免疫荧光层析法检测新型冠状病毒IgM/IgG抗体的临床价值及假阳性分析

目的探讨新型冠状病毒(SARS-CoV-2)抗体在新型冠状病毒肺炎(COIVD-2019)患者和非COIVD-2019患者中的检测效果。方法选取161例COIVD-2019患者和79例非COIVD-2019[合并人类免疫缺陷病毒(HIV)感染、结核和自身免疫性疾病]患者,采用免疫荧光层析法对患者的血清标本进行SARS-CoV-2 IgM和IgG抗体检测。结果161例COIVD-2019患者SARS-CoV-2 IgM和IgG抗体阳率分别是88.82%(143/161)和93.79%(151/161)。79例非COIVD-2019患者SARS-CoV-2 IgM和IgG抗体阳性率分别为16.46%(13/79)和7.59%(6/79)。免疫荧光层析法与化学发光分析法进行一致性评价,IgM抗体一致率达84.91%(135/159),IgG一致率达88.68%(141/159),两种方法检测IgG结果的一致性比IgM偏高。检测HIV、结核、系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎(RA)和自身免疫性肝炎(HIA)患者血清出现不同程度假阳性,稀释假阳性标本后检测6例RA、2例结核和1例HIA患者SARS-CoV-2抗体转阴。结论免疫荧光层析法性能满足COIVD-2019临床辅助诊断和流行病学调查,但应注意与流行病不相符的检测结果。通过稀释血清标本,可以一定程度降低检测过程中假阳性,对COIVD-2019患者发病早期标本检测灵敏度的影响需进一步研究。

免疫荧光层析法快速检测猪尿中克伦特罗含量

本研究使用克伦特罗免疫荧光层析试剂盒,基于免疫荧光层析原理,配套使用广州万孚生物技术股份有限公司研制的荧光定量检测仪,实现猪尿中所含克伦特罗的定量检测,并对试纸条的灵敏度、准确度与精密性、类似化学药物干扰、保存期等相关性能进行了评价。实验证明检测限达0.26μg/L,与结构类似化学药物的交叉反应小于0.20%,同时验证了本试剂盒在1年的保存期限有效。整个检测过程只需20 min左右。

免疫荧光层析法检测血清降钙素原的性能分析

目的:了解免疫荧光层析法检测血清降钙素原(PCT)的性能。方法:用电化学发光法(ECLIA)和免疫荧光层析法平行检测300例血清样本PCT的浓度,(1)用Kappa检验分别评价Cut-off值为0.5ng/ml和2.0ng/ml时2种方法的一致性,Kappa值≥0.75时为吻合度好。(2)PCT>0.5ng/ml的样本200例,以ECLIA法为比对方法(X),以免疫荧光法为实验方法(Y),结果进行线性回归和相关系数(R)的计算。结果:(1)Cut-off值为0.50ng/ml和2.00ng/ml时,Kappa值分别为0.780和0.854,免疫荧光法和ECLIA法的吻合度好。(2)PCT>0.50ng/ml的样本,直线回归方程为Y=0.747X-0.158,R=0.985。结论:免疫荧光层析法检测血清PCT和ECLIA法检测的结果相关性高,吻合度好,适用于各类医院血清PCT的急诊检验。

高效液相色谱法和量子点免疫荧光层析法测定小麦及其制品呕吐毒素含量的比较

采用高效液相色谱法和量子点免疫荧光层析法,测定小麦及其制品中呕吐毒素(DON)含量。2种检测方法加标回收率分别为90.75%~95.85%及82.55%~98.74%,符合GB/T 27404—2008附录F中对回收率的要求;2种方法RSD分别为0.96%和3.3%,均小于5%,精密度符合定量分析要求;标准质控样的检测结果均在质控样有效值范围内,检测结果合格。对2种方法检测样品中呕吐毒素含量的结果进行T检验,结果表明检测结果无显著性差异,确定了量子点免疫荧光层析法对呕吐毒素快速定量测定的可行性及可靠性。结合2种方法的优缺点,将其同时应用到小麦等粮食中呕吐毒素的检测,将有效提高检测的效率和安全监控水平。

免疫荧光层析定量检测系统的改进研究

针对韩国i-Chroma免疫荧光分析仪定量检测系统的光路设计、试剂条卡壳、电机驱动电路进行初步改进研究,并介绍了一种两用的微量取样方法。初步检测试验结果表明,改进系统在大幅降低成本以及优化反应体积后,并未对检测准确度产生影响,光路及光电池的更换还对检测精密度指标提高提供了技术支撑。这些改进方案为开发出满足临床应用需求的新型POCT检测系统奠定了基础。

荧光微球免疫层析技术定量检测抗缪勒氏管激素方法的确定

利用免疫层析技术与荧光微球标记技术相结合的方式,依据双抗体夹心原理,制备抗缪勒氏管激素免疫层析试纸条;并从灵敏度、特异性、精密度、稳定性等方面进行全面的方法学评价。利用免疫荧光层析法建立抗缪勒氏管激素(AMH)检测试剂盒,并对试剂盒的各项指标进行评价,建立一种能够定量检测血清抗缪勒氏管激素的荧光微球免疫层析方法,用于评估卵巢储备,并对试纸条进行性能评估。结果表明,试剂盒的线性范围为0.10～20 ng/mL,线性相关系数r≥0.990,检出限不高于0.10ng/mL,重复性检测结果的变异系数CV小于15%,批间差检测结果的变异系数CV小于20%,试剂盒特异性高,与FSH和LH无交叉反应,有效期大于12个月,且与罗氏AMH试剂盒的相关性良好,回归方程为Y=0.9957X+0.0019,R2=0.999 7。免疫荧光层析法能有效的检测血清中抗缪勒氏管激素的含量,该方法稳定性好,具有良好的应用前景。

雅培i2000全自动免疫发光仪与艾克美免疫荧光分析仪检测总前列腺特异性抗原的比对研究

目的探讨雅培i2000全自动免疫发光仪用化学发光免疫分析法,与杭州中翰盛泰科技有限公司艾克美免疫荧光分析仪用免疫荧光干化学层析法检测总前列腺特异性抗原(TPSA)的可比对性。方法对免疫荧光干化学层析法定量检测TPSA进行了性能评价,内容包括批内重复性、线性、准确度。结果该法重复测定高、低值样本,CV<10%;线性回归方程Y=0.9748X+0.048;与化学发光免疫法的相关性分析,r=0.984。结论免疫荧光干化学层析法定量检测系统与雅培i2000全自动大型化学发光仪具有良好的重复性、线性和方法学的相关性,非常适合临床实验室门诊急诊及小批量样本时使用。

白细胞介素-6快速定量荧光免疫层析试纸条的制备及特性研究

目的利用免疫荧光技术研制一种快速、高灵敏度定量检测血清中白细胞介素-6(IL-6)的方法。方法本研究对试剂盒的灵敏度、准确度、特异性和稳定性进行了初步的性能评价。结果本方法的标准曲线线性关系良好,r^2=0.965,检测线和定量限分别为8.49、25.28pg/mL,添加回收试验测得其回收率平均值分别为96.51%、102.46%、103.06%,且制备试纸条的批间和批内精密度均小于15.00%,与7种竞争物交叉反应率小于0.10%。结论本试验制备的IL-6定量荧光免疫层析试纸条的灵敏度高,特异性好,稳定性好,有较为广泛的应用前景。

吗啡免疫荧光层析快速定量方法的建立

目的建立一种高灵敏度的检测方法对生物样本(血液、唾液和尿液)中吗啡进行快速定量。方法采用免疫层析试纸条的反应模式,以稀土元素铕荧光纳米颗粒为标记物,与吗啡单克隆抗体共价偶联,将吗啡抗原和羊抗鼠抗体包被于硝酸纤维素膜上分别作为检测线和质控线,通过竞争性免疫抑制反应原理,结合干式免疫荧光检测仪用于生物样本中吗啡的快速定量。结果通过优化试验条件后制备得到免疫层析试纸条检测,线性范围在3~3 000 ng·m L^(-1);精密度和准确度吗啡质控品试验的RSD<10%;与苯丙胺、甲基苯丙胺和氯胺酮等常见毒品和药品均无交叉反应;试纸条在37℃,7 d的加速试验中,性能没有明显降低。结论本实验初步建立的吗啡免疫荧光层析试纸条定量检测方法具有良好的线性范围和精密度,具有良好的特异性和稳定性。本方法可以快速便捷的对生物样本中吗啡进行定量检测,便于在基层单位推广使用。

两种方法检测降钙素原的正确度性能评价

目的采用免疫荧光层析法与电化学发光法定量检测降钙素原（PCT），对其正确度性能进行评价。方法连续检测10d，每天取不同浓度的6～7份临床血清样本，其中高值18份，中值22份，低值28份，共计68份样本分别用广州万孚生物技术服务有限公司出品的免疫荧光层析法仪器与配套试剂（实验方法）和罗氏公司的电化学发光法仪器与配套试剂（比较方法）定量检测PCT，分析两种方法检测结果的偏倚和相关性，评估两种方法的可比性。结果两种检测方法配对t检验，t=0．479，单侧t0．05（67）=1．668，故P〉0．05；直线回归检测，相关系数0．992，P〈0．05，回归方程：y=0．960X＋0．257，检测结果具较好一致性，PCT医学决定水平0．5ng／mL和2．0ng／mL处的总符合率为97．06％。结论免疫荧光层析法与电化学发光法检测PCT结果具高度相关性和一致性，能够满足临床检测的基本要求。

两种方法检测PCT比较

目的分析免疫荧光层析法检测血清降钙素原(PCT)的性能。方法用免疫色谱检测法、免疫荧光层析法平行检测823例标本血清PCT的浓度,用Kappa检验分别评价诊断阈值(cut-off值)为0.5ng/mL和2.0ng/mL时两种方法的一致性。以免疫色谱法为标准,评价免疫荧光法的灵敏度、特异度、阴性预期值、阳性预期值和总符合率。结果设cut-off值为0.50ng/mL和2.00ng/mL。两种方法检测PCT的Kappa值(K)分别为0.768和0.818。以免疫色谱法为金标准,使用两个cut-off值时免疫荧光法的灵敏度、特异度、阳性预期值、阴性预期值和总符合率分别为98.2%和98.3%、74.5%和81.0%,88.3%和97.4%,95.4%和87.1%,90.2%和96.2%。结论免疫荧光法检测血清PCT是一种低成本、快捷、准确的新方法,可广泛应用于基层医疗机构。

两种不同方法检测降钙素原结果的比较

目的比较ELISA法检测降钙素原和免疫荧光层析法检测降钙素原结果的一致性,为合理选择降钙素原检测方法提供实验依据。方法应用ELISA法检测降钙素原和免疫荧光层析法检测降钙素对87例临床标本进行检测,通过直接比较和计算结果判断检测结果的一致性。结果 87例标本中两种方法结果的符合率89.3%。结论两种不同检测降钙素原的方法具有一定的可比性,可以根据临床需要选择不同的检测方法。

两种检测系统检测血清淀粉样蛋白A的结果比较

目的:比较免疫速率散射比浊法和免疫荧光层析法检测血清淀粉样蛋白A(serum amyloid A protein,SAA)的结果。方法:收集住院病人(观察组)和健康体检者(对照组)血清,均分别采用全自动特定蛋白检测仪(采用免疫速率散射比浊法)和荧光免疫定量分析仪(免疫荧光层析法)检测SAA水平,比较2种检测系统上的分析结果。结果:观察组血清用2种方法检测的SAA水平均高于对照组(P<0.01);观察组免疫速率散射比浊法所测SAA值高于免疫荧光层析法(P<0.01),而对照组采用2种方法所测SAA值差异无统计学意义(P>0.05)。免疫速率散射比浊法和免疫荧光层析法检测的敏感度分别为53.00%和57.00%,特异度分别为92.00%和93.00%,差异均无统计学意义(P>0.05)。荧光免疫层析法对健康体检者所测SAA的下限概率为83.00%(83/100),高于免疫速率散射比浊法的42.00%(42/100)(χ^2=35.86,P<0.01),荧光免疫层析法检测低值时候更稳定。结论:免疫速率散射比浊法和免疫荧光层析均能用于临床检测,后者的稳定性更好。