免疫组织化学法与荧光原位杂交技术检测乳腺癌HER-2状态一致性的对比研究

目的对比研究免疫组织化学法(IHC)与荧光原位杂交技术(FISH)检测乳腺癌人类表皮生长因子受体2(HER-2)蛋白表达和基因状态的一致性,并评价其临床意义。方法采用IHC法及FISH法分别检测1 032例乳腺癌患者术后石蜡包埋标本的HER-2蛋白表达和HER-2基因状态,并进行对比分析。结果 1 032例乳腺癌患者术后石蜡包埋标本,用IHC检测HER-2蛋白表达阳性者373例,占36.1%(373/1 032);表达阴性者659例,占63.9%(659/1 032)。FISH检测HER-2基因扩增325例,占31.5%(325/1 032);基因非扩增707例,占68.5%(707/1 032)。373例HER-2蛋白为阳性的患者中,HER-2基因扩增293例,符合率为78.6%(293/373);659例HER-2蛋白为阴性的患者中,HER-2基因非扩增627例,符合率为95.1%(627/659)。2种方法检测结果比较一致性较好(Kappa=0.758 1,P<0.000 1)。结论 IHC检测乳腺癌HER-2蛋白与FISH检测HER-2基因结果一致性较高。

荧光原位杂交（FISH）技术与免疫组织化学（IHC）技术应用于乳腺癌患者Her2基因检测的评价

目的探讨采用荧光原住杂交（FISH）技术检测乳腺癌患者中的Her2基因与免疫组织化学（IHC）检测Her2基因的结果的一致性以及导致两者差异的可能原因；了解荆州地区乳腺癌患者中Her2基因的分布。方法以FISH方法，对55例免疫组织化学分别为（3＋），（2＋），（1＋）和阴性（-）的乳腺癌新鲜石蜡切片标本进行Her2基因的检测。结果55例标本中，有16例采用FISH方法检测出Her2基因的表达；12例Her2基因表达（3＋）的标本中11例检测出Her2基因；7例Her2基因表达（2＋）的标本中5例检测出Her2基因；10例Her2基因表达（1＋）的标本中未检测出Her2基因；26例Her2基因表达（-）的标本中未栓测出Her2基因。结论初步筛查Her2基因状态可以首选免疫组织化学方法，对于IHC（2＋）的标本，应该行FISH确诊。

荧光原位杂交和免疫组织化学法检测乳腺浸润性导管癌中HER-2基因状态的研究

目的比较荧光原位杂交(FISH)和免疫组织化学(IHC)两种方法检测乳腺浸润性导管癌人类表皮生长因子受体2(HER-2)基因扩增及与C-erb B-2蛋白表达结果的一致性。方法分别采用FISH和IHC法检测346例乳腺浸润性导管癌组织HER-2基因扩增和C-erb B-2蛋白表达,并对两种方法的结果进行统计学分析。结果 346例乳腺浸润性导管癌中,FISH检测HER-2基因扩增145例(41.9%),无扩增201例(58.1%)。IHC检测显示,C-erb B-2蛋白(-)7例,(+)30例,(++)227例,(+++)82例。按乳腺癌HER-2检测指南,(-)和(+)为阴性结果,(+++)为阳性结果,(++)为不确定病例。全组IHC检测C-erb B-2蛋白阳性表达率为23.7%(82/346)。IHC检测C-erb B-2蛋白(-)的7例患者经FISH检测无HER-2基因扩增,一致率为100.0%。IHC检测C-erb B-2蛋白(+)的30例经FISH检测25例无基因扩增,一致率为83.3%;227例(++)中有65例基因扩增,一致率为28.6%;82例(+++)中有基因扩增75例,一致率为91.5%。IHC和FISH检测HER-2状态的一致率为89.9%,具有高度一致性(Kappa值=0.768,P<0.001)。HER-2基因扩增与年龄、肿瘤大小、组织学分级及淋巴结转移均无关(P>0.05)。结论 IHC和FISH法检测乳腺浸润性导管癌HER-2表达状态有高度一致性。IHC可以作为初步筛查乳腺浸润性导管癌HER-2基因状态的首选检测方法,对于IHC检测结果为(++)的标本建议采用FISH法进一步明确HER-2基因扩增状态。

应用免疫酶组织化学法诊断猪流行性腹泻试验

猪流行性腹泻，是由冠状病毒属猪流行性腹泻病毒引起的各种年龄猪急性腹泻性疾病，传播迅速，仔猪死亡率高，可达100％，给养猪生产造成巨大的经济损失。多年来，猪流行性腹泻一直缺乏简便快速，特异性强的诊断方法，给诊断造成了困难。为此，我们进行了应用免疫酶组织化学方法诊断猪流行性腹泻的试验研究，结果表明该方法敏感性，特异性，准确性均比较理想，而且操作简便，对技术设备条件要求不高，是一种适合临床应用的的诊断方法。现报告如下。

早期心肌缺血心脏型脂肪酸结合蛋白的免疫组织化学观察

目的探讨心脏型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)对早期心肌缺血诊断的灵敏性。方法应用免疫组织化学技术对正常心脏、心肌梗死及其它怀疑有心肌缺血的心肌细胞内H-FABP和肌红蛋白(Mb)的变化进行研究。结果正常对照组均无明显的缺失,心肌梗死组均出现明显的缺失,9例可疑心肌缺血病例中有3例出现H-FABP明显的缺失,3例出现可疑缺失,有4例出现Mb明显的缺失,2例出现可疑缺失,说明H-FABP可用于诊断早期心肌缺血。结论H-FABP用于诊断早期心肌缺血具有较好的灵敏性。

非小细胞肺癌PD-L1免疫组织化学检测规范中国专家共识

1引言近年来,以程序性死亡受体1(programmed death-1,PD-1)/PD配体1(PD ligand 1,PD-L1)免疫检查点抑制剂为主的免疫治疗在晚期肺癌中取得了突破性的进展,改变了该领域的治疗格局,为患者带来了更多生存获益。虽然对于免疫治疗适宜人群筛选和疗效预测的生物标志物越来越多,但PD-L1仍是目前应用最为广泛的指标。免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC,简称免疫组化)检测是评估肿瘤组织PD-L1表达状态的一种有效且最常用方法,广泛应用于包括非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)等在内的多种恶性肿瘤中.以识别或辅助预测可能从免疫治疗中获益的患者。

二肽基肽酶II在正常大鼠眼球各组织中的免疫表达

目的:探讨二肽基肽酶II(dipeptidyl peptidaseII,DPPII)在正常大鼠眼球各组织中的免疫表达。方法:应用抗生物素蛋白-生物素-过氧化物酶复合体法,检测DPPII在正常大鼠眼球各组织中的免疫表达。结果:发现DPPII在角膜上皮细胞、角膜基质层、角膜内皮细胞、睫状体无色素上皮细胞、虹膜色素上皮细胞、晶状体上皮细胞、晶状体纤维、视网膜神经纤维层、神经节细胞、视网膜色素上皮细胞中免疫染色均呈阳性。结论:DPPII存在于角膜上皮细胞、角膜基质层、角膜内皮细胞、睫状体无色素上皮细胞、虹膜色素上皮细胞、晶状体上皮细胞、晶状体纤维、视网膜神经纤维层、神经节细胞、视网膜色素上皮细胞。

人端粒酶逆转录酶与p53蛋白在甲状腺癌组织中的表达、相关性及临床意义

目的探讨人端粒酶逆转录酶(hTERTmRNA)与突变型p53蛋白在甲状腺癌和甲状腺良性组织中的表达、相关性及临床意义。方法采用原位杂交法检测hTERTmRNA的表达,采用免疫组织化学法检测突变型p53蛋白的表达。结果①hTERTmRNA和突变型p53蛋白在甲状腺癌中高表达(P<0.05)。②hTERTmRNA与p53蛋白阳性率与甲状腺癌的临床病理分型,有无淋巴结转移,肿瘤TNM分期有关(P<0.05),与患者年龄,性别无关。③hTERTmRNA与p53蛋白在甲状腺癌组织中的表达呈显著正相关,具有统计学意义(P<0.05)。结论①hTERTmRNA和突变型p53蛋白的高表达在甲状腺癌的发生发展过程中起到重要作用。②p53蛋白调控hTERTmRNA的表达,p53蛋白在甲状腺癌中表达的增高可激活hTERTm-RNA,从而导致甲状腺癌的发生。③hTERTmRNA和p53蛋白在甲状腺癌中表达的变化可用于评估其生物学行为和判断预后,对临床上甲状腺癌的靶向治疗起到重要的指导作用。

NF-κB、COX-2、LKB1在子宫内膜癌组织中的表达及临床意义

目的探讨核转录因子κB(NF-κB)、环氧化酶2(COX-2)、肝激酶基因B1(LKB1)在不同子宫内膜组织中的表达及临床意义。方法采用免疫组化SP法检测60例正常子宫内膜、31例非典型增生子宫内膜和60例子宫内膜癌组织中NF-κB、COX-2、LKB1蛋白的表达,并分析其与子宫内膜癌临床病理特征的关系。结果 NF-κB、COX-2、LKB1在子宫内膜癌组织、非典型增生子宫内膜组织和正常子宫内膜组织中的阳性表达率分别为63.3%、70.0%、35.0%,41.9%、64.5%、61.3%和35.0%、51.7%、93.3%,NF-κB、LKB1在3组间的表达差异有统计学意义(P<0.05),而COX-2的表达差异无统计学意义(P>0.05)。子宫内膜癌中NF-κB、COX-2、LKB1蛋白的阳性表达与病理类型、FIGO分期、淋巴结转移均无关(P>0.05)。LKB1蛋白表达与肌层浸润深度和组织学分级相关(P<0.05),NF-κB蛋白表达与组织学分级亦相关(P<0.05)。结论NF-κB在子宫内膜癌组织中高表达、LKB1低表达,其表达可能与子宫内膜癌的发生发展有关;

固定时间对口腔黏膜鳞状细胞癌组织染色的影响

目的探讨固定时间对口腔黏膜鳞状细胞癌组织HE染色和免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)染色的影响。方法选取10例患者口腔黏膜鳞状细胞癌组织,每例各取4块,分别固定8h、24h、48h和1周,进行HE染色和高分子量细胞角蛋白(cytokeratin high molecular weight,CKH,克隆号34βE12)和广谱细胞角蛋白(cytokeratin pan,ckpan,克隆号AE1/AE3)IHC染色,观察细胞形态的优良、染色情况及IHC染色的阳性强度和阳性率。结果 HE染色和IHC染色结果均显示口腔黏膜鳞状细胞癌组织形态和染色、阳性强度和阳性率最佳为固定24h,8h为最差。固定1周者染色效果较48h差。结论本研究表明对口腔黏膜鳞状细胞癌组织,24h为最佳固定时间;组织固定不充分对HE染色和IHC染色的影响要大于固定时间过长的影响;固定时间越长,对HE染色和IHC染色效果影响越大。

PBL教学法在免疫组织化学教学中的应用

免疫组织化学技术是利用抗原与抗体结合的特点，用标记的特异性抗体（或抗原）对组织内抗原（或抗体）的分布进行原位检测的技术[1]。在临床常规病理诊断中，免疫组织化学是一种不可缺少的手段。病理专业本科生对这项技术的掌握程度直接影响到日后的临床和科研工作。传统的教学模式以教师讲授为主，学生被动的接受知识，抑制了学生学习的主动性和积极性。PBL（problem-based learning）是指基于现实世界的问题，以学生为中心的教育方式，已成为近年来国际上受到广泛重视的教学模式[2]。

高通量测序数据再分析在识别结直肠癌患者ERBB2扩增中的价值

目的评估未涵盖即ERBB2拷贝数变异(copynumbervariation,CNV)分析的高通量测序(highthroughput sequencing,HTS)数据再分析在识别结直肠癌患者ERBB2扩增中的价值。方法回顾性分析经病理活检确诊为结直肠癌并接受外周血cfDNA高通量测序样本的检测数据252例。根据经免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)和/或荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)判断为ERBB2未扩增样本的HTS数据,计算17号染色体(Chr17)reads数占总reads数的比例范围,初步确定其为识别ERBB2扩增的阈值。根据初步阈值筛选可疑阳性样本,通过数字PCR、IHC和FISH进行验证。结果89例经IHC和/或FISH判定为ERBB2未扩增样本的Chr17 reads数与总reads数的比值为0.239±0.192(0.188~0.299)。以均数的1.25倍0.298作为识别ERBB2扩增的阈值分析其余163例样本数据,发现7例疑似阳性,比值为0.302~0.853。其中5例经IHC和/或FISH判定为阳性,6例经数字PCR验证为阳性,Chr17 reads与总reads数的比值与ERBB2/EIF2C1比值成正相关,相关性好(r2=0.909)。结论再分析未涵盖ERBB2 CNV分析的HTS数据可以初步识别结直肠癌患者的ERBB2扩增。

非小细胞肺癌MET免疫组织化学检测和判读标准中国专家共识(2023版)

MET基因扩增和/或蛋白过表达是非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)接受表皮生长因子受体-酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)治疗后耐药的主要机制之一,也是潜在重要治疗靶点。多项临床研究结果显示,伴有MET基因扩增和/或蛋白过表达的TKI耐药患者能从MET抑制剂治疗中获益。在NSCLC患者中,MET蛋白过表达比例高于MET基因扩增比例。现有研究提示,免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)检测MET蛋白过表达可提高EGFR-TKI耐药后抗MET靶向治疗的潜在获益人群比例。目前,用于MET蛋白IHC检测的抗体种类繁多、检测流程不同,且尚无统一的判读标准。为提高检测结果准确性且精确筛选潜在获益患者,达成NSCLC患者的MET IHC检测和判读标准共识十分重要。本共识主要对MET IHC检测流程、判读标准及检测报告形式进行了规范,以期进行高质量的MET IHC检测,提高判读结果的准确性和一致性,从而指导临床开展相关临床研究,使更多EGFR-TKI耐药后的NSCLC患者在后续靶向治疗中获益。

眼附属器黏膜相关淋巴组织结外边缘区B细胞淋巴瘤(MALT)临床病理分析

目的:探讨6例眼附属器黏膜相关淋巴组织结外边缘区B细胞淋巴瘤(MALT)患者的临床病理特点及预后。方法:收集2010年01月至2019年01月病理学检查确诊的6例眼附属器MALT患者的临床资料及治疗方案、形态学特点及免疫组化表达,FISH检测MALT1基因断裂,电话随访,分析总结其临床病理特点及预后。结果:临床表现为眼部不适,眼睑肿胀及视物模糊等。镜下可见肿瘤由形态多样的小B细胞组成,包括边缘带细胞(中心细胞样细胞)、单核样细胞、小淋巴细胞,也可见散在的免疫母细胞和中心母细胞样细胞,部分细胞有浆细胞样分化。5例肿瘤细胞CD20(+)、CD3(-)、BCL2(+)、Ki67约10%~25%,3例BCL10及AEG1阳性,1例伴浆细胞分化,免疫组化表现为CD20(-)、CD79α(+)、CD38(+)、CD138(+)、MUM1(+)、Kappa、Lambda呈限制性表达,2例FISH检测结果阳性。结论:眼附属器MALT淋巴瘤常CD20、BCL2、BCL10、AEG1阳性,FISH可作为辅助诊断。

浅谈如何顺利开展免疫组织化学染色的室间质控

根据国家卫生健康委以及国家病理质控中心的要求,省级病理质控中心应在本省定期开展免疫组织化学(IHC)染色的室间质量评价(EQA,又称为室间质控)。广东省临床病理质量控制中心开展IHC染色室间质控工作已有10余年,在质控方面积累了比较丰富的经验。本文着重介绍开展IHC染色室间质控的目的、意义、主要流程以及注意事项。希望能给尚未开展或者正在开展IHC染色室间质控的省级或者地级市病理质量控制中心的质控工作提供一些参考和建议。

免疫组织化学规范化的问题

免疫组织化学（IHC）在近十余年来已在国内广泛开展，几乎所有的病理科在日常工作中都需做几项甚至几十项IHC来辅助病理诊断。IHC已整合入外科病理（诊断病理），成为医院病理科不可缺少的辅助技术。它不仅能使病理诊断更精确，更有助于肿瘤的正确分类分型，还能预测某些肿瘤的预后和提供治疗的依据。近年来IHC已发展到能用于检测基因异常包括基因突变、特殊的染色体移位（导致融合蛋白的形成）、基因扩增和靶向性治疗的靶基因状态。

浙江省免疫组织化学质量控制评价方案及应用尝试

浙江省免疫组织化学（IHC）的质量控制评价方案是2004年由浙江省临床病理质量控制中心（简称省中心）提出并建立的，其目的不仅在于评价IHC染色质量，同时也促进实验室发展和改进IHC技术。对该方案系统共进行了两次质量评价，即2005年浙江省三级医院IHC专项质量评价和2006年浙江省二级甲等医院IHC专项质量评价。参加单位125家，质量评价活动历时两年，基本涵盖了全省大中型医院及基层二级医院，因此两次评审结果基本能够反映出浙江省目前病理科IHC的技术水平。作为IHC技术质量控制工作的尝试，

免疫组织化学及^(14)C尿素呼气试验法联合检测新疆地区幽门螺杆菌感染情况及相关因素分析

目的比较检测幽门螺杆菌(Hp)感染时^(14)C尿素呼气试验(^(14)C-UBT)法和胃镜病理活检组织的免疫组织化学(IHC)法差异,同时统计新疆地区Hp感染率并分析相关因素。方法纳入行IHC和^(14)C-UBT法检测Hp感染患者共5747例;筛选其中"同时"(两种检测间隔<1周,取材包含胃窦)行IHC检测及^(14)C-UBT检测的病例共3944例,精确比较胃镜病理组织IHC染色及^(14)C-UBT差异;联合两种方法统计5747例患者Hp感染总体阳性率,统计学分析与常见临床病理因素的相关性。结果同时行^(14)C-UBT及IHC检测病例中^(14)C-UBT检测灵敏度为94.9%,IHC检测灵敏度65.1%,差异有统计学意义(P<0.01)。联合两种检测方法统计,5747例患者Hp感染总阳性率48.6%。不同性别、年龄组、民族及地域差异均有统计学意义(均P<0.01);性别、年龄完全匹配的汉/维病例(555对)阳性率分别为41.4%及73.3%,差异有统计学意义(P<0.01)。结论^(14)C-UBT法灵敏度显著高于IHC法,但也存在漏诊,联合应用有助于提高Hp感染检出率。新疆Hp总感染率高于既往报道,民族差异是最主要因素,防控重点为维吾尔族群众尤其是年轻人。