IL-17等炎性因子在风湿免疫相关性血细胞减少骨髓细胞中的分泌状态及其临床意义

目的:观察风湿免疫相关性血细胞减少(Rheumatism immune-related hematocytopenia,RIRH)患者骨髓免疫细胞炎性因子分泌状态,探讨其对骨髓造血细胞损伤的病理作用及临床意义。方法:①ELISA法检测66例RIRH患者血清IL-5、IL-10、IL-12、IL-17和IFN-γ浓度,对照组30例采自健康查体血清;免疫化学法观察骨髓免疫细胞HLA-DR表达;②免疫荧光法观察骨髓细胞抗人球蛋白(IgG)抗体、FcγⅡ受体(FcγⅡR)、甘露糖受体(MR)、ICAM-1、IL-12、IL-17A与IL-17RA表达;30例缺铁性贫血患者骨髓作为疾病对照;③随机抽取32例血小板>50×109L-1无出血倾向患者,常规治疗同时联合复方丹参促进炎性因子代谢,与30例不联合复方丹参患者对照治疗效果。结果:①66例患者血清IL-5、IL-10、IL-12、IL-17和IFN-γ浓度分别为(126.04±7.66)ng/L,(316.23±25.163)ng/L,(328.43±27.01)ng/L,(48.17±4.22)ng/L和(40.28±3.69)ng/L,较之对照组(33.16±2.17)ng/L,(176.25±10.69)ng/L,(94.05±3.26)ng/L,(20.03±1.14)ng/L和(8.25±2.01)ng/L显著升高;②骨髓中活化的组织嗜碱细胞、嗜酸性粒细胞(EOS)、树突状细胞和巨噬细胞(Mφ)等免疫细胞高表达HLA-DR、FcγⅡR、MR、ICAM-1、IL-12、IL-17A和IL-17RA;③32例IRHS患者联合复方丹参组经治疗2周后,血清IL-5和IL-17含量较之对照组显著降低,血象恢复时间较之对照组提前1周。结论:RIRH患者骨髓中多种免疫细胞活化,表达和分泌多种免疫分子,介导ADCC效应、细胞免疫功能和炎性反应,是损伤病变的造血细胞的重要免疫机制。抗感染、抑制免疫联合复方丹参活血化瘀,能改善骨髓造血微环境,促进造血恢复。

骨髓造血细胞岛在免疫相关性血细胞减少患者中的异质性研究

目的:观察免疫相关性血细胞减少或免疫相关性全血细胞减少(Immuno-related hematocytopenia/immuno-relat-ed pancytopenia,IRH/IRP)患者骨髓"造血细胞岛"(Hematopoietic islands,HI)的不同性质,分析其与MHCⅠ/Ⅱ类分子和骨髓造血细胞抗人球蛋白(IgG)的关联,探讨相关免疫机制及其对临床诊疗的指导意义。方法:①对37例IRH/IRP患者骨髓涂片行常规瑞氏染色,观察HI的细胞成分和岛中免疫细胞性质;②细胞化学染色观察HI中免疫细胞过氧化物酶(POX)活性和铁贮存情况;③HLA-DR抗体免疫化学染色,观察免疫细胞MHCⅡ分子表达情况;④抗人IgG免疫荧光抗体(Immunofluores-cence,IF)染色,观察造血细胞和免疫细胞表面抗人IgG抗体表达;⑤观察不同HI在患者骨髓中出现的情况。结果:①HI中的造血细胞和免疫细胞各异,并与患者血沉和IgG、血清HLA-B27抗体浓度和过氧化物酶(POX)、HLA-DR和IF染色表达情况密切相关。②根据免疫细胞的生物学性质分为抗体依赖细胞介导的细胞毒作用(Antibody dependent cell cytotoxicity,AD-CC)型HI、巨噬细胞(Mφ)型HI、抗原提呈(Antigen presenting,AP)型HI、浆细胞型HI和幼粒细胞型HI 5种。③HI中幼稚的造血细胞膜上均表达抗人IgG荧光抗体,HI中免疫细胞与造血细胞接触处和抗原提呈细胞(Antigen presenting cells,APC)浆中呈现不同的强阳性IF颗粒。④Mφ型HI数量最多,常与ADCC型HI在血沉升高患者骨髓中同时出现,HLA-B27和血沉均升高的IRP患者骨髓中可同时存在ADCC型、Mφ型和AP型HI。结论:IRH/IRP患者骨髓幼稚造血细胞膜表面抗原改变产生抗人IgG抗体是HI产生的基础;HI异质性及在骨髓中出现的不同形式则为患者体液免疫和细胞免疫不同程度的活化对造血细胞多重性损伤的生物学表现。

免疫相关性血细胞减少患者骨髓造血细胞岛的免疫损伤研究

目的探讨免疫相关性血细胞减少(immuno-related hematocytopenia,IRH)患者骨髓"造血细胞岛"(hematopoietic islands,HI)对病变造血细胞破坏的免疫机制。方法 ELISA法检测患者血清IL-12和IL-17水平,观察其体内炎性因子的含量,免疫荧光(immunofluorescence,IF)染色,观察其骨髓HI中免疫细胞Fcγ受体Ⅱ(Fcγrecepter Ⅱ,FcγRⅡ)、甘露糖受体(mannose receptor,MR)、IL-12、IL-17A、IL-17RA和ICAM-1表达,分析HI的相关病理作用。结果 37例患者血清IL-12和IL-17的水平分别为(318.59±20.13)ng/L和(45.81±8.27)ng/L,显著高于对照组[(94.05±3.26)ng/L和(20.03±1.14)ng/L];经治疗后均下降近正常,较治疗前差异显著,P<0.01。患者骨髓中HI主要为抗体依赖性细胞毒(antibody dependent cell cytotoxicity,ADCC)型、巨噬细胞型(Mφ)和抗原提呈(antigen presenting,AP)型3种,HI中的免疫细胞高表达FcγRⅡ、MR,呈分泌状表达IL-12、IL-17A、IL-17RA和ICAM-1,在上述免疫分子的介导下,发挥体液免疫和细胞免疫及炎性损伤作用,破坏病变的造血细胞。结论 IRH患者骨髓中不同造血细胞岛是活化的免疫细胞破坏病变血细胞的不同免疫形式,是造血细胞在骨髓中"原位破坏的"重要场所。

IL-8、IL-12、IL-17对风湿免疫相关性血细胞减少症的诊断价值

风湿免疫相关性血细胞减少症（RIRH）是一类由骨髓衰竭性疾病分离出的新型疾病体系,发生率呈逐年增长趋势[1]。研究显示,RIRH相关发病机制是受到某种未知病原刺激作用后,重要抗原表现为细胞树突状细胞亚群发生异常,导致下游相关T淋巴细胞的调控平衡丧失,引起B淋巴细胞功能、数量及亚群异常,从而诱导针对骨髓造血细胞的相关自身抗体产生,并经介导巨噬细胞将补体原位溶血吞噬及激活，或将造血细胞膜上相关功能蛋白封闭，阻止造血细胞增殖、分化，引起骨髓衰竭及无效造血。

免疫相关性血细胞减少症23例临床分析

目的探讨免疫相关性血细胞减少症(IRP/IRH)的发病机制及预后。方法对我院收治的23例患者病例进行分析。结果 23例中并发甲状腺功能亢进、干燥综合征各2例,桥本甲状腺炎、系统性红斑狼疮、糖尿病各1例;网织红细胞正常或增高20例,减低3例;乳酸脱氢酶活性增高14例;外周血单核细胞百分比增高19例,形态异常5例;骨髓单核细胞百分比增高9例,形态异常8例;骨髓增生活跃22例,增生减低1例;白细胞碱性磷酸酶阳性率减低16例,增高3例;单用或联合糖皮质激素、环孢素A及丙种球蛋白为该疾病的主要治疗方法,总有效率为95.6%。结论单核细胞百分比增高及形态异常是IRP/IRH特征的新发现。

免疫相关性血细胞减少症血液及细胞形态学诊断的初步探讨

目的探讨免疫相关性血细胞减少症的血液学及骨髓细胞形态学特征,提高诊断的准确性。方法对25例IRP/IRH患者的血常规、网织红细胞计数、骨髓细胞形态学、骨髓病理学及骨髓细胞染色体检查的形态学资料进行回顾分析。结果血象:全血细胞减少60%(15/25),两系细胞减少40%(10/25)。贫血占72%(18/25),网织红细胞平均值为2.15%。血小板减少占96%(24/25),白细胞减少占88%(22/25),中性粒细胞百分比或绝对值正常或增高者占92%(23/25),见到晚幼红细胞者占28%(7/25)。骨髓分析:骨髓有核细胞增生程度为活跃、明显活跃,占88%(22/25),有核细胞增生减低者占12%(3/25)。粒系比值减低占64%(16/25),比值正常和升高占28%(7/25)。红系增生活跃,明显活跃者100%,见幼红细胞造血岛者占44%(11/25)。粒,红两系均有病态改变。巨核系:巨核细胞数目正常,增多者占80%(20/25);数目减少者占20%(5/25),巨核细胞成熟障碍占96%(24/25)。骨髓活检:红系或(和)粒系,巨核系增生表现占60%(15/25),减低表现占40%(10/25)。骨髓细胞染色体检查:25例均核型正常。结论IRP/IRH患者外周血象表现有共性,骨髓细胞形态学改变缺乏特异性,骨髓细胞形态学、骨髓病理学活检及骨髓细胞染色体检查三种方法各有所长,可以互补,联合应用有助于临床诊断和鉴别诊断。

免疫相关性血细胞减少症62例临床观察

目的:总结分析免疫相关性血细胞减少症的临床观察。方法:选择本院2008年2月～2011年2月收治的免疫相关性血细胞减少症62例进行回顾性总结。结果:42例患者经糖皮质激素治疗2个月左右血常规完全恢复正常。14例经糖皮质激素疗效不佳者加用或改用环孢素A者,6例应用大剂量免疫球蛋白;无一例患者转化为AA、PNH及其他血液系统恶性疾病。结论:掌握免疫相关性血细胞减少症临床表现、实验室检查及诊断和治疗特性,能够取得良好的临床效果。

免疫相关性血细胞减少患者血清细胞因子变化与骨髓免疫的相关性

目的检测89例免疫相关性血细胞减少(IRH/IRP)患者外周血细胞因子的变化状况,观察骨髓细胞活化状态,探讨IRH/IRP的免疫相关机制。方法 ELISA方法检测IRH/IRP患者外周血清IL-2、IL-4、IL-6和IFN-γ的含量,分析患者组和正常对照组间细胞因子含量的差异,并对患者组Th1类细胞因子与Th2类细胞因子变化的相关性和升高率以及骨髓细胞免疫活化状况与细胞因子变化的相关性进行分析。结果 89例患者血清IL-4、IL-6和IFN-γ呈现不同程度明显升高(P<0.01),其中IFN-γ显著高于正常对照组,分别为(38.75±3.67)pg/ml和(8.69±1.68)pg/ml。患者Th1活化相关细胞因子的升高率与Th2活化相关细胞因子的升高率相比具有统计学差异。结论 IFN-γ的变化与IRH/IRP者细胞免疫活化密切相关,IL-4和IL-6可能参与与IRH/IRP体液免疫的活化,感染等可加重多重免疫活化,细胞因子含量和骨髓细胞免疫状况的监测有助于IRH/IRP的诊断并有利于评价患者的免疫机能状态。

血脂在免疫相关性血细胞减少症病情评估中的作用

目的:探讨血脂水平与血细胞计数的相关性,以及血脂检测在免疫相关性血细胞减少症(IRH)病情评估中的价值。方法:选取33例免疫相关性血细胞症患者(IRH组)及30例健康人(对照组)为研究对象,检测血常规、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)。结果:IRH组治疗前TC、TG中位数分别5.5 mmol/L、2.5 mmol/L,分别高于对照组的4.80 mmol/L和1.09 mmol/L,差异均有统计学意义(P<0.05);IRH组治疗前白细胞、血红蛋白、血小板计数分别为4.3×10^9/L,102.85g/L和71.0×10^9/L,分别低于对照组的6.05×10^9/L,140.57 g/L和220.50×10^9/L,差异均有统计学意义(P<0.05)。IRH组治疗后血红蛋白、血小板计数分别为109.06 g/L和172.0×10^9/L,较治疗前明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05);TC、TG分别为4.60 mmol/L和1.46 mmol/L,较治疗前显著下降,差异均有统计学意义(P<0.05)。对照组中血小板与TG存在弱相关(rs=0.431,P=0.017),与TC、HDL-C和LDL-C无关(P>0.05)。IRH组治疗前血小板与各项血脂指标均不具有相关性(P>0.05),但治疗后血小板与TG存在弱相关(rs=0.386,P=0.026),而与TC、HDL-C及LDL-C不存在相关关系(P>0.05)。结论:血脂水平对免疫相关性血细胞减少症患者病情评估有重要作用,高水平的TC、TG提示较为严重的病情。

微柱凝胶免疫对免疫相关性血细胞减少症的诊断价值研究

目的:探讨分析微柱凝胶免疫对免疫相关性血细胞减少症的诊断价值。方法:回顾性分析31例免疫相关性血细胞减少症患者临床资料,所有患者均采用骨髓细胞微柱凝胶免疫法(MGIA)和骨髓单个核细胞直接抗人球蛋白试验法(BMMNC-Coombs)检测血细胞抗体,对比观察两组方法临床诊断效果。结果:MGIA组检出27例阳性,阳性率为87.10%,BMMNC-Coombs组检出16例阳性,阳性率为51.61%,MGIA组明显高于BMMNC-Coombs组,两组方法检出的阳性率比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:采用骨髓细胞微柱凝胶免疫法诊断免疫相关性血细胞减少症,具有较强的敏感性和诊断价值,检出阳性率优于骨髓单个核细胞直接抗人球蛋白试验法,能有效提高诊断率。

HLA-B27异常表达在免疫相关性血细胞减少疾病中的临床意义及相关机制研究

目的观察免疫相关性血细胞减少(immunorelated hematocytopenia,IRH)和免疫相关性全血细胞减少(immunorelated pancytopenia,IRP)患者HLA-B27群体表达情况,分析HLA-B27检测分型对该类疾病诊疗的临床意义。方法①ELISA方法检测患者血清HLA-B27抗原、IL-12、IL-17和IFN-γ水平。②细胞免疫化学(immunochemistry,IC)染色观察骨髓中抗原递呈细胞(APC)HLA-DR表达情况。③原位免疫荧光(immunofluorescence,IF)染色,观察患者骨髓造血细胞表面抗人球蛋白IgG、FcγⅡR、甘露糖受体(MR)、IL-12和IL-17A表达情况。④根据HLA-B27和血沉等检测指标对IRH/IRP分型选择治疗方案。结果①106例IRH/IRP中45例(42.45%)血清HLA-B27显著升高(70.03±8.21)pmol/L,对照组仅2例(6.0%),P<0.01。②HLA-B27+组血清IL-17和IFN-γ血清质量浓度分别为(50.26±3.67)pg/ml和(42.95±3.64)pg/ml,显著高于HLA-B27-组(36.11±2.17)pg/ml和(28.875±5.81)pg/ml,P值均<0.05。③IRH/IRP患者骨髓中树突状细胞(DC)和巨噬细胞(Mφ)捕获和吞噬血细胞现象活跃,活化的DC与Mφ高表达HLA-DR抗原,HLA-B27+组骨髓中可见到淋巴细胞攻击造血细胞现象;粒细胞减少的患者骨髓中嗜酸性粒细胞攻击粒细胞现象多见。④IRH/IRP患者骨髓中部分造血细胞表面表达抗人IgG,DC和Mφ表达MR、IL-12和IL-17A,并介导对病变造血细胞的捕获和吞噬和炎性损伤。⑤在伴有IgG和ESR升高的患者骨髓中活化的Mφ高表达FcγRⅡ受体,发挥ADCC效应介导对病变造血细胞的损伤。结论 IRH/IRP是一类涉及细胞免疫和体液免疫多个环节,主要累及骨髓造血细胞且具有基因易感性的免疫相关性血细胞减少性疾病。部分患者发病与HLA-B27基因活化状态有一定关联,HLA-B27+伴体液免疫指标活化者病情更重。HLA-B27检测对疾病的评估、治疗和预后有着重要的临床意义。

骨髓单个核细胞Coombs试验在免疫相关性血细胞减少症中的诊断意义

目的研究骨髓单个核细胞抗人球蛋白试验（Coombs试验）对免疫相关性血细胞减少症的诊断价值。方法采用骨髓单个核细胞（BMMNC）悬液取代经典Coombs试验的外周血红细胞悬液，即骨髓单个核细胞Coombs（BMMNC-Coombs）试验检测21例临床拟诊免疫相关性血细胞减少（IRH）或全血细胞减少（IRP）症患者，并以20例明确诊断的血细胞减少患者作为对照。结果21例拟诊IRH／IRP患者中BMMNC—Coombs试验阳性14例，阳性率66．7％。对照组20例BMM—NC—Coombs试验均阴性。BMMNC—Coombs试验阳性患者经临床应用糖皮质激素等免疫抑制剂均产生了显著疗效。结论BMMNC—Coombs试验对IRH／IRP的诊断具有较高的灵敏度和特异度，且简便可行，易于推广应用。

免疫相关性血细胞减少症41例临床分析

目的:观察41例免疫相关性血细胞减少(immunorelated hemocytopenia,IRH)或全血细胞减少症(immunorelated pancytopenia,IRP)患者的临床特点,以提高对本病的认识。方法:分析41例IRH/IRP患者临床表现、血常规、骨髓象、骨髓单个核细胞抗人球蛋白(BMMNC-Coombs)试验、抗核抗体ANA和ENA抗体谱、T淋巴细胞亚群、染色体核型等以及对肾上腺糖皮质激素、环孢素A等免疫抑制剂的治疗反应。结果:本组病例临床主要表现为贫血、出血、感染;血常规呈三系、二系或一系减少,网织红细胞百分比不低;骨髓增生以活跃或明显活跃为主(82.9%),红系比例多增高;BMMNC-Coombs试验阳性率78.0%;除外了再生障碍性贫血(AA)、骨髓增生异常综合征(MDS)、阵发性睡眠性血红蛋白尿(PNH)等疾病;小部分病例(19.5%)并发系统性红斑狼疮(SLE)等自身免疫性疾病;对肾上腺糖皮质激素、环孢素A等治疗有良好反应。结论:IRH/IRP是由于T淋巴细胞调控异常致B淋巴细胞产生针对骨髓未成熟造血细胞的自身抗体而使血细胞减少,BMMNC-Coombs试验对IRH/IRP的诊断具有较高的灵敏性和特异性,多数病例对肾上腺糖皮质激素等免疫抑制剂反应良好。

免疫相关性血细胞减少症

目的 :免疫相关性血细胞减少症有原发性与继发性两种 ,为提高其诊断率及鉴别诊断 ,以便及时治疗。方法 :采用西班牙格瑞索 (GRIFOLS)自动分析仪进行Coomb试验 ,将其分为AHG、IgG、IgG +C3 、C3 、骨髓单个核Coomb试验及Coomb试验阴性几种类型。结果 :5 6 1例贫血患者 15 7例Coomb阳性。其中原发性 10 7例 ,包括自身免疫性溶血性贫血 (AIHA) ;原发性血小板减少性紫癜 (ITP) ;Evans综合征。 3例骨髓单个核细胞Coomb阳性 ,Coomb试验阴性者 8例。继发免疫相关血细胞减少症 5 0例 ,包括多种微生物感染、癌症、器官移植术后、结缔组织病等。结论 :无论原发或是继发免疫相关血细胞减少症均是机体免疫功能紊乱 ,产生针对自身红细胞的抗体和 (或 )补体 ,其吸附于红细胞表面 ,导致红细胞破坏而溶血。同时对Coomb试验阴性者及骨髓单个核细胞Coomb阳性者进行探讨 。

免疫相关性血细胞减少症87例临床报告

目的报告一组免疫相关的血细胞减少症。方法用常规的临床资料及实验室检查排除再生障碍性贫血(AA),阵发性睡眠性血红蛋白尿(PNH),骨髓增生异常综合征(MDS),营养不良性贫血,自身免疫性溶血性贫血(AIHA),Evan′s综合征,结缔组织疾病等常见血细胞减少性疾病。采用骨髓单个核细胞的抗人球蛋白实验(BM Coomb′S)来进一步明确诊断。结果与结论该组疾病特点为全血细胞或两系细胞减少,网织红细胞和中性粒细胞百分数不低,骨髓多数增生不减低,红系比例正常或增高,常规溶血检查为阴性,没有异常克隆造血证据,部分病例的BM Coomb′S为阳性,多数病例对肾上腺皮质激素及大剂量丙种球蛋白反应良好,且环孢素可以巩固疗效。