应用免疫胶体金银染色技术定位玉米内生细菌

本文利用光镜免疫胶体金银染色技术对玉米内生细菌进行了定位研究.用分离、筛选于玉米体内具有生防潜力的优势菌枯草芽孢杆菌B20-006菌株的特异性蛋白,制备兔抗血清作为一抗,二抗为金标记羊抗兔IgG,30%甘油-1%戊二醛固定组织,进行冷冻切片免疫胶体金银染色光镜观察.结果表明:枯草芽孢杆菌液浸根处理后5～7 d(三叶期)的组织切片中菌体有大量金银颗粒沉淀,内生细菌在根、茎、叶均有分布,大多寄生在植物组织的细胞间隙,菌量根部大于茎和叶部,根、茎、叶的菌量之比为12:3:1,证明枯草芽孢杆菌B20-006菌株为玉米内生细菌,且可在玉米体内繁殖和传导.

采用免疫胶体金标记结合负染色电镜技术对体外组装的中间纤维定性

将免疫胶体金标记与电镜负染色技术相结合，清晰显示体外组装的波形纤维具有１０ｎｍ中间纤维结构特征，抗波形纤维蛋白－金颗粒特异地标记在波形纤维上。用抗波形纤维蛋白－金颗粒对体外组装的微管进行标记则呈阴性反应。实验结果表明将免疫胶体金标记与电镜负染色技术相结合可以同时显示体外组装的细胞骨架纤维的精细结构和蛋白属性。

免疫金银染色法诊断血吸虫病的研究

应用免疫金银染色法(IGSS)诊断血吸虫病,并与ELISA法比较。检测153例粪检阳性和76例健康人血清,其敏感性和特异性分别为96.08％和100％,显著高于ELISA的88.24％和94.70(p>0.05);与肝吸虫病的交叉反应两法均为4.76％;治疗后3年的49例血吸虫病人阳性率IGSS和ELISA分别为30.60％和28.57％,两法无显著差异(p>0.05)。表明IGSS的特异性高,敏感性强,制备金标记物方法简便,结果稳定。

免疫金银技术

FaulR等(1971)将胶体金标记引入免疫化学,创建了免疫金染色法(Immun-goldstaining,IGS)。Geogh-egan等(1978)首先将胶体金染色法用于光镜水平的免疫标记。虽然高浓度的IGS试剂可使细胞染成红色,但由于金粒子太小,光镜下难以辨认,且用量大、价格昂贵,既不经济,也不敏感。因此,Holgate等(1983)将IGS改进发展为免疫金银染色法(Immun-gold-slwer staininy,IGSS),大大提高了检测的敏感性,使免疫细胞化学技术有了新的飞跃。与其它免疫标记技术相比,此法不影响二抗或葡萄球菌蛋白A与一抗的结合活性;而且灵敏度高(比PAP法至少敏感200倍),操作简便安全,所染标本不退色、易保存,可以在一般实验室推广使用,是目前免疫组化最敏感的方法之一。

免疫金银染色法检测B淋巴细胞膜表面免疫球蛋白

B淋巴细胞在分化成熟过程中产生膜表面免疫球蛋白(SmIg)。常用的检测方法为免疫荧光法,因限于设备条件难以在基层实验室开展。我们建立了测定B淋巴细胞SmIg的免疫金银染色法(IGSS)。

阿尔采默病患者皮肤α-微管蛋白的免疫细胞化学与胶体金免疫电镜观察

目的观察阿尔采默病(AD)患者皮肤基底细胞α微管蛋白的变化。方法取患者背部皮肤,用免疫细胞化学和胶体金免疫电镜技术观察,并进行定量分析。结果免疫细胞化学染色显示,对照组皮肤免疫阳性染色主要位于表皮层基底细胞的胞质内,棘细胞层和颗粒层可见少量的阳性细胞;AD组基底细胞内着色深,棘细胞层和颗粒层亦有表达,但数量少。胶体金标记结果显示,对照组基底细胞可见较丰富的微管,标记的胶体金散在于胞质。AD组微管较对照组减少;标记的金颗粒数量较对照组明显增多。定量结果显示,AD组α微管蛋白免疫细胞化学染色的AOD值(1. 165±0. 079)、VIOD值(186. 000±15. 853)均较对照组(0. 814±0. 152, 96. 020±14. 755)明显增高(P<0. 01);α微管蛋白胶体金标记颗粒数目AD组(20. 74±3. 99)亦较对照组(15. 50±3. 41)增多明显(P<0. 01)。结论AD患者皮肤基底细胞内微管数量的减少,结构破坏,对皮肤组织的观察可能间接反映神经组织的改变。

胶体金探针的研制及在T细胞亚群检测中的应用

采用鞣酸—柠檬酸钠还原法制备了不同颗粒大小（如φ6nm、φ10nm、φ15nm）、不同种类的胶体金标记抗小鼠IgG、抗人IgG及SPA等探针。所制备的胶体企探针直径达到标记要求，颗粒大小均匀，稳定性好。用该探针检测健康人外周血淋巴细胞表面抗原，如CD3、CD4和CD8等T-淋巴细胞亚类抗原，其本底低，对比度好，阴阳性分明，优于常规的免疫荧光法。

应用免疫金银直接染色法诊断肾综合征出血热

应用免疫金银直接染色法（Ｄ－ＩＧＳＳ）对肾综合征出血热病毒（ＨＦＲＳＶ）感染的Ｖｅｒｏ－Ｅ６细胞进行ＨＦＲＳＶ抗原检测，发现Ｅ６细胞的胞浆和细胞膜上能清楚地观察到黑色均匀的银颗粒，而用ＨＦＲＳＶ免疫兔血清ＩｇＧ作阻断试验，却未见银颗粒。在此基础上对３２例ＨＦＲＳ患者检测外周血白细胞中的ＨＦＲＳＶ抗原，并和间接免疫荧光法（Ｉ－ＩＦＡ）进行对照，结果病程１０天以内Ｄ－ＩＧＳＳ法阳性率达到１０００％，个别病例病程２３天仍能检出ＨＦＲＳＶ抗原，而ＩＦＡ法在病程１１天以后阳性率明显下降，病程１４天后未检出ＨＦＲＳＶ抗原。说明Ｄ－ＩＧＳＳ法敏感性明显高于ＩＦＡ法。为对比外周静脉血和手指末稍血白细胞中ＨＦＲＳＶ抗原检出率，对３２例患者进行同步采血，结果ＨＦＲＳＶ抗原检出率无显著性差异（Ｐ＜００５）。我们认为Ｄ－ＩＧＳＳ法检测ＨＦＲＳ患者末稍血中的ＨＦＲＳＶ抗原，是简而易行的方法，可用于ＨＦＲＳ早期诊断。

遗传 育种

Z981573 大麦细胞核及染色体肌球蛋白免疫细胞化学定位/陶伟,段晓刚…(东北师大遗传与细胞研究所)//实验生物学报.-1998,31(1).-95～99对去除 DNA、组蛋白和大部分非组蛋白的大麦细胞核和染色体间接免疫荧光标记实验结果表明:抗肌球蛋白抗体的荧光标记弥散分布在整个细胞核和染色体上;进一步应用免疫胶体金技术分析肌球蛋白在细胞核和染色体的分布情况,发现在染色体中散布着大量的胶体金颗粒;

银强化金标记免疫吸附剂试验的方法学研究

银强化金标记免疫吸附剂试验（ＳＥＧＬＩＳＡ）是一种新的非酶、非放射性免疫测定法，本文以兔抗ＢＳＡ抗体测定为模式，就它的原理、试剂制备和方法学最佳化等进行了研究，并与ＥＬＩＳＡ作了对比试验。