EnVision System在免疫组织化学方法中应用的体会

目的 介绍EnVisionSystem这种免疫组织化学染色技术的新方法。方法 分别用EnVisionSystem与S P两种染色方法在 40例活检组织中的各种抗体 (CD44、Cytokeratin、ER、PR、GFAP、Vimentin)标记进行对比观察。结果 EnVisionSystem法的灵敏度、阳性强度都优于S P法 ,而且非特异性着色浅 ,背景低 ,时间短。结论 相对于S P法 ,EnVisionSystem法的确是一种灵敏度高、低背景、快速、操作方便的免疫组化染色新方法 ,值得在医院外科病理诊断中推广应用。

EnVision免疫组织化学二步法在诊断深部真菌感染上的应用

观察微波EnVision免疫组织化学二步法检测临床常见的几种深部真菌感染的敏感性与特异性,选用鼠抗曲霉单克隆抗体、兔抗新生隐球菌及兔抗白念珠菌多克隆抗体,分别对34例深部真菌感染的福尔马林固定,石蜡包埋切片进行PAS染色、微波EnVision免疫组织化学标记。结果示免疫组织化学染色示16例可疑曲霉感染14例阳性,11例可疑隐球菌感染全部阳性,7例念珠菌感染6例阳性,菌体染色清晰几无背景。结论:微波EnVision免疫组化二步法应用于深部真菌感染检测具有高敏感、低背景、快速简便的特点,在真菌病的临床病理诊断中具有很好的应用价值。

冰冻切片联合快速免疫组织化学检测在乳腺癌前哨淋巴结转移诊断中的应用价值

目的:观察冰冻切片联合快速免疫组织化学检测在乳腺癌前哨淋巴结转移诊断中的应用价值。方法:收集2022年3月-2023年10月贵州医科大学附属白云医院收治的190例乳腺癌患者病理组织标本,均采取冰冻切片、快速免疫组织化学法、石蜡切片进行前哨淋巴结活检,以石蜡切片病理结果作为“金标准”,评估冰冻切片、快速免疫组织化学法以及两者联合检测对乳腺癌前哨淋巴结转移的诊断效能。结果:190例患者石蜡切片病理结果显示,乳腺癌前哨淋巴结转移56例。冰冻切片联合快速免疫组织化学检测诊断乳腺癌前哨淋巴结转移的准确率、灵敏度、阴性预测值高于冰冻切片、快速免疫组织化学法,诊断乳腺癌前哨淋巴结转移的特异度、阳性预测值低于冰冻切片、快速免疫组织化学法,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:冰冻切片联合快速免疫组织化学检测在乳腺癌前哨淋巴结转移诊断中的临床价值较高,能够提高诊断准确率、灵敏度、阴性预测。

微波Envision免疫组织化学标记的特异性和敏感性研究

本文应用新建立的快速微波－Ｅｎｖｉｓｉｏｎ两步法免疫组织化学技术，分别对福尔马林固定和石蜡包埋切片的良恶性肿瘤进行免疫组织化学标记，观察该法的敏感性和特异性。所有２３种抗原均获得强阳性、低背景。整个程序在１８分钟内完成。结果表明：该法是一种特异性强、敏感性高、背景染色轻、快速和简便的新方法，可用于常规病理诊断。

Envision法免疫组织化学染色研究重组人可溶性血管内皮细胞生长抑制因子的抗肿瘤活性

目的：研究重组人可溶性血管内皮细胞生长抑制因子(vascular endothelial growth inhibitor，VEGI)的抗肿瘤活性及其机制。方法：用重组人可溶性VEGI治疗荷S180肉瘤小鼠；第VIII因子相关抗原(FVIII RAg)标记肿瘤血管内皮细胞，用免疫组化Envision法检测瘤内微血管密度。结果：重组人可溶性VEGI显著抑制S180肉瘤生长，肿瘤微血管密度大大减低。结论：VEGI具有较强的抗肿瘤活性，其机制可能是通过抗新生血管形成介导的。

免疫组织化学法与间接免疫荧光法对REV抗原定位的比较

本研究分别用免疫组织化学(IHC)法、间接免疫荧光(IFA)法对肿瘤病鸡不同脏器中的禽网状内皮增生病病毒(REV)进行了检测,旨在为两种REV抗原定位方法的应用提供实验依据。采用REV SD1005分离株人工接种1日龄海兰褐鸡,分别采取28日龄肿瘤病鸡的肿瘤、法氏囊、骨髓、肝脏、心脏、脾脏、腺胃的新鲜切面在洁净盖玻片上触片,同时制备其病理组织连续切片,分别用IHC法、IFA法对触片和切片进行REV检测。结果显示,两种用于抗原定位的染色方法检测结果完全一致,均可对病鸡的肿瘤、法氏囊、骨髓、肝脏、心脏、脾脏、腺胃等组织中存在的REV进行定位,依据染色后的阳性细胞感染率可判断REV的组织嗜性。本研究表明,IHC法与IFA法均可用于检测不同脏器中的REV,并具有良好的特异性、低背景和简便快速的特点。但相对于IFA法,IHC法更经济实用并且实验材料易于保存,因此可以在REV抗原定位研究中推广应用。

免疫组织化学法在鼻窦真菌球诊断中的价值

目的 研究鼻窦真菌球的主要致病菌种 ,探索组织切片中快速鉴定主要条件致病真菌的组织病理学方法。方法 2 5例鼻窦真菌球患者接受鼻窦病变清除术 ,对其组织病理标本分别进行了碘酸雪夫染色 (paraaminosalicylic ,PAS)和免疫组织化学染色 ,并比较两种方法的敏感性。 结果鼻窦真菌球以上颌窦发病率最高 ,其次是蝶窦。致病真菌检测 :曲霉菌感染 2 3例 (92 % ) ,白色念珠菌感染2例 (8% )。鼠抗曲霉单克隆抗体、兔抗白色念珠菌多克隆抗体可以分别鉴定组织中的曲霉菌和白色念珠菌。免疫组化和PAS染色的敏感性差异无显著性 (χ2 =0 2 72 ,P >0 0 5 )。结论鼻窦真菌球感染以曲霉菌属多见 ,免疫组化技术具有抗原特异性强、诊断快速的特点 。

应用单克隆抗体的免疫组织化学法研究雏鸭体内鸭瘟病毒的分布

本实验应用了免疫组织化学的单克隆抗体间接酶标染色法,对人工感染鸭瘟病毒雏鸭的组织切片进行染色观察,旨在研究病毒在鸭体内分布,对其进行定位。研究结果显示,鸭的心脏、肝脏、脾、胸腺、肠、法氏囊、胰、肺、肾等组织的细胞浆内均出现了染色的特异阳性反应物。结果表明,鸭瘟病毒广泛分布于感染雏鸭的各种组织器官,并造成一定的组织病理变化。

宫腔镜联合免疫组织化学法确诊子宫内膜癌的临床研究

目的探讨宫腔镜及抑癌基因PTEN(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten)、P27的免疫组织化学法在子宫内膜癌及癌前病变诊断中的意义。方法宫腔镜检查846例患者,免疫组织化学SP法检测其中10例正常子宫内膜,13例子宫内膜不典型增生,32例子宫内膜癌中PTEN和P27基因表达。结果宫腔镜及病理检查确诊32例子宫内膜癌(3.78%);3种组织比较,PTEN、P27阳性表达率明显降低,差异有显著性(P<0.01)。结论宫腔镜检查直观病灶,准确活检,宜于早期诊断;PTEN、P27表达异常对子宫内膜癌发生、发展及预后判定有重要意义。

荧光原位杂交法与免疫组织化学法检测乳腺癌HER-2基因扩增及蛋白表达的对比研究

目的比较桂林市荧光原位杂交法(FISH)和免疫组织化学法(IHC)检测乳腺癌组织中人表皮生长因子受体(HER-2)基因扩增及其蛋白表达情况的一致性,探讨FISH与IHC检测乳腺癌HER-2基因状态的临床意义。方法应用IHC和FISH对50例乳腺癌患者HER-2蛋白表达、基因扩增情况及17号染色体倍体性进行检测,分析IHC与FISH检测HER-2基因状态的差异以及HER-2蛋白状态与17号染色体倍体性的相关性。结果FISH与IHC结果总的符合率为82.0%,两者之间存在较好的一致性(kappa=0.640),FISH检测IHC结果为3+、2+和0/1+者的符合率分别为92.9%、70.0%和80.8%;IHC3+及2+者出现17号染色体多体性的几率比IHC0/1+者高(P<0.05)。结论FISH可以准确和稳定地检测乳腺癌组织中HER-2的基因状态及17号染色体倍体性;FISH检测IHC3+者符合率较高,FISH与IHC的差异主要在于IHC2+和IHC0/+组,IHC仅作为检测HER-2基因状态的初筛方法,而IHC结果为2+或0/1+者的HER-2基因状态必须应用FISH进一步确定。

免疫组织化学法与酶联免疫法对胰岛细胞抗体检测的比较

目的 比较免疫组织化学法与酶联免疫吸附法 (ELISA)测定胰岛细胞抗体 (ICA)的阳性率。 方法 对同一批 2 0 0份血清标本 ,在北京、上海两地三个三甲医院内分泌实验室分别采用免疫组织化学技术POPA法、ABC法及ELISA法检测ICA。 结果 免疫组织化学POPA法与ABC法检测ICA的阳性率和阴性率基本一致 ,而用ELISA法检测的阳性率低 ,假阳性率、假阴性率高。 结论 与ELISA法相比 ,用免疫组织化学法测定ICA的准确性高 ,重复性好 ,宜推广应用于临床。

免疫组织化学LSAB和ABC法敏感性比较

继免疫组化ABC法之后近年又出现了LSAB法(labeled streptavidin biotin method,链菌素-生物素标记法),作者用不同稀释度的第一抗体作LSAB及ABC染色,对这两种方法进行敏感性对比,结果表明:LSAB法比ABC法更为敏感。用LSAB法时,第一抗体稀释度可比ABC法高2～3倍以上,孵育时间比ABC法大大缩短,且背景清晰,是理想的具有广阔应用前景的新一代免疫酶标法。

免疫组织化学法与流式细胞术在非小细胞肺癌骨髓微转移检测中的效果

目的免疫组织化学法和流式细胞术检测非小细胞肺癌骨髓微转移状况的差异比较。方法选取2009年5月至2011年3月我院手术治疗的非小细胞肺癌160例，术前没有经历化疗及放疗，术中抽取肋骨骨髓，分别应用免疫组织化学法和流式细胞技术检测骨髓中阳性细胞表达率。结果160例非小细胞肺癌患者免疫组化检测骨髓转移阳性率为30．0％（48例），流式细胞术检测骨髓转移阳性率为34．4％（55例），112例免疫组化检查阴性的患者中，流式细胞术检测发现12例患者骨髓中存在微转移；而48例免疫组化检查阳性的患者中，有5例流式细胞术检测为阴性。结论流式细胞术和免疫组化技术都可检测非小细胞肺癌骨髓微转移，流式细胞技术有着更高的敏感性和检测效率。

PowerVision法与SABC法在免疫组织化学染色中的比较

目的 探讨免疫组织化学染色中常用的PowerVision二步法与SABC三步法各自的适用性。方法 取大鼠的胃体组织 ,分别应用PowerVision二步法与SABC三步法进行 12种抗体免疫组化染色。结果 PowerVision二步法对其中 6种抗体的显示优于SABC法 ,对 3种抗体的显示不及SABC法 ;而 2种方法对其中 3种抗体的显示无差别。结论 2种方法对不同抗体的显示有差别。

BrdU免疫组织化学染色方法的改进(漂片法)

目的改进用漂片法进行BrdU免疫组织化学染色时的封闭液,以减少组织切片破损。方法用5-溴-2-脱氧尿嘧啶核苷(5-bromo-2-deoxyuridine,BrdU)标记大鼠踏转轮运动中所引起增殖细胞,通过ABC免疫组织化学方法染色。在染色过程中,比较不同的封闭液(羊血清、牛血清白蛋白、胰酶抑制剂)减少脑片破损的效果。结果踏转轮运动可使大鼠海马齿状回BrdU阳性细胞数明显多于对照组。加入不同的封闭液后,组织片破损率明显下降,尤其是加入牛血清白蛋白和胰酶抑制剂组,但胰酶抑制剂组有非特异性染色。结论牛血清白蛋白是较理想的封闭液。

运用免疫组织化学法对绵羊布鲁菌病抗原的检测

布鲁菌病是由布鲁菌属的细菌引起的人畜共患传染病,目前仍是世界范围内严重的人畜共患传染病,主要感染反刍动物和人类。自20世纪90年代初,布鲁菌病在国内外都出现了回升势头。该病的病原是细胞内寄生的革兰阴性菌——布鲁菌（Brucel-la），它主要引起人类波状热和慢性感染，引起反刍动物睾丸炎和流产等，多种动物对布鲁菌都有易感性。

免疫组织化学ABC法观察扁桃酸对小鼠急性弓形虫病肝脏病变的作用

目的用免疫组织化学ABC法观察扁桃酸治疗小鼠急性弓形虫病肝脏的病变,探讨扁桃酸对病变肝脏的保护作用。方法扁桃酸200mg/kg,2次/d,口服和静脉注射治疗弓形虫感染小鼠,同时设立乙胺嘧啶及扁桃酸药物对照组,治疗不同时间后取肝脏组织,常规制作病理切片,免疫组织化学ABC法常规染色。结果阳性对照组可见大量肝细胞坏死区,其内可见形态典型的弓形虫速殖子,扁桃酸治疗组仅见少量散在的黄染肝细胞,乙胺嘧啶对照组小鼠肝组织内也仅见少量散在的黄染肝细胞,但肝细胞受到明显的毒性损害。因而扁桃酸能有效地抑制弓形虫速殖子入侵肝细胞,减轻弓形虫速殖子对肝细胞的破坏程度,且扁桃酸对肝细胞的毒副作用极少。结论扁桃酸对弓形虫感染小鼠的肝脏有明显的保护作用。

快速微波ABC法免疫组织化学技术的研究

随着免疫组织化学方法学的进展,其敏感性和特异性已得到显著提高。然而,目前常用的方法既费时又增加了非特异背景染色和脱片机会。近年来,有资料表明,微波辐社在免疫组化技术中的应用不仅克服了上述缺点,而且可获得令人满意的染色效果。作者将微波与ABC(Avidinbiotin complex)法相结合,应用多种单克隆及多克隆机体对不同类型的良恶性肿瘤进行了免疫组化标记,并与常规ABC法进行比较,以探讨该法的特异性、稳定性和实用价值。

免疫组织化学法定位猪脾脏中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的研究

利用免疫组织化学法研究了脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)在猪脾脏分布定位,为DON体内残留及DON对免疫系统影响进一步研究提供依据。选用10头健康阉公猪,随机分为二组,一组经乳静脉注射DON标准品,注射剂量为75μg/kg体重,另一组经乳静脉注射相当体积生理盐水。注射完成后开始计时,并观察记录猪的反应情况,待30min后放血宰杀,并迅速取脾脏,4%多聚甲醛固定,经脱水、包埋及切片后,采用免疫组化法定位脾脏中DON的分布情况。免疫组化法定位结果显示,在75μg/kg体重给药组中,脾组织中的血管壁周围见有DON阳性反应颗粒,而对照组未见阳性反应颗粒。