免疫荧光分析法检测ST2蛋白的临床性能评价

目的评价免疫荧光分析法检测ST2蛋白的临床性能,为临床选用不同方法的检测试剂盒提供依据。方法选取2022年11月至2023年2月广西中医药大学第一附属医院110例患者的血清作为试验样本,以美国Critical Diagnostics公司的Presage ST2试剂为对照,验证巴迪泰(广西)生物科技有限公司的免疫荧光分析法ST2蛋白检测试剂。使用线性回归分析法分析两种方法的相关性,通过Kappa检验分析两种方法定性判断检测结果的一致性,采用Bland-Altman Plot分析两种方法定量检测结果的一致性。结果线性回归分析法拟合的一元线性回归方程为y=0.9878x+1.6977,相关系数r=0.9959;Kappa检验的Kappa系数=0.901;Bland-Altman Plot分析结果显示,Mean±1.96s范围内检测结果的占比为96.36%(106/110)。结论巴迪泰(广西)免疫荧光分析法的ST2试剂与酶联免疫吸附法的Presage ST2试剂检测ST2蛋白的相关性密切、一致性高,等效性良好,均可满足临床检验需求。

溶血对时间分辨免疫荧光分析法测定胰岛素的影响

目的探讨溶血对时间分辨免疫荧光分析法测定胰岛素的影响。方法收集30例未发生溶血的血清标本,利用低渗溶血法分别制备轻度溶血、中度溶血、重度溶血标本各10例;采用时间分辨免疫荧光分析法分别测定各组标本溶血前(0h)和溶血后0.5、2、18h的胰岛素浓度;通过配对t检验、重复测量数据的方差分析对溶血程度和时间对胰岛素浓度检测结果的影响进行分析。结果轻度溶血、中度溶血、重度溶血标本之间胰岛素浓度检测结果比较差异无统计学意义(P>0.05);随着溶血时间的延长,胰岛素浓度呈明显下降趋势,0.5、2、18h检测结果与0h检测结果相比,比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论溶血程度对时间分辨免疫荧光分析法测定胰岛素浓度的影响不明显,但溶血时间则对测定结果具有较为明显的影响;标本溶血和溶血时间均为影响胰岛素浓度检测结果的重要因素。

百日咳毒素S1亚基蛋白时间分辨免疫荧光分析法的建立及应用

目的建立铕(Eu3+)标记检测百日咳毒素S1亚基蛋白时间分辨免疫荧光分析法。方法利用原核重组表达系统表达百日咳毒素S1亚基蛋白,并鉴定,采用双抗体夹心法建立检测S1 TRFIA分析方法。结果自制S1试剂盒检测灵敏度2.5 ng/ml,与其他抗原无交叉反应,并初步可应用于百日咳疫苗中免疫原的监测。结论自制百日咳毒素S1亚基蛋白时间分辨免疫荧光分析法能够较为可靠的监控百日咳疫苗质量。

检测游离β-HCG时间分辨免疫荧光分析法的建立及临床应用

目的建立一种快速灵敏的时间分辨免疫荧光分析法（TRFIA）,用于定量检测孕妇血清中游离β人绒毛膜促性腺激素（β-HCG）的浓度。方法包被游离β-HCG单克隆抗体,铕（Eu3＋）标记抗β-HCG单克隆抗体,建立双抗体夹心法游离β-HCG TRFIA,对该试剂的各项指标进行评价。结果最低检测量〈0.06 ng/mL;线性检测范围为0.052-400 ng/mL;分析内和分析间变异系数分别为1.0%-6.4%、3.3%-5.1%;人黄体生成素（HLH）、人促甲状腺素（HTSH）、人促卵泡激素（HFSH）和人绒毛膜促性腺激素（HCG）与本试剂的交叉反应率分别为0.04%、0.03%、0.05%和0.11%;1 043份孕妇血样用该试剂与进口同类试剂同时检测,2种试剂检测值具有显著相关性（r=0.990,P=0.000）;血清样本2-8℃储存超过3 d,室温储存1 d或冻融2次,与新鲜样本比较,游离β-HCG浓度显著性增加（P〈0.05）。结论该试剂敏感性高、特异性强、操作简便快捷,具有良好的精密度,可以替代进口试剂用于临床样本的检测。为保证结果的可靠性,应注意样本的保存条件。

酶联免疫法、金标法、时间分辨免疫荧光分析法测定HBsAg对比分析

目的探讨酶联免疫法、金标法、时间分辨免疫荧光分析法三种方法测定HBsAg的可靠性及优缺点。方法通过对1500名体检及临床标本用三种方法检测HBsAg，对其检测结果的准确度、灵敏度、特异性进行对比。结果三种方法在准确度、灵敏度、特异性方面酶联免疫法最低，金标法其次，时间分辨免疫荧光分析法最高。结论酶联免疫法检测HBsAg操作简便，可用于自动化分析，适用于大量标本的定性检测，如大量人群的乙肝筛查；金标法检测HBsAg操作简便快速，无需特殊仪器设备。适用于单份标本的定性测定，适用于急诊、社区诊所及家庭化验；时间分辨免疫荧光分析法检测HBsAg动态检测范围广、试剂稳定、自动化程度高，最有发展前途，但对实验室条件和操作人员条件要求高，适用于HBsAg定量检测。

免疫荧光分析法诊断A、B型流感病毒中的临床应用情况

目的分析免疫荧光分析法诊断A、B型流感病毒中的临床应用情况。方法研究时段自2016年7月-2018年7月,选定本院100例流感患者鼻咽拭子样本,采用GICA(胶体金免疫层析)法以及Sofia InfluenzaA+B FIA检测系统检测A、B型流感病毒。结果 Sofia InfluenzaA+B FIA检测法的阳性检出率(95.00%)显著高于GICA检测法(62.00%)的,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 Sofia InfluenzaA+B FIA检测系统具有较高的特异性、灵敏度,可迅速诊断A、B型流感病毒,值得借鉴。

溶血对时间分辨免疫荧光分析法测定胰岛素的影响

目的分析不同程度溶血对时间分辨免疫荧光分析法检测胰岛素结果的影响。方法选择健康成年体检者未发生溶血的300例血液标本,利用低渗溶血法分别制备出不同程度溶血标本,其中:轻度溶血100例、中度溶血100例、重度溶血标本100例;均采用时间分辨免疫荧光分析法对以上三组不同程度溶血标本分别检测其溶血前后的血清胰岛素水平;并进行组间对比分析。结果各组未溶血前检测结果与轻、中、重度溶血后比较,差异具有统计学意义(P<0.05);且轻、中、重度溶血标本间血清胰岛素水平检测结果比较,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论溶血对临床测定血清胰岛素水平具有较明显的影响,因此,在进行临床血清胰岛素水平检测时须尽量避免溶血现象发生。

单纯疱疹病毒IgM抗体(1+2型)时间分辨免疫荧光分析法的建立

目的利用时间分辨免疫荧光分析法研制单纯疱疹病毒IgM抗体(1+2型)检测试剂盒。方法基于"捕获法"原理,在96孔酶标板上包被抗人IgM单克隆抗体,铕标记特异性单纯疱疹病毒1型和2型单克隆抗体作为示踪物,建立单纯疱疹病毒IgM抗体(1+2型)检测试剂,并对自研试剂盒的各项性能进行评价,与同类试剂盒进行方法学比对试验。结果自研试剂盒的灵敏度与ELISA比较有较大的提高,分析内变异系数≤4.29%,分析间变异系数≤6.15%;血清盘检测结果与该血清盘说明书提供的Gull IFA试剂的测试结果一致;与进口酶免法试剂同时检测293份临床样本,自制试剂盒的临床敏感性达100%,临床特异性达98.88%,Kappa值为0.940(P<0.001)。结论自研试剂盒灵敏度高、特异性强、精密度好,与商业化的同类产品检测结果一致性好,能满足临床应用的需要。

BAS-时间分辨免疫荧光分析检测丙型肝炎抗体

本文介绍将丙肝抗原包被于微量滴定条孔上，使待测丙肝抗体与生物素化抗人ＩｇＧ产生免疫反应，再与Ｅｕ３＋标记的链亲合素产生亲合反应。将ＢＡＳ引入检测方法中，建立了ＢＡＳ－ＴＲＩＦＭＡ检测抗－ＨＣＶ。

免疫比浊法与免疫荧光定量分析法测量血清降钙素原比较

目的:比较免疫比浊法和免疫荧光定量分析法在测量血清降钙素原时的结果。方法:选取把在笔者所在医院进行降钙素检测的202例浓度不同的血清降钙素,分别用浙江兰森生物科技有限公司生产的乳胶增强免疫比浊法和广州万孚生物公司生产的免疫荧光定量分析法同时进行监测,并对结果和数据进行统计学的分析。结果:经比较,这两种方法在轻度升高组、低风险组、阴性组的浓度值方面比较,差异无统计学意义(P>0.05);在高度和中度升高组的浓度值方面比较,差异有统计学意义(P<0.05),免疫比浊法结果稍高于免疫荧光定量分析法的结果;总阳性率的比较方面,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:免疫比浊法和免疫荧光定量分析法均可用于临床血清降钙素原的检测,且免疫荧光法操作比较简便。

时间分辨免疫荧光技术检测3项血清指标的临床应用

目的探讨时间分辨免疫荧光分析法和放射免疫分析法检测游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离素甲状腺素(FT4)、促甲状腺激素(TSH)的方法学及临床应用。方法利用2种方法分别检测对260例甲状腺疾病患者的血清FT3、FT4、TSH进行检测,对甲状腺功能亢进、甲状腺功能低下的诊断标准及临床符合率给以统计分析。同时对血清FT3、FT4、TSH进行精密度、准确度、分析灵敏度、抗干扰情况等方面的分析,并进行相关性比较。结果 2种方法检测结果差异无统计学意义(P>0.05)。并且时间分辨免疫荧光法在患者结果可报告范围,精密度,灵敏度,准确度抗干扰试验方面稍优于放射免疫分析法。结论时间分辨免疫荧光法完全能够替代放射免疫分析法,并且还具有精密度及灵敏度高,抗干扰能力强,可报告范围宽等优点。在甲状腺疾病患者中FT3、FT4、TSH所测结果各有特点,有助于临床鉴别诊断。

不同检验方法对血源性病原体四项检查的检测应用

探索对血源性病原体四项检查的血清标志物在进行检测的过程中,采取不同的检测方法所起到的效果。方法 以系统随机化法,将2022.3-2023.5在我院住院治疗的65例患者均分为观察组与对照组两组。其中对照组(n=32):乙型肝炎表面抗原、梅毒螺旋体特异抗体、丙型肝炎抗体选择时间分辨免疫荧光分析法,人类免疫缺陷病毒抗体选择酶联免疫法进行检测,观察组(n=33)则全部采用电化学发光法进行检测。比较两组的诊断准确率、血清标志物的阳性情况。结果 在进行检测后,观察组的乙型肝炎表面抗原、梅毒螺旋体特异抗体检出情况、艾滋病毒检出情况与丙型肝炎抗体阳性检出率均显著高于对照组,P<0.05。结论 运用电化学发光法对血源性病原体四项检查的血清标志物进行检测,其不仅阳性检出率高,而且诊断准确率更高,患者能更快诊断,尽早接受治疗。是一种优质的检测方法,值得在临床上应用推广。

两种方法检测血清低水平乙肝病毒表面抗原比较

目的:比较时间分辨免疫荧光分析法(TRFIA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测低值乙肝病毒表面抗原(HB-sAg)的符合率。方法:分别用国产TRFIA试剂盒和ELISA试剂盒检测血清标本。结果:在234例乙肝病毒表面抗原浓度介于0￣0.5ng/ml的临床标本中,两种方法检测HBsAg同时阳性共41例,其中TRFIA检测阳性有46例,ELISA检测阳性有66例,符合率为87.18%。结论:在国产试剂HBsAg中,TRFIA与ELISA相比,特异性较高但灵敏度较低,在临床应用中应注意0.2￣0.5ng/ml的低值。

乙肝血清标志物与HBV-DNA定量检测结果分析

目的探讨乙肝血清标志物(HBVM)与HBV-DNA定量的关系,为临床诊断及治疗提供有价值的判断标准。方法采用聚合酶链反应和时间分辨免疫荧光分析法(TRFIA)分别对603例乙肝患者血清进行乙肝血清标志物(HBVM)与HBV-DNA定量检测。结果HBV-DNA定量结果与乙型肝炎病毒血清标志物不同组合间存在一定差异,乙型肝炎"大三阳"病毒检出率为94.4%,明显高于其他各组,有显著性差异(P值<0.01)。结论乙型肝炎患者HBsAg和HBeAg均为阳性模式HBV-DNA高于HBeAg阴性模式,乙型肝炎患者血清标志物与HBV-DNA含量之间存在一定的相关性,进一步探索其规律,能更好指导临床正确治疗。

加样时差及加样时间对时间分辨法检测弱阳性HBsAg标本的影响

目的:探讨加样时差及加样时间对时间分辨法检测弱阳性HBsAg标本的影响。方法:利用30份弱阳性HBsAg患者血清为检测对象,用加样时差和加样时间这2个条件进行实验。结果:30份标本在不同的加样时差所检测的结果不一致,加样时差对弱阳性标本的结果有影响;立即加样与30、45、60min后加样比较有明显差异(P<0.005)。结论:加样时间及加样时差影响弱阳性HBsAg检测的重复性;在常规检测操作中应将初试中高值阴性标本做复试,且保证复试标本加样优先,以避免漏检弱阳性标本。

丙肝抗体新型检测法及应用

建立灵敏的检测抗丙型肝炎病毒抗体(抗HCV)方法,对于丙型肝炎(HC)的流行病调查和丙肝诊断,具有重要意义。本文采用新型的时间分辨免疫荧光分析法(TRIFMA)检测丙肝抗体,方法具有灵敏度高,标记方便、标记物稳定、可大量检测样品等优点。用0.1MP^H7.5PBS对丙肝抗原作1:100稀释,包被于预处理的微量滴定条孔壁,用0.05MP^H7.8PBS作为封闭液,制备固相抗原;用0.25MP^H8.5CBS溶解免抗人IgG抗体(RAHIgG).

微孔渗漏法与聚合酶链反应联合检测沙眼衣原体

目的： 探索一种快速、经济、敏感的方法用来诊断泌尿生殖道中沙眼衣原体（Ｃｈｌａｍｙｄｉａ ｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓ， ＣＴ）。方法：用微孔渗漏法、聚合酶链反应法（ＰＣＲ）和直接免疫荧光分析法（ＤＦＡ）检测泌尿生殖道中ＣＴ。结果：微孔渗漏法阳性率为 ２５． ８７％， ＰＣＲ法阳性率为 ３４． ２８％，而 ＤＦＡ法仅为 ２５． ２４％，且微孔渗漏法不需要特殊仪器，测定时间短，工作量小，灵敏度高。微孔渗漏法与ＤＦＡ二者阳性率无显著性差别（Ｐ＜０．０５）。ＰＣＲ与ＤＦＡ二者阳性率有显著性差别（Ｐ＜０．０１）。结论： 因此微孔渗漏法与 ＰＣＲ法联合检测泌尿生殖道中 ＣＴ具有简便、快速、检出率高的优点。

慢性乙型肝炎346例血清学指标检测结果分析

目的:探讨慢性乙型肝炎患者血清中乙型肝炎病毒前S1抗原(HBV PreS1-Ag)、乙肝五项、HBV-DNA和肝功能之间的关系及其联合检测的临床应用价值。方法:分别采用酶联免疫法、时间分辨免疫荧光分析法、荧光定量-聚合酶链反应法、全自动生化分析仪检测346例慢性乙型肝炎患者的前S1抗原、乙肝五项、HBV-DNA含量以及肝功能指标。结果:慢性乙型肝炎346例患者中,HBV PreS1-Ag(+)214例(61.8%),HBV-DNA(+)230例(66.5%),两者间呈正相关(P<0.05);HBeAg(+)和HBeAg(-)标本中HBV PreS1-Ag(+)率分别为86.1%和50.8%;慢性乙型肝炎患者肝功能指标中的ALT、AST、GGT异常率较其他指标高,其中ALT异常率最高(52.6%),AST异常率次之(49.1%)。结论:HBVPreS1-Ag与HBV-DNA相关性较好,在一定程度上HBV PreS1-Ag可替代HBV-DNA,同时与HBeAg相比,更能反映病毒复制情况。ALT、AST是较灵敏的肝功能指标。慢性乙肝患者可以HBV PreS1-Ag、ALT及AST作为长期随访指标。