免疫组织化学染色法在肝脏毛细淋巴管研究中的应用

目的评价免疫组织化学染色法在肝脏淋巴管研究中的作用。方法利用层黏蛋白单克隆抗体标记毛细血管和毛细淋巴管的基底膜,对肝脏组织进行免疫组化染色。结果毛细血管由于内皮细胞外有一层完整的基底膜,管壁呈现连续的棕褐色:而毛细淋巴管由于内皮细胞外缺乏基膜,管壁常不显色。结论:免疫组织化学染色法在肝脏毛细淋巴管的研究中是一种较为准确、客观的方法。

肌酸激酶与P53双重免疫组织化学染色法在食管癌中的应用

双重免疫组织化学染色法是在一张切片上显示2种不同抗原成分的免疫组织化学方法。这种方法可以了解不同细胞、组织之间的相互关系，甚至可以了解同一种细胞内抗原之间的相互关系121。本实验运用双重免疫组织化学染色法，在一张切片上完成了食管癌肌酸激酶（CK）与P53两种抗原的表达，用以观察CK阳性的癌细胞是否同时表达P53，现报告如下。

前列腺特异抗原和高分子量细胞角蛋白改良免疫组织化学染色法对前列腺癌的诊断作用

目的 探讨前列腺特异抗原 (PSA)和高分子量细胞角蛋白 (CK3 4βE12 )改良免疫组织化学染色法对前列腺癌鉴别诊断的作用。方法 对 5 2例疑难病例采用改良免疫组织化学染色法检查。即在同一切片的一侧贴附可靠的阳性对照组织 ,应用微波处理 ,尽可能保存和修复抗原 ,在显微镜下严格控制显色等方法以达到最佳染色效果。结果 3例前列腺不典型腺瘤样增生(AAH)、3 7例前列腺上皮内瘤 (PIN)高表达PSA与CK3 4βE12 ;3例前列腺导管内癌也表达PSA及CK3 4βE12 ;9例前列腺腺癌仅表达PSA无CK 3 4βE12表达 ;10例膀胱移行上皮癌均不表达PSA与CK3 4βE12。 结论 PSA和CK3 4βE12的改良免疫染色可以作为前列腺癌鉴别诊断的工具之一 ,对指导临床治疗可发挥重要作用。

肾组织石蜡切片Ⅳ型胶原α链免疫组织化学染色法诊断Alport综合征

Alport综合征（Alport syndrome，AS）的诊断问题日益受到关注。采用抗不同α（Ⅳ）链的单克隆抗体，对肾及皮肤活检组织进行冰冻切片免疫荧光染色对Alport综合征的诊断具有重要价值^[1]，但冰冻切片难以长期保存，异地标本难以运送，相对于此石蜡切片有其优势。日本学者曾报告，采用高压锅加热法修复肾组织石蜡切片抗原，

大鼠垂体远侧部内分泌细胞的四重免疫组织化学染色方法

本文介绍一种显示大鼠垂体远侧部内分泌细胞的四重免疫组织化学染色方法。此法以PAP 法为基础,结合 DAB 银加强法和间接免疫金标记技术。方法比较简单,所需试剂容易得到。

家兔急性心肌梗死CTnI免疫组织化学实验研究

目的研究CTnI诊断急性心肌梗死的法医病理学意义。方法结扎兔心脏左冠状动脉左旋支的左室支制作心肌梗塞动物模型。应用免疫组织化学法检测心肌梗塞区域CTnI的变化,与HE染色法进行比较。结果早期心肌梗塞组织,HE染色组尚未出现特征性梗死表现,免疫组织化学染色法可见CTnI分布以及含量变化,并且随着时间延长,变化区域扩大,且近心内膜心肌细胞同时出现变化。结论CTnI免疫组织化学检测可以应用于急性心肌梗死的诊断。

胃癌组织中上皮生长因子及其受体免疫组织化学染色

目的：通过免疫组织化学染色对增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen，PCNA．），表皮生长因子（epidermal growth factor，EGF）及表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor，EGF—R）在胃癌细胞中的表达及其关系进行观察。方法：免疫组织化学染色方法采用北京中杉金桥生物技术有限公司提供的PV-9000通用型二步法检测试剂盒的方法。计数100个以上细胞，统计阳性细胞数。根据HE染色对23例胃癌组织类型进行分型。利用Studentt测定组织类型与免疫组织化学的关系。结果：23例胃癌组织中，EGF阳性14例（60．9％），EGF—R阳性5例（21．7％），EGF与EGF—R共同阳性3例（13．0％）。EGF—R阳性组与EGFR阴性组之间在EGF的表达、病程、组织学类型、癌组织侵犯静脉以及PCNA表达等方面都有明显差异。23例胃癌中有5例EGF—R阳性表达，这5例中，利用镜像切片免疫组织化学染色法对癌组织同一部位的EGF—R阳性表达的细胞与EGF—R阴性表达的细胞中PCNA的阳性率进行统计，它们分别是（49．95±20．30）％，（28．48±18．18）％，二者之间有显著性差异（P〈0．05）。而EGF—R阳性表达胃癌细胞PCNA的阳性率（18．82±14．24）％与EGF—R＋EGF阳性表达的胃癌细胞PCNA的阳性率（18．82±14．324）％之间也有明差异（P〈0．05）可能与EGF—R阳性细胞增殖活跃有关。胃癌的分化程度、侵润静脉、浸润深度以及EGF阳性程度等项其中胃癌细胞的PCNA阳性率均未见明显差异。而早期胃癌与进展期胃癌之间PCNA阳性率有显著性差异PCNA阳性率分别是（18．86±6．78）％、（31．23±19．44）％。EGF阳性组PCNA阳性率3（4．63±17．74）％，EGF阴性组PCNA阳性率（18．82±14．24）％，在统计学上均有显著性差异，与癌细胞增殖活跃有关。结论：在胃癌组织中，EGF—R阳性表达的细胞与EGF—R阴性表达的细胞中PCNA的阳性率之间，EGF—R阳性表达胃癌细胞PCNA的阳性率与EGF—R＋EGF阳性表达的胃癌细胞PCNA的阳性率之间，EGF阳性组PCNA阳性率EGF阴性组PCNA阳性率之间，在统计学上均有显著性差异，可能与癌细胞增殖活跃有关。

结核分枝杆菌分泌蛋白ESAT-6、CFP-10在肺结核组织中的表达

目的:探究结核分枝杆菌特异性抗原ESAT-6、CFP-10在肺结核组织中的表达。方法:收集经病理学诊断的19例石蜡包埋肺结核组织标本,以20例正常肺组织(肺癌切除标本正常组织断端)为阴性对照,采用免疫组化检测ESAT-6及CFP-10,并与抗酸染色进行对比。结果:ESAT-6及CFP-10的阳性信号主要分布在结核病灶的坏死区域及其周围的巨噬细胞和多核巨细胞中,其分布与抗酸杆菌有关,范围更广。免疫组化检测ESAT-6的敏感度、特异度分别为73.68%、90.00%;CFP-10的敏感度和特异度分别为63.16%和95.00%;抗酸染色敏感度为52.63%,免疫组化的敏感度高于抗酸染色(P<0.05)。结论:采用免疫组化检测ESAT-6及CFP-10在结核诊断中有潜在的应用价值。

鹅细小病毒在雏鹅体内分布的免疫组织化学检测

采用间接免疫酶组织化学染色法对14日龄雏鹅人工感染鹅细小病毒后不同时间段病毒抗原在体内的定位及分布情况进行了检测,同时应用图像分析软件对免疫组织化学图像中的抗原强度进行了定量分析。结果显示,感染后第1天到第21天,在心、肺、脾、肝、法氏囊、胸腺、腺胃、十二指肠、空肠、回肠、盲肠、食管12种组织器官中检测到了病毒抗原。其中感染后第5天的感染组织最广泛,抗原染色强度最高,在检测的组织中以空肠的检出率最高。病毒抗原广泛分布于肠道的上皮细胞、腺上皮细胞,肺泡壁细胞和肾小管的上皮细胞内。始终未能从大脑、胰腺和骨骼肌中检测到鹅细小病毒。可见该病毒感染雏鹅后存在于患病鹅的大部分组织器官内,进一步证实该病毒是一种泛嗜性病毒。

PRRSV缺失变异毒株HB-2(sh)/2002在人工感染仔猪组织中的分布与定位

用猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)HB-2(sh)/2002滴鼻感染30日龄健康仔猪,分别于3、7、14、28、42天宰杀,用免疫组化法对呼吸道,泌尿道,生殖道和消化道的主要器官以及脑和主要淋巴器官中的病毒抗原进行了定位分析。结果表明,在各个时间段,病毒抗原阳性率最高的器官为呼吸道、消化道沿途的淋巴结,组织中的阳性细胞多数为巨噬细胞和树突细胞,从个别猪的脑、心肌、肝和呼吸道上皮的细胞检测到阳性信号,同时发现该毒株主要在巨噬细胞和呼吸道腺上皮细胞复制。

食管癌组织中Ebp1蛋白表达及意义

目的探讨Ebp1蛋白在食管癌发生、发展中的作用。方法采用免疫组化染色法检测220例食管癌患者的癌组织及其癌旁正常食管组织中Ebp1蛋白表达水平。结果食管癌组织中Ebp1蛋白阳性率显著高于正常食管组织(t=23.140,P=0.000)。单因素分析显示,与Ebp1 mRNA表达高度相关的临床参数包括年龄、家族史、淋巴结转移、病理分级、浸润深度和临床分期;多因素分析结果表明,家族史、淋巴结转移、肿瘤体积、浸润深度、病理分级均是Ebp1蛋白表达的危险因素。结论 Ebp1在食管癌发生、发展过程中起重要作用,可作为食管癌病情进展监测、转移潜能及预后评估方面的一个靶基因。

大鼠局灶性脑缺血再灌注后脑组织肾上腺髓质素的表达

目的探讨肾上腺髓质素(adrenom edu llin,ADM)在不同月龄大鼠脑缺血再灌注(I/R)脑组织的表达情况。方法采用栓线法制成大鼠大脑中动脉I/R模型,阻断血流2 h后再灌注4 h。应用免疫组织化学染色法检测不同月龄段大鼠局灶性脑I/R后血浆ADM。结果正常大鼠脑内即有ADM表达,假手术后ADM表达略有增加,但与正常对照组相比无明显差异(P>0.05);大鼠脑I/R后ADM免疫阳性细胞增多,与正常对照组及假手术组相比差异显著(均P<0.05);大鼠脑I/R后缺血侧及缺血对侧ADM免疫阳性细胞均增多,但以缺血侧区域增多最为明显(P<0.05)。老龄大鼠脑I/R后ADM免疫阳性细胞数明显高于青年大鼠(P<0.05)。结论脑I/R后ADM表达增强,ADM表达增强与血管硬化相关。

肾上腺髓质素对大鼠局灶性脑缺血再灌注后脑组织的保护作用(英文)

目的探讨肾上腺髓质素与脑缺血再灌注损伤的关系。方法采用栓线法制成大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型, 阻断血流 2 h 后进行再灌注。应用免疫组织化学染色法检测不同时间段大鼠局灶性脑缺血再灌注后肾上腺髓质素的表达情况, 并进行动态观察。结果正常大鼠脑内即有肾上腺髓质表达, 假手术后肾上腺髓质素表达略有增加, 但与正常对照组相比无明显差异, P >0.05; 大鼠脑缺血再灌注后肾上腺髓质素免疫阳性细胞增多, 与正常对照组及假手术组相比差异显著, 均 P <0.05; 大鼠脑缺血再灌注后缺血侧既缺血对侧肾上腺髓质素免疫阳性细胞均增多, 但以缺血侧区域增多最为明显, P <0.05。动态观察发现, 脑缺血再灌注 2 h 后, 肾上腺髓质素免疫阳性细胞即增多, 缺血再灌注 6 h 达高峰, 至 1 周左右仍明显增多。结论脑缺血再灌注后肾上腺髓质表达增强。

Ezrin和TGF-β1在鼻咽癌组织中的表达及临床意义

目的探讨埃兹蛋白(Ezrin)、转化因子-β1蛋白(TGF-β1)在鼻咽癌组织中的表达情况及临床病理意义。方法采用免疫组织化学染色S-P法检测57例鼻咽癌组织及30例癌旁组织Ezrin、TGF-β1蛋白的表达水平。结果 (1)Ezrin阳性≥50岁组显著高于40～49岁组及≤39岁组(P<0.05);有淋巴结转移组阳性率高于无淋巴结转移组(P<0.05)。(2)有淋巴结转移组TGF-β1阳性表达率高于无淋巴结转移组(P<0.05)。Ezrin和TGF-β1在鼻咽癌组织表达,两者无显著相关性(r=0.074,P=0.585)。结论 Ezrin和TGF-β1蛋白表达与鼻咽癌淋巴结转移有关,可作为评价预后的指标。

细胞黏附分子CD44v6在肝癌组织中的表达及意义

目的:检测细胞黏附分子CD44v6在肝癌细胞组织中的表达,并初步探讨其与肝癌部分生物学行为的关系.方法:选择同济医院手术肝细胞癌患者标本32例,以门脉高压肝硬变患者8例及肝外伤患者5例标本作为对照.采用免疫组织化学染色法检测正常肝脏、肝硬化组织和肝癌组织中CD44v6的表达情况,并分析其表达水平与肝癌部分生物学行为如肿瘤直径、有无包膜侵犯、肝癌病理分级(Edmonson分级)、是否伴有肝内外转移、合并肝硬化情况以及甲胎蛋白(AFP)的表达等指标间的关系.结果:正常肝脏组织及肝硬化组织中CD44v6几乎不表达或仅在少量淋巴细胞和间质细胞中呈弱阳性表达,32例肝癌组织中有25例可见CD44v6的强阳性表达,主要集中于细胞质和细胞膜上,阳性率为78.3%.肝癌组织中CD44v6表达阳性率高于正常肝脏组织(78.2%vs40.0%,P<0.05)及肝硬化组织(78.2%vs62.3%,P<0.05).肝癌细胞组织中CD44v6的表达明显强于正常肝脏(113.3±13.3vs23.6±10.6个阳性细胞,P<0.05)及肝硬化组织(113.3±13.3vs42.4±12.3个阳性细胞,P<0.05).有包膜侵润、EdmonsonIV以及转移者CD44v6表达比无包膜侵润、EdmonsonII—III和无转移者显著增高(7125.9±14.7vs95.2±15.2,P<0.05;122.5±24。3VS99.4±15.3,P<0.05;165.4±17.5vs95.3±12.4,P<0.01).CD44v6表达与肿瘤直径、AFP水平以及有无肝硬化无显著相关性(P>0.05).结论:CD44v6的表达有可能作为肝癌恶性程度和转移的指标之一,有必要进一步研究细胞黏附分子CD44v6在肝癌生物学行为中的作用及机制.

Smad4蛋白在结肠癌组织中的表达及其与转移和预后的关系

目的探讨Smad4蛋白在结肠癌组织与癌旁正常组织的表达差异及预后的关系。方法选择88例结肠癌手术切除的标本,选取结肠癌组织和癌旁正常组织;采用免疫组织化学染色法检测两组Smad4蛋白表达水平,Kaplan-Meier法和Cox比例回归模型分析Smad4蛋白表达与结肠癌预后之间的关系。结果结肠癌组织中Smad4蛋白表达水平显著低于癌旁组织(P=0.01)。Smad4蛋白表达水平随着淋巴结转移及血管淋巴管浸润的出现、肿瘤TNM分期的增加及肿瘤分化程度的降低明显减低(P<0.05)。Kaplan-meier生存分析显示Smad4蛋白高表达的结肠癌患者有更长的生存期。多因素分析结果显示Smad4蛋白表达水平是结肠癌预后的独立影响因子。结论 Smad4蛋白表达在结肠癌的发生、发展发挥着抑制因子的作用,是影响结肠癌预后的独立影响因子。

胃癌患者血清及癌组织中MMP-3的表达及临床意义

目的研究胃癌患者血清及癌组织中基质金属蛋白酶-3(MMP-3)的表达特点,探讨检测血清MMP-3在临床上反映胃癌病程变化的意义。方法选取胃癌患者45例为观察组,同期健康体检者30例为对照组,比较手术前观察组与对照组血清MMP-3水平,分析观察组MMP-3在胃癌组织、癌旁组织中的表达情况,及其与临床病理因素的关系。结果胃癌组织MMP-3阳性染色率显著高于癌旁组织(P<0.01);观察组血清MMP-3水平显著高于对照组(P<0.01);血清MMP-3水平与肿瘤浸润深度、淋巴结转移、临床分期密切相关(P<0.01)。结论胃癌患者MMP-3于癌组织及血清中均高表达,血清MMP-3在预测胃癌侵袭转移,评估胃癌恶性程度等可能具有重要的临床应用价值。

原发性胆囊癌组织中血管生成活性检测的临床意义

目的 探讨血管生成与原发性胆囊癌临床病理特征和预后的关系。方法 对 42例原发性胆囊癌手术切除的肿瘤标本行免疫组织化学染色 (SABC法 ) ,观察肿瘤内微血管计数 (MVC)和血管内皮生长因子 (VEGF)的表达。结果 胆囊组织中MVC平均值为 (70 .4± 2 0 .7)个 ,VEGF表达阳性率为 69.0 %。MVC在细胞学分级为Ⅰ、Ⅱ级组中平均值为 (5 7.9± 15 .4)个 ,在Ⅲ、Ⅳ级组中平均值为 (88.8± 11.5 )个 ,两组相比较差异有显著性意义 (P<0 .0 0 1) ;在NevinⅠ、Ⅱ、Ⅲ期病例组MVC平均值为 (4 5 .0± 17.0 )个 ,Ⅳ、Ⅴ期组平均值为 (77.2± 16.0 )个 ,两组相比较差异有显著性意义(P<0 .0 0 1)。VEGF表达阳性率与肿瘤细胞分级及肿瘤分期呈等级相关 ,分化差、分期晚者VEGF表达显著增高。VEGF的表达与MVC值呈显著正相关 ,MVC值高者或VEGF表达阳性者 ,3年生存率明显降低。结论 胆囊癌中VEGF的分泌增多可导致微血管数目增加 ,促进了病变进展和转移。血管生成可作为判断胆囊癌预后的一项有效指标。