免疫组织化学Image Pro Plus图像半定量分析的参数选择

应用ImageProPlus（IPP）图像分析软件测算阳性细胞面积（area）、平均光密度值、积分光密度值，研究面积参数选择、阳性结果选色方式对免疫组织化学结果的影响，以期获得IPP图像分析免疫组织化学的标准化结果。方法：采用人工计数法将矽肺免疫组织化学结果分为低表达、中表达、高表达3组。应用IPP软件，面积选择参数分为过滤10、30、50、100以下的阳性显色；采用吸管取色、RGB、HIS3种选择阳性显色的方法；编写宏文件，计算各组阳性细胞面积、平均光密度值（MD）、积分光密度值（IOD）的均值和总和，并与人工计数法测算结果进行比较。结果：在滤过面积10-100范围内，面积参数对各组阳性细胞面积总和、IOD总和统计结果无影响，与人工计数法结果一致；采用HIS选色测算的面积总和、IOD总和与人工计数法结果一致。结论：IPP图像分析能够简易、快速地进行免疫组织化学结果的半定量分析，面积参数在一定范围内对测算结果无影响，HIS选色方式可能较吸管显色和RGB选色方式好，而IOD总和是比较可靠、稳定的半定量指标。

实验性糖尿病肺iNOS和VIP免疫组织化学观察及图像分析

目的 :探讨糖尿病大鼠肺诱生型一氧化氮合酶 (iNOS)及血管活性肠肽 (VIP)的病理变化。方法 :采用免疫组织化学方法 ,观察正常和四氧嘧啶诱导的糖尿病 4周大鼠肺内iNOS及VIP的变化 ,并进行图像分析。结果 :糖尿病 4周大鼠肺支气管上皮细胞、肺泡管上皮细胞、肺泡囊上皮细胞和动脉内皮细胞iNOS呈阳性或弱阳性 ,静脉内皮细胞、毛细血管内皮细胞iNOS呈阴性。图像分析表明 ,糖尿病鼠肺iNOS的着色面积、积分光密度和相对含量均明显低于正常大鼠肺。糖尿病 4周鼠肺支气管纤毛上皮细胞VIP呈阳性 ,支气管平滑肌肌层、支气管粘膜下腺体周围、肺间隔和肺动脉壁外膜VIP呈弱阳性或阴性 ,图像分析显示糖尿病鼠肺VIP着色面积、积分光密度和相对含量均明显低于正常大鼠肺。结论 :糖尿病肺病变不仅受自主神经影响 ,而且非肾上腺素能非胆碱能神经改变亦与之有关 ,其神经递质NO和VIP可能在糖尿病肺病变中具有重要意义。

食管鳞状细胞癌PD-L1不同抗体免疫组织化学检测的一致性分析

背景与目的:程序性死亡[蛋白]配体-1(programmed death ligand-1,PD-L1)是食管癌免疫治疗应用最广泛的疗效预测生物标志物,准确可靠的PD-L1检测对于筛查免疫治疗的潜在受益者至关重要。本研究旨在探讨食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)患者PD-L1的表达情况以及7种不同克隆号PD-L1抗体免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)检测的一致性,为规范食管癌PD-L1 IHC检测及后续临床研究提供参考。方法:收集2020年1月—2021年12月复旦大学附属肿瘤医院的146例ESCC手术切除标本,用PD-L122C3、SP263、28-8、E1L3N XP、CST E1L3N、BP6099和MXR0067种克隆号抗体进行染色,并采用联合阳性评分(comprehensive positive score,CPS)、肿瘤细胞比例评分(tumor proportion score,TPS)和免疫细胞评分(immune cell proportion score,IPS)3种评分标准,在不同临界值下对抗体的一致性进行统计学分析。结果:PD-L122C3与两种伴随诊断抗体(SP263、28-8)对比结果显示:CPS临界值为10时,3种抗体之间均一致性较好(Kappa:0.66~0.80);CPS临界值为1时,28-8与22C3、SP263抗体一致性较好(Kappa=0.80、0.65),22C3与SP263一致性一般(Kappa=0.49);TPS临界值为10%和1%时,3种抗体之间均具有很高的一致性(Kappa:0.79~0.89,0.71~0.91)。PD-L122C3与4种国产抗体(E1L3N XP、CST E1L3N、BP6099、MXR006)对比结果显示:CPS临界值为10和TPS临界值为10%时,5种抗体之间均一致性较好(Kappa:0.67~0.88,0.65~0.79);CPS临界值为1时,5种抗体之间一致性较好或一般(Kappa:0.58~0.88);TPS临界值为1%时,5种抗体之间均一致性很好(Kappa:0.85~0.92);IPS临界值为1%和10%时,5种抗体之间一致性一般或较差(Kappa:0.46~0.66,0.30~0.62)。结论:PD-L122C3与两种伴随诊断抗体(SP263、28-8)在CPS和TPS中一致性较好;PD-L122C3与4种国产抗体(E1L3N XP、CST E1L3N、BP6099、MXR006)在CPS和TPS中一致性较好,而采用IPS时不同克隆号抗体的一致性较差。这些抗体之间具有一定的可互换性,可为食管鳞状细胞癌PD-L1临床检测提供更多选择。

免疫组织化学显微图像分析技术进展

免疫组织化学是用特异性抗体显示组织化学成分的重要方法 ,是实验结果以显微图像的形式显示出来。对免疫组化图像的分析方法主要包括人工分析和计算机图像处理分析。前者简便易行 ,对实验的标准化要求不高 ,但无法做精确的量化分析 ;后者在精确性、客观性、分析速度等方面具有巨大优势 ,但目前仍不完善。本文对两种分析技术的应用现状、实验要求及特点进行了综述 。

图像处理和分析技术在免疫细胞化学和免疫组织化学中的应用

目的：探讨在图像分析仪上有效地对免疫细胞化学和免疫组织化学中阳性特征进行定量分析．方法：采用图像灰度非线性变换、特征检测和二值化操作等多种处理和分析方法对光镜下免疫组化切片进行分析和比较．结果：经上述处理后，阳性特征更加易于识别和定量，同时对２０个视野中的阳性细胞计数，比较了经上述处理后单视野中阳性细胞的平均计数值和未经上述处理只简单的进行灰度阈值特征检测的常规处理过程后平均计数值，两者差异显著（Ｐ＜０．０１）．结论：在图像分析仪上。

细胞免疫组织化学显微图像分析及实现

病理细胞免疫组织化学图像分析是显微图像分析中的一个重要内容,文章采用细胞形态学和病理学相结合的方法,将医学病理常用的手术切除组织切片经固定后,用Feulgen 染色,由图像采集系统将原始细胞图像存入计算机中,并对细胞图像进行分析、计算,得到阳性细胞的数量、面积分布、百分比分布、积分光密度以及阳性单细胞平均面积等参数,过程快速、准确,可应用于临床分析诊断.

Image-ProPlus图像分析软件在免疫组织化学定量分析中的基本应用

免疫组织化学，简称免疫组化，是应用免疫学基本原理-抗原抗体反应，即抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记在抗体上的显色剂，如荧光素、酶、金属离子和同位素等显色来确定组织细胞内抗原，对其进行定位、定性及定量的研究。比较显微测试网格和图像分析仪测试对病理组织结构的定量差别，无显著性差异［1，2］。但图像分析仪测试操作相对来说比较简便，因操作人员的主观因素造成的定量分析结果误差也相对较小，越来越多的病理图片使用病理图像分析仪进行分析［3～5］。免疫组化标本的定量分析最常用的主要有：阳性细胞数目，阳性细胞比例［6］，阳性面积［7］，光密度，积分光密度［8］。

免疫组织化学检测在乳腺癌病理诊断中的作用分析

探讨分析免疫组织化学在乳腺癌病理诊断中的作用,分析不同患者的症状表现以及病情特点。方法 本次研究在进行设置时,选择我院中收入的2019年5月至2021年12月间收入的乳腺癌60例患者作为研究对象,在患者入院后,研究人员针对患者的雌激素受体和孕激素受体进行记录,分析不同患者的阳性率,并针对患者的阳性结果将其分为对照组(n=30)与实验组(n=30)。对照组患者为雌激素受体与孕激素受体阴性,实验组患者为雌激素受体与孕激素受体阳性。研究人员针对所有患者进行免疫组织学化学检查,针对两组研究对象的腋窝淋巴结转移阳性率、阴性率以及腋窝淋巴结转移率进行对比,分析组间差异。结果 研究结果中显示阳性率高于对照组,差异显著(P<0.05)。结论 乳腺癌患者的临床发病率较高,是对女性健康产生威胁的一种严重疾病,而研究人员认为针对乳腺癌患者进行病理诊断,使选择有效的诊断方式确定患者的病情对于提高患者的疗效来说有不可忽视的作用。研究人员通过本次实验证实了免疫组织化学检测应用于乳腺癌病理诊断中效果良好,有助于提高患者的诊断。盈利具有良好的可应用价值,值得进行推广。

乳腺癌病理诊断中免疫组织化学检测的临床分析

分析乳腺癌病理诊断中免疫组织化学检测的临床应用及意义。方法 选择2019年1月~2023年1月期间在我院接受手术治疗的乳腺癌患者60例作为研究对象,根据患者手术后的激素阳性与阴性情况分为两组,分别为阳性组30例,阴性组30例,应用免疫组织化学检测,比较两组患者的检测数据差异。结果 HER-2阳性组乳腺肿瘤标本中HER-2表达水平较低,HER-2阴性组乳腺肿瘤标本中HER-2表达水平较高,(P>0.05)。此外,HER-2阳性组腋窝淋巴结转移率较低,(P>0.05)。结论 免疫组织化学检测HER-2在乳腺癌病理诊断中有重要的临床意义。通过检测HER-2的表达水平,可以确定乳腺癌的分子分型,进而指导治疗方案的选择。同时,HER-2的表达水平与乳腺癌的转移风险也存在相关性。因此,免疫组织化学检测HER-2在乳腺癌病理诊断中应用广泛,并对指导临床治疗起到重要作用。

免疫组织化学图像光度学参数的选择及测量

目的探讨免疫组织化学图像定量分析的最佳光度学指标,并对其测量方法及影响因素进行分析,以提高图像分析的精度。方法运用图像分析软件,建立统一的图像采集、分割及处理标准,对青年、老年大鼠海马CA3区突触素的平均光密度、积分光密度进行测量。结果青年组与老年组大鼠海马CA3区突触素积分光密度较平均光密度差异性更为显著。结论积分光密度与平均光密度相比将面积因素考虑在内,测量物质含量结果更为准确。

SARS患者脾淋巴细胞免疫组织化学的定量分析

目的对严重急性呼吸综合征(SARS)患者脾淋巴细胞进行定量分析,为SARS的病理变化和发病机制的探讨提供证据。方法通过免疫组织化学技术对6例SARS死亡患者脾和6例意外死亡者正常脾CD3+、CD4+、CD8+T细胞及CD20+B细胞的分布进行观察,并进行图像分析。结果SARS患者脾内的脾小体及动脉周围淋巴鞘(白髓)均遭到严重损害。动脉周围淋巴鞘的数量减少90·39%;脾小体减少80%左右,有的甚至完全消失;脾红髓广泛出血坏死。红髓内的CD3+T细胞平均数较正常减少71·76%,有的甚至完全消失,CD4+T细胞和CD8+T细胞分别平均减少86%和84%。CD20+B细胞减少80%以上。结论定量分析显示,SARS死亡患者脾中T细胞和B细胞普遍严重减少,提示SARS患者免疫系统遭到严重破坏,并可能是疾病的原发性损伤。

人宫颈上皮内瘤变和浸润癌组织中树突状细胞及T细胞的免疫组织化学定量分析

目的研究人宫颈上皮内瘤变和浸润癌组织中树突状细胞和T细胞的数量、分布变化,为人宫颈癌的诊断和生物治疗提供实验依据。方法采用免疫组织化学和图像分析技术,测定人宫颈上皮内瘤变、宫颈浸润癌和正常宫颈组织中树突状细胞表型抗原CD1a、S-100及T细胞表面分化抗原CD3、CD8阳性细胞的数量、分布和表达强度。结果与人正常宫颈组织比较,宫颈上皮内瘤变中CD1+a、S-100+、CD3+、CD8+细胞数量增多(P<0.05),与组织分级呈正相关(P<0.05),抗体表达强度增高;宫颈浸润癌中4种抗体阳性细胞数量减少,与临床分期呈负相关(P<0.05),强度略有下降。结论人宫颈上皮癌前病变至浸润癌变过程中树突状细胞和T细胞数量及抗体表达强度发生变化,提示宫颈病变局部的免疫功能发生了改变。

影响免疫组织化学敏感性反应的因素分析及对策

免疫组织化学技术是用已知标记的特异性抗体或抗原对组织内相应抗原或抗体进行定性、定位或定量检测，经组织化学反应，使标记于特异性抗体的酶、金属及荧光素等呈现出某种颜色，并借助于光镜，荧光镜及电镜等观察其颜色变化，从而了解抗原抗体结合部位和量的一门新兴检测...

乳腺癌病理诊断中免疫组织化学检测的临床分析

目的:探讨乳腺癌病理诊断中免疫组织化学检测的临床价值。方法:选取乳腺癌患者82例,根据孕激素受体(PR)、雌激素受体(ER)分为阳性组(ER+PR+)和阴性组(ER-PR-),各41例。两组均实施免疫组织化学检测,观察比较两组检测结果。结果:经检测,阳性组C-erb B-2的阳性率、阴性率等与阳性组相比差异具有统计学意义(P<0.05);而阴性组腋窝淋巴结转移率与阳性组相比显著较高,且组间差异,具有统计学意义(P<0.05)。结论:免疫组织化学检测在乳腺癌病理诊断中的临床价值非常显著,即可为患者临床诊治提供一定依据,值得应用推广。

狼疮肾炎患者肾组织CD_(134)(OX_(40))表达的免疫组织化学分析

目的 :了解狼疮肾炎 (LN)肾组织中CD13 4 (OX40 )的表达并探讨其与LN肾脏病理改变和肾功能损害的关系。方法 :用免疫组织化学方法对 4 0例LN患者肾组织CD13 4 的表达进行检测 ,并对其与LN的肾脏病理改变和肾功能损害的相关性进行分析。结果 :LN患者肾组织中 ,CD13 4 表达显著上调 ,尤其以WHOⅣ型LN更为明显。除系膜细胞、内皮细胞和远曲小管CD13 4 表达明显增强外 ,肾间质毛细血管和大血管内皮细胞亦有CD13 4 表达阳性的浸润细胞。LN肾组织CD13 4 表达与LN肾脏病理活动指数和肾功能损害显著相关。结论 :LN患者确实存在CD13 4 共刺激分子的异常表达 。

不同年龄大鼠主动脉壁凝集素组织化学的图像分析研究

本文利用凝集素组织化学的方法，结合应用ＩＢＡＳ图像分析系统对不同年龄（１０天，６个月及２年）大鼠主动脉壁的凝集素受体进行研究。在所采用的六种生物素化凝集素中（ＣｏｎＡ、ＲＣＡＩ、ＵＥＡ－Ｉ、ＰＮＡ、ＳＢＡ及ＷＧＡ），ＣｏｎＡ、ＲＣＡ－Ｉ及ＷＧＡ在大鼠主动脉壁呈阳性反应，它们在各年龄组大鼠主动脉壁内膜及外膜均表现出强阳性反应，而在中膜反应较弱。ＵＥＡ－Ｉ、ＰＮＡ和ＳＢＡ表现出无明显反应。此外，三种阳性反应凝集素在主动脉壁的反应产物随增龄而减少，图像分析结果显示其灰度值随增龄的变化趋势是逐渐增加。上述结果提示，大鼠主动脉壁含α－Ｄ－Ｍａｎｎｏｓｅ、β－ＤＧａｌａｃｔｏｓｅ、ｓｉａｌｉｃａｃｉｄ或Ｎ－ａｃｅｔｙｌ－Ｄ－Ｇｌｕｃｏｓａｍｉｎｅ残基的糖复合物含量随增龄而减少，可能使ＬＤＬ易于通透而致脂质在动脉壁沉积，加速脂纹病变的形成，从而易于导致动脉粥样硬化。

乳腺囊内乳头状癌:原位还是浸润性肿瘤? 免疫组织化学分析和临床随访结果

乳腺囊内乳头状癌（IPC）被当做是一种导管内肿瘤,但是最近有证据认为此肿瘤可能是浸润性的,因为肿瘤周围缺少肌上皮。作者评估了来自39例患者（女性35例,男性4例）的40个囊内乳头状癌的肌上皮细胞、Ⅳ型胶原的基膜,并对其临床处理和随访进行了评估。

鼻咽部非何杰金氏恶性淋巴瘤临床及免疫组织化学分析

鼻咽部非何杰金氏恶性淋巴瘤临床及免疫组织化学分析湖南省肿瘤医院（４１０００６）粟占三，陈森林，吴雄伟，蔡杰，刘保安非何杰金氏恶性淋巴瘤（ＮＨＬ）为鼻咽部除低分化鳞癌外最常见的一组恶性肿瘤［１］。其临床表现无特异性，组织学上因鼻咽癌可呈未分化型、泡状模...