免疫组织化学双染技术在唾液腺淋巴上皮性病变中的应用评价

目的:根据抗体阳性表达的不同部位(细胞核、细胞质和细胞膜)、染色顺序及匹配不同的显色系统,探讨免疫组织化学双染技术在唾液腺淋巴上皮性病变诊断中的最佳染色方法。方法:挑选良性淋巴上皮病(benign lymphoepithelial lesion,BLEL)、淋巴上皮癌(lymphoepithelial carcinoma,LEC)和黏膜相关淋巴组织结外边缘区B细胞淋巴瘤(extranodal marginal zone lymphoma of mucosa-associated lymphoid tissue,MALT淋巴瘤)各20例,分别进行AE1/AE3、Ki-67、CD20cy抗体的免疫组织化学单染和两两组合的双染检测。每个病例依据不同抗体的表达部位(细胞核、细胞质及细胞膜)、不同的抗体染色顺序和显色剂,分别采用3种双染方法检测,即①先Ki-67(DAB显色),再AE1/AE3或CD20cy(AEC显色);②先AE1/AE3或CD20cy(DAB显色),再Ki-67(AEC显色);③先Ki-67(AEC显色),再AE1/AE3或CD20cy(BCIP/NBT显色)。所得结果均与单染相比较,采用SPSS 17.0软件包对数据进行χ^2检验和配对t检验,分析染色强度和阳性比率有无差异。结果:所有双染方法中抗体定位均准确,但方法 1中各抗体染色强度(P=0.765)和阳性比率(P>0.05)均无显著差异,而方法 2和方法 3中抗体的阳性比率和染色强度均有不同程度下降(P<0.05)。结论:免疫组织化学双染技术在唾液腺淋巴上皮性病变中的最佳染色方法为先进行阳性定位于细胞核如Ki-67的染色,配合使用DAB显色剂,后进行阳性定位于细胞膜或细胞质如AE1/AE3或CD20cy的染色,配合使用AEC显色剂。

免疫组织化学法双色银染原位杂交与荧光原位杂交技术检测乳腺癌HER-2基因状态的应用

目的:比较免疫组织化学法(IHC)、双色银染原位杂交(DISH)、荧光原位杂交技术(FISH)对乳腺癌HER-2基因状态的应用效果。方法:回顾性的选取2017年1月至2019年12月我院收治的180例乳腺癌患者作为研究对象,均为女性、单侧,取组织标本行IHC、DISH、FISH检查HER-2。结果:180例患者中各检测方式对HER-2基因的检查效果:IHC检查HER-2表达阴性118例、HER-2表达阳性49例,可疑阳性13例;DISH检查HER-2基因扩增56例、无扩增107例、不确定17例;FISH检查HER-2扩增54例、无扩增107例、不确定19例。各检测方式比较:DISH与IHC检查HER-2基因的Kappa值为0.788,一致性较好;FISH与IHC检查HER-2基因的Kappa值为0.784,一致性较好;DISH与FISH检查HER-2基因的Kappa值为0.939,一致性高。结论:IHC、DISH、FISH均可对乳腺癌患者的HER-2基因状态行评估,可以IHC作为筛查手段,若医疗资源许可应当结合DISH检查结果制定治疗方案。

S-100/CKpan免疫组化双染技术在结直肠癌周围神经侵犯诊断中的应用

近年我国结直肠癌的发病率和病死率呈逐年上升趋势[1]。在结直肠癌的诊断中,周围神经侵犯与不良预后密切相关,是影响结直肠癌患者预后的独立危险因素,也是相关病理结果中不可或缺的一环[2]。目前结直肠癌周围神经侵犯的诊断主要依赖病理医师对病理标本HE染色和相应免疫组化结果的判读。

EBER原位杂交结合CK免疫组织化学双染在诊断鼻咽癌中的应用价值

目的探讨全自动免疫组织化学仪行EB病毒早期RNA(Epstein-Barr virus early RNA,EBER)与细胞角蛋白(cytokeratin,CK)双染在鼻咽癌诊断中的应用价值。方法收集我院2018年1月至2019年12月鼻咽活检组织60例,根据诊断结果进行分组,A组为鼻咽非角化型未分化性癌30例,B组为上皮性病变30例。在VENTANA全自动免疫组织化学仪平台上分别对这两组病变进行CK免疫组织化学染色、EBER原位杂交、EBER原位杂交结合CK免疫组织化学(EBERCK)双染标记,其中双染再分为是否复染苏木素,比较染色情况。结果免疫组织化学CK单染A、B组均可见阳性细胞;原位杂交EBER单染A组鼻咽癌细胞阳性,B组表达呈阴性;EBER-CK双染A组鼻咽癌细胞呈双阳性,B组病变细胞呈CK阳性、EBER呈阴性,未见双阳性表达;EBER-CK双染复染苏木素后的表达与未复染苏木素的表达相同,但对比差,不易观察。结论全自动免疫组织化学仪行EBER-CK双染有助于鼻咽癌组织学诊断,不复染苏木素效果更佳,值得推广。

血管性痴呆小鼠海马胆碱乙酰转移酶免疫组织化学变化特征

目的 观测血管性痴呆小鼠海马神经元胆碱乙酰转移酶免疫组织化学变化特征。方法 双侧颈总动脉线结 ,反复缺血—再灌注法制备模型 ,利用跳台试验和水迷宫试验观测其行为学改变 ,采用免疫组织化学技术观测小鼠海马神经元胆碱乙酰转移酶的表达变化。结果 模型组小鼠学习、记忆成绩较假手术组明显降低 (P <0 .0 1) ,其海马胆碱乙酰转移酶表达也明显下降 (P <0 .0 1)。结论 血管性痴呆小鼠学习、记忆成绩下降与其海马胆碱乙酰转移酶低水平表达有关。

TUNEL与免疫组织化学双染色技术的应用

TUNEL作为一种敏感性高、使用方便的检测细胞凋亡的技术方法早已被广泛应用.但是,我们在实际工作中往往还要使用多种其他技术方法展开多层次的研究,以解决凋亡细胞的组织来源、形态学定位和其调节机制等诸多问题.

免疫组化双染技术在淋巴瘤亚型检测中的应用

目的:观察免疫组化双染技术在淋巴瘤亚型检测中的应用效果。方法:选取23例淋巴瘤患者和12例淋巴增生患者作为观察对象。取患者淋巴组织,经石蜡切片采用免疫组化双染技术,检测CD3、CD20/CD45RO、CD79a表达水平,并比较其在淋巴瘤和淋巴增生患者的表达阳性率。结果:B细胞的CD20阳性显红色、CA79a阳性显棕色;T细胞的CD3阳性显棕色、CD45RO阳性显红色。淋巴瘤患者CD3、CD20/CD45RO、CD79a检测阳性率为82.61%(19/23),明显高于淋巴增生患者的25.00%(3/12),差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:免疫组化双染技术用于淋巴瘤患者CD3、CD20/CD45RO、CD79a检测的阳性率较高。

微波抗原修复法在免疫组织化学双标记技术中的应用

微波抗原修复法在免疫组织化学双标记技术中的应用孙保存赵秀兰章明放林建韶随着免疫组织化学方法的普及，双标记技术的应用日益增多。但该技术操作复杂，影响因素多，不易获得满意结果。利用微波辐射对组织抗原进行修复可明显提高免疫组化染色效果。我们在对克隆病组织中...

SMA/CK双染技术在鉴别乳腺疾病中的应用

目的:免疫组化双染技术是指在一张切片上同时显示两种不同的抗原,为病理诊断和科研提供了更加直观和详实的依据。探讨平滑肌肌动蛋白/角蛋白免疫组化双染技术在乳腺疾病诊断以及鉴别诊断中的应用。方法:对乳腺正常组织、良性病变、原位癌、乳腺癌早期浸润以及浸润性癌共30例进行标记。结果:乳腺正常组织、良性病变和叶状囊肉瘤中腺上皮细胞呈鲜红色,肌上皮细胞连续性围绕并形成棕色花冠样;原位癌癌巢周围肌上皮细胞数目减少,呈细绳样连续或不连续围绕;乳腺癌早期浸润中早期浸润灶及浸润性癌癌巢周围肌上皮细胞大部分消失或无肌上皮细胞围绕。结论:从乳腺正常组织、良性病变到原位癌、早期浸润癌以及浸润性癌,肌上皮细胞的消失是一逐渐发展的过程,SMA/CK免疫组化双染技术有助于乳腺疾病的诊断和鉴别诊断。

肾脏标本的原位杂交与免疫组织化学双标记技术

我们利用小鼠单侧输尿管梗阻(UU0)模型,采用地高辛标记的细胞黏附分子-1(ICAM-1)cDNA探计与单核巨噬细胞(ED-1)抗体在同一切片上观察了肾间质中ICAM-1 mRNA及ED-1抗原的表达,取得了满意的效果.

鸡尾酒双染CD31/D2-40和CKpan在脉管癌栓病理诊断中的应用价值

脉管癌栓与肿瘤患者的术后辅助治疗及预后关系密切。近年多采用免疫组化CD31/D2-40标记血管、淋巴管内皮细胞,然而仅使用单项的免疫组化标记,仍无法确定脉管内细胞团是否有癌细胞,免疫组化鸡尾酒双染法是一种可以在组织中同时标记两类不同抗原的方法,可同时双染脉管内皮细胞和其内癌细胞[1-2]。本实验联合检测CD31/D2-40和上皮细胞标志物(CKpan),分别行HE染色、免疫组化单染CD31/D2-40、鸡尾酒双染CD31/D2-40/CKpan,分析鸡尾酒双染法在脉管癌栓病理诊断中的价值。

MUM1/CD38双染在诊断慢性子宫内膜炎中的应用

慢性子宫内膜炎是妇科常见疾病,是导致不孕和流产的重要原因。该病临床表现无特异性,病情易反复,需进行诊断性刮宫术联合组织内膜病理检查方可确诊。慢性子宫内膜炎的病理诊断依据是在子宫内膜间质中发现异常浆细胞浸润。本文采用免疫组化染色技术对子宫内膜组织分别进行CD38、CD138及MUM1/CD38标记,通过比较CD38和CD138免疫组化染色法与MUM1/CD38双染技术的差异。

双探针显色原位杂交技术在乳腺癌HER2基因检测中的应用

目的:通过双探针显色原位杂交技术检测乳腺癌HER2基因的状态,评估双探针显色原位杂交技术的临床应用价值。方法:选取存档蜡块82例,分别用免疫组化及双探针显色原位杂交两种方法对Her-2基因及蛋白进行检测,并采用四格表卡方检验、配对卡方检验及Kappa检验作相关统计学分析。结果:两种方法检测结果不存在显著性差异(P>0.05);就两种方法检测结果的一致性分析而言,两种方法所得出的检测结果存在较好的一致性(P<0.05)。结论:双探针显色原位杂交技术检测乳腺癌HER2基因扩增结果与免疫组化检测HER2蛋白过表达结果高度相似,可作为检测HER2基因状态的有效方法。

p16/Ki-67手工染色与全自动免疫组化仪染色效果对比

p16蛋白是细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂,p16在细胞周期的阻滞期具有抑制细胞增殖的功能[1]。Ki-67表示细胞周期进展及增殖活跃[2]。两者同时表达在一个细胞周期则提示细胞周期失调。正常生理状态下,p16和Ki-67的表达相互制约,不会同时表达于一个细胞中。若p16/Ki-67免疫细胞化学双染检测阳性,提示子宫颈上皮内病变2级(cervical intraepithelial neoplasias 2,CIN2)及以上病变[3-6]。

结缔组织生长因子在增生性玻璃体视网膜病变增生膜中的表达

目的观察结缔组织生长因子(CTGF)在增生性玻璃体视网膜病变(PVR)增生膜中的表达,并鉴别增生膜中阳性细胞来源。方法采用SABC免疫组织化学方法对玻璃体切割手术获得的43例PVR增生膜进行CTGF蛋白的检测,并采用免疫荧光双标记技术在阳性表达的增生膜和正常人眼球标本中判定CTGF阳性细胞来源。结果免疫组织化学显示PVR增生膜中阳性细胞形态多是一类胞体为长圆形或多角形,胞浆丰富的上皮样细胞。17例C2-C3级膜中12例阳性,26例D1-D3级膜中19例阳性,其染色反应为阴性"-"、弱阳性"+"、阳性"2+"和强阳性"3+"的分别有5、3、6、3例和7、5、8、6例,总阳性率分别为70.6%和73.1%。统计学分析CTGF阳性表达与膜分级问无相关性(P>0.1)。免疫荧光双标记法显示PVR增生膜中有RPE、巨噬细胞、神经胶质细胞,CTGF阳性细胞来源于RPE细胞;正常眼球RPE层不表达CTGF。结论正常眼球RPE层不表达CTGF,PVR形成过程中RPE细胞在TGF-β1等生长因子的刺激下,CTGF表达上调,表明CTGF参与了PVR增生膜的形成和发展。

细胞周期蛋白G2在胃癌组织中的表达和其对胃癌细胞株体外增殖影响的研究

目的研究G型细胞周期蛋白(cyclin)家族中的新成员cyclinG2在胃癌组织中的表达和其对胃癌细胞株SGC7901体外增殖的影响。方法通过免疫组织化学技术检测40例胃癌标本中cyclinG2蛋白的表达情况并进行显微图像分析;利用阳离子介导的脂质体转染试剂将包含有cyclinG2的真核表达载体pIRESG2转染SGC7901,经G418克隆筛选后获得稳定表达cyclinG2的细胞克隆,噻唑蓝法(MTT)比色法测定转染后细胞增殖活性的改变。结果①CyclinG2在非癌组织、分化型癌和差分化型癌组织中的阳性率和表达强度逐渐下降且差异有统计学意义(P<0.01)。②转染pIRESG2获得的克隆细胞的体外增殖能力降低(P<0.01)。结论CyclinG2基因很可能是一种候选的抑癌基因,随着胃癌恶性程度的增加其表达水平降低;外源性基因转染导致的cyclinG2异常性高表达可显著抑制胃癌细胞株的体外增殖能力。

辛芷鼻敏胶囊对大鼠变应性鼻炎脾脏组织核转录因子-κB和白介素-5表达的影响及相关性

目的探讨辛芷鼻敏胶囊对实验性大鼠变应性鼻炎(A llergic rh in itis,AR)脾脏组织核转录因子-κB(Nuc lear factorkappa B,NFκ-B)和白介素-5(Interleuk in-5,IL-5)表达及相互关系的作用,明确药效机理。方法通过造模的大鼠灌服辛芷鼻敏胶囊及与同类药物对照,用免疫组化Evision方法半定量检测脾脏组织NFκ-B(亚单位P65)的活性细胞表达及双抗体夹心酶联免疫吸附技术(Enzym e labeled immunosorbent assay,ELISA)定量测定IL-5的表达。结果实验药物组的NF-κBP65的阳性细胞比例和IL-5含量明显低于模型组及阳性对照组(P<0.05);且NFκ-BP65的活性细胞比例与IL-5的表达呈正相关(r=0.935 5、P<0.05)。结论辛芷鼻敏胶囊可能通过降低核转录因子-κB活性,抑制大鼠AR发病过程中IL-5的表达,进而减少嗜酸粒细胞(Eosinoph il,EOS)的浸润而控制症状。