正常组织在免疫组织化学染色对照设置中的应用

日常工作中影响免疫组织化学染色结果的因素繁多,对照组织的设置是验证免疫组织化学染色结果是否可靠的有效方法。2015年国际特设专家委员会就诊断免疫组织化学阳性对照的设计原则及应用提出了规范化的建议,并推荐18种病理诊断常用抗体对照组织及染色结果的判读标准[1]。据此本实验室优先选用表达抗原的正常组织作为常用的外部阳性对照组织,并将其分为三类:正常阑尾组织、扁桃体组织及羊膜卷组织集。

超声特征及免疫组化标志物对乳腺癌新辅助治疗后腋窝淋巴结病理完全缓解的预测价值

目的探讨超声特征及免疫组化标志物对乳腺癌新辅助治疗(NAT)后腋窝淋巴结病理完全缓解(pCR)的预测价值。方法回顾性分析2020年1月~2023年9月南通市肿瘤医院收治的伴腋窝淋巴结转移(ALNM)的140例乳腺癌患者的临床资料,所有患者均接受NAT+手术切除+腋窝淋巴清扫。根据腋窝淋巴结病理结果将患者分为pCR组(n=53)和非pCR组(n=87),比较两组NAT前乳腺癌原发灶及腋窝淋巴结超声特征及免疫组化标志物,采用Logistic回归分析确立乳腺癌NAT后腋窝淋巴结pCR的独立预测因素,并采用ROC曲线验证其预测效能。结果两组原发灶纵横比、Adler血流分级,腋窝淋巴结短径、长短径比值、皮髓质分界、形态、彩色多普勒血流成像血流信号,HER-2及Ki-67的差异有统计学意义(P<0.05)。Logistic回归分析显示,腋窝淋巴结长短径比值≥2、腋窝淋巴结形态Ⅰ~Ⅱ型、腋窝淋巴结无彩色多普勒血流成像血流信号、HER-2阳性及Ki-67高表达是乳腺癌NAT后腋窝淋巴结p CR的独立预测因素(P<0.05)。ROC曲线显示,联合诊断的预测效能最高,曲线下面积为0.739(95%CI:0.643~0.812),敏感度为68.42%,特异度为75.34%。结论超声特征及免疫组化标志物对乳腺癌NAT后腋窝淋巴结pCR具有一定的预测价值。

抗原修复时间对不同克隆号P40免疫组化染色结果的影响

目的:探讨抗原修复时间对不同克隆号的P40免疫组化染色结果的影响。方法:选择本科室P40免疫组化染色异常的胸水细胞沉渣包埋蜡块,3μm连续切片4张,按抗原修复时间不同分为两组(A组抗原修复40 min,B组抗原修复80 min),每组两张切片分别滴加C3B4和MXR010两种不同克隆号的P40抗体,进行免疫组化染色对比实验。结果:A组的C3B4出现胞浆胞膜中度非特异染色,而MXR010没有出现非特异染色。B组的C3B4出现胞浆胞膜高度非特异染色,而MXR010出现胞浆胞膜轻度非特异染色。同一克隆号,A组和B组相比,随着抗原修复时间的延长,MXR010从无非特异染色变为轻度非特异染色,而C3B4从中度非特异染色加重为高度非特异染色。结论:抗原修复时间对不同克隆号的P40免疫组化染色结果会产生影响,随着抗原修复时间的延长,越容易出现非特异染色。选择适当的抗原修复时间和特异性好的抗体,可以减少免疫组化的非特异染色。

肺癌病理应用支气管冲洗细胞块免疫组化链霉菌亲生物素蛋白-过氧化物酶连接法染色的诊断效果及检出率评价

目的探讨肺癌病理应用支气管冲洗细胞块免疫组化链霉菌亲生物素蛋白-过氧化物酶连接法(SP)染色的诊断效果及检出率。方法选取2017年2月至2021年12月广东省开平市中心医院收治的70例经支气管冲洗液检查阳性患者作为研究对象。采用液基薄层细胞学(TCT)技术制备细胞块,分别采用免疫组化SP法、苏木精伊红染色(HE)进行常规细胞学检查,比较两种检测方法诊断效能及不同肺癌类型免疫组化SP法检查后不同抗体阳性表达率比较。结果免疫组化SP法对恶性肿瘤诊断的灵敏度为96.15%、准确度为95.71%,均高于HE染色的69.23%、70.00%(P<0.05),特异度为94.44%,高于HE染色的72.22%,但差异无统计学意义。免疫组化SP法对肺癌病理类型总检出率高于HE染色,差异有统计学意义(P<0.05)。免疫组化SP法对肌上皮(p63)、细胞角蛋白5/6抗体(CK5/6)、细胞角蛋白7(CK7);甲状腺转录因子-1(TTF-1)、突触素(Syn)、人表皮生长因子受体-5(CD56),增殖细胞的核抗原(Ki67),天冬氨酸蛋白酶(Napsin-A)表达阳性率均高于HE染色,差异统计学意义(P<0.05)。不同类型肺癌患者p63、CK5/6、CK7、TTF-1、Syn、CD56、Ki67、Napsin-A阳性表达率比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论支气管冲洗液细胞块免疫组化SP法染色对肺癌有较高的诊断价值,对不同类型肺癌有较高的检出率及鉴别率,具有重要的临床意义。

免疫组化结合胸腹水细胞蜡块切片在病理诊断中的临床价值

目的:分析病理诊断中采用胸腹水细胞蜡块切片与免疫组化的临床价值。方法:搜集80份胸腹水标本,分别进行免疫组化结合细胞蜡块切片诊断(研究组)和液基细胞学诊断(参照组)。金标准为活检病理诊断。观察并分析两种检查方法的标本诊断结果。结果:经过病理活检金标准诊断,80例患者中恶性胸腹水占比率为87.50%(70/80)。免疫组化结合细胞蜡块切片的诊断准确率、灵敏度、特异性,均明显高于液基细胞学诊断,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:在恶性肿瘤胸腹水病理诊断中采用免疫组化结合细胞蜡块切片的检查手段,与常规液基细胞学诊断方法疾病检出准确率和灵敏度更高,有利于为诊疗方案提供支持和参考。

观察全自动免疫组化(IHC)和荧光原位杂交(FISH)评价胃癌HER2状态的效果

探讨荧光原位杂交(FISH)和全自动免疫组化(IHC)评价胃癌表皮生长因子受体2(HER2)状态的效果。方法 对我院胃食管交界处腺癌或手术切除原发性胃石蜡组织标本展开FISH和IHC检测,288例标本采集时间为2019.1.1-2023.12.31,对FISH和IHC检测的胃癌HER2蛋白与基因表达情况加以分析。结果 228例标本中,50例(21.93%)表达为IHC2+与3+,178例(78.07%)表达为0+与1+。FISH检测HER2基因扩增病理病例34例,其中31例IHC+1病例FISH检测有27例扩增,未扩增病例共2例,来源于17号染色体多体;FISH检测扩增病例共2例,来源于IHC2+的19例;在检测FISH下可检出HER2扩增34例,其中低度、中度以及高度扩增分别有15例(44.12%)、10例(29.41%)、9例(26.47%);扩增病理中17号染色体非整倍性者17例,其中亚二体性、低多体性、高多体性各有1例(5.88%)、11例(64.71%)、5例(29.41%);HER2蛋白表达与WHO分化程度与Lauren分级密切相关,P<0.05;HER2基因扩增、Lauren分级、肿瘤分化程度三者之间关系密切,P<0.05。结论 HER2基因扩增中17号染色体多倍体发生比例与分化程度相对更高,HER2阳性率偏高,以肠型多见,IHC虽能够用于胃癌HER2的筛查,但若遇到无法明确的病例,可借助FISH检测进一步确诊,能够有效提升临床诊断的准确性。

基于马立克病病毒Meq蛋白单克隆抗体的免疫组化诊断方法的建立

为了对临床上马立克病(MD)准确诊断,研究利用杆状病毒表达系统表达马立克病病毒(MDV)强毒株Meq重组蛋白免疫小鼠,利用杂交瘤技术研制MDV Meq蛋白特异性单克隆抗体,并以此为基础建立MD诊断方法。结果显示:试验成功制备了4株Meq蛋白特异性单克隆抗体,分别命名为MDV-Meq-1D6、MDV-Meq-1D10、MDV-Meq-6B3、MDV-Meq-6D10;Western blot结果证明这些单克隆抗体不仅能与体外表达的Meq蛋白反应,而且能识别MD肿瘤细胞系MSB-1中的Meq蛋白和MD肿瘤组织细胞中的Meq蛋白;以Meq蛋白单克隆抗体成功建立免疫组化诊断MD的方法,该方法特异性强,结果稳定,易观察判定。研究表明,试验制备了4株Meq蛋白单克隆抗体(MDV-Meq-1D6、MDV-Meq-1D10、MDV-Meq-6B3、MDV-Meq-6D10),基于此建立的免疫组化MD诊断方法为临床MD鉴别诊断提供技术支撑。

高危型人乳头瘤病毒感染与宫颈癌患者临床特征、免疫组化指标及预后的关系

目的探讨高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)感染与宫颈癌患者临床特征、免疫组化指标及预后的关系。方法选取120例宫颈癌患者,其中HR-HPV阴性40例,HR-HPV阳性80例。比较HR-HPV阴性和HR-HPV阳性宫颈癌患者的临床特征、免疫组化指标(p16、Ki-67、p53)及预后。结果HR-HPV阴性和HR-HPV阳性宫颈癌患者的年龄、病理类型、淋巴结转移情况、分化程度比较,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。HR-HPV阴性宫颈癌患者p16、Ki-67阳性率及5年生存率均低于HR-HPV阳性患者,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。结论相较于HR-HPV阳性宫颈癌患者,HR-HPV阴性宫颈癌患者发病年龄更低、腺癌比例更高、更容易发生淋巴结转移、分化程度更低、p16和Ki-67阳性率更低、预后更差。

骨转移乳腺癌X线表现与免疫组化分型的相关性分析

目的:分析骨转移乳腺癌的数字乳腺X线摄影特征与免疫组化分型的相关性,以及骨转移灶的CT与MRI表现,并与无远处转移乳腺癌进行对比。方法:回顾性分析经手术病理证实的乳腺癌骨转移患者和无远处转移患者各90例(90个病灶);比较骨转移乳腺癌与无远处转移乳腺癌X线表现及免疫组化的差异。结果:①骨转移乳腺癌肿块以高密度为主,无远处转移乳腺癌肿块以等密度为主,差异有统计学意义(P<0.05)。②骨转移乳腺癌肿块边缘以模糊为主,无远处转移乳腺癌以毛刺状为主,差异有统计学意义(P<0.05)。③骨转移乳腺癌首诊区域淋巴结转移所占比例高于无远处转移乳腺癌,差异有统计学意义(P<0.05)。④相比骨转移乳腺癌,无远处转移乳腺癌无T4期患者,差异有统计学意义(P<0.05)。⑤骨转移乳腺癌Luminal A型及Luminal B型组织学分级以Ⅱ级为主,三阴性及HER-2过表达型以Ⅲ级为主,差异有统计学意义(P<0.05)。⑥骨转移乳腺癌Luminal A型、Luminal B型、HER-2过表达型以肿块伴钙化为主,三阴性以肿块为主,差异有统计学意义(P<0.05)。⑦无远处转移乳腺癌Luminal A型、三阴性及HER-2过表达型,发生同侧腋窝淋巴结转移居多,Luminal B型多未发生同侧淋巴结转移,差异有统计学意义(P<0.05)。⑧无远处转移乳腺癌Luminal A型与Luminal B型组织学分级以Ⅱ级为主,三阴性及HER-2过表达型以Ⅲ级为主,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:骨转移乳腺癌不同免疫组化分型对应的临床病理学特征及影像学特征不同,有助于临床医师预测不同免疫组化分型的骨转移可能性,为治疗提供参考。

组织芯片制作仪在制作免疫组化外对照中的应用

目的 免疫组化染是病理诊断过程中重要的检测手段,设置阳性对照尤其重要。本文旨在探讨一种流程简单的使用组织芯片制作仪制作单组织阳性外对照的方法。方法 用组织芯片制作仪中直径2 mm规格的穿刺针在提前备好的空白蜡块上打孔。对照阳性切片的免疫组化染色结果,找出阳性染色部位对应的供体蜡块位置,用直径2 mm规格的穿刺针进行穿刺,并将穿刺出的组织芯注入受体蜡块孔洞中,组织芯片蜡块即制作完成。结果 同一张玻片上,单组织阳性对照呈直径2 mm的圆形,与待检组织界限清楚,阳性定位准确,从而确认了试剂的有效性及染色过程的准确性。结论 用组织芯片制作仪制作单组织阳性对照流程简单,效果良好,适合有条件的单位日常开展使用。

MHC-Ⅱ联合MHC-Ⅰ免疫组化染色在特发性炎性肌病诊断中的应用价值探讨

目的探讨主要组织相容性复合体(MHC)-Ⅱ联合MHC-Ⅰ免疫组化染色在特发性炎性肌病(IIM)诊断中的应用价值。方法收集2010年3月至2018年4月在首都医科大学宣武医院神经内科行肌肉活检患者的标本29份,并通过医院电子病历系统收集患者的临床资料,包括4种IIM[皮肌炎(DM)5例,多发性肌炎(PM)5例,散发性包涵体肌炎(IBM)4例及坏死性自身免疫性肌病(NAM)5例]和2种非炎性肌病(NIM)[肌营养不良(MD)5例,dysferlinopathy肌病5例]。将标本进行苏木精-伊红(HE)染色及MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ免疫组化染色。结果免疫组化染色结果显示,PM、DM及IBM患者肌肉标本MHC-Ⅰ阳性率达100.0%,NAM和MD患者肌肉标本MHC-Ⅰ阳性率为80.0%,dysferlinopathy肌病患者肌肉标本MHC-Ⅰ阳性率为20.0%。PM和IBM患者肌肉标本MHC-Ⅱ阳性率分别为40.0%、50.0%,其余类型疾病患者肌肉标本的MHC-Ⅱ免疫组化染色均呈阴性。结论相较于MHC-Ⅰ免疫组化染色,MHC-Ⅱ免疫组化染色在鉴别IIM与NIM中有较高的特异性。MHC-Ⅱ联合MHC-Ⅰ免疫组化染色对不同肌病类型的诊断有较好的临床应用价值。

免疫组化三标双染法在乳腺癌HER2评估中的应用

HER2过表达与乳腺癌患者的不良预后和临床用药密切相关。根据2019版乳腺癌HER2检测指南,原位癌中HER2免疫组化着色不能作为评估对象,只评定浸润癌中HER2的着色情况。然而,在乳腺癌HER2判读时,传统方法是分别进行肌上皮和癌细胞的单独染色,通过反复切换切片并寻找同一视野最终进行评估,费时费力。本文采用免疫组化三标双染法(CK5/6-P63-HER2三抗体联合应用),对乳腺肌上皮和癌细胞同时进行不同颜色标记,并分析判读染色结果。

乳腺乳头状癌病理亚型病例影像特征与常见免疫组化指标的关系

目的:研究乳腺乳头状癌病理亚型病例的超声(US)、乳房X线摄影(MG)和磁共振成像(MRI)的影像学表现,分析乳腺乳头状癌亚型及影像学特征与常见免疫组化指标的关系。方法:回顾性分析2012年2月16日至2021年12月20日收治的47例乳腺乳头状癌病例,其中,US检查47例(47病灶)、MG检查45例(45病灶)、MRI检查14例(16病灶),对比分析亚型病例及其影像特征与ER、PR、Her-2、Ki-67等免疫组化指标的关系。结果:US特征:在ER、PR表达中,各亚型的超声影像学特征比较差异无统计学意义(P>0.05),42例肿块的ER、PR阳性表达率分别为97.6%(41/42)、88.1%(37/42)。在Her-2表达中,pDCIS亚型肿块后方回声改变存在统计学差异(P=0.039)。EPC亚型肿块直径、IPC亚型肿块后方回声改变在Ki-67表达中存在统计学差异(P=0.037,P=0.039)。MG特征:Ki-67表达中SPC亚型的钙化分布特征存在统计学差异(P=0.048),在ER、PR、Her-2表达中,各亚型的MG影像学特征比较差异无统计学意义(P>0.05),26例肿块的ER、PR阳性表达率分别为96.2%(25/26)和80.8%(21/26)。MRI特征:ER、PR、Her-2及Ki-67表达中4个亚型的MRI影像学特征关系比较差异均无统计学意义(P>0.05),13例肿块的ER、PR阳性表达率分别为100%(13/13)及84.6%(11/13);Her-2阴性表达率达76.9%(10/13)。结论:乳腺乳头状癌是一种以ER、PR阳性表达为主的乳腺癌,US显示EPC亚型肿块直径≥2 cm及IPC亚型肿块后方回声衰减与Ki-67阳性表达存在关联。Ki-67阳性表达与SPC亚型钙化非良性分布的MG影像特征相关。这些影像特征有助于判断乳腺乳头状癌的生物学特性,可协助临床预测患者的预后。

分析不同危险度胃间质瘤超声内镜特征及免疫组化结果的相关性

目的探讨不同危险度胃间质瘤超声内镜特征及免疫组化结果的相关性,为临床诊断和治疗提供参考。方法回顾性收集2018年1月至2023年7月就诊于兰州大学第二医院并行手术治疗的胃间质瘤患者相关指标,分析不同危险度之间的差异性。结果胃间质瘤的平均发病年龄为(56.02±10.94)岁,首发症状为黑便对于胃间质瘤的不同分级有意义,不同危险度的患者所接受的治疗方式也有显著差异(P<0.05)。极低危、低危、中危、高危四组的部位、起源层次、边界、回声、有无囊性变、钙化或血流信号对危险度的分级无差异(P>0.05);肿瘤大小、生长方式、形状、内部回声均匀度、外观对于胃间质瘤术后危险分级评估有意义(P<0.05),多因素Logistic回归显示肿瘤大小是独立影响因素(P<0.05)。免疫组化结果示DOG-1、CD34、SMA、Desmin是否阳性对胃间质瘤术后危险度的分级无影响(P>0.05);而Vimentin的阳性表达、Ki-67指数及核分裂象与危险度显著相关(P<0.05)。结论胃间质瘤的不同侵袭度分级与病灶大小、形状、回声等有关系,超声内镜能较好地诊断胃间质瘤,结合免疫组化相关指标能更好地评估胃间质瘤患者的整体情况,为临床诊疗提供参考。

交错式手工封片在免疫组化中的应用

免疫组化切片在上机染色前需贴好标签,但是在后期脱水透明等步骤后易出现局部溢胶问题,此时用封片机封片极易将溢出的胶体黏到机器抓手及玻片收集器上,造成封片机故障。目前很多病理科在标本量不大的情况下会继续选择手工封片。手工封片操作简单,成本低,但封片过程易出现气泡,既不美观,又影响医生镜下视野观察,现将本科室使用的交错式手工封片方法归结如下。

河北省年度免疫组化室间质控结果分析

室间质控又称室间质量评价(external quality assessment,EQA),是对实验室操作和实验方法的回顾性评价[1]。免疫组化(immunohistochemistry,IHC)技术是指染色的特异性抗体在组织原位与特异性抗原结合,从而对抗原进行定位、定量、定性测定[2]。通过开展免疫组化室间质控,可以了解参评医院免疫组化技术的质量水平,及时发现存在的质量问题,有针对性进行质量提升工作,保障医疗质量和安全。

Ventana-D5F3免疫组化和NGS检测肺腺癌ALK阳性比较

Ventana-D5F3免疫组化(IHC)和二代测序技术(NGS)在ALK阳性检测上具有较高的一致性,在临床应用中可以采用IHC进行肺腺癌ALK阳性患者的筛查,而NGS精准检测可以作为有效的补充。在检测方法选择时,需要考虑样本类型、肿瘤细胞比例、检测靶标对检测方法的限制。

乳腺癌新辅助化疗前后分子分型和免疫组化表达变化与疗效的相关性

目的:分析乳腺癌新辅助化疗(NAC)前后分子分型和免疫组化(IHC)表达改变的情况,探讨新辅助治疗后IHC结果发生改变可能的相关因素。方法:回顾性收集2014年3月至2022年8月在我院接受NAC的共151例乳腺癌患者的临床、病例资料。新辅助所有患者均进行4~6周期的新辅助放化疗且行乳腺癌改良根治术或根治术。根据Miller-Payne分级为评估标准,分为pCR与非病理完全缓解(non-pCR)两个亚组。观察分析NAC后non-pCR组患者IHC指标雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、人类表皮生长因子受体2(Her-2)、细胞增殖抗原(Ki-67)及分子分型出现改变的现象,采用χ^(2)检验分析新辅助化疗前后non-pCR组IHC指标及分子分型的差异性;采用皮尔逊相关系数检验IHC表达及分子分型在NAT后发生变化的情况。分析新辅助化疗患者pCR与临床病理特征间的关系,临床病理特征主要包括年龄、累及乳腺、病理类型、免疫组化标记物及分子分型的相关性。采用多因素Logistic回归分析来检验pCR相关的影响因素。结果:151例乳腺癌患者,Luminal A型6例,Luminal B型81例,Her-2过表达29例,三阴性35例。经NAC后,pCR患者占40.4%(61/151),non-pCR患者占59.6%(90/151)。90例non-pCR患者。病理学结果相对于治疗前,新辅助化疗后ER(阳性表达无变化,χ^(2)=0.000,P=1.000)、PR(阳性表达减少9例,χ^(2)=2.730,P=0.098)和Her-2(阳性表达减少3例,χ^(2)=0.284,P=0.594)差异无统计学意义(P>0.05),Ki-67高表达治疗后54例(60.0%)较治疗前83例(92.2%)明显下降,差异具有显著统计学意义(χ^(2)=25.697,P<0.001)。新辅助化疗pCR疗效与临床病理特征方面分析,ER状态(χ^(2)=16.130,P=0.000)、PR状态(χ^(2)=18.881,P=0.000)、 Her-2状态(χ^(2)=25.414,P=0.000)、分子分型(χ^(2)=17.365,P=0.001)与新辅助化疗pCR效果相关,多因素回归分析在校正其他变量后,ER阴性(P=0.023,OR=0.141, 95%CI=0.026~0.760)和Her-2阳性(P=0.000,OR=10.674,95%CI=2.911~39.138)可作为新辅助化疗pCR效果的预测因子。结论:乳腺癌NAC能够降低Ki-67的表达水平,ER阴性和Her-2阳性与乳腺癌NAC病理缓解有关,对NAC判断预后具有一定的指导作用。

宫颈液基细胞块联合免疫组化在宫颈癌筛查中的应用价值

目的:探讨宫颈液基细胞块联合免疫组化(IHC)在宫颈癌筛查中的应用价值。方法:对239例HPV及宫颈液基细胞学双阳性的残留标本进行细胞块制作、石蜡切片、免疫组化染色。观察其病理及免疫表型特征,并分析其应用价值。结果:液基细胞学被诊断为非典型鳞状细胞,意义不明(atypical squamous cells of undetermined significance,ASC-US)的90例标本中,经细胞块再确诊分流为低级别鳞状细胞上皮内病变(low-grade squamous intraepithelial lesions,LSIL)39例、高级别鳞状细胞上皮内病变(high-grade squamous intraepithelial lesions,HSIL)17例、宫颈腺癌1例及炎性/未见上皮内病变33例。细胞学诊断为LSIL的87例标本中,经细胞块确诊分流:LSIL 79例、炎性/未见上皮内病变8例。细胞学诊断为非典型鳞状细胞,不排除肿瘤病变(atypical squamous cells not excluding neoplastic lesions,ASC-H)的20例中,经细胞块确诊分流:LSIL 2例、HSIL 15例、鳞癌(squamous cell carcinoma,SCC)1例及炎性/未见上皮内病变2例。液基细胞学诊断为HSIL的32例中,细胞块确诊分流:HSIL 24例、SCC 6例及炎性/未见上皮内病变2例。液基细胞学诊断为腺细胞非典型增生(atypical glandular cells,AGC)的10例中,细胞块确诊分流:宫颈腺浸润性腺癌2例,子宫内膜腺癌1例。结论:宫颈液基细胞块联合IHC在宫颈病变及宫颈癌筛查中具有很好的应用价值,能有效分流细胞学中一些诊断不明确的病例,从而提高宫颈病变诊断准确性。是对宫颈液基细胞学及HPV检测的有效补充。

一步核酸扩增和快速直接免疫组化在乳腺癌前哨淋巴结术中的诊断价值

目的:探讨一步核酸扩增(one-step nucleic acid amplification,OSNA)检测技术及快速直接免疫组织化学(rapid direct immunohistochemistry,RDIHC)染色技术在乳腺癌前哨淋巴结(sentinel lymph node,SLN)术中的诊断价值。方法:应用多聚辣根过氧化物酶直接标记的抗体CK和CK19对乳腺癌前哨淋巴结冷冻切片进行RDIHC染色,OSNA检测淋巴结CK19 mRNA表达量,以术后石蜡诊断为金标准,对常规冷冻切片(frozen section,FS)、OSNA及联合RDIHC的冷冻切片(FS+RDIHC)进行评价及比较。结果:67例206枚淋巴结的结果分析,FS+RDIHC准确率(100%)显著高于FS(97.09%,P<0.05)。67例的整体诊断中FS与FS+RDIHC在准确率、特异度、灵敏度、假阴性率以及延迟诊断率无显著差异。对同时进行FS、RDIHC以及OSNA检测的结果分析,OSNA准确率(95.45%)与FS准确率(94.32%)显著低于FS+RDIHC(100%,P<0.05);FS延迟诊断率(4.55%)显著高于OSNA(0)和FS+RDIHC(0,P<0.05)。结论:FS联合RDIHC染色技术可以提高乳腺癌SLN术中诊断准确性,RDIHC染色流程耗时10 min,是检测乳腺癌SLN状态的最佳联合检测方式;OSNA具有高准确率及高灵敏度,OSNA检测流程耗时30~40 min,可以应用于SLN术中诊断。