筛选和制备单或多克隆抗体进行间日疟疾免疫诊断研究——Ⅱ、单抗筛选检测方法—斑点免疫结合试验的建立

比较间日疟、恶性疟和食蟹猴疟原虫可溶性抗原不同蛋白包被浓度、酶结合物稀释度以及几种混合纤维素膜的测定结果,建立和稳定DIA(斑点免疫结合试验)方法,用以检测和筛选单克隆抗体获得较好效果。与常规IFAT(免疫荧光抗体试验)比较,DIA敏感性高,抗原用量小,可用肉眼判定结果。

胶体金免疫结合试验在检验医学中的应用

目的探究胶体金免疫结合试验在检验医学领域的价值与应用。方法从2018年1月-2019年1月该院收治的相关疾病患者进行随机抽取,共600例患者进行研究,使用胶体金免疫结合分为GICA(金免疫层析试验)和GIFA(金免疫渗滤试验),通过不同的疾病类型选择不同类型试验,在几种不同类型的疾病(细菌性疾病,真菌性疾病,病毒疾病等)中使用胶体金免疫结合试验,分析其在不同类型疾病中的检验结果以及检测准确性。结果胶体金免疫检测的两种病毒性疾病(柯萨奇病毒和流行性出血抗体)灵敏度分别为96.37%和98.15%,检测符合率为95.0%和96.5%,检测准确率高。该试验检测寄生虫疾病灵敏度略高于渗透法,灵敏度分别为98.00%和100.0%,但两种检测方法间差异无统计学意义(P>0.05);胶体金免疫结合试验在该次检测的疾病中灵敏度均高于95%(除梅毒,灵敏度78%),特异性多为60%~70%,灵敏度检测效果好。结论胶体金免疫结合试验在检验医学中对各类疾病的检验有明显的效果,可以给部分疾病的诊断提供重要信息,提供更加有效的治疗方案。但该试验特异性较低,有待改进。

血清滤纸斑点免疫结合试验诊断棘球蚴病

以定性滤纸吸附血清样品,保存于室温和4℃冰箱内, 3和6个月后对所保存的血清滤纸进行生物素抗生物素系统斑点免疫结合试验,以检测血清样品中抗棘球蚴抗原的抗体.结果表明2种条件下保存的干血清滤纸的检测结果与新鲜血清样品检测结果基本一致(P>0. 05).证明在生物素抗生物素系统斑点免疫结合试验检测棘球蚴病患者免疫应答时,干血清滤纸法可作为患者血清样品的保存方法.

生物素抗生物素系统斑点免疫结合试验检测棘球蚴病患者的免疫应答

建立了生物素抗生物素系统斑点免疫结合试验 (BAS DIBA) ,并以此法研究了棘球蚴病患者对细粒棘球蚴 (Echinococcusgranulosus)抗原的免疫应答 .79例棘球蚴病患者血清、6 9例非棘球蚴病患者血清和 119例健康人血清的BAS DIBA试验结果为 :两试验检测抗棘球蚴抗原抗体的敏感性分别为 97.4 5 %和 92 .4 1% ;特异性分别为 98.4 0 %和 98.94 % ;在 91.14 %的棘球蚴病患者血清中 ,BAS DIBA试验较DIBA法敏感 ;两法同为阳性的棘球蚴病患者血清中 ,BAS DIBA检出的抗体效价的几何均数为DIBA法的 5 .4 8倍 ;4例DIBA试验阴性的棘球蚴病患者血清在BAS DIBA法中为阳性 .证实所建立的BAS DIBA法是检测棘球蚴病患者免疫应答敏感性高、特异性强的方法 ,特别是对于低抗体水平的棘球蚴病患者可能具有更高的应用价值 .

HRP—SPA斑点免疫结合试验诊断脑囊虫病的研究

本文用斑点免疫结合试验法检测脑囊虫病患者血清和脑脊液中的抗囊虫抗体,并与常规ELISA法进行比较。结果表明,47例确诊为脑囊虫病患者血清抗体滴度阳性率为85.1％～95.7％;35例确诊为脑囊虫病患者脑脊液阳性率为85.7％。血清在1:50～1:400,脑脊液在原液～1:10稀释时该法与常规ELISA比较阳性率相一致,当提高稀释(?)数时阳性率虽有不同,但无统计学差异(P>0.05)。49例非囊虫病患者和45例健康人血清在1:100以上稀释度时均未发现假阳性。囊虫病与包虫病患者血清有一定的交叉反应。

胶体金免疫结合试验在疾病预防控制领域检验中的应用分析

目的分析探究胶体金免疫结合试验在疾病预防控制领域检验中的临床应用。方法胶体金免疫结合试验应用于几种不同的病毒检测中,分析其应用结果。结果各类疾病中均具有显著地检测结果。结论胶体金免疫结合试验在各类疾病预防、控制、检验均有良好的应用效果。

疾病预防控制领域检验中胶体金免疫结合试验的应用探析

探析胶体金免疫结合试验在疾病预防控制领域检验中的价值。分别将胶体金免疫结合试验分别应用在不同细菌性疾病、病毒性疾病、寄生虫疾病及其他微生物疾病检验中,分析其在不同病菌中的应用效果。胶体金免疫结合试验在多种疾病中具有明显的检测结果 ,可为疾病诊断与治疗方案的制定提供重要信息。胶体金免疫结合试验在多种疾病预防、检验与控制中应用效果良好。

快速斑点免疫结合试验检测泌尿生殖道沙眼衣原体感染

采用新型斑点免疫结合技术,以特异性沙眼衣原体(chlamydia trachomatic,CT)单克隆抗体为基础建立快速定性检测方法,对533例性病门诊患者泌尿生殖道标本进行CT的检测,结果CT检出率为21.2％(113/533),男性CT检出率为18.9％(54/286);女性CT检出率为23.9％(59/247)。提示泌尿生殖道的CT感染在本地区STD高危人群中流行,应引起高度重视。

一步夹心点免疫结合试验检测HBeAg

一步夹心点免疫结合试验检测ＨＢｅＡｇ周伯平１姚集鲁２１广东省深圳市东湖医院肝病研究室５１８０２０２中山医科大学传染病教研室主题词肝炎抗原，肝炎／分析免疫测定ＳｕｂｊｅｃｔｈｅａｄｉｎｇｓｈｅｐａｔｉｔｉｓＢｅｅｎｔｉｇｅｎｓ／ａｎａｌｙｓｉｓｉｍ...

布鲁氏菌病补体结合酶联免疫吸附试验抗体检测试剂盒敏感性和特异性评价

为评价布鲁氏菌病补体结合酶联免疫吸附试验抗体检测试剂盒(CF-ELISA试剂盒)的敏感性、特异性及与其他试剂盒的符合率,用CF-ELISA试剂盒对布病感染地区牛、羊血清各200份,布病净化地区牛、羊群血清各100份进行抗体检测,同时与其他商品化检测试剂进行了比较。结果表明,感染地区牛、羊血清抗体的McNemar检验结果表明CF-ELISA试剂盒与间接酶联免疫吸附试验(iELISA)试剂盒和CGS的敏感性和特异性差异均不显著(P>0.05),Kappa一致性检验分析结果表明,CF-ELISA试剂盒与iELISA试剂盒检测结果有高度的符合性。检测净化地区牛、羊群血清抗体产品间的特异性和符合率均为100%。

斑点免疫结合法检测3种植物病毒

研究了改进的斑点免疫结合法在检测芜菁花叶病毒、烟草花叶病毒和小西葫芦黄化花叶病毒中的应用 .无论是使用全抗血清还是纯化的免疫球蛋白 ,检测感染组织粗汁液中的病毒或纯化的病毒 ,均获得了满意的结果 .同时进行的斑点免疫结合试验、酶联免疫吸附试验和免疫吸附电子显微术等的比较结果表明 :无论是检测纯化病毒还是感染组织粗汁液中的病毒 ,斑点免疫结合法的检测敏感性均优于后 2种方法 ,病毒的可测感度芜菁花叶病毒为 0 .6 5ng ,烟草花叶病毒为0 .39ng ,小西葫芦黄化花叶病毒为 0 .4 5ng ;应用碱性磷酸酶标记抗体及羟基吲哚磷酸盐和氮兰四唑为底物较为合适 ,这种底物可在室温下长期保存 ,并且反应产物为不褪色的紫色 。

用斑点免疫结合法测定登革病毒单克隆抗体亲和力

建立斑点免疫结合法（ＤＩＡ）测定抗体相对亲和力。用此法出定了登革病毒Ⅱ型非结构蛋白ＮＳ１四株单克隆抗体（ＭｃＡｂｓ）的相对亲和力，４株ＭｃＡｂｓ对ＮＳ１的亲和力各不相同。按５０％最大结合浓度分析，抗体株６─１／Ｃ为０．０５μｇ／ｍｌ．１─７／Ｆ为０．６７μｇ／ｍｌ．５Ｄ为２５．００μｇ／ｍｌ，３─１１／Ｃ为５７．００μｇ／ｍｌ。以上结果为应用这些单克隆抗体提供了依据。同时，说明用ＤＩＡ法测定ＭｃＡｂ相对亲和力的可行性。

棘球蚴抗原纯化对免疫球蛋白IgG免疫应答的影响

以纯化的棘球蚴抗原和未经纯化的粗抗原用于棘球蚴感染者血清中抗棘球蚴抗原的特异性免疫球蛋白IgG水平的检测试验,结果表明,当血清稀释度为1∶200时,使用纯化抗原可以获得较高的特异性(98.9%),并可保持在使用粗抗原及血清稀释度为1∶400时获得的较高的敏感性(93.7%),提示在棘球蚴感染者血清中抗棘球蚴抗原特异性免疫球蛋白IgG水平的检测中,使用纯化棘球蚴抗原和粗抗原均可获得较高的敏感性(93.7%)和较高的特异性(98.4%,98.9%),使用纯化抗原时的特异性略高,但在统计学上并无显著差异.

灰飞虱体内Wolbachia的感染与其携带水稻条纹病毒的相关性分析

使用斑点免疫结合试验(DIBA)和PCR法分别对灰飞虱体内水稻条纹病毒(rice stripe virus,RSV)和沃尔巴克氏体(Wolbachia)的感染特点进行研究。结果发现:灰飞虱体内广泛存在Wolbachia感染,但是灰飞虱体内Wolbachia的感染与其体内携带RSV的特点不存在明显的相关性,同时二者在经卵传播过程中也没有明显的相关性。这暗示了RSV和Wolbachia在灰飞虱体内虽然都可以垂直传播给下一代,但是二者在传播方式上或者在传播过程中可能是两个相对独立、相互间没有明显影响的过程。

用完整恶性原疟虫作抗原进行DIA诊断恶性疟

应用培养的完整恶性疟原虫虫体抗原代替可溶性抗原进行DIA,检测52例恶性疟病人血清,阳性率为94,2％,与用可溶性抗原DIA对同一批病人检测的阳性率为96.2％,两者无显著差异(p>0.05),但比ELISA的检测效果80.8％明显为高。48名健康人血清均未出现假阳性反应。此法与黑热病、肺吸虫病、姜片虫病和日本血吸虫病均无交叉反应。此法操作简便,适于一般实验室应用。

钩端螺旋体L型的鉴定

目的为鉴定钩端螺旋体Ｌ型菌株。方法用电镜检查、ＳＤＳ－ＰＡＧＥ及斑点免疫结合试验（ＤＩＢＡ）鉴定一株自钩体脑动脉炎患者血及脑脊液标本中分离到菌株。结果电镜显示该菌株细胞壁有缺陷，形态呈多形性，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ显示该菌株表达的蛋白质带型与钩体的相似，缺失了部分条带，无新的蛋白带出现 ＳＤＩＢＡ显示该菌株弱阳性。结论 多种方法均鉴定该菌株为钩端螺旋体Ｌ型。