骨髓标本中免疫组织化学及DNA原位末端标记双重染色技术的应用

为扩展免疫酶标记分子病理学技术在血液病基础与临床研究中的应用 ,我们探索了碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶(APAAP)免疫组化和 DNA原位末端标记 (ISEL)技术在骨髓涂片和切片 (乙二醇甲基丙烯酸酯 GMA冷包埋 )中联合应用 (双重染色 )的方法 ,结果令人满意。

采用双重免疫组织化学及免疫电镜方法可将α-平滑肌肌动蛋白定位于乳腺癌间质新生血管周细胞

目的 观察周细胞形态特点 ,并寻找其标记物。方法 应用双重免疫组织化学及免疫电镜方法 ,观察α -平滑肌肌动蛋白 (α -SMA)在周细胞内的表达情况。结果 免疫组织化学染色发现α -SMA在周细胞内表达 ,而在内皮细胞内不表达 ;免疫电镜可见α-SMA仅定位于周细胞。结论 免疫组织化学方法和免疫电镜方法是一种有效的实验手段 。

运用双重免疫组织化学方法研究骨性关节炎关节软骨细胞的胶原表型

目的 :研究原发性骨性关节炎 (osteoarthritis,OA)关节软骨中软骨细胞的胶原表型。方法 :运用抗Ⅱ型、Ⅲ型及Ⅹ型胶原单克隆抗体 ,对OA关节软骨标本分别进行Ⅹ型和Ⅱ型胶原以及Ⅹ型和Ⅲ型胶原双重免疫组织化学染色。结果 :在原发性OA关节软骨的深层和钙化层软骨细胞中 ,存在Ⅹ型和Ⅱ型胶原以及Ⅹ型和Ⅲ型胶原的共同分布现象。同一个簇聚软骨细胞团中不同细胞的胶原表型也各不相同。结论 :原发性OA关节软骨细胞在疾病环境中发生进一步分化 ,在不同的分化阶段细胞的胶原表型不同 ,其中早期肥大软骨细胞能够同时合成Ⅹ型和Ⅱ型胶原以及Ⅹ型和Ⅲ型胶原。

免疫组织化学实验技术的体会

免疫组织化学技术是在组织化学的方法上结合免疫学的理论和技术发展起来的一门新技术。它具有较高的敏感性、精确性、特异性强和操作简单等优点。其原理是利用抗原与抗体间的特异性结合原理和特殊的标记技术，对组织和细胞内的特定抗原与抗体进行定位、定性，通过化学反应使标记物显示一定的颜色，并借助显微镜等对其颜色进行观察，以达到检测抗原物的目的。在科研和临床病理诊断应用广泛。

一种简便、可靠的免疫组织化学双重标记新方法

免疫组织化学双重或多重标记染色能同时在一张组织切片或一个细胞内证实多种抗原存在，是医学基础研究和临床病理形态学研究常用的方法。目前免疫双重标记（双标）实验多采用碱性磷酸酶和辣根过氧化物酶双酶显色系统，

酶组织化学和免疫金显示大鼠胰淋巴管及其多肽激素转运的意义

目的探讨胰腺内脉管系的分布特点及其多肽激素转运的意义。方法应用常规HE染色、5’ 核苷酸酶和碱性磷酸酶 (5’ Nase ALPase)双重组织化学染色、免疫金标记外源性胰岛素 (immuno goldmarkingexogenousinsulin ,IGMEI)注射技术 ,对大鼠胰组织冷冻切片进行了光镜 (LM )、扫描电镜 (SEM )二次电子和背散射电子图像(secondaryandbackscatteredelectronimages,SEI ,BEI)观察。 结果①经HE和 5’ Nase ALPase染色处理的胰组织切片LM观察表明 ,在大鼠胰腺内、较大的胰岛周围甚至内部 ,不仅存在血管 ,而且分布有丰富的淋巴管样结构 ;血管呈现ALPase强阳性蓝色反应 ,淋巴管表现 5’ Nase强阳性褐色反应。②免疫金标记胰岛素注射的胰组织切片SEM观察表明 ,SEI只显示胰腺的组织构造 ;BEI可显示标记金颗粒的背散射电子 ,主要存在于胰结缔组织间隙或组织通道、淋巴管或毛细淋巴管内。然而 ,胰腺的血管或毛细血管内 ,无背散射电子或BEI微弱。结论在较大的胰岛周围甚至内部 ,不仅存在血管 ,也分布有淋巴管 ;胰腺组织液的淋巴回流 ,对于胰岛素等多肽激素的正常转运 。

免疫组织化学技术的某些进展

随着免疫组织化学技术的广泛应用,最近几年来又出现了一些新的制剂,标记技术及染色方法,进一步提高了该技术的特异性,灵敏性及定位精确性。本文仅就其中一些主要者作一简介。一、有关制剂(一)单克隆抗体单克隆抗体是指每个B细胞纯系产生的抗体。每个B细胞表面的抗原受体只特异地识别一种抗原决定簇,因此产生的抗体非常纯。这些以一株单细胞系产生的抗体称为单克隆抗体,简称McAb。

肌肉活检组织中NADH-TR染色与免疫组化双重染色技术

对肌肉活检标本进行还原型辅酶Ⅰ四氮唑还原酶（NADH—tetrazolium reductase，NADH—TR）染色可区分不同的肌纤维结构，是神经肌纤维病变诊断的重要指标之一，免疫组化染色有利于观察肌纤维不同部位蛋白变化而进一步确定病变性质。在同一张切片上进行NADH—TR染色与免疫组化双重染色，可同时显示不同染色成分，为病理诊断提供更丰富的形态学依据。现将方法介绍如下。

免疫组化双重标记联合特殊染色技术应用于胶质瘤血管新生的分析

胶质瘤是好发于成人的原发性中枢神经系统肿瘤,约占恶性脑肿瘤的81%[1]。血管新生化是胶质瘤,尤其是胶质母细胞瘤(glioblastoma,GBM)的突出组织病理学特征,且与其侵袭性和临床不良预后密切相关[2]。因此,探寻胶质瘤中特殊的促血管新生因子,对于研发阻断肿瘤源性血管发生的精准治疗策略,改善这类血管化肿瘤的临床疗效,显得尤为重要。本实验联合应用免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)双重标记和过碘酸雪夫(periodic acid-Schiff,PAS)特殊染色技术,发现胶质瘤细胞内生性的一种生长因子——神经胶质成熟因子-β(glia maturation factor-β,GMF-β)的表达与肿瘤血管新生的相关性。

双重免疫组化技术在乳腺癌组织芯片中的应用

在生物医学和临床研究实践中，经常需要检测两种不同物质是否在同一样品或同一种细胞中共存，最好使用双重染色法在同一个组织样本上进行杂交。双重染色的方法有两种类型，免疫酶组织化学和免疫荧光化学法。目前，在实体肿瘤中，由于甲醛固定石蜡包埋组织过高的荧光信号，

微波抗原修复法在免疫组织化学双标记技术中的应用

微波抗原修复法在免疫组织化学双标记技术中的应用孙保存赵秀兰章明放林建韶随着免疫组织化学方法的普及，双标记技术的应用日益增多。但该技术操作复杂，影响因素多，不易获得满意结果。利用微波辐射对组织抗原进行修复可明显提高免疫组化染色效果。我们在对克隆病组织中...

免疫组织化学广谱细胞角蛋白与维多利亚蓝联合双重染色在评估结直肠癌pT3和pT4a分期中的应用价值

目的:探讨使用免疫组织化学广谱细胞角蛋白(CKpan)与维多利亚蓝联合双重染色(简称联合双染)在评估结直肠癌腹膜弹力纤维网侵犯(elastic fiber lamina invasion,ELI)的可行性,评估结直肠癌ELI和临床病理预后因素之间的关系,为结直肠癌术后患者提供一个更准确的病理分期标志物。方法:收集2012-2019年山西省肿瘤医院手术切除结直肠癌标本104例,术前影像学和术中手术医师考虑cT4a期,而术后病理诊断为pT3期。另外选取25例pT4aN1M0病例作为对照。对于前者,选取肿瘤细胞距离浆膜表面最近的蜡块,做联合双染。检测ELI的阳性率并分为3组:ELI(+)组、ELI(-)组、弹力纤维网未着色组,进行统计学分析。结果:联合双染的ELI(+)检出率为51.9%(54/104)。弹力纤维网未着色组16例、ELI(-)组34例和ELI(+)组54例之间,在淋巴管血管受侵、浆膜表面回缩超过5 mm伴纤维化、肌肉层向黏膜面抬升超过5 mm、淋巴结转移、5年无病生存率和5年总生存率之间差异有统计学意义( P<0.05)。ELI(+)组和pT4aN1M0之间差异无统计学意义( P>0.05)。多因素分析显示淋巴结转移、淋巴管血管侵犯、ELI(+)、浆膜表面回缩伴纤维化超过5 mm、肌肉层向黏膜面抬升超过5 mm是影响结直肠癌患者术后转归的独立危险因素。 结论:联合双染用于判断结直肠癌是否有ELI,为评估结直肠癌患者pT3和pT4a分期提供了一个简单有效的方法,建议在常规工作中开展。

双重免疫组化染色检测DLK1与PCNA在肝细胞癌组织中的表达及临床意义

目的探讨双重免疫染色检测DLK1蛋白与增殖细胞核抗原(PCNA)在不同分化程度肝细胞癌(HCC)中的表达及临床意义。方法用双重免疫组化染色方法检测HCC组织(45例)、癌周肝硬化组织(20例)及肝局灶性结节性增生(FNH)组织(20例)中DLK1及PCNA的表达。结果 DLK1与PCNA在HCC组、肝硬化组织及FNH组织中表达率均为100%;两者阳性表达水平与HCC恶性程度呈正相关。DLK1与PCNA在癌周肝硬化组及FNH组中的表达水平均较HCC组低(P<0.05),DLK1/PCNA在FNH组中的表达水平较癌周组织低(P<0.05)。结论DLK1与PCNA的表达均与HCC的恶性程度呈正相关,同时高阳性表达DLK1与PCNA的HCC恶性程度更高,双重免疫组化染色检测DLK1与PCNA的表达更能体现肿瘤的恶性程度。