检测副溶血弧菌TDH斑点免疫胶体金渗滤法的研究

目的:制备特异性检测副溶血弧菌TDH的斑点免疫胶体金渗滤测试盒(Dot immunogold filtration assay,DIG-FA)。方法:T6D4和T9H4两株抗体分别标记于金颗粒和点样于硝酸纤维素膜,通过双抗体夹心法来开发斑点免疫胶体金渗滤测试盒,并对测试盒的特异性、重复性、稳定性做了分析。结果:研制的斑点免疫胶体金渗滤测试盒能够特异性检测副溶血弧菌TDH,其最低检测限达到250 ng/ml TDH,该测试盒在4℃恒温条件下保存12周后仍表现出准确和稳定的检测结果。结论:成功制备了检测副溶血弧菌TDH的斑点免疫胶体金渗滤测试盒,对现场快速检测TDH提供了可靠的测试工具。

胶乳凝集法和免疫胶体金渗滤法检测D-二聚体的比较

目的对胶乳凝集法和免疫胶体金渗滤法测定D-二聚体进行比较。方法对2008年11月至2009年1月间在本院就诊的86例临床怀疑血栓性疾病的患者,两种方法同时测定患者的D-二聚体。结果经配对四格表χ2检验,胶乳凝集法和免疫胶体金渗滤法测定D-二聚体结果差异有统计学意义(P<0.001)。结论免疫胶体金渗滤法比胶乳凝集法更适用于D-二聚体的快速检测。

斑点免疫胶体金渗滤法、免疫层析法联合酶联免疫法检测结核抗体诊断结核病的应用价值分析

目的本文旨在探讨斑点免疫胶体金渗滤法(TB-DOT)、免疫层析法(TB-IgG)和酶联免疫法(TB-SA)检测结核抗体诊断结核病的应用价值。方法选取本院2017年3月~2019年5月收治的100例结核病患者作为结核组,另选取同期的100例非结核病肺部疾病患者作为对照组。比较三种不同检查方法对结核病的诊断符合率和特异性。结果三种检查方式诊断结核病的阳性检出率比较,差异无统计学意义(P>0.05);三种检查方式诊断结核病的特异性和敏感性比较,差异无统计学意义(P>0.05);三项联合检查诊断结核病的阳性检出率为95.00%,明显高于两项检查(88.00%)和任一单项检测,差异有统计学意义(P<0.05)。结论三种检测方式联合检测结核抗体诊断结核病阳性率高,可为临床诊断提供参考依据。

结核病的诊断中应用免疫层析法、斑点免疫胶体金渗滤法联合酶联免疫法检测结核抗体的应用价值

分析对于结核病的诊断实施免疫层析法、斑点免疫胶体金渗滤法联合酶联免疫法检测结核抗体的临床价值。方法:选入我院于2018年1月-2019年1月收治的50例结核病患者(试验组)以及同期收治的非结核病患者(参照组),所有的患者均进行免疫层析法、斑点免疫胶体金渗滤法联合酶联免疫法检测。对比和分析两组患者采用三种检验方式对结核病的阳性检出率,采用三种检验方式联合检查诊断试验组结核病的阳性检出率。结果:两组患者采用三种检验方式对结核病的阳性检出率无差异性(p>0.05),组间不存在统计学意义(P<0.05);三种检验方式联合检查诊断结核病的阳性检出率高于两项检出率,组间比较具有差异性(P<0.05)。结论:对于结核病的诊断应用免疫层析法、斑点免疫胶体金渗滤法联合酶联免疫法检测准确率更高,为临床后续治疗提供有效的参考依据。

胶体金免疫渗滤法检测日本血吸虫病血清抗体的研究

应用建立的胶体金免疫渗滤法检测日本血吸虫病血清抗体,并以快速酶联免疫吸附试验(F-ELISA)方法检测作平行对照。现场和实验室试验表明,胶体金渗滤法与F-ELISA方法在敏感度和特异度的差异无统计学意义(P>0.05),两法具有较高的一致性。但胶体金免疫渗滤法操作简便快速,无特殊要求,在临床和现场防治工作中具有比较广泛的应用前景。

胶体金渗滤法与快速ELISA法定量检测D-二聚体对比分析

目的对比分析胶体金免疫渗滤法和快速ELISA法定量检测D二聚体(D-Dimer,DD)探讨临床应用价值。方法分别用胶体金免疫渗滤法和快速ELISA法检测质控物及2011年12月—2012年10月在我院住院病人107份标本的DD含量,对比两种方法的重复性、稳定性、特异性和敏感性。结果快速ELISA法检测DD的重复性、稳定性、特异度、敏感度优于胶体金免疫渗滤法;两种方法测定结果的相关系数r=0.693,相关性不理想。结论胶体金免疫渗滤法和快速ELISA法检测DD均具有较高的重复性、稳定性、敏感性,二者特异性不高,两种方法相比较有各自特点,实验室可根据自身具体情况进行选择D二聚体检测方法。

纳米胶体金免疫标记技术在牛病检测中的研究和应用

作者综述了以胶体金免疫渗滤法和胶体金免疫层析法为代表的纳米胶体金免疫标记技术近年来在牛病检测方面的研究和应用进展,并分析和预测其应用前景,为该技术在牛病临床检测领域的进一步研究与应用提供参考。

斑点金免疫渗滤法检测鼠疫菌的方法研究

目的 建立一种简便、快速的胶体金免疫渗滤法 (DIGFA)用于鼠疫菌的快速诊断。方法 用柠檬酸钠还原法制备 10nm的胶体金标记鼠疫多价抗体 ,制备成鼠疫抗体金探针。结果 鼠疫胶体金渗滤法对鼠疫FI抗原的最低检出限为 10ng/ml;对EV76的最低检出限为 2 .4× 10 5cfu ;除 4株鼠疫菌外 ,不与包括小肠结肠炎和假结核耶尔森菌等其他细菌发生交叉免疫反应 ;整个反应过程在 10min内完成。结论 该方法简便、快速、特异、敏感 ,不需任何特殊仪器设备 ,适合于现场鼠疫监测。

胶体金免疫渗滤法快速检测幽门螺杆菌血清抗体的研究和应用

目的 建立一种简便、快速、准确的检测胃幽门螺杆菌 (H .pylori)抗体的新型血清学诊断方法。方法 用胶体金标记技术与渗滤法相结合 ,建立了快速胶体金免疫渗滤法 (DIGFA) ,与ELISA对比检测 145份H .py lori感染血清 ,并与病理学检查对比检测 10 8份H .pylori血清。做阻断试验和IgG标准品最小蛋白含量的检出观察 ,对其敏感性、特异性做了分析并调查了 2 16例不同年龄组的人群感染率。结果 本法与ELISA相比 ,两者符合率为 95 1% ;与病理组织染色检查比较 ,两者符合率为 88 8%。DIGFA可检出IgG标准品的最小蛋白量为10 μg·mL-1,阻断试验证明该法检出的确为H .pylori特异抗体。流行病学调查人群感染率为 42 5 %。结论 DIGFA可作为临床辅助诊断和对消化不良病人的初筛检查 ,并适用于大规模流行病学调查 ,具有广阔的应用前景。

α-唾液淀粉酶胶体金免疫渗滤法的建立及其在中药酶学作用研究中的应用

目的建立α-唾液淀粉酶(salivary alpha-amylase,sAA)胶体金免疫渗滤法,制备胶体金免疫渗滤试纸,并将该试纸用于中药白术及葛根的酶学作用研究。方法采用胶体金标记技术,筛选最佳标记pH值和抗体标记量,制备金标抗体复合物,再利用纸基免疫渗滤技术,设计单因素试验,优化包被液种类、包被条件、封闭液种类、封闭条件、洗涤液种类、抗原抗体最佳工作浓度、包被抗原与金标抗体反应条件、待测样品与金标抗体反应条件共8个影响因素,建立胶体金免疫渗滤检测法,同时对免疫试纸的灵敏度和初步稳定性进行验证,并利用该试纸检测不同浓度中药白术和葛根提取液对sAA与其抗体特异性结合活性的促进或抑制作用。结果胶体金标记抗体的最佳pH值为8.5,最佳抗体稀释比例为1∶125,在此条件下制备的金标抗体复合物稳定性良好,活性效价为1∶384。sAA胶体金免疫渗滤法的最适反应条件为:以含8%甲醇的PBS缓冲液(0.01 mol/L,pH 7.4)为包被液稀释sAA至10μg/mL,37℃包被15 min;以含2%BSA的PBS缓冲液(0.01 mol/L,pH 7.4)为封闭液,37℃封闭15 min;以含0.4%Tween-20的PBS缓冲液(0.01 mol/L,pH 7.4)为洗涤液对NC膜进行洗涤;待测样品与稀释比例为1∶1的金标抗体于37℃下提前反应15 min,加入NC膜后25℃条件下再反应20 min,洗涤后根据斑点显色情况判断实验结果。制备的胶体金免疫渗滤试纸灵敏度为5μg/mL,稳定性良好。中药酶学作用研究结果显示,白术可促进sAA与其抗体的特异性结合,而葛根具有抑制作用,且两者作用程度与中药提取液的浓度呈正相关。结论建立的sAA胶体金免疫渗滤法操作简便、快速,成本低,灵敏度和稳定性良好,可为sAA的快速检测提供新方法。

滴金法检测幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白A抗体试剂盒的研制及应用

目的 建立一种快速、简易的检测血清中抗幽门螺杆菌 (Hp)细胞毒素相关蛋白A(CagA)抗体的胶体金免疫渗滤法 (DIGFA)。方法 采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒 ,标记葡萄球菌A蛋白 (SPA) ,将重组的CagA抗原固定于硝酸纤维素膜上 ,制成免疫渗滤试剂盒。血清中抗CagA抗体与试剂盒上金标记物及硝酸纤维素膜上的固相抗原结合后 ,形成肉眼可见的红色斑点。结果 用DIGFA与酶联免疫吸附试验 (ELISA)试剂盒对比检测了 32 6份血清标本中抗CagA抗体 ,本方法的特异性为 95 .8% ,敏感性为 97.3% ,两种方法符合率为 96 .6 %。结论 DIGFA检测血清中的抗CagA抗体特异性强、灵敏度高、简便快速 ,无需特殊仪器设备 。

建立快速诊断肾综合征出血热方法的研究

目的：建立一种检测血清中抗汉坦病毒IgM抗体的快速、简便、敏感的方法。方法：将羊抗人IgM抗体点于硝酸纤维素膜上，干燥封闭待用。向已包被抗体的硝酸纤维素膜上滴加患者血清后，再先后滴加汉坦病毒抗原，鼠抗汉坦病毒抗体，最后滴加金标抗鼠抗体直接显色，阳性反应为红色。整个操作过程一般超过10分钟。结果：用该法与IgM抗体捕获法ELISA对比检测40份肾综合征出血热（HFRS）患者血清标本，两法均阳性者38份，均阴性者2份，总符合率为100％，敏感性为95％。结论：胶体金免疫渗滤法操作简便，反应迅速，敏感性较高，不需要特殊的医疗设备，尤其适用于基层医疗单位，是HFRS早期诊断的好方法。

降钙素原检测在鉴别细菌和病毒性肠道感染性疾病中的应用

目的探讨降钙素原(PCT)对儿童感染性腹泻的诊断价值。方法采用半定量的胶体金免疫渗滤法对52例感染性腹泻患儿和20名正常儿童进行PCT检测。结果细菌性痢疾患儿组的PCT阳性率为41.2%(14/34),轮状病毒性肠炎组为5.6%(1/18),细菌性痢疾组与轮状病毒性肠炎组比较差异有显著性(P<0.01)。结论PCT水平与细菌感染相平行,是一项鉴别细菌和病毒性肠道感染性疾病的敏感指标。

包虫病特异性抗体检测试剂盒诊断效能评价及结果判定优化

为评价3种包虫病特异性IgG抗体诊断试剂盒的临床诊断效能,并针对其特异度差的问题进行优化,为包虫病免疫学诊断提供检测结果优化判定的策略,本研究共收集87例包虫病确诊病人血清,78例经排查为非包虫病就诊病人血清。每份血清同时采用3种试剂盒进行检测,对结果进行统计分析,评价各方法的诊断效能。通过受试者工作特征(ROC)曲线寻找各方法最佳诊断界值。采用胶体金免疫渗滤斑点法(DIGFA)对酶联免疫吸附法(ELISA)或胶体金免疫层析法(GICA)所得检测结果低于最佳诊断界值的阳性样本进行重新测定,以DIGFA法最佳诊断界值为结果判定标准。比较结果优化前后的诊断效能。结果显示,3种诊断方法的灵敏度在90.8%~94.3%之间,特异度在75.7%~83.3%之间。ROC曲线所得最佳诊断界值均高于试剂盒的cutoff值。检测结果经优化后,灵敏度保持在90.3%以上,特异度提升至88.5%以上。结果表明,3种诊断方法的特异度均不理想,本次研究通过对检测结果的优化判定,在不影响灵敏度的前提下可减少该部分血清假阳性结果的误判,提高方法的特异度,为包虫病临床诊断提供更为可靠的信息。