从阳虚毒结探讨免疫编辑假说在防治肿瘤复发转移中的应用

免疫编辑假说自21世纪初形成,描述了肿瘤细胞在机体内经历免疫清除、免疫平衡、免疫逃逸的三个序贯阶段。肿瘤细胞躲避机体免疫监视,导致免疫清除失败,逐渐发展以致打破免疫平衡,发生免疫逃逸,从而导致最终的转移复发。从阳虚毒结角度,结合肿瘤病程不同阶段,探讨肿瘤细胞经历免疫编辑各阶段发生转移复发的机制:肿瘤早期,手术损伤阳气,免疫清除效率降低,癌毒内伏;中期药毒戕害阳气,免疫稳态失衡,癌毒胶结;晚期机体阳虚,无法维持带瘤生存,肿瘤细胞发生免疫逃逸。预防肿瘤转移复发应益气温阳以增强机体免疫功能,稍佐滋阴以防温燥;解毒抗癌以改善肿瘤微环境、削弱肿瘤细胞增殖能力。

IFN-γ逆转免疫编辑后人肺癌A549细胞对CIK杀伤敏感性的研究

目的:探讨IFN-γ对免疫编辑后人肺癌A549细胞对CIK杀伤敏感性的逆转作用。方法:应用RT-PCR和MTT方法分别检测IFN-γ对免疫编辑后A549细胞表面MICA表达的影响及A549细胞对CIK杀伤敏感性的变化。结果:免疫编辑后A549细胞表面低表达MICA,对CIK细胞杀伤敏感性低。IFN-γ可明显上调编辑后A549细胞MICA mRNA的表达率,提高CIK对编辑后A549细胞的细胞毒活性。结论:IFN-γ可以增强A549细胞表面MICA mRNA表达,逆转免疫编辑后A549细胞对CIK细胞杀伤敏感性。

自然杀伤细胞与肿瘤细胞之间的免疫编辑

自然杀伤细胞(nature killer cell,NK)是机体天然免疫的主要承担者,NK细胞表面表达的抑制性杀伤细胞免疫球蛋白样受体(inhibitory killer cell immunoglobulin-like receptor,KIR)和活化性受体NKG2D是调节NK细胞杀伤活性的主要受体。NK细胞通过其细胞表面的活化性受体和肿瘤细胞表面的相应配体结合,激活NK细胞的杀伤活性。NK细胞在杀伤肿瘤细胞的同时和肿瘤细胞之间发生了相互免疫编辑作用,结果导致肿瘤细胞表面NKG2D配体表达的降低或者肿瘤细胞表面NKG2D配体以可溶性的形式释放到外周血中与NK细胞结合;NK细胞受肿瘤细胞的编辑作用导致其细胞表面NKG2D受体表达的下降,抑制性杀伤细胞免疫球蛋白样受体表达增强,使得NK细胞的抗肿瘤效应减弱。在认识NK细胞和肿瘤细胞相互编辑过程和相关的分子机制基础上,采取措施阻断NK细胞的抑制性信号通路或增强活化性信号通路是提高NK细胞抗肿瘤效应的主要手段。

中医药对肿瘤免疫编辑过程重塑的分子机制研究

中医药是我国肿瘤治疗的重要特色。回顾多年的临床实践和基础研究,对患者机体的免疫调节是中医药治疗肿瘤的最大作用优势和特点。肿瘤免疫编辑是近年来提出来的包含免疫监视和免疫逃逸的肿瘤免疫调节的新理论,本文从促进荷瘤机体免疫监视和逆转免疫逃逸两方面诠释了中医药对肿瘤免疫编辑过程的重塑,揭示了中医药发挥免疫调节新的科学内涵,为今后的临床实践提供了新的理论基础。

人鼻咽癌细胞株CNE2对NK细胞KIR/NKG2D受体的免疫编辑作用及其对NK细胞杀伤功能的影响

目的探讨NK细胞与表达NKG2D配体的人鼻咽癌细胞株CNE2混合培养后4、24、48h时KIR、NKG2D的变化及其对NK细胞杀伤CNE2细胞活性的影响。方法PCR-SSP法检测CNE2细胞HLA-A、B、Cw表型、NK细胞KIR表型(选择3例健康者为试验对象),流式细胞仪检测对照组(新鲜分离的NK细胞)KIR2DL1、KIR2DL3、KIR3DL1、NKG2D的表达情况。IL2组(IL2培养的NK细胞)、CNE2组(CNE2、IL2、NK细胞混合培养)培养后4、24、48h时KIR2DL1、KIR2DL3、KIR3DL1、NKG2D的表达情况,LDH释放法测定IL2组及CNE2组培养24h后的NK细胞对CNE2细胞的杀伤活性。结果CNE2细胞表面HLA-A、B、Cw表型为A2,24;B18,35;Cw4,7。3例健康者均表达KIR2DL1、KIR2DL3、KIR3DL1。CNE2组4、24、48h时KIR2DL1、KIR2DL3表达较对照组、IL2组明显升高(P<0.01),NKG2D表达较对照组、IL2组明显降低(P<0.01),KIR3DL1表达与对照组、IL2组相比无明显变化(P>0.05)。IL2组4、24、48h时KIR2DL1、KIR2DL3、KIR3DL1及NKG2D表达与对照组相比无明显变化(P>0.05)。IL2组、CNE2组培养24h后的NK细胞对CNE2细胞的杀伤活性在效靶比10∶1时分别为(26.96±1.47)%和(2.74±1.64)%,两者相比差异有统计学意义(P<0.01);效靶比20∶1时分别为(35.74±3.59)%和(4.57±2.41)%,两者相比差异有统计学意义(P<0.01)。结论NK细胞与NKG2D配体阳性的肿瘤细胞持续性接触,下调NK细胞表面NKG2D表达,上调NK细胞表面与HLAI类分子相结合的KIR表达,导致NK细胞对靶细胞杀伤活性减低。本研究阐明了编辑后的NK细胞杀伤活性减低的分子基础,同时提示阻断HLAI类分子与KIR的结合或者增强NK细胞表面NKG2D的表达将有利于提高NK细胞杀伤肿瘤细胞的活性。

NK细胞与K562细胞之间相互免疫编辑作用及其对NK细胞杀伤活性的影响

目的:探讨NK细胞与K562细胞混合培养前、后其杀伤活性的变化及分子机制。方法:流式细胞仪检测NK细胞与K562细胞混合培养前、后细胞表面相应分子的变化,LDH释放法测定效靶比20∶1时NK细胞对K562细胞的杀伤活性。结果:相互编辑前,K562细胞表面MICA/MICB的表达率为(79.90±0.87)%,NK细胞表面NKG2D、KIR2DL1和KIR3DL1的表达率分别为(98.27±0.67)%、(45.70±1.22)%和(35.60±1.35)%。相互编辑后,K562细胞表面MICA/MICB和NK细胞表面NKG2D的表达率分别为(35.56±1.01)和(34.67±3.88)%,均明显低于编辑前(P=0.000);NK细胞表面KIR2DL1和KIR3DL1的表达率分别为(47.20±1.08)%和(34.03±1.20)%,与编辑前比较差异均无显著性(P>0.05)。效靶比20∶1时,NK细胞对编辑后的K562细胞的杀伤活性为(24.07±0.58)%,编辑后的NK细胞对K562细胞的杀伤活性为(16.95±2.00)%,均明显低于编辑前NK细胞对K562细胞的杀伤活性[(54.03±3.46)%](P=0.000)。结论:NK细胞与K562细胞持续性接触后,双方发生了相互免疫编辑作用;NK细胞的杀伤活性下降,其分子机制是细胞表面相应的配受体发生了变化。

IL-2、IL-15增强免疫编辑后NK细胞NKG2D的表达及其对鼻咽癌CNE2细胞的杀伤活性

目的:观察IL-2、IL-15对免疫编辑后NK细胞NKG2D的表达及其对鼻咽癌CNE2细胞杀伤活性的影响。方法:抗CD56磁珠纯化NK细胞后分为4组:(1)编辑前NK细胞组:加入100 U/ml IL-2;(2)单纯编辑组:NK细胞与CNE2细胞10∶1混合,加入100U/ml IL-2;(3)IL-2再培养组:纯化编辑后的NK细胞,加入1 000 U/ml IL-2;(4)IL-15再培养组:纯化编辑后的NK细胞,加入10 ng/ml IL-15。24 h后,流式细胞仪检测各组NK细胞表面NKG2D的表达;LDH释放测定法测定效靶比20∶1时各组NK细胞对CNE2细胞的杀伤活性。结果:编辑前NK细胞组、单纯编辑组、IL-2再培养组、IL-15再培养组NK细胞表面NKG2D的表达率分别为(97.63±0.83)%、(53.50±1.25)%、(94.47±1.00)%、(98.07±0.21)%。IL-2、IL-15再培养组NK细胞NKG2D的表达分别比单纯编辑组有显著的增加(P<0.01),该4组NK细胞对CNE2细胞的杀伤活性分别为(35.90±3.27)%、(4.70±2.30)%、(31.70±3.56)%、(40.18±2.94)%,IL-2再培养组、IL-15再培养组明显提高编辑后NK细胞对CNE2细胞的杀伤活性(P<0.01),IL-15的作用强于IL-2。结论:高剂量IL-2、IL-15可以上调免疫编辑后NK细胞表面NKG2D的表达,恢复编辑后NK细胞对鼻咽癌细胞CNE2的杀伤活性,IL-15的作用强于IL-2。

肿瘤免疫编辑与免疫治疗

Schreiber等人于2002年提出肿瘤免疫编辑学说。肿瘤免疫编辑分为3个阶段:清除阶段、均衡阶段和逃逸阶段。肿瘤免疫编辑学说较全面的阐释了肿瘤与宿主免疫系统之间的复杂的相互作用。肿瘤免疫编辑学说对肿瘤免疫治疗具有一定的指导意义。依据肿瘤免疫治疗实践,提出了肿瘤免疫编辑和肿瘤免疫治疗的一些观点。

肿瘤免疫编辑

肿瘤细胞具有逃避免疫系统识别和攻击的能力,而这种能力正是肿瘤细胞与免疫系统相互作用的过程中所形成的。传统的肿瘤免疫监视学说已不能完全涵盖这一概念,因此Schreiber和Dunn等于2002年首次提出了肿瘤免疫编辑学说。肿瘤免疫编辑包括免疫监视和免疫逃逸。它反映了免疫系统具有抵抗肿瘤的保护性功能,同时又对肿瘤具有塑型作用,即对肿瘤细胞实施免疫选择压力,使弱免疫原性肿瘤细胞得以逃逸并进一步生长。肿瘤免疫编辑学说的提出不仅具有重要的理论意义,同时对肿瘤的免疫治疗也具有指导作用。

肿瘤的免疫监视和免疫编辑

免疫系统和肿瘤的相互作用中,免疫系统发挥了双重作用。机体的免疫监视作用能抑制非病毒源性肿瘤的发展,同时部分肿瘤在发展过程中经历了免疫系统的重塑,其免疫表型发生改变从而利于其进展。因此,把机体的免疫监视理论作用完善为“免疫编辑”。本篇将对肿瘤免疫编辑的三个过程:清除、平衡和逃逸进行概述,藉此为肿瘤的攻克提供有效的免疫治疗策略。

NK细胞免疫编辑后的人鼻咽癌细胞株CNE2 HLA I类分子和MICA/MICB的表达及其对NK细胞杀伤活性的影响

目的:探讨自然杀伤(NK)细胞与表达NKG2D配体的人鼻咽癌细胞株CNE2混合培养24h时CNE2细胞表面HLAI类分子及MHCI类链相关分子(MICA/MICB)的变化及编辑前、后的CNE2细胞对NK细胞杀伤敏感性的差异.方法:PCR-SSP法检测NK细胞KIR分型,流式细胞仪检测编辑前的CNE2细胞(单纯培养的CNE2细胞),编辑后的CNE2细胞(NK细胞与CNE2细胞10∶1混合培养24h)表面HLAI类分子及MHCI类链相关分子(MICA/MICB)的表达情况,LDH释放法测定3例健康者的NK细胞在不同效靶比时对编辑前、后的CNE2细胞的杀伤活性.结果:编辑前、后的CNE2细胞表面MICA/MICB的表达率分别为(88.67±2.81)%和(34.53±3.15)%,两者相比差异有统计学意义(P<0.01);编辑前、后的CNE2细胞表面HLAI类分子表达率分别为(99.77±0.12)%和(97.80±0.87)%,两者相比差异无统计学意义(P>0.05).NK细胞对编辑前、后的CNE2细胞的杀伤活性在效靶比10∶1时分别为(26.96±1.47)%和(6.60±0.86)%,两者相比差异有统计学意义(P<0.01);效靶比20∶1时分别为(35.74±3.59)%和(11.57±2.02)%,两者相比差异有统计学意义(P<0.01).结论:CNE2细胞与NK细胞持续性接触24h,CNE2细胞表面HLAI类分子表达无改变,MI-CA/MICB表达下调,导致编辑后的CNE2细胞激发NK细胞杀伤活性下降.本研究初步证明了NK细胞对编辑后的肿瘤细胞杀伤活性下降的分子基础,同时为我们如何提高NK细胞的杀伤活性提供了新的干预的靶点.

免疫编辑前后细胞因子诱导的杀伤细胞分泌细胞因子水平及细胞毒活性的比较

目的探讨免疫编辑前后细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine-induced killer,CIK)分泌细胞因子水平及细胞杀伤活性的变化。方法采用Ficoll密度梯度法提取脐血单个核细胞,定向诱导成CIK细胞,即免疫编辑前CIK细胞。Transwell小室共培养CIK细胞与人肺癌A549细胞,分离纯化CIK细胞即免疫编辑后CIK细胞。通过ELISA和MTT法分别检测免疫编辑前后CIK细胞分泌细胞因子水平及细胞毒活性的变化。结果CIK细胞与A549细胞共培养后,其分泌细胞因子IFN-γ和TNF-α的含量较共培养前CIK细胞显著下降(P<0.05),IL-2则略有降低。共培养后CIK细胞杀伤活性明显减弱(P<0.05)。结论CIK细胞与人肺癌A549细胞间存在免疫编辑作用,编辑后的CIK细胞分泌细胞因子水平及杀伤活性均下降。

肿瘤免疫编辑理论与树突状细胞个体化治疗肿瘤策略的思考

利用树突状细胞瘤苗提高机体免疫系统对肿瘤的特异杀伤能力,已成为肿瘤免疫治疗中的研究热点。根据肿瘤免疫编辑理论,肿瘤免疫可分为清除、平衡和逃逸3个阶段。应用该理论阐述应用树突状细胞个体化治疗肿瘤的策略具有重要意义。

免疫编辑诱导的免疫治疗耐药

近年来,免疫治疗在多种恶性肿瘤治疗中取得突破性进展,为肿瘤患者带来明显生存获益。然而,免疫系统在识别和杀伤肿瘤细胞的同时,出现免疫编辑诱导,导致大多数患者对免疫治疗具有先天或后天的耐药性。肿瘤免疫编辑是免疫系统抑制或促进肿瘤发生发展的过程,肿瘤的发生发展经历了免疫消除、免疫平衡和免疫逃逸三个阶段。在整个过程中,肿瘤的免疫原性被编辑,并获得使疾病进展的各种免疫抑制机制,致使肿瘤细胞逃避免疫系统的监测,导致肿瘤细胞免疫逃逸产生耐药。因此,揭示肿瘤免疫治疗耐药机制及克服耐药至关重要。本文主要从肿瘤免疫编辑过程背后的机制对肿瘤免疫治疗耐药作一具体阐述,为临床中克服免疫耐药取得更好疗效提供参考。

“扶正治癌”通过免疫编辑防治肺癌的研究进展

中医学认为肿瘤形成的主要原因为"正气"不足,提倡"养正积自消"的治则,从而针对性地选择可以提高或调节免疫功能的中药来增强机体的免疫功能,以达到抑制肿瘤的目的。免疫理论指出免疫系统不但有免疫抑制作用,防止自身免疫病;而且有免疫监视作用,预防肿瘤免疫逃逸。随着对免疫系统的深入研究,研究人员发现以一种整体性来发挥作用,这与中医学的整体观念极其相似。"扶正治癌"一方面能够有效改善癌症患者的生活质量、延长其生存期,另一方面能够调控免疫编辑,从而抑制肿瘤细胞逃避免疫监视、增强机体免疫功能从而阻止免疫逃逸预防癌症转移的发生。以下将从几方面探讨"扶正治癌"通过免疫编辑防治肺癌的研究进展:肺癌发病与免疫调控紊乱的关系、"扶正治癌"的优势、"扶正治癌"调控免疫编辑等。

肿瘤免疫编辑研究现状

免疫系统抑制肿瘤生长的同时肿瘤的恶性程度逐渐强化,这一过程被称作为“肿瘤免疫编辑”.这一概念的是在对肿瘤免疫学认识不断深入的基础上提出的,分免疫清除、免疫对抗、免疫逃逸3个阶段.现就肿瘤免疫编辑的3个过程及最新进展做一综述,有助于设计更合理的方案,更好的防癌抗癌.

免疫编辑学说视角下探讨中医药对肿瘤免疫抑制的逆转机制

肿瘤的发生不仅仅是细胞异常增殖的过程,随着现代医学研究的深入,肿瘤与机体免疫之间错综复杂的关系越来越受到研究者的重视,并促成了免疫编辑学说的提出,通过对机体免疫功能的调节进而达到控制肿瘤的生长、侵袭和转移已经成为近年来的研究热点。

颗粒酶系统在免疫编辑中的作用初探

在颗粒酶杀伤体系中,快速、高效的引发靶细胞死亡是由多个颗粒酶介导实现的.笔者就颗粒酶发挥作用的机制,探讨其在免疫编辑中的核心作用.细胞毒性T细胞（CTL）和自然杀伤（NK）细胞识别并杀死病毒感染或恶性转化细胞通过两个主要途径：①CTL使用其细胞表面的肿瘤坏死因子超家族（TNF）的配体结合靶细胞表达的相应受体使其死亡;②CTL / NK细胞还可以使用细胞毒颗粒胞外分泌途径,通过细胞介导的颗粒胞吐进入靶细胞,其中起重要作用的时膜裂解蛋白穿孔素,能促进颗粒酶发挥细胞毒作用,以快速,高效的促进细胞凋亡[1].

基于免疫编辑假说探讨中医阴阳平衡与肿瘤免疫

肿瘤免疫编辑假说认为免疫系统在肿瘤发生发展过程中具有双重作用,分为免疫清除、免疫平衡以及免疫逃逸三个序贯的阶段。中医理论认为阴阳失衡是导致肿瘤发生发展的关键。中医药治疗肿瘤强调通过调整阴阳达到阴平阳秘的平衡状态,从而实现控制肿瘤生长、改善患者临床症状、提高患者生活质量等目的。本文应用肿瘤免疫编辑假说,将机体阴阳平衡与机体免疫清除、阴阳失衡与肿瘤细胞免疫逃逸联系起来,并结合目前中医药治疗肿瘤实践,尝试探讨中医基本病机中的“阴阳平衡”与肿瘤免疫编辑假说间的相关性,以为肿瘤免疫治疗中充分发挥中医药多靶点、多层次、多因素的作用提供借鉴。