还原氧化石墨烯/纳米金非酶标记免疫传感器检测单核细胞增生李斯特氏菌

为构建用于快速检测单核细胞增生李斯特菌(L.monocytogenes)的非酶标记免疫传感器,本研究以还原氧化石墨烯为基板固定的Au NPs作为电化学标记,以免疫磁性纳米微球(IMNPS)为捕获探针。以修饰单核细胞增生李斯特菌抗体(Anti-L.monocytogenes)的还原氧化石墨烯/纳米金(r GO/Au NPs)作为非酶标记物与富集L.monocytogenes的IMNPS形成夹心结构,在外加磁场的作用下将夹心结构复合物吸附在丝网印刷碳电极(SPCE)表面,采用差分脉冲伏安法进行分析。该免疫传感器检测L.monocytogenes的DPV响应信号在10~3 cfu/m L^10~9 cfu/mL具有良好的线性关系,线性回归方程为y=0.02933x-0.01996,R^2=0.99367,检出限为1.8×10~4 cfu/mL(S/N=3),即在检测3μL的检测样品中54 cfu的L.monocytogenes即可被检出。本研究所制备的电化学免疫传感器,成本低,操作简便,在实际应用中具有良好的前景。

模拟肺癌外周血微转移癌细胞富集检测方法的建立

目的制备特异的纳米免疫磁性微球,结合免疫细胞化学技术研制肺癌细胞富集检测试剂盒,探讨在肺癌患者外周血中微转移癌细胞检测的可行性及灵敏度。方法用反相微乳法制备纳米磁性微球,然后以碳二亚胺为交联剂将抗体与微球连接,制备纳米免疫磁性微球;将人肺腺癌细胞(A549)与PBMC及全血混匀建立癌细胞微转移模型,经纳米免疫磁性微球吸附和磁性分离后进行肺癌细胞的免疫细胞化学鉴定,检测此方法的特异性及灵敏度,建立癌细胞富集检测方法。结果制备的纳米免疫磁性微球能够特异地与A549细胞结合并能将细胞磁性分离,当PBMC与A549比为5×106:1时可检测到癌细胞,并且能检测出1ml外周血中1个癌细胞,未有假阳性。结论制备的肺癌细胞富集检测试剂能有效的从外周血中分离和鉴定出微转移的癌细胞,具有较高的灵敏度,为临床提供了一种简便、快速、敏感的肿瘤微转移病灶检测技术,可提高肺癌转移及复发的诊断率。