免疫组化HSP70在大鼠磨牙损伤刺激后的表达

目的:研究大鼠磨牙在不同程度的机械性钻磨损伤刺激后的HSP 70动态表达及定位。方法:选取Wistar大鼠用于动物模型制作,应用HSP 70抗体进行免疫组化染色。结果:在对大鼠磨牙机械性钻磨损伤过程中,浅磨24h组HSP 70在牙髓中大多阴性着色;深磨24h组可见成牙本质细胞及其相邻几层牙髓成纤维细胞和中性粒细胞强阳性表达;穿髓24h组和穿髓3d组表现为急性炎症反应,HSP 70在成纤维细胞,血管内皮细胞中呈强阳性表达,成牙本质细胞呈中度阳性表达;至穿髓7d时为弱阳性表达,可能为修复期所致。结论:①HSP 70在炎症牙髓中能广泛表达,且随着刺激程度的加深HSP 70在牙髓中的表达有不同程度的变化,提示其在炎症牙髓中可能发挥着重要的生理病理作用。②在牙髓炎症进程中HSP 70的表达逐渐减弱,提示其可能参与牙齿的矿化和修复过程。

急进高原新兵淋巴细胞HSP70的表达与血清CRP的检测分析

目的:探讨急进高原时外周血淋巴细胞热休克蛋白70(HSP70)表达和血清C-反应蛋白(CHP)、心肌酶谱的变化规律与意义。方法:采用流式细胞术和火箭电泳法检测22例新兵急进高原(海拔3658m)1d、3d时外周血淋巴细胞HSP70的表达强度和血清CRP水平,以及心肌酶活性水平,并与在平原时比较。结果:淋巴细胞HSP70和血清CRP、LD、HBD在急进高原1d与3d时显著高于平原时水平,P<0.01;3d时HSP70、LD、HBD、AST比1d时显著降低,P<0.01;CRP降低不明确,但仍明显高于平原水平,P<0.05。结论:急进高原时低氧、低压等因素使心肌细胞膜通透性升高,刺激淋巴细胞HSP70的表达和CRP的增加。

热疗促进HSP70表达对免疫效应细胞杀伤肿瘤的影响

目的: 探讨热疗通过促进乳腺癌药物敏感细胞株与多药耐药细胞株表达热休克蛋白 (HSP)70,提高免疫效应细胞对靶细胞的杀伤活性。为开展基于热疗的细胞免疫治疗提供实验依据。方法: 采用IFNγ、CD3单抗、IL 1和IL 2等细胞因子诱导并扩增免疫效应细胞。分别给予乳腺癌药物敏感株MCF7和耐受株MCF7 /ADR非致死温度热冲击 42℃ 1h,继续培养 4h, 24h, 48h后收获细胞,用流式细胞术检测靶细胞上HSP70的表达。用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定靶细胞增殖活性以及免疫效应细胞对靶细胞的杀伤活性。结果: HSP70在两种靶细胞上的表达有差异,加热前MCF7 /ADR细胞HSP70表达明显高于MCF7,加热后 4h,HSP70在MCF7 /ADR表达提高了 6倍,在MCF7表达提高了 22倍,超过了耐药株。药物敏感株MCF7增殖的热抑制率低于耐药株MCF7 /ADR。热冲击前免疫效应细胞对MCF7细胞的杀伤活性低于MCF7 /ADR细胞。热冲击后免疫效应细胞对MCF7的杀伤活性提高了 86. 23%,超过了对MCF7 /ADR的杀伤活性 (提高了 30. 32% )。结论: 热疗明显提高HSP70在乳腺癌药物敏感与耐受细胞系上的表达,增加了免疫效应细胞对这两种靶细胞的杀伤活性。HSP70在乳腺癌药物敏感与耐受细胞系上的差异性表达对免疫效应细胞的杀伤活性有影响。

原位杂交检测hsp70 mRNA在黑腹果蝇胚胎中的表达

利用设计合成的地高辛标记的黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)hsp70 DNA探针,整体原位杂交检测热休克反应中,hsp70 mRNA在胚胎发育各阶段的表达情况.实验发现,在正常温度下黑腹果蝇的胚胎检测不到hsp70 mRNA存在.在热激的果蝇胚胎中,可检测到hsp70 mRNA的广泛存在.hsp70 mRNA在热激的胚胎中,除早期细胞化囊胚的极细胞外,其余细胞均可检测到hsp70 mRNA的均一分布.随着胚胎发育,hsp70 mRNA仍广泛分布在各细胞中,晚期胚胎中神经细胞hsp70 mRNA比其余细胞的表达水平高,说明神经细胞具有更高的热诱导活性,在热激反应中hsp70 mRNA的表达水平更高.

艾灸促进胃黏膜细胞HSP70表达上调对细胞凋亡线粒体信号转导途径的影响

目的:探讨艾灸预处理抑制细胞凋亡、保护胃黏膜损伤的机制.方法:32只健康Wister大鼠随机分为4组,即捆绑组(A组)、模型组(B组)、艾灸穴位组(C组)和艾灸非穴组(D组),每组8只.艾灸穴位组和艾灸非穴组大鼠艾灸预处理8d,捆绑组和模型组大鼠只捆绑,不艾灸.除捆绑组外,其余各组采用无水乙醇灌胃法制备大鼠急性胃黏膜损伤模型.采用Western blot法检测大鼠胃黏膜细胞色素C(Cyt-C)的表达,免疫组织化学方法检测大鼠胃黏膜HSP70、胃黏膜细胞凋亡、凋亡活化因子1(Apaf-1)、Caspase-9和Caspase-3的表达.结果:与A组相比,B组大鼠胃黏膜HSP70表达,胃黏膜细胞凋亡指数(AI),胞质Cyt-C、Apaf-1、Caspase-9和Caspase-3含量明显增加(2.93±0.29vs2.51±0.22,3.52±0.77vs2.25±0.53,1.63±0.36vs0.75±0.23,4.32±0.67vs3.44±0.86,4.05±1.01vs3.76±0.82,3.55±0.86vs2.35±0.71,P<0.01或0.05).与B组相比,C组大鼠胃黏膜HSP70表达(3.93±0.36)明显增加(P<0.01),而细胞凋亡指数(1.53±0.45),胞质Cyt-C(0.97±0.26)、Apaf-1(2.24±0.49)、Caspase-9(2.43±0.73)、Caspase-3(1.97±0.61)均显著降低(P<0.01).与C组相比,D组大鼠胃黏膜HSP70表达(3.35±0.34)显著降低(P<0.01),而凋亡指数(3.06±0.81),Cyt-C(1.45±0.29),Apaf-1(3.16±0.66),Caspase-9(3.33±0.76),Caspase-3(2.98±0.86),显著升高(P<0.01或0.05).结论:艾灸通过上调大鼠胃黏膜细胞HSP70表达,继而作用于凋亡线粒体信号转导途径相关靶点,由此抑制胃黏膜细胞凋亡,达到保护胃黏膜损伤的作用,且这种保护作用具有一定的穴位特异性.

葛根素对大鼠急性脑缺血损伤Hsp70表达的影响

目的:探讨葛根素对大鼠急性脑缺血损伤Hsp70表达的影响。方法:采用闭夹大脑中动脉造成局部脑缺血模型,对脑组织用免疫组化SP法作Hsp70染色,观察其Hsp70表达情况。结果:葛根素干预组Hsp70表达强度显著强于单纯缺血组(P<001)。结论:葛根素有上调大鼠急性脑缺血损伤时Hsp70表达的作用。

MHC与HSP70在胃癌组织中表达的意义

目的探讨MHC和HSP70在胃癌组织中的表达,并探讨二者的相关性。方法采用免疫组织化学sABC法,检测40例胃癌及8例非胃癌组织中MHC和HSP70的表达情况。结果⑴MHC、HSP70在正常胃黏膜和肿瘤组织之间的表达有显著性差异(P<0.01);⑵MHC的低表达与胃癌组织分化程度,淋巴结转移关系密切(P<0.01);HSP70的高表达与胃癌组织分化程度,淋巴结转移关系密切(P<0.05);⑶MHC、HSP70在癌组织中的表达具有负相关性(P<0.01)。结论MHC和HSP70的表达与胃癌组织分化程度,淋巴结转移密切相关,二者具有负相关性,提示MHC和HSP70可能在胃癌的分化和转移中有一定作用。

仔猪HSP70蛋白表达与断奶腹泻关系研究

为了探讨HSP70在断奶过程中的作用,试验通过免疫组化方法检测民猪、长白猪断奶仔猪的胃、十二指肠、空肠、回肠、盲肠、结肠六个组织中HSP70蛋白的组织定位与定量变化。结果表明,胃肠道中HSP70蛋白主要在黏膜上皮和肠腺内表达,在各组织内的表达没有因腹泻与否而发生组织定位的改变,在除胃以外的其他消化道组织中,长白健康组仔猪的HSP70蛋白的表达量显著高于长白腹泻组、民猪健康与腹泻组。

大鼠磨牙牙髓组织在程度不同的机械性损伤刺激后HSP70的表达及意义的研究

目的检测大鼠磨牙在程度不同的机械性钻磨损伤刺激(浅磨、深磨、穿髓)后热休克蛋白70(HSP70)的动态表达。方法采用"二步法"免疫组化法观察HSP70在正常组、浅磨组、深磨24h组、穿髓24h组、穿髓3d组和穿髓7d组牙髓组织中的表达情况。结果浅磨组和正常组HSP70在牙髓组织中有个别标本弱阳性着色,与后4组相比P<0.01;深磨24h组可见成牙本质细胞、成纤维细胞阳性表达,血管内皮细胞弱阳性表达;穿髓24h组和3d组表现为急性炎症反应,HSP70在成牙本质细胞、血管内皮细胞、中性粒细胞中均呈强阳性表达,成纤维细胞呈阳性表达;至穿髓7d时为弱阳性表达。结论在程度不同的钻磨刺激下,HSP70在鼠牙髓组织中的表达有强弱不同的动态变化;HSP70在牙髓损伤修复过程中可能是主要介导牙齿矿化修复的细胞因子之一。

TFF1和HSP70在结肠癌中的表达及临床意义

目的探讨TFF1和HSP70在结肠癌中表达及临床意义。方法用免疫组化S-P法检测71例结肠癌术后组织和15例正常组织TFF1和HSP70表达。结果结肠癌组织TFF1和HSP70表达率分别为57.7%和70.4%,高于正常组织(26.7%和40%;P=0.03;0.04)。TFF1表达与Dukes分期和分化程度有关(P=0.025;0.005)。HSP70表达与Dukes分期和分化程度有关(P=0.032;0.031)。TFF1和HSP70均与性别、年龄、肿瘤浸润深度、生长方式、淋巴结转移和预后无关。TFF1和HSP70在结肠癌中表达呈正相关(r=0.306,P=0.009)。结论本实验首次研究TFF1与HSP70在结肠癌中的表达相关性,提示两者在肿瘤发生中可能存在相互作用。TFF1和HSP70在结肠癌高表达,可能参与肿瘤的发生发展过程。

星形胶质细胞瘤中HSP70的表达及生物学活性

目的探讨星形胶质细胞瘤中热休克蛋白(HSP70)表达水平与肿瘤恶性程度的关系及其与胶质细胞瘤生物学行为的关系。方法采用HSP70单克隆抗体对62例星形胶质瘤进行免疫组化染色,检测HSP70的表达水平及其与胶质瘤病理分级的关系,随访观察患者5年生存率,比较不同HSP70表达水平下患者的生存率差异。结果 62例星形胶质细胞瘤患者中,21例HSP70表达增高,与正常脑组织有统计学差异(P<0.05);HSP70表达情况与性别、年龄无关(P>0.05);HSP70的表达水平与胶质瘤病理分级呈正相关(r=0.685,P<0.01);HSP70阳性组5年生存率明显低于HSP70阴性组(χ2=4.742,P<0.05)。结论 HSP70与胶质瘤的生物学行为和分化程度有关,HSP70的检测会对星形胶质细胞瘤的诊断与靶向治疗提供实验依据。

脑溢安颗粒剂对出血性中风大鼠缺血皮质区细胞凋亡及HSP70与NF-kB表达的影响

目的 :研究脑溢安 (NYA)颗粒剂对出血性中风大鼠脑内HSP70与NF kB表达的影响。方法 :用Ⅶ型胶原酶立体定位法复制出血性中风动物模型 ,观察行为、TUNEL及HE染色 ,HSP70、NF kB免疫组化反应 ,取手术侧海马及皮质分别抽提总蛋白与核蛋白进行Westernblot反应 ,密度扫描测定HSP70与NF kB蛋白表达。结果 :NYA治疗组爬行计分明显低于模型对照组 ,3d时血肿明显缩小 ,7d基本吸收 ,凋亡细胞明显减小 ;免疫组化示 3d时可见 ,HSP70信号增强 ,NF kB信号相对减弱 ;Westernblot及密度扫描显示HSP70显著升高 ,NF kB显著降低。结论 :NYA能促进神经功能恢复 ,加快血肿吸收 ;增强HSP70表达 ,抑制NF kB表达 ,通过抑制炎症因子保护脑出血后继发脑缺血损伤可能是NYA的作用机理之一。

HSP70在发绀型先天性心脏病人心肌组织中的表达

目的 :探讨发绀型先天性心脏病人心肌细胞中HSP70的表达及其心肌保护作用。方法 :非发绀型先天性心脏病人 12例 (A组 ) ,发绀型先天性心脏病人 12例 (B组 )。两组病人于阻断主动脉前、阻断主动脉后 2 0min及开放主动脉后 2 0min ,取右房心肌标本 ,分别进行免疫组化法检测HSP70的含量及化学比色法检测SOD活性、MDA的含量。结果 :心肌细胞中HSP70的含量在手术过程中无明显变化 (P >0 .0 5 ) ;B组HSP70的含量明显低于A组 (P <0 .0 5 )。手术过程中B组SOD活性明显降低 ,MDA含量明显高于A组 (P <0 .0 5 )。结论 :发绀型先天性心脏病人心肌细胞中HSP70呈低水平表达与其抗缺血 /再灌注损伤作用减弱有关。

有氧运动对大鼠中枢神经系统HSP70表达的影响

目的:探讨有氧运动对大鼠中枢神经系统(CNS)细胞热休克蛋白70(HSP70)表达的影响。方法:40只SD大鼠分成5组,分别为对照组、中等强度耐力训练组、中等强度耐力训练+大强度力竭运动组、大强度耐力训练组和大强度耐力训练+大强度力竭运动组,耐力训练持续6周,力竭运动在最后1次耐力训练后次日进行,各组取材后采用免疫组化和图像分析方法观察运动对CNS脑和脊髓6个部位HSP70表达的影响。结果:中等、大强度耐力训练组CNS各部位HSP70表达水平与对照组相比显著增加;力竭运动组CNS各部位HSP70表达水平均高于相应的耐力训练组,其中中等强度耐力训练+大强度力竭运动组表达增加最显著。结论:耐力训练是CNS各部位HSP70表达水平增加的重要诱导因素,运动强度的适应性改变是决定耐力训练后CNS各部位HSP70表达量的主要因素。

洛克沙胂暴露对斑马鱼的急性毒性及其组织中HSP70的表达定位

[目的]对洛克沙胂的水生生态安全评价、畜禽粪便管理以及HSP70在斑马鱼应激状态下的保护作用的研究提供科学依据。[方法]以斑马鱼为试验生物,进行洛克沙胂暴露对斑马鱼96 h的急性毒性试验,并对洛克沙胂暴露下斑马鱼组织(鳃、肝脏、性腺)中HSP70的表达定位进行了免疫组织化学初步研究。[结果]洛克沙胂对斑马鱼的急性毒性较低,96 hLC50为249.80 mg/L;在浓度100mg/L洛克沙胂暴露下,HSP70在斑马鱼的鳃、肝脏、性腺3种组织中有特异性表达,主要定位在鳃小片的基底膜、鳃弓和鳃丝上皮细胞及红细胞的胞质中,性腺的基质细胞中,肝脏的静脉血管四周和红细胞胞质中。[结论]洛克沙胂对于斑马鱼的毒性属于低毒范围。

HSP70和HSP90α在人膀胱癌中的表达及意义

目的 探讨热休克蛋白70(heat- shockprotein70,HSP70)和热休克蛋白90α(heat shockprotein90α,HSP90α)在 膀胱癌中的表达及临床意义。方法 应用免疫组化技术检测HSP70、HSP90α和增殖细胞核抗原(proliferatingcellnuclearan tigen,PCNA)在50例膀胱癌组织和14例正常膀胱粘膜组织的表达。结果 膀胱癌中HSP70、HSP90α阳性表达率分别为 56%(28 50)和66%(33 50)。HSP70和HSP90α在膀胱癌病理分级、临床分期、生存率等方面具有显著性差异(P<0.05)。 HSP70、HSP90α和PCNA在膀胱癌中表达呈正相关。结论 HSP70、HSP90α与膀胱癌细胞分化,肿瘤的浸润深度有关,在膀 胱癌发生和发展中起重要作用。HSP70、HSP90α可以作为判断膀胱癌预后的新指标。

卵巢浆液性癌HSP70及PCNA的表达及其意义

目的 :探讨人体卵巢浆液性癌 (SCHO)的生物学特性及HSP70 ,PCNA在其诊断中的作用 .方法 :采用免疫组化SP法 ,检测HSP70、PCNA在 10例卵巢良性、14例交界性及 30例恶性浆液性肿瘤中的表达 .结果 :①HSP70表达强度恶性 >交界性 ,交界性 >良性 ;表达部位SCHO阳性定位于细胞质和胞核 ,交界性在腺体上皮顶浆部位比较明显 ,部分细胞质也有表达 ,良性阳性限于腺体上皮细胞顶浆部位 .SCHO中HSP70表达强度Ⅲ级 >Ⅰ、Ⅱ级 .②PCNA表达强度恶性>交界性 >良性 ;同时 ,其表达强度与SCHO病理分级关系密切 ,Ⅲ级 >Ⅱ级 ,Ⅱ级 >Ⅰ级 .③HSP70与PCNA在SCHO中的表达强度具有正相关性 (r =0 .92 1,P <0 .0 5 ) .结论 :HSP70与PCNA有可能共同成为表达细胞增殖的指标 ;HSP70在SCHO的不同级别中其表达部位不同 ;检测HSP70、PCNA对SCHO的诊断、鉴别诊断及病理分级和治疗有一定的参考价值 .HSP70。