肿瘤浸润淋巴细胞在重度免疫缺陷小鼠体内毒性研究

目的评价肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)在重度免疫缺陷小鼠体内的毒性反应。方法使用NOG小鼠,给予TIL细胞3次,每周1次。考察小鼠临床症状、注射部位刺激性、摄食量、体重、血液学和血清生化检查、人源细胞因子检测和组织病理学检查等,同时考察受试物在血液中的分布情况。结果两个剂量TIL注射对小鼠注射部位、体重、摄食量、血液学、血清生化、脏器重量等指标未见明显影响。在高剂量下,雌性小鼠在恢复期结束时IFN-γ浓度升高。与受试物相关的组织病理学改变为多器官混合细胞聚集,以及胸骨和大腿骨骨髓细胞数目增多。在血液中,均可检测到CD3^(+)、CD3^(+)CD4^(+)、CD3^(+)CD8^(+)细胞,3种细胞变化趋势一致,且呈剂量依赖性,至末次给药后29 d,3种细胞数量基本消除。结论NOG小鼠3次给药后,对TIL具有较好的耐受性,且在恢复期结束时TIL在小鼠血液中基本消除。

黄酒多糖对免疫缺陷小鼠血清免疫相关因子的影响

研究黄酒多糖对免疫缺陷小鼠血清免疫因子的影响。选择健康昆明小鼠,适应性喂养4 d后,分成5组:空白组、环磷酰胺(cyclophosphamide,CY)模型组、CY+黄酒多糖(低、中、高剂量)组,每组10只。黄酒多糖按高、中、低3个剂量(50、100、200 mg/(kg·d),均以体质量计)给小鼠灌胃,1次/d,连续给药14 d,空白组和CY模型组给予生理盐水。第19天除空白组,其余4组腹腔注射环磷酰胺,连续4 d。处死小鼠,眼眶取血,测定血清中白细胞介素-6(interleukin 6,IL-6)、干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、免疫球蛋白(Ig A、Ig M、Ig G)、补体(C3、C4)水平。结果表明,与CY组相比,黄酒多糖能提高IL-6、IFN-γ、TNF-α、免疫球蛋白(Ig A、Ig M、Ig G)和补体(C3、C4)水平,并且随着低中高剂量效果依次增加。由此说明,黄酒多糖能提高免疫缺陷小鼠的免疫功能。

免疫缺陷小鼠肿瘤模型的建立及其肿瘤相关免疫机制的探讨

目的:观察不同免疫缺陷小鼠中的人肝癌细胞生长情况以及T,B淋巴细胞的免疫作用,探讨免疫缺陷小鼠肿瘤模型制作的意义。 方法:将体外培养的人肝癌细胞接种到四种免疫缺陷小鼠,分别为:B细胞缺陷的CBA/N,T细胞缺陷的Balb/c-nu,T,B细胞缺陷的SCID及免疫重建的SCID小鼠,观察其生长特点;作鼠脾细胞毒试验,测定外周血CD4^+,CD8^+数分数和荷瘤鼠血清Ig含量的变化;作肝癌细胞凝集试验。 结果:CBA/N和用BALB/c鼠外周血淋巴细胞重建的SCID(B-PBL-SCID)鼠不成瘤,nude、SCID和用CBA/N鼠外周血淋巴细重建的SCID(C-PBL-SCID)小鼠全部成瘤;SCID鼠的瘤体比裸鼠瘤体长的更快,肝内接种转移率更高、转移范围更大。接种瘤细胞的BALB/c和CBA/N鼠脾细胞对癌细胞杀伤力较强,免疫重建的SCID鼠脾细胞毒杀伤较小。接种瘤细胞的鼠CD4^+数分数都下降,CD8^+变化不大,CD4^+/CD8^+比值下降。具有B细胞的实验鼠均测得Ig在mg·L^(-1)水平,并能使癌细胞产生凝集反应。 结论:SCID鼠是建立肿瘤模型和免疫重建研究的理想小鼠;小鼠成瘤率与T细胞相关,T细胞在异种瘤移植排斥中起主要作用;B淋巴细胞及其产生的抗体在抗肿瘤中起着不可忽视的作用。

严重免疫缺陷小鼠皮层脑梗死模型的制作

目的介绍严重免疫缺陷(SCID)小鼠皮层脑梗死模型的制作和相对梗死体积测量计算方法.方法 SCID小鼠嗅束外缘外侧1～2 mm范围内电凝并切断左侧大脑中动脉,术后24 h麻醉后经心脏灌注碳素墨汁染色以及取脑TTC染色进行大体观察;术后1个月经心脏灌注固定后取脑,中线部分处左侧皮层宽度除以右侧皮层宽度得出皮层梗死宽度指数(CWI)作为相对梗死体积的观察值.结果模型制作成功率达到90%,梗死部位固定在左侧大脑皮层.SCID小鼠的CWI为0.34±0.03,变异系数为8.8%.结论使用SCID小鼠制作的皮层脑梗死模型有很高的成功率和稳定性.CWI作为梗死体积的观察指标,测量方便,变异小.

基于CRISPR/Cas9技术构建严重联合免疫缺陷小鼠

目的应用CRISPR/Cas9技术靶向敲除编码小鼠T、B细胞的Rag2基因及编码NK细胞的IL2rg基因,构建T、B细胞及NK细胞联合免疫缺陷小鼠。方法根据Genbank报道的Rag2及IL2rg基因序列,分别针对其外显子设计25 bp左右的sgRNA并进行合成,sgRNA退火后克隆入p X330载体。Rag2-sgRNA、IL2rg-sgRNA及Cas9重组质粒体外转录为mRNA后显微注射入BALB/c小鼠受精卵细胞,受精卵细胞移植到受体动物获得子代小鼠,首建鼠(F0)与野生型小鼠交配获得F1代小鼠,突变的F1代小鼠互交后筛选F2代纯合子小鼠。通过基因测序、流式细胞技术及接种人源性肿瘤细胞系方法检测子代小鼠基因型和表型。结果成功构建了Rag2-sgRNA、IL2rg-sgRNA重组质粒并对其进行了体外转录,mRNA显微注射并移植后获得57只F0小鼠。连续交配后,获得F2代纯合子小鼠。序列分析表明子代小鼠中IL2rg有两个基因型,分别是10 bp和11 bp的缺失突变;而Rag2只有一个基因型,为8 bp的缺失突变。与野生型BALB/c小鼠相比,小鼠外周血中CD3、B220及NKp46阳性细胞数量明显降低。接种人乳腺癌细胞系SKBR-2HL后,肿瘤生长良好,且随着时间延长肿瘤组织逐渐增大。结论利用CRISPR/Cas9技术可有效实现BABL/c小鼠体内Rag2、IL2rg基因突变,并导致小鼠T、B及NK细胞功能异常。

不同来源高度免疫缺陷小鼠微卫星DNA遗传检测的分析

目的对不同来源的高度免疫缺陷小鼠进行遗传背景的检测分析,旨在发现经遗传修饰的小鼠遗传背景是否符合近交系遗传特征。方法对收集到的4种不同来源以NOD为背景的高度免疫缺陷小鼠,选取30个微卫星DNA位点进行PCR检测,通过凝胶电泳结果和STR扫描确定基因型,进行遗传分析。结果 4组20个样本中共有17个位点呈现多态性,A、B两组小鼠30个微卫星位点表现为纯和,其他两组小鼠中不同位点均出现杂合个体;A、B两组遗传距离最小,保持着较高的遗传相似度。结论研究表明,不同来源高度免疫缺陷小鼠遗传背景有差异。

活血生津煎剂对免疫缺陷小鼠免疫功能的调节作用

目的观察活血生津煎剂对免疫缺陷小鼠免疫功能的影响。方法以免疫抑制剂环磷酰胺(Cy)处理 BALB/C 小鼠,而获得免疫缺陷小鼠模型。实验组受试药物为活血生津煎剂,设高剂量组、中剂量组和低剂量组,同时选六味地黄汤作为阳性对照药。结果与环磷酰胺组比较,活血生津煎剂高剂量组及阳性对照组小鼠胸腺指数增加,NK 细胞活性提高,动物血清溶血素抗体水平增加,TNF-αIL-2、IL-6 活性提高,差异有显著性(P<0.05)。结论活血生津煎剂多角度提高免疫低下小鼠的细胞和体液免疫功能。

人造血干细胞的免疫缺陷小鼠移植模型研究与应用

已有多种免疫缺陷动物被用于人造血干 /祖细胞的检测。理想的免疫缺陷动物应具有完整的免疫缺陷 ,能高效的移植人造血干 /祖细胞 ,又有足够长的寿命能适于观察。通过介绍Nude、SCID、Nod/SCID、NOD/SCID β 2mnull等一系列免疫缺陷小鼠的遗传及免疫学特点及其在造血干细胞研究中的贡献。本文综述了小鼠移植模型的发展 ,评价了免疫缺陷移植模型在造血干细胞研究中的重要性及小鼠移植模型的新进展和方向。

人肺癌不同程度免疫缺陷小鼠的移植及其高转移模型的建立

将不同转移特性的人肺巨细胞癌PLA－801C、PLA－801D、PLA－801DL及人肺腺癌Anip973四株裸鼠皮下移植瘤作为瘤源，分别移植于60Co－γ辐射裸鼠、单纯脾切除或复合60Co－γ辐射脾切除探鼠、SCID小鼠．观察移植瘤转移情况。结果表明：脾切除或复合60Co－γ脾切除裸鼠更有利于移植瘤转移表型表达，在裸鼠及SCID小鼠体内未发现转移的PLA－801C移植瘤在脾切除裸鼠出现淋巴结转移，提示高转移瘤株与低转移瘤株是一个相对概念，肿瘤转移表型的表达是肿瘤与宿主相互作用的结果。

重度联合免疫缺陷小鼠的繁育及其应用初报

应用带过滤罩的透明鼠笔在层流柜内繁育Ｔ和Ｂ淋巴细胞缺失的重度联合免疫缺陷（ｓｃｉｄ）小鼠获得成功。１９９３年５月至１９９４年４月，共繁育ｓｃｉｄ小鼠２２１只，寿命均超过１２个月。平均每窝产仔数为５．５只，显著低于对照组ＢＡＬＢ／ｃ小鼠；不育率为１４．９％，离乳率为８８．２％，与ＢＡＬＢ／ｃ小鼠相比均无明显差异。ｓｃｉｄ小鼠４～１０周龄的体重与同龄ＢＡＬＢ／ｃ小鼠相比也无明显差异，微生物学检测均符合ＳＰＦ级小鼠标准。剖检发现其胸腺极小，胸腺的相对重量仅为同龄ＢＡＬＢ／ｃ，小鼠的６％左右，脾脏相对重量则为２７９６～３７％。外周血淋巴细胞仅占白细胞总数的１１％～２６％。人癌移植于ｓｃｉｄ小鼠后获得３种人癌移植瘤：肺腺癌（ＬＡＸ－８３），肝细胞肝癌（ＬＣ－４１２），结肠粘液腺癌（ｃｏｌｏｎ），其平均瘤重均显著大于裸小鼠。

非肥胖型糖尿病及严重联合免疫缺陷小鼠体内成人脂肪源Flk1^+CD31^-CD34^-细胞的多向分化

目的:探讨成人脂肪源Flk1+CD31-CD34-细胞用于移植的可能性。方法:将男性成人脂肪源Flk1+CD31-CD34-细胞按106个/只剂量经尾静脉输入10只6～8周龄、接受亚致死剂量射线照射的非肥胖型糖尿病及严重联合免疫缺陷(NOD/SCID)小鼠体内(实验组),对照组10只输注等体积的RPMI1640培养基,2个月后处死动物,检测植入情况。结果:在实验组小鼠体内,脂肪源Flk1+CD31-CD34-细胞不仅有助于造血重建及体内微血管损伤的修复,参与血管新生,还能分化为消化道上皮细胞;而对照组小鼠则在2周内全部死亡。结论:脂肪源Flk1+CD31-CD34-细胞极有可能成为一种理想的种子细胞用于移植。

犬蛔虫ES产物对正常小鼠和免疫缺陷小鼠外周血嗜酸性粒细胞的影响

已有很多报道认为蠕虫，如蛔虫［１］、血吸虫［２］和旋毛虫［３］，感染小鼠后嗜酸性粒细胞升高。犬蛔虫感染正常纯系小鼠的第１０ｄ和２８ｄ时出现２次嗜酸性粒细胞血症；而无胸腺裸鼠感染犬蛔虫后，仅出现１次嗜酸性粒细胞血症［４］。由此表明犬蛔虫感染小鼠后的嗜酸...

严重联合免疫缺陷小鼠的免疫重建及其在HIV-1研究中的应用

严重联合免疫缺陷小鼠的免疫重建及其在ＨＩＶ－１研究中的应用张梅英秦英（综述）王太一（审校）（中国医科大学实验动物部，沈阳）ＳＣＩＤ小鼠（ＳｅｖｅｒｅＣｏｍｂｉｎｅｄＩｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｔＭｉｃｅ）即严重联合免疫缺陷小鼠，为一种先天性Ｔ和Ｂ细胞...

利用CRISPR/Cas9技术建立NOD/SCID/IL2Rγ^(-/-)免疫缺陷小鼠（英文）

目的 NOD/SCID/IL2Rγ-(/-NSG)小鼠品系是最严重的免疫缺陷品系,广泛应用于异种移植的研究。然而,SCID突变是Prkdc基因的一个自发性突变,会导致T细胞发育阻滞后渗漏而且很难进行基因型鉴定。因此,开发一个敲除Prkdc和IL2Rγ基因的新品系NSG小鼠非常重要。方法使用CRISPR/Cas9系统实现Prkdc和IL2Rγ基因的靶向敲除。将基因敲除小鼠与NOD背景小鼠杂交,我们产生了新品系NOD/SCID/IL2Rγ-(/-NSG)小鼠,称为cNSG(中国NSG)小鼠。结果 cNSG小鼠完全缺乏T细胞,B细胞以及NK细胞而且表达NOD突变。体内成瘤实验证实cNSG鼠是一种比免疫缺陷裸鼠更有效的异种移植模型。结论 cNSG小鼠与Jackson实验室的NSG鼠的免疫缺陷一致,有望成为中国生物医学研究的重要异种移植模型。

恶性疟疾的免疫缺陷小鼠模型研究进展

由于恶性疟原虫的宿主特异性,人们很难在小动物体内进行恶性疟疾红细胞内期的研究,这已成为制约该领域发展的一大难题。免疫缺陷小鼠以其体液免疫或/和细胞免疫缺陷的特点,除了在肿瘤学、免疫学、毒理学、感染性疾病等领域的基础性研究中被广泛应用外,也被用于对疟原虫无性生殖期的研究。本文将针对恶性疟原虫红细胞内期的免疫缺陷小鼠模型的研究进展综述如下。

免疫缺陷小鼠和人源化小鼠模型在干细胞质量控制中的应用

干细胞具有自我更新和多向分化的能力,在治疗糖尿病、脑损伤、急性心梗等疾病的治疗中有着巨大的潜力。由于干细胞产品种类繁多、批次差异性大、性质复杂,因此干细胞产品临床前的质量控制尤为重要。干细胞作为活性外源物质具有免疫原性,免疫缺陷小鼠和人源化小鼠在干细胞质量控制中发挥极大作用。本文综述了干细胞的免疫学特性、总结了常用的免疫缺陷和人源化小鼠模型,概述了免疫缺陷和人源化小鼠模型在干细胞质量控制中的应用,以期为干细胞质量控制标准化提供资料和信息。

几种常用免疫缺陷小鼠的血液学及血液淋巴细胞亚群的测定与比较分析

目的测定与比较分析几种常用免疫缺陷小鼠的血液学(血常规与血清生化)指标和血液淋巴细胞亚群百分率,为肿瘤、免疫学等研究和应用提供基础数据。方法 (1) BALB/cAnude、SCID、NOD-SCID和NPSG共4个免疫缺陷小鼠品系,每品系取6周龄小鼠各20只(雌雄各半),同周龄近交系BALB/cA小鼠作对照,采血后测定血常规(30项)和血清生化(25项)指标;(2)4种免疫缺陷小鼠6周龄,每品系雌雄随机各取2只,用流式细胞仪检测分析淋巴细胞亚群,同周龄近交系BALB/cA小鼠作对照。结果 (1)免疫缺陷小鼠的白细胞数(WBC)、淋巴细胞数(L Y M P H)、淋巴细胞百分率(L Y M P H%)和中性粒细胞数(NEUT)低于B A L B/c A小鼠(P<0.01),中性粒细胞百分率(NEUT%)和网织红细胞数高于BALB/cA小鼠(P<0.05,P<0.01);SCID、NOD-SCID、NPSG小鼠的WBC、LYMPH和LYMPH%显著低于BALB/cA-nude小鼠(P<0.05),NEUT%高于BALB/cA-nude小鼠(P<0.05)。(2)NOD-SCID和NPSG小鼠的血糖、三酰甘油水平低于BAL B/cA小鼠(P<0.01),而尿酸水平相对偏高(P<0.05)。(3)BALB/cA-nude小鼠T细胞严重缺失,B细胞和自然杀伤(NK)细胞活性降低;SCID和NODS C I D小鼠T细胞缺失,B细胞和N K细胞活性降低更加明显;N P S G小鼠T细胞、B细胞和N K细胞均表现为缺失。结论 BALB/cA-nude、SCID、NOD-SCID和NPSG小鼠的血液学性状和血液淋巴细胞亚群的百分率均符合相应免疫缺陷小鼠的品系特征。

重症联合免疫缺陷小鼠的分子生物学研究进展

重症联合免疫缺陷小鼠的分子生物学研究进展陆长明，综述，李厚达，校阅（苏州医学院核医学生物技术重点实验室）１９８３年，Ｂｏｓｍａ等［１］首先报道了一种隐性遗传的重症联合免疫缺陷（Ｓｃｉｄ）小鼠。该鼠免疫器官萎缩，体内缺少可检测的Ｔ、Ｂ淋巴细胞，血液中缺...