免疫组织化学染色法在肝脏毛细淋巴管研究中的应用

目的评价免疫组织化学染色法在肝脏淋巴管研究中的作用。方法利用层黏蛋白单克隆抗体标记毛细血管和毛细淋巴管的基底膜,对肝脏组织进行免疫组化染色。结果毛细血管由于内皮细胞外有一层完整的基底膜,管壁呈现连续的棕褐色:而毛细淋巴管由于内皮细胞外缺乏基膜,管壁常不显色。结论:免疫组织化学染色法在肝脏毛细淋巴管的研究中是一种较为准确、客观的方法。

肌酸激酶与P53双重免疫组织化学染色法在食管癌中的应用

双重免疫组织化学染色法是在一张切片上显示2种不同抗原成分的免疫组织化学方法。这种方法可以了解不同细胞、组织之间的相互关系，甚至可以了解同一种细胞内抗原之间的相互关系121。本实验运用双重免疫组织化学染色法，在一张切片上完成了食管癌肌酸激酶（CK）与P53两种抗原的表达，用以观察CK阳性的癌细胞是否同时表达P53，现报告如下。

大鼠垂体远侧部内分泌细胞的四重免疫组织化学染色方法

本文介绍一种显示大鼠垂体远侧部内分泌细胞的四重免疫组织化学染色方法。此法以PAP 法为基础,结合 DAB 银加强法和间接免疫金标记技术。方法比较简单,所需试剂容易得到。

染色体结构维持蛋白4在乳腺癌组织中的表达及其临床病理学意义

目的:探究染色体结构维持蛋白4(SMC4)在乳腺癌中的表达及其评估患者预后的价值。方法:利用TIMER、GEPIA等数据库数据分析SMC4在乳腺癌组织中的表达及其与患者临床病理特征间的相关性;用免疫组化法检测SMC4蛋白在乳腺癌组织中的表达,并探讨其与乳腺癌临床病理特征之间的关系;通过Cox回归模型、Kaplan-Meier生存曲线、GEPIA数据库数据评估SMC4表达与乳腺癌患者生存期之间的关系。结果:生物信息学分析结果显示,SMC4 mRNA在乳腺癌组织中的表达水平明显高于癌旁组织(P<0.01),并与临床分期、淋巴结转移及化疗耐药密切相关(均P<0.05)。免疫组化法检测结果显示,在乳腺癌组织中SMC4的阳性及强阳性表达率均显著高于癌旁组织(均P<0.05);SMC4蛋白的高表达与乳腺癌患者年龄、临床分期和淋巴结转移密切相关(均P<0.05)。SMC4蛋白低表达组的患者累积生存率显著高于SMC4蛋白高表达组,尤其是在HER2阳性乳腺癌患者中(均P<0.05),且SMC4是乳腺癌患者预后的独立危险因素。结论:SMC4在乳腺癌组织中呈高表达,SMC4高表达与乳腺癌患者的淋巴结转移、临床分期及预后密切相关,可作为乳腺癌诊断与预后评判的潜在标志物。

胃癌组织中上皮生长因子及其受体免疫组织化学染色

目的：通过免疫组织化学染色对增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen，PCNA．），表皮生长因子（epidermal growth factor，EGF）及表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor，EGF—R）在胃癌细胞中的表达及其关系进行观察。方法：免疫组织化学染色方法采用北京中杉金桥生物技术有限公司提供的PV-9000通用型二步法检测试剂盒的方法。计数100个以上细胞，统计阳性细胞数。根据HE染色对23例胃癌组织类型进行分型。利用Studentt测定组织类型与免疫组织化学的关系。结果：23例胃癌组织中，EGF阳性14例（60．9％），EGF—R阳性5例（21．7％），EGF与EGF—R共同阳性3例（13．0％）。EGF—R阳性组与EGFR阴性组之间在EGF的表达、病程、组织学类型、癌组织侵犯静脉以及PCNA表达等方面都有明显差异。23例胃癌中有5例EGF—R阳性表达，这5例中，利用镜像切片免疫组织化学染色法对癌组织同一部位的EGF—R阳性表达的细胞与EGF—R阴性表达的细胞中PCNA的阳性率进行统计，它们分别是（49．95±20．30）％，（28．48±18．18）％，二者之间有显著性差异（P〈0．05）。而EGF—R阳性表达胃癌细胞PCNA的阳性率（18．82±14．24）％与EGF—R＋EGF阳性表达的胃癌细胞PCNA的阳性率（18．82±14．324）％之间也有明差异（P〈0．05）可能与EGF—R阳性细胞增殖活跃有关。胃癌的分化程度、侵润静脉、浸润深度以及EGF阳性程度等项其中胃癌细胞的PCNA阳性率均未见明显差异。而早期胃癌与进展期胃癌之间PCNA阳性率有显著性差异PCNA阳性率分别是（18．86±6．78）％、（31．23±19．44）％。EGF阳性组PCNA阳性率3（4．63±17．74）％，EGF阴性组PCNA阳性率（18．82±14．24）％，在统计学上均有显著性差异，与癌细胞增殖活跃有关。结论：在胃癌组织中，EGF—R阳性表达的细胞与EGF—R阴性表达的细胞中PCNA的阳性率之间，EGF—R阳性表达胃癌细胞PCNA的阳性率与EGF—R＋EGF阳性表达的胃癌细胞PCNA的阳性率之间，EGF阳性组PCNA阳性率EGF阴性组PCNA阳性率之间，在统计学上均有显著性差异，可能与癌细胞增殖活跃有关。

家兔急性心肌梗死CTnI免疫组织化学实验研究

目的研究CTnI诊断急性心肌梗死的法医病理学意义。方法结扎兔心脏左冠状动脉左旋支的左室支制作心肌梗塞动物模型。应用免疫组织化学法检测心肌梗塞区域CTnI的变化,与HE染色法进行比较。结果早期心肌梗塞组织,HE染色组尚未出现特征性梗死表现,免疫组织化学染色法可见CTnI分布以及含量变化,并且随着时间延长,变化区域扩大,且近心内膜心肌细胞同时出现变化。结论CTnI免疫组织化学检测可以应用于急性心肌梗死的诊断。

染色体组装因子1亚基A(CHAF1A)和增殖细胞核抗原在宫颈鳞状细胞癌组织高表达并与恶性程度正相关

目的探讨染色体组装因子1亚基A(CHAF1A)和增殖细胞核抗原(PCNA)在宫颈鳞状细胞癌(CSCC)组织中的表达和临床意义。方法荧光定量PCR检测CSCC组织和对应癌旁组织中CHAF1A和PCNA的mRNA的水平,免疫组织化学染色法检测正常宫颈上皮、宫颈上皮内瘤变(CIN)以及CSCC组织中CHAF1A和PCNA蛋白的表达,分析其与临床病理参数的关系,并探讨相关性。结果 CHAF1A和PCNA在CIN及CSCC组织中表达明显高于正常宫颈组织,CHAF1A和PCNA呈正相关。CHAF1A与CSCC的分化程度、肿瘤大小、浸润深度及有人乳头瘤病毒(HPV)感染有关,PCNA与CSCC的分化程度、国际妇产科联盟(FIGO)分期、淋巴结转移、浸润深度及有HPV感染有关。结论 CHAF1A和PCNA在CSCC中高表达并且与恶性程度相关,二者呈正相关。

前列腺特异抗原和高分子量细胞角蛋白改良免疫组织化学染色法对前列腺癌的诊断作用

目的 探讨前列腺特异抗原 (PSA)和高分子量细胞角蛋白 (CK3 4βE12 )改良免疫组织化学染色法对前列腺癌鉴别诊断的作用。方法 对 5 2例疑难病例采用改良免疫组织化学染色法检查。即在同一切片的一侧贴附可靠的阳性对照组织 ,应用微波处理 ,尽可能保存和修复抗原 ,在显微镜下严格控制显色等方法以达到最佳染色效果。结果 3例前列腺不典型腺瘤样增生(AAH)、3 7例前列腺上皮内瘤 (PIN)高表达PSA与CK3 4βE12 ;3例前列腺导管内癌也表达PSA及CK3 4βE12 ;9例前列腺腺癌仅表达PSA无CK 3 4βE12表达 ;10例膀胱移行上皮癌均不表达PSA与CK3 4βE12。 结论 PSA和CK3 4βE12的改良免疫染色可以作为前列腺癌鉴别诊断的工具之一 ,对指导临床治疗可发挥重要作用。

结核分枝杆菌分泌蛋白ESAT-6、CFP-10在肺结核组织中的表达

目的:探究结核分枝杆菌特异性抗原ESAT-6、CFP-10在肺结核组织中的表达。方法:收集经病理学诊断的19例石蜡包埋肺结核组织标本,以20例正常肺组织(肺癌切除标本正常组织断端)为阴性对照,采用免疫组化检测ESAT-6及CFP-10,并与抗酸染色进行对比。结果:ESAT-6及CFP-10的阳性信号主要分布在结核病灶的坏死区域及其周围的巨噬细胞和多核巨细胞中,其分布与抗酸杆菌有关,范围更广。免疫组化检测ESAT-6的敏感度、特异度分别为73.68%、90.00%;CFP-10的敏感度和特异度分别为63.16%和95.00%;抗酸染色敏感度为52.63%,免疫组化的敏感度高于抗酸染色(P<0.05)。结论:采用免疫组化检测ESAT-6及CFP-10在结核诊断中有潜在的应用价值。

肾组织石蜡切片Ⅳ型胶原α链免疫组织化学染色法诊断Alport综合征

Alport综合征（Alport syndrome，AS）的诊断问题日益受到关注。采用抗不同α（Ⅳ）链的单克隆抗体，对肾及皮肤活检组织进行冰冻切片免疫荧光染色对Alport综合征的诊断具有重要价值^[1]，但冰冻切片难以长期保存，异地标本难以运送，相对于此石蜡切片有其优势。日本学者曾报告，采用高压锅加热法修复肾组织石蜡切片抗原，

PRRSV缺失变异毒株HB-2(sh)/2002在人工感染仔猪组织中的分布与定位

用猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)HB-2(sh)/2002滴鼻感染30日龄健康仔猪,分别于3、7、14、28、42天宰杀,用免疫组化法对呼吸道,泌尿道,生殖道和消化道的主要器官以及脑和主要淋巴器官中的病毒抗原进行了定位分析。结果表明,在各个时间段,病毒抗原阳性率最高的器官为呼吸道、消化道沿途的淋巴结,组织中的阳性细胞多数为巨噬细胞和树突细胞,从个别猪的脑、心肌、肝和呼吸道上皮的细胞检测到阳性信号,同时发现该毒株主要在巨噬细胞和呼吸道腺上皮细胞复制。

食管癌组织中Ebp1蛋白表达及意义

目的探讨Ebp1蛋白在食管癌发生、发展中的作用。方法采用免疫组化染色法检测220例食管癌患者的癌组织及其癌旁正常食管组织中Ebp1蛋白表达水平。结果食管癌组织中Ebp1蛋白阳性率显著高于正常食管组织(t=23.140,P=0.000)。单因素分析显示,与Ebp1 mRNA表达高度相关的临床参数包括年龄、家族史、淋巴结转移、病理分级、浸润深度和临床分期;多因素分析结果表明,家族史、淋巴结转移、肿瘤体积、浸润深度、病理分级均是Ebp1蛋白表达的危险因素。结论 Ebp1在食管癌发生、发展过程中起重要作用,可作为食管癌病情进展监测、转移潜能及预后评估方面的一个靶基因。

组织芯片观察CD44^＋/CD166^＋结直肠癌干细胞的形态及分布

背景:越来越多的研究将CD44作为结直肠癌干细胞的一个特异性的标志物。目的:观察结直肠癌干细胞CD44+/CD166+在原发性结直肠癌组织中的数量、位置及分布方式。方法:取61份结直肠癌、10份正常肠黏膜组织及18份伴不典型增生的结直肠腺瘤标本制成42点的共3块组织芯片。结果与结论:免疫组织化学双染结果显示,正常肠黏膜中未见CD44+/CD166+细胞,在伴不典型增生腺瘤中可见极少量CD44+/CD166+细胞,结直肠癌中可见到少量CD44+/CD166+双阳性细胞。双阳性细胞主要分布在结直肠癌腺管基底侧,呈灶状或散在分布;细胞呈立方形,胞浆稀少,胞核规则,呈卵圆形或高柱状,随着结直肠癌分化程度的降低,数量增多,且其数量在浸润较深的癌巢中较多。提示结直肠癌干细胞的数量、位置、分布方式及其形态有助于结直肠癌的诊断及判断预后。

大鼠局灶性脑缺血再灌注后脑组织肾上腺髓质素的表达

目的探讨肾上腺髓质素(adrenom edu llin,ADM)在不同月龄大鼠脑缺血再灌注(I/R)脑组织的表达情况。方法采用栓线法制成大鼠大脑中动脉I/R模型,阻断血流2 h后再灌注4 h。应用免疫组织化学染色法检测不同月龄段大鼠局灶性脑I/R后血浆ADM。结果正常大鼠脑内即有ADM表达,假手术后ADM表达略有增加,但与正常对照组相比无明显差异(P>0.05);大鼠脑I/R后ADM免疫阳性细胞增多,与正常对照组及假手术组相比差异显著(均P<0.05);大鼠脑I/R后缺血侧及缺血对侧ADM免疫阳性细胞均增多,但以缺血侧区域增多最为明显(P<0.05)。老龄大鼠脑I/R后ADM免疫阳性细胞数明显高于青年大鼠(P<0.05)。结论脑I/R后ADM表达增强,ADM表达增强与血管硬化相关。

肾上腺髓质素对大鼠局灶性脑缺血再灌注后脑组织的保护作用(英文)

目的探讨肾上腺髓质素与脑缺血再灌注损伤的关系。方法采用栓线法制成大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型, 阻断血流 2 h 后进行再灌注。应用免疫组织化学染色法检测不同时间段大鼠局灶性脑缺血再灌注后肾上腺髓质素的表达情况, 并进行动态观察。结果正常大鼠脑内即有肾上腺髓质表达, 假手术后肾上腺髓质素表达略有增加, 但与正常对照组相比无明显差异, P >0.05; 大鼠脑缺血再灌注后肾上腺髓质素免疫阳性细胞增多, 与正常对照组及假手术组相比差异显著, 均 P <0.05; 大鼠脑缺血再灌注后缺血侧既缺血对侧肾上腺髓质素免疫阳性细胞均增多, 但以缺血侧区域增多最为明显, P <0.05。动态观察发现, 脑缺血再灌注 2 h 后, 肾上腺髓质素免疫阳性细胞即增多, 缺血再灌注 6 h 达高峰, 至 1 周左右仍明显增多。结论脑缺血再灌注后肾上腺髓质表达增强。

改良手工免疫组化方法和改良原位杂交方法的应用研究

目的探讨改良手工免疫组化染色和原位杂交方法的实用价值和推广意义。方法免疫组化:选取本院近期病例80例,每例分别进行常规手工和改良手工染色及全自动免疫组化仪染色,进行结果对比;原位杂交:选取本院近期原位杂交EBER阳性病例15例和HPV阳性病例18例,每例分别进行传统和改良手工原位杂交染色方法,并比较染色结果。改良手工染色方法为:省去一抗后的清洗步骤,直至显色前充分清洗。结果三种免疫组化染色方法均定位准确,无非特异性染色,待测目的组织与内对照的表达情况一致,复染清晰,染色评分无差异(P=0.985),但全自动免疫组化仪的染色背景更加干净。三种方法的脱片率分别为18.1%、17.8%和10.0%,传统手工和改良手工免疫组化方法之间脱片率差异无统计学意义(P=0.911),传统手工与全自动免疫组化仪染色方法之间、改良手工与全自动免疫组化仪染色方法之间脱片率差异有统计学意义(P=0.009,P=0.012)。传统手工方法和改良手工方法原位杂交染色的结果完全一致。结论免疫组化和原位杂交的改良手工染色法可以代替传统手工染色法。

Ezrin和TGF-β1在鼻咽癌组织中的表达及临床意义

目的探讨埃兹蛋白(Ezrin)、转化因子-β1蛋白(TGF-β1)在鼻咽癌组织中的表达情况及临床病理意义。方法采用免疫组织化学染色S-P法检测57例鼻咽癌组织及30例癌旁组织Ezrin、TGF-β1蛋白的表达水平。结果 (1)Ezrin阳性≥50岁组显著高于40～49岁组及≤39岁组(P<0.05);有淋巴结转移组阳性率高于无淋巴结转移组(P<0.05)。(2)有淋巴结转移组TGF-β1阳性表达率高于无淋巴结转移组(P<0.05)。Ezrin和TGF-β1在鼻咽癌组织表达,两者无显著相关性(r=0.074,P=0.585)。结论 Ezrin和TGF-β1蛋白表达与鼻咽癌淋巴结转移有关,可作为评价预后的指标。

Smad4蛋白在结肠癌组织中的表达及其与转移和预后的关系

目的探讨Smad4蛋白在结肠癌组织与癌旁正常组织的表达差异及预后的关系。方法选择88例结肠癌手术切除的标本,选取结肠癌组织和癌旁正常组织;采用免疫组织化学染色法检测两组Smad4蛋白表达水平,Kaplan-Meier法和Cox比例回归模型分析Smad4蛋白表达与结肠癌预后之间的关系。结果结肠癌组织中Smad4蛋白表达水平显著低于癌旁组织(P=0.01)。Smad4蛋白表达水平随着淋巴结转移及血管淋巴管浸润的出现、肿瘤TNM分期的增加及肿瘤分化程度的降低明显减低(P<0.05)。Kaplan-meier生存分析显示Smad4蛋白高表达的结肠癌患者有更长的生存期。多因素分析结果显示Smad4蛋白表达水平是结肠癌预后的独立影响因子。结论 Smad4蛋白表达在结肠癌的发生、发展发挥着抑制因子的作用,是影响结肠癌预后的独立影响因子。

免疫组化法检测促黄体素受体在多浪羊和卡拉库尔羊卵巢上的分布

为从形态学角度理解内分泌调节过程,揭示促黄体生成素(luteotropic hormone,LH)对雌性哺乳动物卵巢调节作用机制,试验采用免疫组织化学SP方法研究促黄体生成素受体(luteotropic hormone receptors,LHR)在多浪羊和卡拉库尔羊卵巢组织中的分布与表达,分别选取相邻的5张连续切片,光镜观察、图像分析。结果显示,多浪羊与卡拉库尔羊的LHR阳性物质主要见于膜细胞、卵母细胞、颗粒细胞和血管周围间质,尤其在膜细胞和卵泡颗粒细胞的胞质中分布最多。原始卵泡卵母细胞中便有LHR受体阳性物质分布,在各级卵泡中LHR阳性细胞数量和染色强度随卵泡发育呈正向增加趋势。