺如病毒研究进展

诺如病毒（Norovirus，NVs）属于杯状病毒科诺如病毒属，是引起病毒性胃肠炎的重要病原。该病原最初由Kapikian于1972年通过免疫电镜法对1968年美国诺瓦克市一次急性腹泻暴发的患者粪便提纯进行抗原抗体反应得到，当时被命名为诺瓦克病毒。此后，世界各地陆续从胃肠炎患者粪便中分离出多种形态与之相似但抗原性略异的病毒样颗粒，均以发现地点命名（Desert Shield，Fort Lauderdale，Gwynedd，Hawaii）。2002年8月第八届国际病毒命名委员会批准：诺瓦克病毒和诺瓦克样的类病毒统一命名为诺如病毒（Norovirus NVs），与日本发现的札幌样病毒（SapporolikeVirus SLV）合称人类杯状病毒（Calicivirus）。