EnVision与特异性抗体的一步法免疫组织化学标记

探讨 En Vision与特异性抗体复合一步法免疫组织化学标记的可行性及其应用效果 ,筛选适合用于该法的特异性抗体。利用辣根过氧化物酶标记的第二抗体 (En Vision)分别与 72种单克隆和多克隆特异性抗体混合配制成即用型试剂 ,将两步标记法变为快速微波一步法 ,并对 2 10 0余例各种良性和恶性肿瘤的免疫组化标记结果进行观察和分析。结果显示绝大部分特异性抗体的特异性和敏感性与标准 En Vision法相似 ,其中 46种特异性抗体结果稳定 ,重复性佳 ;14种特异性抗体稳定性欠佳 ,但临用前新配制效果仍较理想 ;12种不理想 ,不主张用于此法。结果表明 En Vision与特异性抗体复合免疫组化一步法是一种有效、快速、简便的免疫组化染色技术 ,适用于临床病理快速免疫组化诊断 ,但对所用的特异性抗体应注意选择。

免疫组织化学标记在鉴别结节性淋巴细胞为主型与富于淋巴细胞的经典型霍奇金淋巴瘤中的作用

霍奇金淋巴瘤（HL）分为结节性淋巴细胞为主型（NLPHL）和经典型（CHL），因两者具有不同的免疫表型与临床特点必须加以区别。其中，NLPHL与富于淋巴细胞的经典型HL（LRCHL）的鉴别较困难。B细胞特异性激活蛋白（BSAP）和BOB.1（B-cell oct-binding protein 1）是目前研究较多的两种B细胞特异性转录因子，已有学者指出在NLPHL中的L＆H细胞表达这两种蛋白。目前国内对EB病毒在这两种病变中的表达情况研究较少,

免疫组织化学与影像学检测对肝癌的诊断价值

肝癌是一种常见的恶性肿瘤疾病具有非常高的病死率。在早期时,肝癌并无特殊的临床表现,患者如果出现明显的临床症状之后,在就诊时就已经到了肝癌晚期。所以,对于肝癌疾病的早期诊断、治疗具有重要的意义。免疫组织化学标记物应用在肝癌早期诊断中具有良好的临床价值,通过免疫组织化学标记物筛选可以使肝癌患者进行进一步的检测,使肝癌的诊断率能够得到提高[1,2]。而肝癌最常用的免疫组织化学标记物为胎釉(AFP),但是会出现一定的假阳性与假阴性情况。

多标记免疫荧光染色及多光谱成像技术在组织学研究中的应用

免疫组织化学染色及成像分析是研究组织形态和组织原位抗原表达不可或缺的检测技术,广泛应用于临床病理诊断和医学及生物学研究的各个领域。组织切片样本中蕴含着丰富的信息,但是受制于传统单标记免疫组织化学染色方法的限制,通常只能对组织中的一到两种抗原进行染色分析,而且定量结果的判读往往依赖于肉眼观测,缺乏客观标准。随着蛋白组学的发展,对现代组织学分析提出了更高的要求,例如不同的蛋白共表达和共定位分析、低丰度分子的检测、异质性分析、细胞表型统计乃至复杂组织微环境的描绘等,都需要在同一张组织切片样本上同时检测多种靶标分子。这对于理解组织微环境中各种细胞间的关系,推演信号通路上下游蛋白表达的关系,制定临床诊断和治疗方案都有着非常重要的意义。本文介绍一种基于酪胺信号放大(TSA)技术衍生而来的多标记免疫荧光染色方法,能够在同一组织切片样本上复染7种以上抗原并进行区别标记,配合光谱成像技术和定量分析软件,能够将组织中蕴含的丰富信息准确的呈现出来。这套流程化的分析方案为临床诊断和基础科研提供了更高精度和更可靠的组织学数据,将免疫组织化学分析的技术水平提升到一个新的高度。

异位错构瘤性胸腺瘤的临床病理学观察和免疫组织化学研究

目的探讨异位错构瘤性胸腺瘤的临床病理学特征、免疫学表型和组织发生。方法对2例异位错构瘤性胸腺瘤进行临床病理学分析,采用免疫组织化学LSAB法行AE1/AE3、细胞角蛋白(CK)5、CK7、CK8、CK20、上皮膜抗原(EMA)、波形蛋白、CD5、CD10、α-平滑肌肌动蛋白(SMA)、calponin、结蛋白、CD34、S-100蛋白、CD57、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、甲状腺转录因子(TTF)-1和CD99标记。结果两例均发生于男性,年龄分别为20岁和40岁,因发现胸骨柄上缘肿块6个月和左锁骨上肿块2个多月就诊。肿块呈球形和卵圆形,边界清楚,最大直径分别为5cm和3cm,切面呈灰白色,质地柔软。组织学上,肿瘤由梭形细胞、上皮细胞和成熟的脂肪细胞3种成分混合组成。梭形细胞成分在2例中分别占到85%和70%,形态上类似纤维母细胞,多呈束状、编织状或席纹状排列。上皮细胞成分在两例中均占10%左右,形态上以非角化性鳞状上皮为主,可呈实性的小岛屿状、类似造釉细胞瘤的条索状和扩张的囊肿样排列,部分区域显示腺样分化,可见腺管形成。上皮细胞和梭形细胞在形态上有移行。成熟的脂肪组织呈不规则性分布,在两例肿瘤中所占的比例分别为<5%和20%。免疫组织化学标记显示,上皮细胞表达AE1/AE3、CK5、CK7、CK8和EMA,梭形细胞除CK外还表达波形蛋白、CD10和CD34,并部分表达α-SMA和calponin。两种细胞成分均不表达CK20、CD5、TTF-1、结蛋白、S-100蛋白、CD57、GFAP和CD99。结论异位错构瘤性胸腺瘤是一种好发于中青年男性锁骨上和胸锁关节附近软组织内的良性肿瘤,是一种由上皮和肌上皮组成的混合性肿瘤,可能起自于His颈窦,采用鳃原基混合瘤来命名或许更为合适。

AQP4与Kir4.1在大鼠眼内组织的共表达

目的:探讨AQP4与Kir4.1在大鼠眼内的定位分布及二者的共表达.方法:用免疫组织化学及激光扫描共聚焦显微技术检测AQP4与Kir4.1在大鼠眼内的分布.结果:免疫荧光显示,AQP4与Kir4.1在大鼠视网膜和睫状体内的分布形式相似;免疫荧光双标显示,AQP4与Kir4.1在视网膜Mller细胞及睫状突无色素上皮细胞的顶膜面及基底膜面呈重叠分布.结论:AQP4与Kir4.1在大鼠视网膜Mller细胞及睫状突无色素上皮细胞共表达,提示二者可能具有协同作用,参与房水的产生以及视网膜内水、K+运输平衡的调节.

垂体多激素腺瘤的免疫病理研究

目的探讨垂体多激素腺瘤的临床表现和免疫病理学特点,以提高其病理诊断的准确性。方法选取1990年3月至2002年12月经手术切除的垂体多激素腺瘤103例进行免疫组化检测,其中18例另行双标记免疫组化染色。结果全组以PRL-GH型垂体腺瘤最多,共10例(9.7%)。大多数病例只表现出一种内分泌症状,仅7例(6.8%)表现出两种不同的内分泌症状。垂体多激素腺瘤的免疫组化组合形式多样,2～6种激素组合均有。免疫组化、血清激素水平与内分泌症状之间相关性最好的激素是PRL。结论垂体多激素腺瘤的免疫组化检测对于其正确的病理诊断非常重要。

免疫荧光双标对肝细胞癌及癌旁异型增生肝细胞Ki-67与AMACR和RAS表达的定位分析

目的对肝细胞癌(hepato celluar carcinoma,HCC)及其癌旁异型增生肝细胞Ki-67与α-甲酰基-辅酶A消旋酶(alpha-methylacyl-coenzyme A racemase,AMACR)和RAS表达进行定位分析,探讨AMACR的表达在HCC发生中的意义。方法 90例人HCC、90例癌旁肝组织制作组织芯片,以20例正常肝组织对照。用免疫荧光双标法,通过激光共聚焦显微镜,分析AMACR在肝细胞癌和癌旁异型增生肝细胞的表达与Ki-67、癌基因蛋白RAS表达的原位定位关系。结果 HCC组织中AMACR的表达显著高于癌旁肝组织,而且在HCC组织中AMACR的表达多呈弥漫性分布;HCC组织中显示Ki-67标记指数比癌旁组织高。结论 AMACR可能参与RAS信号在肝细胞异型增生和HCC早期发生的信号机制。

平滑肌肌动蛋白在乙型肝炎肝组织中的表达

目的是研究乙型肝炎肝内静脉系血管病变的形态学表现及其与肝病变的关系及平滑肌肌动蛋白（SMA）在肝组织中的表达及其与肝病变的关系。我们对270例各型乙肝肝标本及10例大致正常肝组织，用SMA单克隆抗体进行免疫组织化学标记。结果发现在正常肝组织SMA仅在原有的肝内动、静脉及胆管壁表达。在乙肝肝标本中SMA还在血管病变区阳性或强阳性表达，且SMA表达的强弱及分布部位与肝病变密切相关。因此得出结论，乙肝的肝内血管病变在其病理发生、发展中有重要作用；SMA在乙肝的分级、分期中有重要参考价值。

米枯力兹病51例临床病理分析

目的:探讨米枯力兹病的病理诊断、鉴别诊断及预后等问题,为临床防治提供依据。方法:对51例米枯力兹病的临床和病理资料进行分析,并进行LCA、CD20、CD3、CD4、CD45RA、CD45RO、EMA、CEA、S-100、CK、lysozyme、EBV、IgG4、HBsAg、HBcAg免疫组织化学标记。结果:米枯力兹病的病变特征为腺实质萎缩和淋巴样组织增生。免疫组织化学标记示T和B淋巴细胞混合性增生,IgG4 80%阳性。结论:米枯力兹病为一种自身免疫性疾病,多见于绝经后女性,手术后可以复发,治疗上应辅以免疫调节剂等治疗。

豚鼠哮喘模型脑内P物质表达

目的观察哮喘豚鼠脑内P物质(SP)的表达,为进一步阐明哮喘发病机制提供实验依据。方法18只雄性健康豚鼠,分为哮喘发作组、对照组及正常组,用卵蛋白(OVA)建立豚鼠哮喘动物模型。4%多聚甲醛(PFA)/0.1MPBS灌注固定,取脑,切片,以抗SP抗体为I抗,采用改良的ABC法进行免疫组织化学标记。结果哮喘豚鼠的许多脑部区域,尤其是感觉相关区域、延髓网状结构区域及边缘叶部分区域等部位的SP免疫反应阳性产物的密度和显色程度均明显大于对照组及正常组。结论SP在哮喘动物脑组织中有表达,在哮喘的病理生理机制中起重要作用。

GFAP、Vim、MDR-1与EGFR在颅内星形细胞肿瘤中的表达及意义

目的 探讨颅内星形细胞肿瘤的GFAP、Vim和MDR-1、EGFR的表达及意义。方法 采用S-P法对101例颅内星形细胞肿瘤进行GFAP、Vim、和MDR-1、EGFR免疫组化标记,并对临床和病理资料及免疫组化结果进行统计分析。结果 免疫组化标记能帮助区别星形细胞肿瘤的组织类型和分化程度。间变性星形细胞瘤和胶质母细胞瘤GFAP表达减弱,而Vim、MDR-1、EGFR的表达增强,恶性程度增加,术后生存率低(P<0.005)。结论 免疫组化标记对星形细胞肿瘤术后化疗方案的制定及预后估计具有重要意义。间变性和肥胖细胞性星形细胞瘤更具恶性,易复发。胶质母细胞瘤恶性程度最高,预后差。

胸腹水中肿瘤相关巨噬细胞不同活化亚型的分析

目的研究不同性质胸腹水中肿瘤相关巨噬细胞表型的特异性标志物CD68、CD86、CD163来判断巨噬细胞的类型,并通过对肿瘤相关巨噬细胞浸润及相关分型和主要功能的研究,探讨其临床意义。方法胸腹水细胞蜡块标本76例,其中恶性肺癌标本59例,良性标本17例,通过免疫组化的方法检测巨噬细胞表型的特异性标志物CD68、CD86、CD163在其中的表达水平。结果巨噬细胞表型的特异性标志物CD68、CD86、CD163在良性组的染色强度、阳性表达比肺癌组均较低,差异具有统计学意义(P<0.05)。肺癌标本中M1、M2型巨噬细胞的比例较良性病变患者差异均无统计学意义(P>0.05)。结论胸腹水中肿瘤相关巨噬细胞表型的特异性标志物CD68、CD86、CD163在肺癌组中表达水平均显著升高,可为临床诊断肺癌提供重要参考。