盐酸水解暴露抗原促进免疫组织化学反应的研究

盐酸水解暴露抗原促进免疫组织化学反应的研究熊正文，胡海霞，李春光，苏红，李自强，田玉旺，邓永江（张家口解放军第２５１医院病理科．张家口０７５０００，北京军区总医院病理科．北京１００７００）免疫组织化学技术已广泛应用于临床病理诊断、神经解剖、组织胚胎等...

应用微波技术对脱色后的H．E切片进行免疫组织化学反应的方法及应用

应用微波技术对脱色后的Ｈ．Ｅ切片进行免疫组织化学反应的方法及应用苏红，谷化平，熊正文，胡海霞（中国人民解放军第二五一医院病理科张家口０７５０００）在日常的病理工作中经常会遇到因组织块很小，所获得有意义的组织、细胞数太少，制成的切片很有限，或外地送检的...

豚鼠胆囊SP免疫组织化学反应特点及电镜观察

研究采用 ABC免疫组化方法及电镜观察发现 :豚鼠胆囊含有 SP免疫反应的神经元、神经纤维及肥大细胞。这些神经纤维束是被神经膜细胞完全或不完全包裹的无髓神经纤维 ,其神经纤维内含有的突触小泡形态大小不一 ,电镜下分可为3种类型 :1以小型无芯小泡为主以及少量大型有芯小泡。 2以小型有芯小泡为主以及少量无芯小泡和大型有芯小泡。 3以大型有芯小泡为主以及少量小型无芯小泡。用 SP免疫电镜组化方法观察 ,豚鼠胆囊的 SP免疫反应阳性神经纤维内散在分布的突触小泡多为第 3种。但在血管、淋巴管周围 SP免疫反应阳性神经纤维内的突触小泡多为小型有芯小泡。胆囊除了受肾上腺素能神经支配外 ,尚受 SP等肽能神经的支配。本研究对豚鼠胆囊

提高免疫组化反应的抗原修复方法

目的 探讨免疫组织化学反应不同预处理方法对反应结果的影响。方法 对5 0例经10 %中性福尔马林液固定过的组织,经脱水、石蜡包埋,制成切片,分别采用3种不同方法作预处理后,进行免疫组织化学(S P法)染色。结果 石蜡组织切片免疫组化反应预处理,采用中温水浴抗原修复法,其阳性表达率为5 2 .6% ,脱片率为2 .0 % ;采用高压锅抗原修复法,其阳性表达率为47.4% ,脱片率为2 0 .0 % ;采用水沸抗原修复法,其阳性表达率为3 9.5 % ,脱片率为12 .0 %。结论 免疫组化反应采用中温水浴抗原修复法作预处理,石蜡组织切片阳性表达率较高压锅抗原修复法提高了5 .2 % ,P <0 .0 5 ,较水沸抗原修复法提高了13 .1% ,P <0 .0 5 ;采用中温水浴抗原修复法石蜡组织切片脱片率较高压锅抗原修复法降低了18.0 % ,P <0 .0 1,较水沸抗原修复法降低了10 .0 % ,P <0 .0 1。预处理采用中温水浴抗原修复法,即提高了免疫组织化学反应阳性表达率,又提高了制片质量,操作方法易于掌握,是1种理想的免疫组化反应预处理方法,值得推广。

NMDA受体亚单位NR1在长期培养大鼠海马脑片中的免疫活性变化

目的 研究NMDA受体亚单位NR1在长期培养大鼠海马脑片各区中免疫组织化学反应活性变化规律。方法 将新生 6～ 9天大鼠海马和齿状回切成 4 0 0 μm厚脑片 (即海马脑片 ) ,分别体外培养 1、2、3、4、5周时再作 2 0 μm厚冰冻切片 ,行NR1免疫组织化学反应和图像分析。 结果 NR1在培养各周海马脑片各区锥体细胞和颗粒细胞胞体的免疫反应均呈阳性 ,胞膜深染 ,胞质淡染。培养 1周时 ,其反应强度为CA3区 >CA1区 >齿状回(DG) ;之后则为CA1区 >CA3区 >DG ;3周时各区反应均达高峰。结论 NR1在长期培养大鼠海马脑片各区的免疫活性有时空差异 。

脊髓内感觉与运动单突触联结的谷氨酸样免疫组化观察

实验用SD成年大鼠8只，其中3只做腰4、腰5脊神经背根切除术，成活二周后，经10％水合氯醛深度麻醉，用含2．5％戊二醛和1％多聚甲醛进行心脏灌流。取相应节段(L4～L5)脊髓及脊神经节入上述灌流液冰冻后固定过夜，经震荡切片后按常规脱水，EPON812包埋和半薄切片，用抗谷氨酸单克隆抗体进行免疫组织化学反应。

中华鳖胃肠胰内分泌细胞的鉴定与定位

应用过氧化物酶标记的链霉亲和素 (Streptavidin peroxidase简称S -P法 )免疫组织化学技术 ,用抗胰高血糖素、胃泌素、生长抑素、5 羟色胺抗体对中华鳖 (Trionyxsinensis)的胃、肠、胰内分泌细胞进行研究。结果表明 :5 HT细胞在消化道各段均有分布 ,以小肠密度最高 ,胃、大肠、直肠其次 ,食管最少。Som细胞在胃底部、幽门部和小肠各段密度较高 ,胃贲门部、大肠和直肠密度较低。Gas细胞分布于胃体部、幽门部和小肠各段 ;胃贲门部、大肠和直肠未检出Gas细胞。Glu细胞在消化道各段均未检出 。

侧脑室注射钩藤碱增加大鼠心血管相关核团中c-fos的表达

目的研究侧脑室注射钩藤碱(Rhy)对大鼠脑内心血管相关核团中c-fos表达的影响。方法应用Fos蛋白免疫组化技术。结果侧脑室注射Rhy诱发脑干的延髓头端腹外侧核(RVL)、蓝斑核(LC)、旁巨细胞外侧核(iPGL),下丘脑的室旁核(PVN)、视上核(SON)等多个部位的心血管中枢出现大量Fos样免疫反应(FLI)神经元。L型-钙通道开放剂Bayk 8644可明显减弱Rhy的效应。蛋白酪氨酸磷酸酶抑制剂正矾酸钠也可明显减弱Rhy的效应。结论Rhy可兴奋脑内多个心血管相关核团的神经元,其机制可能与阻断神经元上的钙通道并进而抑制蛋白质磷酸化有关。

哮喘大鼠肺内SP阳性纤维的变化和Fos蛋白表达的形态学研究

为探讨P物质(SP)和Fos蛋白与哮喘发病的关系,本实验采用免疫组织化学方法及计算机图像分析技术对正常对照大鼠和哮喘大鼠肺内SP免疫阳性纤维的分布变化及Fos蛋白的表达情况进行了研究。结果显示:(1)正常对照组大鼠肺组织内可观察到SP阳性纤维分布于支气管至终末细支气管和肺血管壁内,但呼吸性细支气管和肺泡壁内少见SP阳性纤维。哮喘组大鼠肺内SP阳性纤维的数量及分布均发生了明显变化,从肺内支气管到终末细支气管均有较密集的SP阳性纤维呈束走行;且呼吸性细支气管和肺泡壁内也出现了SP阳性纤维。哮喘组大鼠肺内SP阳性纤维的数量明显高于正常对照组大鼠(P<0.05)。(2)正常对照组大鼠的肺内几乎不表达c-fos基因,但在哮喘组大鼠肺内可观察到许多Fos阳性细胞,这些细胞主要为炎性细胞和平滑肌细胞。以上结果表明,肺内SP阳性纤维增生及c-fos基因表达与哮喘发病密切相关。

胃癌及胃癌前病变中E-cadherin及其相关蛋白的表达

目的:探讨Ecadherin、αcatenin、βcatenin和γcatenin与胃癌发生及胃癌生物学行为的关系。方法:用免疫组织化学方法检测Ecadherin及αcatenin、βcatenin、γcatenin在43例胃癌,22例胃癌前病变及10例正常胃粘膜中的表达。结果:在胃癌前病变中Ecadherin,αcatenin、βcatenin、γcatenin的异常表达率分别为22.7%、22.7%、18.2%、27.3%,分别与胃癌Ecadherin(53.5%),αcatenin(55.8%)、βcatenin(51.2%)的异常表达率相比差异有显著性(P<0.05)。进展期胃癌异常表达率较早期胃癌高,除γcatenin外差异均有显著意义(P<0.05或P<0.01)。低分化胃癌Ecadherin的异常表达率较高,胃癌浸润到浆膜外及伴随淋巴结转移时Ecadherin、βcatenin的异常表达率升高(P<0.05或P<0.01)。76.7%的胃癌及50.0%的胃癌前病变Ecadherin系统中至少有一项表达异常,二者差异有显著性(P<0.05),且至少有一项为表达异常病人的淋巴结转移率明显高于无蛋白异常表达者(P<0.01)。结论:Ecadherin及部分相关蛋白的表达异常与胃癌的分化程度、临床分期、浸润深度及淋巴结转移密切相关,Ecadherin系统在由胃不典型增生转化为胃癌的过程中起作用,联合检测Ecadherin及αcatenin、βcatenin、γcatenin可提高检测结果的参考价值。

肾缺血引起大鼠儿茶酚胺神经元Fos表达(英文)

实验应用Fos蛋白和酪氨酸羟化酶 (tyrosinehydroxylase ,TH)的双重免疫组化方法 ,观察肾脏动脉阻断(renalarteryocclusion ,RAO)是否激活脑干中核团的儿茶酚胺能神经元。所得结果如下 :(1)脑干中Fos样蛋白的基础性表达低 ;RAO可诱发孤束核 (nucleustractussolitarius ,NTS)、最后区 (areapostrema ,AP)、巨细胞旁外侧核 (paragi gantocellularislateralis ,PGL)和蓝斑 (locuscoeruleus ,LC)核团中许多神经元显示Fos样免疫反应 (Fos likeimmunoreactivi ty ,FLI)。 (2 )NTS、AP、PGL和LC核团中含有较多的儿茶酚胺能神经元 ;RAO能激活其中的部分儿茶酚胺能神经元。 (3)腺苷受体阻断剂 8 苯茶碱可明显减弱RAO所致的上述效应。以上结果表明 ,肾脏短暂缺血能激活脑干内的一些神经核团以及其中的部分儿茶酚胺能神经元。此效应可能是肾缺血时腺苷释放作用于肾内腺苷受体后引起肾传入神经活动增加的结果。

侧脑室注射肾上腺髓质素增加大鼠心血管相关核团中c-fos的表达并激活脑内一氧化氮神经元(英文)

本研究利用Fos蛋白和一氧化氮合酶(nNOS)双重免疫组化方法,观察侧脑室注射肾上腺髓质素(adrenomedullin,ADM)对大鼠心血管相关核团中c-fos表达及一氧化氮神经元的影响,以探讨ADM在中枢的作用部位并研究其在中枢的作用是否有NO神经元参与。侧脑室注射ADM(1 nmol/kg,3 nmol/kg)诱发脑干的孤束核、最后区、蓝斑核、臂旁核和外侧巨细胞旁核,下丘脑的室旁核、视上核和腹内侧核以及前脑的中央杏仁核和外侧缰核等多个部位的心血管中枢出现大量Fos样免疫反应神经元。侧脑室注射ADM(3 nmol/kg)引起脑干的孤束核、外侧巨细胞旁核,下丘脑的室旁核、视上核内的Fos-nNOS双标神经元增加;ADM(1 nmol/kg)亦可引起室旁核、视上核内的Fos-nNOS双标神经元增加,而对孤束核、外侧巨细胞旁核内的Fos-nNOS双标神经元无影响。降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)受体拮抗剂CGRP_(8-37)(30 nmol/kg)可明显减弱此效应。以上结果表明,ADM可兴奋脑内多个心血管相关核团的神经元并激活室旁核、视上核、孤束核及外侧巨细胞旁核内的一氧化氮神经元,此效应可能部分由CGRP受体介导。

侧脑室注射肾上腺髓质素对大鼠脑内心血管相关核团儿茶酚胺神经元及c-fos表达的影响

目的和方法:利用Fos蛋白和酪氨酸羟化酶(TH)的双重免疫组化方法,观察侧脑室注射肾上腺髓质素对大鼠心血管相关核团中儿茶酚胺神经元及c fos表达的影响,以探讨肾上腺髓质素的中枢效应是否通过激活脑内儿茶酚胺能神经元而诱发。结果:①侧脑室注射肾上腺髓质素(3nmol/kg)诱发脑干、下丘脑及前脑等多个部位的心血管中枢出现大量Fos样免疫反应神经元。②侧脑室注射肾上腺髓质素引起最后区(AP)、孤束核(NTS)、巨细胞旁外侧核(PGL)和蓝斑核(LC)内Fos TH双标神经元明显增加。③降钙素基因相关肽受体拮抗剂CGRP8-37(30nmol/kg)可明显减弱肾上腺髓质素的效应。结论:肾上腺髓质素可兴奋脑干、下丘脑及前脑等多个部位心血管相关核团的神经元,其中枢效应通过激活儿茶酚胺能神经元而诱发,降钙素基因相关肽受体介导这一效应。

侧脑室注射肾上腺髓质素增加大鼠心血管相关核团中c-fos的表达(英文)

目的 研究侧脑室注射肾上腺髓质素 (1nmol/kg ,3nmol/kg) ,对大鼠脑内心血管相关核团中c fos表达的影响。方法 应用Fos蛋白免疫组化技术。结果 (1)侧脑室注射肾上腺髓质素诱发脑干的孤束核、最后区、蓝斑核、臂旁核和外侧巨细胞旁核 ,下丘脑的室旁核、视上核和腹内侧核以及前脑的中央杏仁核和外侧缰核等多个部位的心血管中枢出现大量Fos样免疫反应神经元。 (2 )降钙素基因相关肽受体拮抗剂CGRP8 37(30nmol/kg)可明显减弱肾上腺髓质素 (3nmol/kg)的效应。 结论 肾上腺髓质素可兴奋脑内多个心血管相关核团的神经元 ,降钙素基因相关肽受体可能介导这一效应。

侧脑室注射肾上腺髓质素激活大鼠脑内儿茶酚胺神经元(英文)

利用Fos蛋白和酪氨酸羟化酶(TH)的双重免疫组化方法,观察侧脑室注射肾上腺髓质素(ADM)对大鼠心血管相关核团中儿茶酚胺神经元c-fos表达的影响,以探讨ADM的中枢效应是否通过激活脑内儿茶酚胺能神经元而诱发。侧脑室注射ADM引起最后区(AP)、孤束核(NTS)、巨细胞旁外侧核(PGL)和蓝斑核(LC)内Fos-TH双标神经元明显增加;降钙素基因相关肽受体拮抗剂CGRP8-37(30nmol/kg)可明显减弱ADM的效应。结果表明,ADM可兴奋脑内多个心血管相关核团的神经元,其中枢效应通过激活儿茶酚胺能神经元而诱发,降钙素基因相关肽受体可能介导这一效应。

猫骶尾髓胆碱能神经成分的分布

应用单克隆抗ChAT血清(Bochringer Mannheim,1∶500)对8只猫的骶尾髓冰冻切片用AB-AEC法进行了免疫组织化学反应,其结果如下:一、ChAT免疫反应阳性细胞的分布在L_(7)-S_(2)节段前角的腹外侧核、后外侧核和后后外侧核,S_(3)、CO_(1)节段的腹内侧核和前连合核区,可见大量的ChAT免疫反应阳性神经元。