莱芜黑山羊卵巢FSHr、LHr的免疫组化定位研究

为从形态学角度理解内分泌调节过程,揭示促性腺激素(GTH)对雌性哺乳动物卵巢调节作用机制,对处于非繁殖季节的莱芜黑山羊卵巢中FSHr、LHr分布进行免疫组化SABC方法定位.分别选取相邻的6张连续阳性切片,光镜观察、图像分析.结果显示:FSHr、LHr阳性细胞主要分布于卵泡颗粒细胞、膜细胞、卵母细胞、血管周围间质,尤其以在卵泡颗粒细胞、膜细胞的胞质中分布最多.原始卵泡卵母细胞中便有两种受体阳性物质分布,在各级卵泡中两种受体阳性细胞数量、染色强度随卵泡发育水平呈正向增加趋势.

玉屏风散调控变应性鼻炎大鼠IL-6、TNF-α活性的实验研究

目的探讨玉屏风散(黄芪、白术和防风)对变应性鼻炎大鼠白介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响。方法选用健康SD大鼠,采用10%甲苯-2,4-二异氰酸酯橄榄油溶液复制变应性鼻炎大鼠模型,并用玉屏风散进行治疗。对大鼠过敏症状进行评分;股静脉取血分离血浆采用酶联免疫法检测IL-6及TNF-α的水平;收集腹腔肥大细胞,采用蛋白印迹法检测IL-6及TNF-α蛋白的表达水平;采用过SABC免疫组织化学法对各组动物鼻黏膜进行染色,观察药物对IL-6和TNF-α表达的影响。结果与模型组比较,玉屏风散能明显降低模型大鼠的过敏症状积分(P<0.05,P<0.01),外周血中IL-6及TNF-α的水平(P<0.05,P<0.01),腹腔肥大细胞IL-6和TNF-α的表达水平(P<0.05,P<0.01),鼻黏膜中IL-6和TNF-α的表达。结论玉屏风散能有效治疗变应性鼻炎,其机制可能与其抑制IL-6和TNF-α的活性有关。

消痰散结方对人胃癌细胞周期及CDK4表达影响的实验研究

[目的]观察消痰散结方(主要由半夏、胆南星、鸡内金、全蝎等组成)对胃癌细胞周期及CDK4表达的影响,以探讨其抑制胃癌增殖的机理。[方法]将人胃癌MKN-45接种于裸鼠腋部皮下,分别给予小鼠消痰散结方、环磷酰胺或生理盐水21 d后处死小鼠,取出瘤组织,用流式细胞仪检测各组胃癌组织中处于G1、S期的细胞数,用免疫组化SABC法检测胃癌组织中CDK4的表达。[结果]中药组G1期细胞数为(66.84±1.14)％,空白组为(54.66±8.72)％,二者比较有显著性差异(P<0.01),中药组、化疗组S期细胞比例均明显低于空白组(P<0.01),中药组S期细胞数也明显低于化疗组(P<0.01)。中药组胃癌组织中CDK4表达总阳性率、中度及以上阳性率均明显低于空白组和化疗组(均P<0.05)。[结论]消痰散结方可明显抑制胃癌细胞的增殖;其机理可能是通过抑制CDK4的表达来影响细胞周期的完成。

进展期胃癌病理和预后影响因素的关系

目的:研究机体免疫因素和肿瘤生物学行为与进展期胃癌病理之间的相关性,比较并筛选对进展期胃癌预后有影响的指标。方法:获得61例行根治性切除术的进展期胃癌预后资料,用免疫组化(SABC法)和TUNEL(原位末端标记)方法检测组织切片中胃癌细胞增生细胞核抗原标记指数(PCNA-LI)、树突状细胞(DCs,dendritic cells)浸润密度,凋亡指数(AI,apoptosis index),研究上述指标和病理之间的相关性并进行单因素、多因素生存分析。结果:PCNA-LI,DCs,AI与TNM分期、淋巴结转移、淋巴管浸润、胃癌分化有相关性。单因素生存分析表明胃癌患者的年龄、性别、病灶的大小、肿瘤分化、是否有淋巴管癌栓、AJ等与胃癌预后无关。胃癌分期、浸润深度、淋巴结转移、PCNA—LI、DCs浸润密度是胃癌预后的影响因素(Log-rank test,P<0.05)。多参数回归生存分析表明肿瘤大小(RR=2.328),UICC(1997年)TNM分期(RR=5.251)是胃癌预后的独立影响因素(P<0.05)。结论:UICC的胃癌TNM分期是判断胃癌预后有价值的指标。胃癌细胞本身生物学特性和机体的免疫状态与胃癌病理有一定相关性并且参与了对胃癌预后的影响。

Rb蛋白在结直肠癌中的表达及临床意义

目的分析Rb蛋白表达与结直肠癌临床病理特征的关系。方法应用免疫组化SABC法,检测44例结直肠癌癌中心、癌旁(距肿瘤边缘1cm)、切缘(距肿瘤边缘3cm以上)Rb蛋白表达情况,并分析Rb蛋白表达与结直肠癌临床病理特征的关系。结果44例结直肠癌癌中心Rb蛋白表达为61.36％(27/44),癌旁粘膜为90.91％(40/44),切缘为97.73％(43/44);Rb蛋白表达与年龄、性别、肿瘤部位、大小及分化程度无显著相关,而与肿瘤临床分期及淋巴结转移显著相关。结论Rb蛋白的表达与结直肠癌的部分临床病理特征密切相关,可能是判断结直肠癌预后的一项重要指标。

KAI1/CD82蛋白表达与食管癌淋巴结转移的关系

目的 探讨KAI1/CD82蛋白表达与食管癌淋巴结转移的关系。方法 应用免疫组化SABC法 ,检测 5 2例食管癌组织中KAI1/CD 82蛋白表达水平。结果 有淋巴结转移食管癌组织和无淋巴结转移食管癌组织中KAI1/CD 82蛋白表达率分别为2 8.6% ( 4 /14 )、73 .7% ( 2 8/3 8) ,两者比较有显著性差异 (P <0 .0 5 )。结论 KAI1/CD

大肠癌Survivin、Caspase-3及NF-κBp65的实验研究

目的研究凋亡相关蛋白Survivin、Caspase-3和NF-κBp65在正常大肠黏膜、大肠腺瘤及大肠腺癌组织中的表达,探讨它们在大肠癌癌变过程中的作用与其临床病理特征的关系。方法采用免疫组化SABC法分别检测大肠腺癌、大肠腺瘤及正常大肠黏膜组织中的Survivin、Caspase-3和NF-κBp65的表达。结果Survivin、Caspase-3和NF-κBp65分别在大肠腺癌、大肠腺及正常大肠黏膜的表达差异有统计学意义(P<0.013)。Survivin、Caspase-3和NF-κBp65的阳性表达率在大肠腺癌中不同组织学分级间差异均有统计学意义(P<0.05),组织分化程度越低,Survivin和NF-κBp65的表达强度越强,则Caspase-3的表达强度则越弱。Survivin与Caspase-3在大肠腺癌中的表达呈负相关(P<0.05)。结论大肠腺癌中Survivin和NF-κBp65表达上调,提示Survivin和NF-κBp65的高表达共同参与了大肠腺癌的发生。Survivin和NF-κBp65随大肠腺癌组织分化程度降低而表达上调,提示Survivin和NF-κBp65可在一定程度上反映大肠腺癌的恶性程度。Survivin可通过抑制Caspase-3的表达,促进肿瘤的发生。

丹芍化纤胶囊对实验性肝纤维化大鼠肝脏Smad-7表达的影响

目的探讨Smad7在大鼠肝纤维化肝脏中的表达及丹芍化纤胶囊抗大鼠肝纤维化对其表达的影响。方法雄性Wistar大鼠80只分为正常组、肝纤维化模型组、自然恢复组、低剂量治疗组、高剂量治疗组,除正常组外,其余采用CCl4、饮酒、高脂低蛋白饮食等复合病因刺激制备肝纤维化动物模型8周,然后两治疗组分别予以低剂量(0.5g/kg)、高剂量(1.0g/kg)丹芍化纤胶囊灌胃治疗8周。实验结束后测定肝脏指数,光镜下观察肝组织纤维化程度,同时免疫组化SABC法检测肝组织中Smad7的表达。结果Smad7在肝纤维化大鼠肝脏中表达明显减少(0.98±0.20/12.80±2.32),治疗8周后,治疗组与肝纤维化模型组、自然恢复组比较,肝脏指数、肝纤维化程度显著减轻;肝脏Smad7表达显著增加(10.42±2.74/1.74±0.29)。结论丹芍化纤胶囊能显著增加肝纤维化大鼠肝组织中Smad7的表达,可能是其发挥抗纤维化作用的机制之一。

Leptin在乌鸡下丘脑和脑干的分布研究

为了探讨leptin在禽类下丘脑和脑干中的分布,本研究选用健康乌鸡,经灌流固定后,切取下丘脑和脑干制作石蜡连续切片。采用免疫组化SABC法研究leptin在乌鸡下丘脑、中脑、脑桥和延髓中的分布。结果显示:leptin在下丘脑室旁核、中脑动眼神经核、结合臂交叉核、线形核、脑桥中缝核、桥内侧核、桥外侧核、延髓中缝核、迷走神经运动核和舌下神经核中均有分布。上述核团中的leptin可能通过旁分泌或自分泌的形式,参与对摄食等多种功能的调节。

结缔组织生长因子在大鼠肺纤维化模型中的蛋白表达

目的 :了解结缔组织生长因子 (connectivetissuegrowthfactor ,CT GF)在大鼠肺纤维化模型中的表达状况及其与肺纤维化之间的关系。方法 :42只Wistar大鼠随机分为二组。模型组 (M组 ) :气管内灌注博莱霉素 ,对照组 (C组 ) :气管内灌注生理盐水。于灌注后第 7、14、2 8天每组分别处死大鼠 7只。制备大鼠肺组织切片。用免疫组化SABC法分别检测二组大鼠肺组织中CTGF及转化生长因子 β1 (TGF β1 )、纤维连接蛋白 (FN )在肺内的表达水平。结果 :M组CTGF及TGF β1 、FN在肺内的表达水平在各时间点均显著高于C组 (P <0 .0 5 )。结论 :CTGF作为TGFβ1 的下游因子 ,可能通过促进细胞外基质(ECM)

TGF-β1和p27kipl在胰腺癌中的表达及其意义

目的探讨胰腺癌、胰腺炎和正常胰腺组织中TGF-β1的表达及其与p27kipl的关系。方法采用免疫组化SABC法检测TGF-β1和p27kipl在胰腺癌、急慢性胰腺炎及正常胰腺组织中的表达情况。结果胰腺癌、急慢性胰腺炎及正常胰腺组织中TGF-β1阳性率分别为69.05%、46.15%和16.67%;p27kipl的阳性率分别为45.24%、92.31%和50%;胰腺癌组织中TGF-β1和p27kipl无明显相关性(P>0.05)。结论TGF-β1和p27kipl蛋白表达异常与胰腺癌的发生发展密切相关,p27kipl蛋白表达下降可作为胰腺癌恶性程度的指标。

基质金属蛋白酶及其组织特异性抑制物与环氧合酶-2在骨性关节炎中的表达及临床生物学意义

目的观察环氧酶-2(COX-2)、基质金属蛋白酶-3(MMP-3)和组织特异性抑制物-1(TIMP-1)在骨性关节炎(OA)中的表达,探讨其与OA的发生、发展的关系。方法采用苏木精-伊红染色及SABC法,检测OA及正常对照关节软骨组织切片中COX-2、MMP-3和TIMP-1蛋白的表达情况,应用统计学方法对其在OA的发生、发展中与OA病理分级、临床影像学分级的相关性进行非参数分析。并运用Spearman相关分析检验对OA组中MMP-3蛋白与COX-2蛋白的表达进行相关性分析。结果OA中MMP-3、TIMP-1、COX-2蛋白的阳性表达率分别为78.0,68.7和86.7,与它们在正常软骨组织中的比较有显着性差异(P<0.05),MMP-3、COX-2与关节损伤程度成正相关(P<0.05),TIMP-1与关节损伤程度成负相关(<0.05)。结论OA中MMP-3/TIMP-1的变化与COX-2变化无相关性。

CD_(105)标记微血管密度与喉癌临床病理特征相关性

目的探讨喉鳞状细胞癌血管生成与各临床病理特征的关系。方法应用CD105单克隆抗体进行免疫组化SABC法检测54例喉癌组织中微血管密度(intratumormicrovesseldensity,IMVD)。结果54例喉癌组织中IMVD为8.854.50,T3和T4级喉癌组织IMVD(10.734.33)明显高于T1和T2级(6.803.68),其差异有显著性意义(P<0.01)。颈淋巴结转移组IMVD(12.873.39)明显高于非转移组(6.092.73),差异有显著性意义(P<0.01)。术后复发者组IMVD值(11.934.55)高于无复发者组(8.324.32),差别有意义(P<0.05)。结论CD105标记IMVD与喉癌T分级、颈淋巴结转移和肿瘤复发密切相关,可能是喉癌患者的一个独立的预后指标。

血管内皮生长因子与脑胶质瘤恶性程度的相关性研究

应用免疫组化 SABC法和原位杂交检测血管内皮生长因子 ( VEGF)在 ～ 级脑胶质瘤中的表达。结果 62例 ～ 级脑胶质瘤组织 VEGF免疫组化阳性率分别为 3 0 .7%、40 .0 %、73 .7%和 86.7% , ～ 级脑胶质瘤阳性率明显高于 ～ 级脑胶质瘤 ,差异显著 ( P<0 .0 1 )。原位杂交显示 VEGFm RNA表达 ,与 VEGF蛋白表达结果相近。提示VEGF高表达与脑胶质瘤组织分化程度低、侵袭强等恶性表型密切相关 。

喉鳞状细胞癌中Skp2、PTEN及p27蛋白的表达及其意义

目的探讨Skp2、PTEN及p27蛋白表达与喉鳞状细胞癌(LSCC)发生、发展的关系。方法采用免疫组化SABC法检测65例LSCC组织中Skp2、PTEN及p27蛋白的表达情况。结果Skp2、PTEN及p27蛋白在LSCC组织中总的阳性表达率分别为60.0%,49.2%和41.5%,Skp2过表达与LSCC的临床分期及淋巴结转移正相关(P均<0.05),低分化、伴颈部淋巴结转移及Ⅲ～Ⅳ期LSCC组织中PTEN阳性率明显降低(P均<0.05),p27在颈部淋巴结转移组中阳性率显著降低(P<0.05)。结论联合检测Skp2、PTEN及p27的表达有助于综合评估LSCC的生物学行为。

慢性脑低灌注状态再灌注后大鼠海马p21和p53蛋白的表达

目的通过建立大鼠慢性脑低灌注模型,探讨慢性脑低灌注状态再灌注后大鼠海马p21和p53蛋白的表达。方法45只雄性SD大鼠随机分为对照组(n=5),模型不灌注组(n=20),模型再灌注组(n=20),模型再灌注组大鼠按再灌注压后不同时间点分组(12h、24h、48h、72h组),每个时间点各5只(n=5)。采用右侧颈外静脉—颈总动脉端侧吻合和双侧颈外动脉及对侧横窦引流静脉结扎的方法,建立慢性脑低灌注动物模型,术后3个月阻断颈部动静脉分流造成模型组大鼠脑组织再灌注。应用免疫组化SABC法和显微图像分析方法检测慢性脑低灌注状态再灌注后大鼠海马CA1区p21和p53蛋白的表达。结果p21和p53蛋白在对照组大鼠海马CA1区无表达,在模型不灌注组中弱表达,模型再灌注组于术后12h开始有表达,48h达高峰,72h后逐渐降低。模型再灌注组海马CA1区p21和p53蛋白阳性细胞平均光密度值明显大于模型不灌注组(P<0.01)。结论慢性脑低灌注状态再灌注后,海马CA1区p21和p53蛋白的表达上调,二者可能对正常灌注压突破(NPPB)后迟发性神经功能障碍的发生起促进作用。

基质金属蛋白酶在肝细胞癌中表达的实验研究

目的 探讨基质金属蛋白酶 - 2 (MMP- 2 )、基质金属蛋白酶 - 9(MMP- 9)在肝细胞癌的表达及其与侵袭转移过程中的关系 ,进一步了解肝细胞癌侵袭转移的发生机理。方法 通过免疫组化 SABC法 ,检测 32只大鼠的肝细胞癌模型标本肝癌及癌旁肝组织 MMP- 2、MMP- 9的表达 ,应用图像分析法进行定量分析 MMP- 2、MMP- 9的变化。门静脉癌栓形成作为肝细胞癌侵袭转移标志。结果 免疫组化显示 :癌及其癌旁肝组织均有 MMP- 2、MMP- 9表达 ,MMP - 2、MMP- 9在肝癌组织的表达显著高于癌旁肝组织 (P<0 .0 1) ;MMP- 2、MMP- 9在有侵袭转移肝癌组织的表达显著高于无侵袭转移肝癌组织 (P<0 .0 1)。 MMP- 2、MMP- 9在无侵袭转移肝癌、癌旁肝组织及有侵袭转移癌旁肝组织的表达无显著差异 (P>0 .0 5 )。结论 肝细胞癌在有侵袭转移情况下 MMP- 2、MMP- 9在癌组织表达明显增高。预示可通过检测癌组织 MMP- 2、MMP- 9表达水平帮助判断肝癌复发、转移风险。因此 。

MMP-7在食管癌组织中的表达及其意义

目的 探讨MMP 7表达与食管癌生物学行为的关系。方法 采用免疫组化SABC法检测MMP -7在食管鳞癌中的表达。结果 在正常食管鳞状细胞MMP -7呈阴性表达;在食管癌组织中主要表达于癌细胞膜和胞质中,间质细胞中无表达,在食管癌中共阳性表达率为43 .4% (3 3 / 76) ;MMP 7表达与食管癌淋巴结转移、临床分期、静脉侵犯和浸润深度有关(P <0 .0 5 ) ;与性别、年龄、病理类型、病理分化无关(P >0 .0 5 )。结论 MMP- 7在食管鳞癌进展中有重要作用,可能是1个独立预后指标。常规检测其在食管鳞癌中的表达,有助于食管癌治疗和预后的判断。