文摘目的筛选 R-藻红蛋白免疫荧光检测中适宜的洗涤条件。方法采用二步法改变洗涤液离子强度、p H值 ,比较弱阳性血清的检出率及阴性假阳性率 ,由此筛选最佳洗涤条件。结果洗涤液离子强度的增加有助于降低阴性血清假阳性现象。在本实验所涉及样品范围内 ,摩尔浓度大于 10 0 mm ol/ L 时 ,假阳性率可降低到 0 ;12 0 m mol/ L 时 ,阳性检出率最高值达93.3% ;中性、偏碱性的 p H值对检出率影响较小。结论以 12 0 m mol/ L PBS(p H7.5 )为洗涤液有利于提高 R-藻红蛋白荧光免疫法的特异性和灵敏度。
文摘选取不同浓度的柑橘溃疡病菌SOB培养液,利用载玻片进行固定、封闭、抗体结合、免疫荧光标记及荧光强度检测,以探讨免疫荧光检测技术在柑橘溃疡病菌快速检测方面的应用。结果表明,30℃下用BSA封闭2h,30℃下抗体结合1 h,荧光抗体浓度为4μg/mL,室温放置40 m in后,在荧光显微镜下可以清楚看到绿色的柑橘溃疡病菌体。该方法操作简便,检测过程仅需4 h,抗原抗体反应特异性极强,检测灵敏度可达103cfu/mL。