周围神经损伤后Tropic 1808基因表达蛋白的免疫组织化学研究

目的 研究Tropic 180 8基因表达蛋白在受损大鼠坐骨神经中的表达与分布。 方法 用酶联间接法和双重免疫荧光法进行免疫组织化学染色。并通过计算机图像处理技术 ,测量阳性区域的强度与面积。 结果 损伤神经的近侧端和远侧端中施万细胞均有Tropic 180 8基因表达蛋白的阳性免疫反应 ,阳性免疫反应物主要分布于施万细胞膜上 ,远侧端的阳性反应物强度和面积强于和大于近侧端。 结论 周围神经损伤后 ,Tropic180 8基因表达蛋白分布于损伤近侧端和远侧端的施万细胞膜上 ,并且远侧端中该蛋白的表达强于近侧端。

荧光原位杂交（FISH）技术与免疫组织化学（IHC）技术应用于乳腺癌患者Her2基因检测的评价

目的探讨采用荧光原住杂交（FISH）技术检测乳腺癌患者中的Her2基因与免疫组织化学（IHC）检测Her2基因的结果的一致性以及导致两者差异的可能原因；了解荆州地区乳腺癌患者中Her2基因的分布。方法以FISH方法，对55例免疫组织化学分别为（3＋），（2＋），（1＋）和阴性（-）的乳腺癌新鲜石蜡切片标本进行Her2基因的检测。结果55例标本中，有16例采用FISH方法检测出Her2基因的表达；12例Her2基因表达（3＋）的标本中11例检测出Her2基因；7例Her2基因表达（2＋）的标本中5例检测出Her2基因；10例Her2基因表达（1＋）的标本中未检测出Her2基因；26例Her2基因表达（-）的标本中未栓测出Her2基因。结论初步筛查Her2基因状态可以首选免疫组织化学方法，对于IHC（2＋）的标本，应该行FISH确诊。

色素原位杂交法和免疫组织化学法检测乳腺癌HER-2基因扩增及蛋白表达

目的:对照色素原位杂交法(chromogenicin situhybridization,CISH)和免疫组织化学法(immuno-histochemistry,IHC)检测乳腺癌组织中人表皮生长因子受体(human epidermal growth factor receptor-2,HER-2)基因扩增及其蛋白表达的状况。方法:采用CISH技术检测145例乳腺癌组织中HER-2的基因扩增情况,其中14例标本经过荧光原位杂交(fluorescencein situ hybridization,FISH)检测,随后分别用FISH和IHC方法检测的HER-2基因扩增及蛋白表达状况与之进行回顾性对照,并按照病理分级、淋巴结状态、绝经与否和雌激素受体(estrogen receptor,ER)/孕激素受体(progesterone receptor,PR)表达情况进行分层,分析HER-2表达与乳腺癌各高危因素之间的关系。结果:CISH检测发现,HER-2无扩增71例(50.0%),低扩增11例(7.6%),高扩增63例(43.4%)。14例FISH与CISH检测结果比较,符合率为100.0%。145例IHC与CISH检测结果的符合率为84.8%(P<0.05)。在IHC检测积分为0/+以及+++的病例中,HER-2基因扩增与蛋白表达情况基本一致,其符合率均在90%以上;而在IHC检测积分为++的标本中,HER-2基因扩增率仅为61.1%。CISH及IHC检测均显示ER/PR表达情况与HER-2阳性呈负相关,ER和PR均为阴性患者的HER-2基因扩增率和蛋白表达率明显高于ER/PR阳性的患者(CISH:68.3%vs38.8%,P<0.01;IHC:71.7%vs48.2%,P<0.01)。HER-2状态与乳腺癌病理分级、腋淋巴结转移以及绝经与否无关(P>0.05)。结论:CISH技术检测HER-2操作简便,准确性高,可以代替FISH技术,对IHC评分为++的病例应进一步确认HER-2状态。HER-2除了与ER/PR表达相关外,与其他乳腺癌高危因素无关,可作为独立指标进行检测。

人脑胶质瘤CDK4、CyclinD1和P16基因蛋白表达的免疫组织化学研究

采用检测人脑胶质瘤中 CDK4、Cyclin D1和 P16基因蛋白的表达情况 ,探讨 G1→ S期细胞周期调节蛋白在胶质瘤发生 ,发展过程中的作用。对 39例近期手术的胶质瘤标本和 8例瘤旁正常脑组织标本进行免疫组织化学检测。结果显示 :CDK4蛋白在良性、交界性胶质瘤和瘤旁正常脑组织中的表达差异没有显著性意义 (P>0 .0 5 ) ,在恶性胶质瘤中的表达却有明显地增高 ,与前两者比较差异均有显著性意义 (P<0 .0 5 )。 P16蛋白在恶性胶质瘤中的表达显著低于在瘤旁正常脑组织和良性、交界性胶质瘤中的表达 (P<0 .0 1) ,但在后两者中的表达差异没有显著性意义 (P>0 .0 5 )。 Cyclin D1蛋白在三者中的表达水平均较低且差异无显著性意义 (P>0 .0 5 )。结果表明 :CDK 4蛋白的表达增高和 P16蛋白的表达下调发生在胶质瘤的较晚期阶段 ,与胶质瘤的恶性变和恶性胶质瘤的发生有关 ,而 Cyclin D1蛋白的表达可能与胶质瘤的发生和发展无关。

隐匿性乙型肝炎:免疫组织化学和S基因序列分析

目的 了解不明原因慢性肝病中隐匿性乙型肝炎所占比例 ,隐匿性乙型肝炎的发病机制及临床、病理特点。方法 给予 2 0例不明原因慢性肝病患者肝穿刺病理检查 ,应用免疫组织化学方法检测肝组织内的乙型肝炎病毒表面抗原 (HBsAg)、核心抗原 (HBcAg) ,丙型肝炎病毒NS3、NS4抗原。采用荧光定量PCR方法对血清HBVDNA进行定量 ,用套式PCR方法扩增HBVS基因 ,对PCR产物进行直接测序 ,比较S基因的核苷酸和推导出的氨基酸序列的差异。结果 5例患者经肝脏病理检查表现为慢性炎症 ,3例在肝组织内HBsAg、HBcAg同时阳性 ,2例仅HBcAg阳性。S基因的氨基酸序列分析显示 ,1例患者S基因的 74位密码子发生终止变异 ,另 1例在HBsAg的“a”决定簇内有 2个氨基酸发生变异 (T13 1N ,M 13 3S) ,其他 3例患者HBsAg的“a”决定簇内未发现变异。 结论 在我国隐匿性乙型肝炎是不明原因肝病的主要原因之一 ,低水平的血清HBVDNA可以引起慢性肝炎。部分隐匿性乙型肝炎HBsAg阴性的原因是S基因变异引起的 ,而有些患者则可能因为血清HBsAg水平过低 ,导致HBsAg检测阴性。

人脑胶质瘤中LN、FN及p53基因蛋白的免疫组织化学与其侵袭微生态系统的相关性探讨

目的 探讨人脑胶质瘤中层粘连蛋白 (LN)、纤维连接蛋白 (FN)及突变型p5 3基因蛋白的免疫组织化学与肿瘤侵袭微生态系统 (tumorousinvasionmicroecosystem ,TIMES)的相关性。 方法 利用透射电镜观察TIMES中微血管特征和免疫组织化学SP法评价LN、FN、p5 3的表达情况 ,并作比较分析。 结果 1 脑胶质瘤微血管基底膜 (basemembrane ,BM)连续 ,多数呈局限性或广泛性增厚 ,并与LN、FN染色结果相一致 ,也与p5 3染色与否有关 ,p5 3阳性染色者BM增厚较p5 3阴性者明显。 2 LN、FN在所有胶质瘤微血管BM及内皮细胞上呈阳性染色 ,恶性程度越高 ,BM上LN、FN染色阳性越强 ,血管管壁越厚 (P <0 0 1和P <0 0 5 ) ,而瘤细胞未见染色。LN在脑内转移瘤BM和内皮细胞上却未见染色 ,但可见散在瘤细胞浆膜染色 ;FN在脑内转移瘤上的染色则与脑胶质瘤相类似。 3 45例胶质瘤中p5 3阳性染色 2 1例 ,其p5 3阳性染色与否也与BM上LN、FN染色结果存在密切正相关 (P <0 0 1)。p5 3阳性染色率在脑内转移瘤和恶性胶质瘤中无统计学差别 (P >0 0 5 )。 结论 脑微血管内皮细胞上LN、FN的过分表达可能是脑胶质瘤TIMES中BM形态学增厚的原因之一 ,p5 3对TIMES的影响也与微血管的内皮细胞功能状态有关。血管内皮细胞可能是TIMES的调控?

大鼠胃肠胰系统中降钙素基因相关肽的免疫组织化学定位

用免疫组织化学ABC法,对降钙素基因相关肽(CGRP)在大鼠胃肠胰系统中的分布进行了研究,结果表明:整个胃肠胰系统都有CGRP免疫反应阳性的神经纤维分布,在胃窦部和胰岛还分布有CGRP免疫反应阳性的内分泌细胞,这些结果说明,胃肠膜系统中的CGRP有两种来源,即来源于神经和内分泌细胞.文内还对CGRP在胃肠胰系统中的可能功能进行了讨论.

同源框基因islet-1表达产物在大鼠脑中分布的免疫组织化学研究

为了解同源框基因ｉｓｌｅｔ－１表达产物（ＩＳＬ－１）在正常成年大鼠中枢神经系统中的形态学分布，采用ＩＳＬ－１特异性抗体的免疫组织化学方法研究了该物质在大鼠脑中的定位分布。结果表明，ＩＳＬ－１广泛分布于除大脑皮层外的神经元细胞核内，尤其在小脑、海马、嗅球等区域其分布更为密集。ＩＳＬ－１在大鼠脑内的分布如此广泛，说明同源框基因ｉｓｌｅｔ－１在正常成年大鼠脑内有着重要的功能。

人肝细胞癌中N－ras、c－myc癌基因的表达──原位分子杂交和免疫组织化学研究

为了明确Ｎ－ｒａｓ、ｃ－ｍｙｃ癌基因在人肝细胞癌（ＨＣＣ）中的表达及其形态学分布，我们对３８例石蜡包埋的ＨＣＣ（其中３３例带有癌周肝组织）标本进行了原位核酸杂交和免疫组化研究。结果表明，ＨＣＣ及癌周肝组织中Ｎ－ｒａｓ表达阳性率分别为４２％和３９％；ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ阳性表达率分别为４７％和３６％；ｃ－ｍｙｃ蛋白阳性率分别为５３％和３９％。ＨＣＣ与癌周肝之间Ｎ－ｒａｓ、ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ及ｃ－ｍｙｃ蛋白表达水平无显著差别；ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ及蛋白阳性强度也无显著差别，其形态学分布基本一致，主要集中于癌细胞和癌周肝中的部分高度增生结节；Ｎ－ｒａｓ表达增强主要见于癌细胞、癌周肝中的高度增生结节、小细胞性不典型增生及少部分肝小多角细胞。它们与ＨＢｘＡｇ表达之间无明确的对应关系。上述结果显示，ＨＣＣ中Ｎ－ｒａｓ、ｃ－ｍｙｃ表达都显著增强，它们可能是人ＨＣＣ发生中较晚期的事件，而Ｎ－ｒａｓ表达增强早于ｃ－ｍｙｃ癌基因活化。

src基因产物在贲门癌中表达的免疫组织化学观察

用ｃ－ｓｒｃ基因产物ＰＰ６０ｃ－ｓｒｃ的特异性单克隆抗体Ｍａｂ３２７对５６例贲门癌、３６例癌旁组织及２０例淋巴结转移癌进行免疫组织化学研究。结果，癌旁正常上皮，增生上皮、腺癌及淋巴结转移癌ＰＰ６０ｃ－ｓｒｃ阳性率分别为２９．４％（１０／３４）、９４．４％（３４／３６）、７１．４％（４０／５６）、６０．０％（１２／２０），几者间有显著性差异（Ｐ＜０．００５）。腺癌及癌旁增生上皮ＰＰ６０ｃ－ｓｒｃ表达量显著高于癌旁正常上皮（Ｐ＜０．００５）。乳头状、管状、低分化及粘液腺癌ＰＰ６０ｃ－ｓｒｃ阳性率分别为７５．０％（６／８）、８１．８％（１８／２２）、５０．０％（１０／２０）、１００．０％（６／６），几者间有显著性差异（Ｐ＜０．０５），其中粘液、管状腺癌的表达量高于乳头状和低分化腺癌（Ｐ＜０．００５）。结果提示，ｃ－ｓｒｃ基因激活表达与贲门癌发生发展有关，在其癌变过程中ＰＰ６０ｃ－ｓｒｃ表达量升高，并与贲门癌的组织学类型、分化和转移有关。

小鼠颌下腺降钙素基因相关肽的免疫组织化学定位

本文用免疫组织化学ＡＢＣ法，对小鼠颌下腺中降钙素基因相关肽（ＣａｌｃｉｔｏｎｉｃＧｅｎｅ－ＲｅｌａｔｅｄＰｅｐｔｉｄｅ，ＣＧＲＰ）的分布进行了观察。结果表明：小鼠颌小腔内有降钙素基因相关肽免疫反应神经的分布，它们主要分布于小叶间结缔组织中。此外，颗粒由管细胞也呈降钙素基因相关肽免疫反应阳性。提示降钙素基因相关肽可能参与颌下腺的分泌活动及血液循环等生理调节。

应用免疫组织化学检测EphA2及其调节基因HoxA1、C-myc在喉癌组织中的表达及相互关系

目的探讨同源异形盒基因A1(homeobox genes A1,HoxA1)、癌基因(cancer-myc,C-myc)、促红细胞生成素产生肝细胞受体A2(erythropoietin-producing hepatocellular receptor A2,EphA2)与喉癌发生发展的关系,从分子生物学角度探讨喉癌的发病机制。方法 40例喉癌组织及40例癌旁组织,取15例非喉癌患者的喉部正常黏膜组织做对照。所有肿瘤经病理检查证实为鳞状细胞癌,癌旁组织和正常组织取材经病理检查证实为炎症或正常。应用免疫组织化学检测喉癌组织、癌旁组织及喉部正常黏膜组织中EphA2、HoxA1、C-myc阳性表达率。结果 EphA2、HoxA1、C-myc在喉癌组织中的阳性表达率分别高于癌旁组织和正常喉黏膜组织,而癌旁组织与正常喉黏膜组织间的表达差异无统计学意义。结论 EphA2蛋白、HoxA1蛋白、C-myc蛋白在喉癌中的表达与喉癌的发生、发展有关。

HIV-1衣壳蛋白在转基因枸杞中表达的免疫组织化学定位

目的:研究转基因植物中重组蛋白的细胞定位,有助于进一步了解转基因枸杞中HIV-1衣壳(CA)蛋白融合蛋白的分泌表达途径。方法:利用含有MA4-CA融合基因的农杆菌转化枸杞,转化植株获得再生。采用免疫组织化学方法对转基因枸杞表达的CA融合蛋白进行初步定位。结果:免疫组织化学定位表明,在转基因枸杞愈伤组织中,HIV-1CA主要在细胞浆、细胞壁和细胞间隙中表达。结论:免疫组织化学结果初步证明了CA融合蛋白在转基因枸杞中的表达分布。

乳腺癌病理诊断中免疫组织化学检测的临床价值及准确性分析

目的:分析在乳腺癌病理诊断中用免疫组织化学检验的诊断准确率与临床价值。方法:将莆田学院附属医院2019年1月至2021年12月收治的乳腺癌患者作为本次观察对象,共60例,以病理检查作为金标准,根据孕激素受体与雌激素受体阴性及阳性检查结果的不同分为观察组(阳性,40例)和对照组(阴性,20例),并对患者采取免疫组织化学检验,比较分析两组间的C-erbB-2基因阳性率与阴性率、腋窝淋巴率,比较免疫组织化学检测乳腺癌孕激素受体与雌激素受体阴性和阳性检查诊断准确率。结果:观察组C-erbB-2基因阳性率、未转移率更高于对照组,C-erbB-2基因阴性率、腋窝淋巴结转移率更低于对照组,对比有统计学意义(P<0.05);免疫组织化学检验乳腺癌孕激素受体与雌激素受体阴性和阳性检查诊断准确率可见,分别为97.5%、100%。结论:在乳腺癌病理诊断中,免疫组织化学检测具有较高的诊断准确率,能够检出C-erbB-2基因阳性率与阴性率,对腋窝淋巴结的转移检测也有较大作用,能够帮助临床医师更好评估疾病状态。

免疫组织化学和聚合酶链反应在乳腺癌易患基因检测中的应用价值

目的探讨免疫组织化学和聚合酶链反应（PCR）在检测乳腺癌易患基因中的应用价值。方法选取2013年10月至2014年10月唐山市妇幼保健院诊治的乳腺癌患者37例为乳腺癌组，良性乳腺疾病患者37例为良性乳腺疾病组，健康体检者37例为正常组，均行免疫组织化学和PCR检测乳腺癌易患基因。结果乳腺癌组乳腺癌易患基因1、乳腺癌易患基因1／132微球蛋白分别为（1．13±0．51）×10^5拷贝／L、（0．37±0．12），均低于正常组[（3．09±1．38）×10^5拷贝／L、（0．95±0．36）]和良性乳腺疾病组[（2．87±1．40）×10^5拷贝／L、（0．93±0．41）]，差异均有统计学意义（P〈0．05）。乳腺癌组乳腺癌易患基因人表皮因子受体2（Her2）、细胞角蛋白5／6（CK5／6）、表皮生长因子受体（EGFR）分别为（6．75±2．98）×10^9拷贝／L、（25．84±11．43）×10^98贝／L、（43．54±18．26）×10^7拷贝／L，均显著高于正常组[（3．65±1．40）×10^9拷贝／L、（2．69±0．54）×10^8拷贝／L、（2．18±0．90）×10^7拷贝／L]和良性乳腺疾病组[（3．80±1．31）×10^9拷贝／L、（2．76±0．68）×10^8拷贝／L、（2．27±1．04）×10^7拷贝／L]，差异均有统计学意义（P〈0．05）。乳腺癌组β2微球蛋白低于正常组和良性乳腺疾病组。行Her2检测时，PCR检测的灵敏度、特异度、准确度均高于免疫组织化学检测。结论免疫组织化学和PCR检测均可用于乳腺癌易患基因的诊断，其中PCR检测的灵敏度、特异度、准确度更高。

周围神经端端或端侧吻合后降钙素基因相关肽和P物质免疫组织化学的对比研究

目的 探讨周围神经端端或端侧吻合后神经递质降钙素基因相关肽 (CGRP)和 P物质 (SP)水平的变化。 方法 选取雌性 Wistar大鼠 2 0只 ,随机分为 5组 ,每组 4只 ;实验组为 4组 ,正常对照组为 1组。实验组 :切断双侧腓总神经。将左侧腓总神经远侧断端吻合至胫神经侧方 ,右侧行腓总神经端端吻合 ,术后 1、2、4和 2 7周于各时间点分别在神经吻合口、腰段脊髓和背根神经节处取材 ,每次 4只进行 CGRP和 SP的免疫组织化学染色。对照组 :不行神经切断及吻合术 ,1周后检测同上。 结果 实验组术后 1周在腰段脊髓后角和背根神经节中 CGRP和 SP的表达均显著减少 ,术后 4、2 7周 ,CGRP和 SP在腰段脊髓后角的表达逐渐恢复至接近正常水平 ,但在背根神经节中的表达却无显著变化。端端、端侧吻合的两侧 CGRP和 SP变化的趋势一致 ,但在腰段脊髓后角的 4个时间点的样本中 ,端端吻合的表达显著高于端侧吻合。对坐骨神经进行乙酰胆碱酯酶 (Ach E)、SP、CGRP和 PGP9.5染色显示神经纤维均可通过端端与端侧神经吻合口。 结论 再生的神经纤维可以通过端侧吻合口 ,端侧吻合中感觉神经的恢复与端端吻合相似 ,但恢复的程度稍差于端端吻合。

实验性腺胃癌大鼠甲状腺降钙素基因相关肽的免疫组织化学

胃癌是常见的恶性肿瘤之一，在我国因患胃癌而死亡者居各种恶性肿瘤之首。甲状腺是体内的大内分泌腺，因此它与机体各部存在着密切关系。一般认为降钙素基因相关肽（CGRP）普遍存在于各个组织，参与机体许多重要生理功能的调节，在一些疾病的发病和治疗中也有十分重要的意义。甲状腺内CGRP与早期胃癌的关系至今未见报道。因此本实验通过大鼠腺胃癌模型来观察甲状腺CGRP的免疫组织化学变化，进一步了解胃癌与甲状腺结构与功能之间的关系，为探讨机体自然抗病机制提供形态学依据。

各种癌基因蛋白微波抗原修复免疫组织化学检测的研究

本研究对1555例各种肿瘤组织标本进行微波辐射(MWI)抗原修复免疫组织化学染色,检测了14种癌基因蛋白产物.并同时选择部分标本分别作冰冻切片,常规石蜡切片进行抗原修复与不修复的对比研究.结果,经MWI抗原修复后p53(PAb1801,PAb-240,PAb-420,DO-7),p185,Rb,C-fos,C-myc,Ki-67(R),EGF,EGFr,TGFβ和Bcl-2阳性检测率明显提高(P≤0 05),而p53(CM-1),PcNA p21和nm23/NDPK经MWI抗原修复与不修复结果一致,说明有部分抗原不用修复和其他处理.另一部分抗原仅表达在冰冻切片上,如Ki-67和Ki-1单克隆抗体,经修复也无阳性表达.本文中对消化、消化与抗原修复相结合及高压处理切片的IH染色也进行了对比研究,对他们处理切片存在的优缺点也一一作了详说.

口腔鳞状细胞癌P53基因的免疫组织化学研究

随着肿瘤分子生物学研究的不断深入和发展，癌基因和抗癌基因在肿瘤发生和发展中的作用日益受到重视。Ｐ５３抗癌基因的产物是分子量为５３０００的核磷酸化蛋白质。已证明发生于１３２～２１５位氨基酸残基之间的突变可导致Ｐ５３蛋白失活，并表现出显性的癌基因转化作用...

心内神经元血管加压素的基因表达—原位杂交与免疫组织化学结合法研究

取中华蟾蜍心房后壁腔静脉窦部位组织作冰冻切片 (30 μm) ,以原位杂交和免疫组织化学双标法进行心内神经节细胞的血管加压素 m RNA (VP m RNA)及血管加压素免疫反应 (VP- IR)染色观察。结果在心内神经节发现了 3种标记细胞 :1VP- IR阳性神经元 ;2 VP m RNA阳性神经元 ;2 VP m RNA和 VP- IR双阳性神经元。VP m RNA和 VP- IR双标记神经元证明部分心内神经节的细胞元内既有血管加压素 (VP)的基因表达 ,又储存 VP。从而说明 VP系心内神经节的一种内源性神经递质。为心内神经节以