兔抗人免疫相关鸟苷三磷酸酶基因多克隆抗体的制备与鉴定

目的:表达人免疫相关鸟苷三磷酸酶基因(IRGM)a全长融合蛋白,制备高质量的兔抗人IRGM多克隆抗体。方法:将IRGMa全长cDNA片段分别克隆到原核表达载体pGEX-4T-2和真核表达载体pCMV-myc,测序验证序列正确。在大肠埃希菌Ecoli BL21中表达IRGMa/GST融合蛋白,用纯化的可溶性IRGMa/GST融合蛋白免疫新西兰大白兔,制备兔抗人IRGM抗体,采用ELISA、免疫印迹和竞争抑制等多种方法验证其敏感度和特异度。结果:自制的兔抗人IRGM多克隆抗体的特异度和敏感度均较高,效价更高于市售抗体。结论:成功制备了兔抗人IRGM多克隆抗体,为进一步的功能研究打下基础。

IRGM基因多态性与结核病发病相关性的Meta分析

目的系统评价免疫相关鸟苷三磷酸酶(IRGM)基因rs10065172位点多态性与结核病发病风险的相关性。方法通过计算机检索PubMed、万方全文数据库、中国期刊全文数据库(CNKI)、中国生物医学文献数据库(CBM)、维普数据库等数据库,查找关于IRGM基因rs10065172位点多态性与结核病发病风险相关性的病例对照研究,检索时限为各个数据库建库至2017年3月。由两名评价员独立对文献进行筛选及数据提取,运用RevMan 5.3和Stata 12.0软件进行Meta分析。结果共纳入文献8篇,9个病例对照研究,包括3 956例结核病病人,4 896例健康对照。Meta分析结果显示,在总体人群合并分析中,IRGM基因rs10065172位点多态性与结核病之间的相关性在隐性基因模型(TT vs TC+CC:OR=0.87,95%CI=0.78~0.97,P=0.01)、共显性基因模型(TT vs CC:OR=0.89,95%CI=0.78~1.01,P=0.08;TT vs TC:OR=0.85,95%CI=0.76~0.96,P=0.007)中有统计学意义。在亚洲人群中,IRGM基因rs10065172位点多态性与结核病之间的相关性在共显性基因模型(TT vs CC:OR=0.80,95%CI=0.67~0.95,P=0.01;TT vs TC:OR=0.80,95%CI=0.68~0.94,P=0.007)、等位基因模型(T vs C:OR=0.91,95%CI=0.84~0.99,P=0.03)、隐性基因模型(TT vs TC+CC:OR=0.80,95%CI=0.69~0.93,P=0.005)中均具有统计学意义。高加索人群及非洲人群因纳入文献较少,未发现IRGM基因多态性与结核病发病风险之间的相关性。结论在亚洲人群中IRGM基因rs10065172位点多态性与结核病发病风险有相关性,其中野生型等位基因C与结核病发病风险增高相关。

IRGM-4958847 A/G基因多态性与克罗恩病易感性的关系

目的：评价免疫相关鸟苷三磷酸酶基因（IRGM）多态性与克罗恩病（CD）易感性的关系。方法用主题词或关键词检索Cochrane图书馆、Pubmed、Embase、ISI数据库、中文科技期刊数据库、中国期刊全文数据库，万方数据库以获得相关研究，检索时间从建库至2012年10月。根据纳入和排除标准由两名研究者独立进行文献质量评价，使用Review Manager 5.2.6统计软件进行Meta分析，效应量为比值比（OR）。结果共有9个病例-对照研究和队列研究纳入分析。Meta分析结果显示在IRGM-4958847 A/G多态性位点，杂合子AG与野生型相比，合并效应量OR=1.17，95%CI（1.01～1.35）， P=0.03。结论 IRGM-4958847位点AG型基因可能与CD遗传易感性相关。

胎儿期RAS信号通路相关综合征的研究进展

RAS/丝裂原激活蛋白激酶(RAS/mitogen-activited protein kinase,RAS/MAPK)信号通路参与调控细胞增殖、分化、存活、凋亡、免疫应答等行为,编码RAS/MAPK信号通路蛋白的基因发生突变,可引起RAS信号通路相关综合征(RASopathies)[1],其发病率约为1/1000。RAS基因包含NRAS(neuroblastoma-RAS)、HRAS(harvery-RAS)、KRAS(kirsten-RAS)等,编码由上游调节子激活的小三磷酸鸟苷(guanosine triphosphate,GTP)酶单体,激活多种信号通路,传递胞外信号启动下游信号通路,包括RAS/MAPK通路[2]。

IRGM/Irgm1的生物学功能研究进展

免疫相关鸟苷三磷酸酶M蛋白(immune-related guanosine triphosphatase M protein,IRGM/Irgm1)是免疫相关GTPases(immunity related GTPases,IRGs)家族的一员。IRGs是参与机体早期免疫应答的一类蛋白,不同物种的IRGs蛋白,其家族成员也大不相同。人类体内仅进化出两个IRG基因,一个功能性的IRGM和一个不参与免疫的IRGC。然而,在小鼠体内,IRGs是一个干扰素诱导的GTPase大家族,其Irgm1(LRG-47)功能也较为广泛,主要包括广谱的抗感染与宿主防御、细胞自噬以及在部分炎性疾病中的促炎作用。大量研究发现人类IRGM蛋白与小鼠的Irgm1发挥着相似但不完全相同的生物学功能。人类IRGM基因在自噬靶向消灭结核分枝杆菌中起着重要作用,并且IRGM与克罗恩病(Crohn's disease,CD)的发病风险密切相关,现就人类IRGM/Irgm1的功能及其作用机制进行综述。

IRGM基因多态性与尘肺易感性研究

目的探讨免疫相关鸟苷三磷酸酶M(IRGM)基因多态性与尘肺易感性的关系。方法采用病例–对照的研究方法,选择248例尘肺患者为病例组,275例年龄相近、同性别、同民族、同工种且工龄相近的非尘肺接尘工人为对照组。采用Sanger测序法检测病例组和对照组中IRGM基因三个单核苷酸多态性(SNP)位点的基因型和等位基因。应用SNPstats软件分析单个SNP和尘肺的相关性,应用在线软件SHEsis进行各个位点的连锁不平衡分析和单体型分析。结果IRGM基因rs4958846位点的TT基因型在病例组的分布频率高于对照组,TC与CC基因型在对照组中的分布频率高于病例组,等位基因T在病例组的分布频率高于对照组,等位基因C在对照组的分布频率高于病例组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。IRGM基因rs4958842、rs4958843位点的基因型和等位基因在病例组和对照组中的分布差异均无统计学意义(P>0.05)。经连锁不平衡检验,IRGM的rs4958842、rs4958843、rs4958846三个基因两两位点之间均存在连锁不平衡(D’>0.7,r2>0.3)。对三个基因位点进行单体型分析,共构建4种单体型,其中ACT和ACC单体型在病例组和对照组中的频率分布差异具有统计学意义(P<0.05),所构建的其他单体型与尘肺的易感性无显著关联(P>0.05)。结论IRGM基因rs4958846位点的T等位基因和ACT单体型可能与尘肺的易感性有关。