个性化抗原修复方法在肾活检组织石蜡切片免疫荧光染色中的应用

肾脏活检的病理诊断在肾脏病学中起到重要作用,它的发展与病理学技术密切相关。肾脏活检的病理检查包括光学显微镜下HE、特殊染色、免疫组化,荧光显微镜下的免疫荧光(immunofluorescence,IF)染色,电镜等多种检查^([1-2])。其中免疫荧光在肾活检病理诊断中起相当重要的作用。日常工作中多采用冰冻切片免疫荧光染色(immunofluorescence of frozen tissue sections,IF-F)。

激光扫描共聚焦显微镜在人胆管癌组织免疫荧光染色切片观察中的应用

目的 :探讨利用激光扫描共聚焦显微镜鉴定单克隆抗体特异性。方法 :正常人胆管组织、正常人肝组织及人胆管癌组织切片经免疫荧光染色后置于普通荧光显微镜及激光扫描共聚焦显微镜进行观察 ,比较二者效果。结果 :与普通荧光显微镜相比 ,激光扫描共聚焦显微镜能清晰地显示染色组织的荧光染色部位及强弱 ,能较好地显示染色组织的形态 ,显示出良好的准确性及精确性。结论 :激光扫描共聚焦显微镜在免疫荧光染色切片的检测中具有准确、特异、清晰的特点 。

肾活检标本的冰冻切片直接免疫荧光法中冰冻切片对包埋剂的选择及应用

肾脏疾病中，变态反应在其病因发病机制中占很大比重，所以在肾活检标本中显示抗原或抗体是很重要的，一般使用冰冻切片直接免疫荧光法观察切片标本上荧光抗体染色结果作为抗原的鉴定和定位。冰冻切片直接免疫荧光法要求冰冻切片质量优良，制作一张质量优良的冰冻切片，制片过程中的每一步环节都很重要，其中包埋剂的使用也很关键，包埋剂包埋组织（-20℃一25℃）冷冻后对组织起到支托固定的作用。现工作中制作冰冻切片常用包埋剂是OCT，在多年临床工作中，我科使用普通胶水替代OCT包埋，所制冰冻切片用于直接免疫荧光检查与使用OCT包埋剂所制冰冻切片用于直接免疫荧光检查效果相同。

利用切片免疫荧光技术研究Tbx5在小鼠胚胎心脏中的表达

Tbx5参与转录因子的调控,对上肢及心脏发育起关键作用.通过对小鼠胚胎心脏组织切片厚度的选择、加入抗原修复液等试验条件的优化,建立了利用切片免疫荧光技术检测小鼠胚胎心脏中Tbx5的方法.结果显示,在胚胎发育的第11.5 d,Tbx5在整个心脏中都有表达,尤其在心房以及左心室中高表达.但在胚胎发育的第13.5 d,Tbx5只在心房和左心室中表达,在右心室中并不表达.揭示Tbx5的这种动态表达模式对于心脏的发育以及腔室分化是十分重要的.

肾活检组织病理诊断中采用石蜡切片免疫荧光染色法的临床价值分析

目的:分析肾活检组织病理诊断中应用新式石蜡切片免疫荧光染色法的可行性与效能。方法:研究开展的时间为2021年1月至2022年12月,共纳入83份肾组织样本,其中10份来源于贵州电力医院,73份来源于贵州医科大学附属医院。对全部样本均实施常规冰冻切片免疫荧光染色诊断与新式石蜡切片免疫荧光染色诊断,将前者列为冰冻组,将后者列为石蜡组,对照两种诊断方式对于常见肾病的诊断效能。结果:肾病理组织活检的阳性检出结果显示,石蜡组23例膜性肾病患者、30例狼疮性肾病患者和30例IgA肾病患者免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白G(IgG)、补体C3、补体C1q的阳性检出率均高于冰冻组,但两组仅在膜性肾病患者IgA、狼疮性肾病患者IgA、IgG、补体C1q的检出率方面存在统计学差异(P<0.05),其他组间对比均无统计学差异(P>0.05)。结论:在肾病患者肾组织病理活检诊断中,新式石蜡切片免疫荧光染色法的诊断效能优于传统冰冻切片免疫荧光染色法,有助于更为准确地检出不同类型的肾病,具有较高的临床应用价值。

冷驯化条件下中缅树鼩脂肪组织切片的对比

目的探讨冷驯化不同时期中缅树鼩脂肪细胞形态变化,为冷驯化是否可以诱导白色脂肪组织中米色脂肪细胞(beige adipocytes)的产生提供形态学依据。方法通过苏木素-伊红染色切片、免疫组织化学染色切片、免疫荧光染色切片进行对比。结果随着冷驯化时间延长,白色脂肪细胞和褐色脂肪细胞形态都明显变小,且褐色脂肪组织中解偶联蛋白1(uncoupling protein 1,UCP1)表达增加,同时腹部皮下白色脂肪组织中可能已发生褐变,产生一些具有UCP1表达的浅褐色脂肪细胞,即米色脂肪细胞。结论不同染色切片不仅能够清晰观察到脂肪细胞的形态改变,还能从抗体阳性颜色中观察出UCP1表达变化,为中缅树鼩脂肪组织研究提供基础性材料。

一种分析肝细胞肝癌免疫和循环微环境的新方法

病理组织大切片相比常规切片,可对肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)部分肝脏手术标本的最大切面的形态和免疫微环境进行广泛分析,是一种已被广泛开展使用的方法[1]。共聚焦荧光显微切片可从三维角度对肿瘤免疫微环境进行更为细微的观测,配合多重抗体标记和荧光显色多通道切换,同一张切片可反映数种免疫细胞和蛋白的分布情况和表达量[2]。

食淀粉乳杆菌对轮状病毒受体HSC70的影响

旨在探究食淀粉乳杆菌(Lactobacillus amylovorus)对轮状病毒(rotavirus,RV)的细胞受体热休克同源蛋白HSC70的调节作用。以饲喂食淀粉乳杆菌的中国昆明鼠乳鼠为试验动物,通过ELISA、qPCR、冰冻切片间接免疫荧光等技术,1~11 d逐日进行空肠组织取样,检测食淀粉乳杆菌对小鼠空肠组织中HSC70调节作用的动态变化。试验分为4组:正常组、病毒组、预防组(先益生菌作用后攻RV)、治疗组(先攻RV后作用益生菌)。试验结果显示,乳鼠体质量的增长率及变化情况与RV的感染相关,并且食淀粉乳杆菌可以显著地治疗及预防RV感染(P<0.05)。对空肠组织中HSC70的检测发现,攻RV后正常组及预防组的热休克同源蛋白HSC70含量在第5天显著高于治疗组和病毒组(P<0.05);在第7,11天时,各组组内热休克同源蛋白HSC70的含量无明显差异(P>0.05);第9天病毒组的热休克同源蛋白HSC70含量显著高于其他组(P<0.05)。HSC70 mRNA含量随天数的增加而减少,正常组下降趋势显著(P<0.05),预防组在第3,4天趋于平缓。攻RV后小鼠肠内HSC70 mRNA的相对表达量在第5,7,11天,呈现为病毒组>预防组>治疗组>正常组(P<0.05),且小鼠肠内HSC70 mRNA的相对表达量在第7天显著升高(P<0.05)。对第9天空肠组织进行冰冻切片-间接免疫荧光检测发现,HSC70主要存在于空肠绒毛组织,且预防组中HSC70明显少于病毒组及正常组(P<0.05)。结果表明,食淀粉乳杆菌可显著抑制RV受体HSC70在细胞中的合成,从而发挥抗病毒作用,为探究食淀粉乳杆菌抗RV机理提供理论依据。