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多色标记免疫组织化学染色和免疫荧光染色在肺癌免疫治疗中的研究进展 被引量:2
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作者 孙文佳 周建娅 周建英 《中国肺癌杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期36-42,共7页
肺癌是目前临床上最常见的恶性肿瘤,严重威胁着患者的生命健康及生活质量。程序性细胞死亡受体1(programmed cell death receptor 1, PD-1)及其配体(programmed cell death ligand 1, PD-L1)抑制剂为非小细胞肺癌(non-small cell lung c... 肺癌是目前临床上最常见的恶性肿瘤,严重威胁着患者的生命健康及生活质量。程序性细胞死亡受体1(programmed cell death receptor 1, PD-1)及其配体(programmed cell death ligand 1, PD-L1)抑制剂为非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)患者提供了新的治疗策略。现有的生物标志物检测对准确选择免疫治疗受益的患者均有一定的价值,但都存在着局限性。多标记免疫组织化学/免疫荧光(multiplex immunohistochemistry/immunofluorescence,mIHC/IF)技术允许在单一组织切片上同时检测多个抗体,并对细胞组成、细胞功能和细胞-细胞相互作用进行全面研究。国内外已有大量研究使用mIHC/IF技术对肿瘤免疫微环境(tumor immune microenvironment, TIME)下特异性免疫细胞群进行了探索,发现其有助于肺癌患者临床预后判断及疗效预测。肺癌免疫治疗时代,这项技术在转化研究和临床实践中均具有良好的应用前景。本文就mIHC/IF检测方法在肺癌免疫治疗中的研究进展进行了总结和展望。 展开更多
关键词 肺肿瘤 多色标记 免疫组织化学 免疫荧光 免疫治疗
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BNP和IL-6双标记时间分辨免疫荧光检测方法的建立及初步应用
2
作者 李云鹏 郝培远 +3 位作者 曹雪明 闫兆月 王恩锋 代荣钦 《实验与检验医学》 CAS 2023年第2期127-131,共5页
目的研制一种脑钠肽(BNP)、白细胞介素-6(IL-6)的双标记时间分辨免疫荧光分析方法(TRFIA)并对其性能进行初步评价。方法将抗BNP和IL-6单克隆抗体(MAb)作为包被抗体包被在96孔板,用Eu3+和Sm3+分别标记另一配对抗体作为检测抗体,建立双抗... 目的研制一种脑钠肽(BNP)、白细胞介素-6(IL-6)的双标记时间分辨免疫荧光分析方法(TRFIA)并对其性能进行初步评价。方法将抗BNP和IL-6单克隆抗体(MAb)作为包被抗体包被在96孔板,用Eu3+和Sm3+分别标记另一配对抗体作为检测抗体,建立双抗体夹心TRFIA分析法并制备成试剂盒。进行灵敏度、准确度、重复性、特异性、稳定性和临床样本比对等实验评价其检测性能。结果制备的双标记时间分辨免疫荧光试剂盒对BNP检测的线性范围为10 pg/mL~5000 pg/mL,灵敏度为8.65 pg/mL,对IL-6检测的线性范围为1 pg/mL~1000 pg/mL,灵敏度为5.36 pg/mL。BNP的回收率在91.49%~99.16%,批内CV在5.73%~8.96%,批间CV在8.42%~11.73%;IL-6的回收率在93.95%~111.50%,批内CV在7.32%~10.07%,批间CV在9.40%~11.30%。与血清中常见的脓毒血症检测指标均无明显的交叉反应。试剂盒能够在4℃稳定保存半年,37℃稳定保存7 d。对临床样本的检测发现,该方法参考区间Cut-off值BNP:46.01 pg/mL,IL-6:13.62 pg/mL;检测结果与临床诊断结果一致,准确性较好。结论建立的BNP和IL-6双标记TRFIA方法具有高灵敏度、高特异性、高准确率、方便快捷等优点,可作为预警脓毒症发生、预测脓毒症病情程度及临床预后的一种新的实验室检测方法。 展开更多
关键词 脓毒血症 抗体夹心 标记时间分辨免疫荧光分析
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免疫荧光双标记技术检测胎盘HBsAg-抗-HBs复合物 被引量:6
3
作者 王歆 徐德忠 +2 位作者 刘蓬勃 李玉松 王素萍 《第四军医大学学报》 北大核心 2001年第12期1125-1128,共4页
目的 探讨乙肝病毒 (HBV)以何种形式感染胎盘滋养层细胞 .方法 通过免疫荧光双标记技术检测 12例血清HBs Ag阳性母亲的胎盘滋养层细胞 HBs Ag-抗 - HBs复合物 .结果 血清学 HBs Ag阳性母亲胎盘滋养层细胞中存在 HB-s Ag-抗 - HBs复合... 目的 探讨乙肝病毒 (HBV)以何种形式感染胎盘滋养层细胞 .方法 通过免疫荧光双标记技术检测 12例血清HBs Ag阳性母亲的胎盘滋养层细胞 HBs Ag-抗 - HBs复合物 .结果 血清学 HBs Ag阳性母亲胎盘滋养层细胞中存在 HB-s Ag-抗 - HBs复合物 .结论 提示 HBV可能通过 HBs Ag与抗 - HBs结合成复合物的方式进入胞内 ,导致胎盘屏障的第一层细胞受到 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 胎盘 抗原抗体复合物 免疫荧光标记 HBsAg-抗-HBs复合物
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运用图像处理软件将同视野两种单标记免疫荧光图像合成为双标记图像的方法研究 被引量:1
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作者 焦西英 程希平 +4 位作者 郎兵 张萍 王百忍 鞠躬 游思维 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期432-434,共3页
探讨以计算机图像处理技术将普通荧光显微镜采集的同视野单标记免疫荧光图像合成为双标记图像的方法。应用AdobePhotoshop7.0和ImageJ两个图像处理软件,将普通荧光显微镜采集的同视野单标记荧光图像叠加处理成双标记荧光图像,并同激光... 探讨以计算机图像处理技术将普通荧光显微镜采集的同视野单标记免疫荧光图像合成为双标记图像的方法。应用AdobePhotoshop7.0和ImageJ两个图像处理软件,将普通荧光显微镜采集的同视野单标记荧光图像叠加处理成双标记荧光图像,并同激光扫描共聚焦显微镜获得的同一双标记免疫荧光图像进行比较。普通荧光显微镜采集的单标记荧光图像在分辨率及清晰度上逊于激光扫描共聚焦显微镜采集的单标记图像,但显示的脊髓室管膜细胞形态更为完整,细胞突起较长且更连续。因此,在没有激光扫描共聚焦显微镜时,可用AdobePhotoshop7.0或ImageJ图像处理软件将普通荧光显微镜采集的同视野两种单标记免疫荧光图像合成为保持原有特点、简便而清晰的双标记荧光图像。 展开更多
关键词 图像处理软件 同视野 标记图像 免疫荧光图像 标记图像
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检测β-CTX和N-MID水平的双标记时间分辨免疫荧光分析方法的建立和评价 被引量:2
5
作者 毛骞 陈翠翠 +3 位作者 梁焕坤 刘鹏娥 钟树海 李来庆 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期770-776,共7页
目的:研制一种检测β胶联降解产物(β-CTX)和骨钙素N端中分子片段(N-MID)水平的双标记时间分辨免疫荧光分析方法(TRFIA)并评价其检测性能。方法:将抗β-CTX和N-MID的4E5和2B7单克隆抗体(MAb)作为包被抗体包被在96孔培养板,采用铕离子(Eu... 目的:研制一种检测β胶联降解产物(β-CTX)和骨钙素N端中分子片段(N-MID)水平的双标记时间分辨免疫荧光分析方法(TRFIA)并评价其检测性能。方法:将抗β-CTX和N-MID的4E5和2B7单克隆抗体(MAb)作为包被抗体包被在96孔培养板,采用铕离子(Eu^(3+))和钐离子(Sm^(3+))分别标记2G6和5A3 MAb作为检测抗体,建立双抗体夹心TRFIA分析法并制备成试剂盒。通过试剂盒的灵敏度、准确度(稀释回收率)、特异性、精密度、稳定性和临床样本比对等实验评价其检测性能。结果:制备的双标记TRFIA试剂盒对β-CTX的检测灵敏度为0.025μg·L^(-1),线性范围为0.025~5.000μg·L^(-1),对N-MID的检测灵敏度为0.5μg·L^(-1),线性范围为0.5~200.0μg·L^(-1)。β-CTX平均稀释回收率为102.13%,N-MID平均稀释回收率为103.02%,与其他常见骨检测指标无明显交叉反应,特异性较强。β-CTX批内变异系数(CV)为5.81%~7.82%,批间CV为5.97%~8.02%;N-MID批内CV为6.05%~8.32%,批间CV为6.14%~8.56%;TRFIA试剂盒可在4℃稳定保存6个月,37℃稳定保存7 d。结论:建立的双标记TRFIA方法具有高灵敏度、高特异度、高准确率和方便快捷等优点,适用于大批量临床样品的检测。 展开更多
关键词 β胶联降解产物 N端中分子片段 骨质疏松症 抗体夹心 标记时间分辨免疫荧光分析
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免疫荧光双标记法在子宫平滑肌肿瘤中的应用 被引量:4
6
作者 王晶 耿海燕 苗雨春 《实用医技杂志》 2014年第7期776-777,共2页
随着激光共聚焦显微镜及其技术的推广,石蜡组织免疫荧光标记的方法也日益广泛运用,尤其是荧光双标或多标的方法,因其具有敏感性高、信号分明的特点,成为广大科研工作者喜欢使用的技术方法。荧光双标实验过程较为复杂,它的成功与否... 随着激光共聚焦显微镜及其技术的推广,石蜡组织免疫荧光标记的方法也日益广泛运用,尤其是荧光双标或多标的方法,因其具有敏感性高、信号分明的特点,成为广大科研工作者喜欢使用的技术方法。荧光双标实验过程较为复杂,它的成功与否会受到很多因素的影响,如果某些环节处理不恰当,会直接导致实验失败。本研究以子宫平滑肌肿瘤为研究对象,分为子宫平滑肌肉瘤组(LMS)、普通型子宫平滑肌瘤组(OUL)、正常子宫平滑肌组(NUSM)3组,选择Survivin和Ki-67两种与细胞增殖和凋亡相关的蛋白,采用免疫荧光双标记法检测各组中2种蛋白的表达情况,取得了较为满意的效果,现以异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)与四甲基异硫氰酸罗丹明(tetramethyl rhodamine isothio-cyanate,TRITC)的荧光双标为例,介绍免疫双荧光切片制备及运用激光共聚焦显微镜采集信号数据的方法。 展开更多
关键词 免疫荧光标记 子宫平滑肌肿瘤 激光共聚焦显微镜 异硫氰酸荧光 RHODAMINE SURVIVIN 子宫平滑肌肉瘤 应用
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同种属来源一抗在免疫荧光双标记染色中的可行性 被引量:3
7
作者 陈曦 刘哲 +1 位作者 邓茂林 冯轼 《四川解剖学杂志》 2015年第1期13-15,19,共4页
目的探讨同种属来源一抗在免疫荧光双标记染色中的可行性。方法本研究采用顺序法对小鼠结肠组织IL-17和肠神经胶质细胞源性神经营养因子GDNF的特异性受体亚基GFR-α1进行同种属来源一抗的免疫荧光双标记染色。结果炎症状态下小鼠结肠组... 目的探讨同种属来源一抗在免疫荧光双标记染色中的可行性。方法本研究采用顺序法对小鼠结肠组织IL-17和肠神经胶质细胞源性神经营养因子GDNF的特异性受体亚基GFR-α1进行同种属来源一抗的免疫荧光双标记染色。结果炎症状态下小鼠结肠组织黏膜及黏膜下层可见被绿色荧光和红色荧光双重标记的阳性细胞,提示IL-17+的Th17细胞表面有GDNF特异性受体亚基GFR-α1表达。结论采用顺序法进行免疫荧光双标记染色,尤其是当已知两种目标抗原表达位置不同时,同一种属来源的一抗仍可得出可信的实验结果。 展开更多
关键词 免疫荧光标记染色 白介素-17/IL-17 GDNF家族受体-α1/GFR-α1
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大鼠孤束核内含calbindin D-28K的内脏伤害性神经元向终纹床核的投射—荧光金标记结合免疫荧光技术研究
8
作者 张宇飞 张文斌 熊抗辉 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期37-42,W009-W010,共8页
既往的研究证明孤束核和终纹床核参与内脏伤害性信息的传递和调控。Calbindin D-2 8K是钙结合蛋白家族的成员 ,为神经细胞特别是投射神经元的选择性标记物。应用荧光金逆行追踪和免疫荧光技术相结合的方法 ,对给予内脏伤害性刺激后大鼠... 既往的研究证明孤束核和终纹床核参与内脏伤害性信息的传递和调控。Calbindin D-2 8K是钙结合蛋白家族的成员 ,为神经细胞特别是投射神经元的选择性标记物。应用荧光金逆行追踪和免疫荧光技术相结合的方法 ,对给予内脏伤害性刺激后大鼠孤束核内 FOS的表达并显示 Calbindin D-2 8K免疫阳性的神经元向终纹床核的投射进行了研究。结果显示 :将荧光金注入一侧终纹床核外侧部后 ,孤束核中尾段内双侧出现荧光金逆行标记细胞 ,注射区同侧占优势 :孤束核的相同平面可观察到双侧等量分布的免疫反应阳性的 Calbindin D-2 8K和 FOS细胞 :三种阳性细胞的分布有明显的重叠现象。在其重叠分布区可见荧光金 /Calbindin D-2 8K、FOS/Calbindin D-2 8K、荧光金 /FOS双重阳性以及荧光金 /Calbindin D-2 8K/FOS三重阳性细胞。除 FOS/Cal-bindin D-2 8K双重阳性细胞为双侧分布外 ,荧光金 /Calbindin D-2 8K、荧光金 /FOS双重阳性以及荧光金 /Calbindin D-2 8K/F OS三重阳性细胞的出现均以注射区同侧为主。荧光金 /Calbindin D-2 8K、F OS/Calbindin D-2 8K双重阳性和荧光金 /Calbindin D-2 8K/F OS三重阳性神经元占孤束核内 Calbindin D-2 8K免疫阳性神经元总数的百分比分别为 2 .79%、15 .3 %和 2 .5 6% ; 展开更多
关键词 CALBINDIN D-28K FOS 孤束核 免疫组织化学 大鼠 内脏伤害性神经元 终纹床核 投射 荧光标记 免疫荧光技术
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免疫荧光双标对肝细胞癌及癌旁异型增生肝细胞Ki-67与AMACR和RAS表达的定位分析
9
作者 符雪莲 王军臣 +1 位作者 韩扬 史阳 《同济大学学报(医学版)》 CAS 2014年第2期29-32,共4页
目的对肝细胞癌(hepato celluar carcinoma,HCC)及其癌旁异型增生肝细胞Ki-67与α-甲酰基-辅酶A消旋酶(alpha-methylacyl-coenzyme A racemase,AMACR)和RAS表达进行定位分析,探讨AMACR的表达在HCC发生中的意义。方法 90例人HCC、90例癌... 目的对肝细胞癌(hepato celluar carcinoma,HCC)及其癌旁异型增生肝细胞Ki-67与α-甲酰基-辅酶A消旋酶(alpha-methylacyl-coenzyme A racemase,AMACR)和RAS表达进行定位分析,探讨AMACR的表达在HCC发生中的意义。方法 90例人HCC、90例癌旁肝组织制作组织芯片,以20例正常肝组织对照。用免疫荧光双标法,通过激光共聚焦显微镜,分析AMACR在肝细胞癌和癌旁异型增生肝细胞的表达与Ki-67、癌基因蛋白RAS表达的原位定位关系。结果 HCC组织中AMACR的表达显著高于癌旁肝组织,而且在HCC组织中AMACR的表达多呈弥漫性分布;HCC组织中显示Ki-67标记指数比癌旁组织高。结论 AMACR可能参与RAS信号在肝细胞异型增生和HCC早期发生的信号机制。 展开更多
关键词 肝细胞肿瘤 α-甲酰基-辅酶A消旋酶 RAS蛋白 KI-67 免疫荧光组织化学标记
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免疫组织化学技术在切片中的应用
10
作者 赵果毅 王兰 《临床医药实践》 2009年第6期476-477,共2页
免疫组织化学是利用抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究,称为免疫组织化学。根据标记物的不同... 免疫组织化学是利用抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究,称为免疫组织化学。根据标记物的不同分为免疫荧光法,免疫酶标法,亲和组织化学法等。 展开更多
关键词 免疫组织化学技术 亲和组织化学 免疫酶标法 切片 标记抗体 特异性结合 免疫荧光 化学反应
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受体megalin和cubilin介导白蛋白吸收的免疫组织化学研究
11
作者 翟效月 刘霞 赵晶 《锦州医学院学报》 2002年第2期1-3,共3页
目的及方法 采用免疫荧光双标记技术对培养的opossum肾 (OK)细胞膜受体megalin和cubilin的表达及其与荧光标记的白蛋白摄取的关系进行研究。结果 不同荧光标记的受体megalin及cubilin同时表达在相同的OK细胞上 ,分布主要局限在细胞膜 ... 目的及方法 采用免疫荧光双标记技术对培养的opossum肾 (OK)细胞膜受体megalin和cubilin的表达及其与荧光标记的白蛋白摄取的关系进行研究。结果 不同荧光标记的受体megalin及cubilin同时表达在相同的OK细胞上 ,分布主要局限在细胞膜 ,而且形式相似。被摄取的荧光标记的白蛋白点状分布在OK细胞内。此外 ,有受体megalin和cubilin表达的细胞就有白蛋白的摄取 ;反之 ,既不表达受体megalin和cubilin的细胞 ,也没有白蛋白的摄取。结论 这种白蛋白的摄取与受体megalin和cubilin表达的特征提示 ,两种大分子糖蛋白受体megalin和cubilin与白蛋白的摄取有密切相关性 ,很可能在肾小管重吸收白蛋白中起到相互作用。 展开更多
关键词 免疫组织化学 MEGALIN CUBILIN OK细胞 白蛋白 免疫荧光标记 肾疾病 受体 opossum肾
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免疫组织化学技术在内科临床的应用
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作者 张景红 《医学研究生学报》 CAS 1991年第2期168-169,共2页
免疫组织化学的最基本技术是应用荧光素或酶标记抗体进行免疫病理研究,主要原理是用标记的抗体定位抗原,在显微镜下观察组织结构的性质,从而使组织的功能与形态联系起来。近年来,随着免疫学、生物学、细胞生物学、分子生物学等学科的迅... 免疫组织化学的最基本技术是应用荧光素或酶标记抗体进行免疫病理研究,主要原理是用标记的抗体定位抗原,在显微镜下观察组织结构的性质,从而使组织的功能与形态联系起来。近年来,随着免疫学、生物学、细胞生物学、分子生物学等学科的迅速发展,免疫组织化学这一融免疫学、病理学为一体的新技术进展神速。除了应用最为广泛的免疫荧光、免疫过氧化物酶技术外,各种新的免疫酶技术不断涌现,如卵白素-生物素复合物法(ABC),葡萄糖氧化酶抗葡萄糖氧化酶法(GAG),硷性磷酸酶抗硷性磷酸酶法(APAAP);各种单克隆抗体及其片段(Fab,F(ab′)2)被大量应用; 展开更多
关键词 内科临床 葡萄糖氧化酶法 免疫酶技术 免疫荧光 标记抗体 磷酸酶 免疫病理 免疫组织化学 单克隆抗体 细胞生物学
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新型定量免疫荧光技术表明银屑病轻微治疗后的表皮细胞群得到改善
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作者 Van Duijnhoven M.W.F.M. Hagenberg R. +1 位作者 Pasch M.C. 罗素菊 《世界核心医学期刊文摘(皮肤病学分册)》 2005年第11期19-20,共2页
A novel antibody labelling technique, the Zenon technique, was used in fluorescent immunohistochemistry for a better characterization of epidermal cell populations in a quantitative approach. With this technique, diff... A novel antibody labelling technique, the Zenon technique, was used in fluorescent immunohistochemistry for a better characterization of epidermal cell populations in a quantitative approach. With this technique, differences in proliferation and differentiation characteristics were shown between psoriatic and normal epidermis. The sensitivity of the method was investigated by assessing the effect of a mild topical treatment versus an emollient. Frozen sections of non-treated psoriatic epidermis and psoriatic epidermis treated once daily with either an emollient or betamethasone-17-valerate for only 2 weeks were compared immunohistochemically. Antibodies against keratin 6, 10 and 15 were labelled with the Zenon technique, whereas antibodies against the Ki-67 antigen and β-1 integrin were covalently FITC-labelled. Using image analysis, these markers were measured in the epidermis in a standardized manner. Treatment of psoriasis with short-term topical steroid resulted towards normalization of Ki-67 antigen, β-1 integrin, keratin 10 and keratin 6 expression, which are parameters for proliferation and differentiation. Although treatment with an emollient showed hardly any clinical response, changes towards a more normal phenotype could already be detected in several epidermal markers using this method. 展开更多
关键词 银屑病 定量免疫荧光 细胞群 角蛋白 外用药物 外用激素 免疫组织化学 抗体标记 冰冻切片 倍他米松
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免疫双标记细胞的检测在中枢神经系统白血病诊断中的意义 被引量:1
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作者 谢晓宝 邱国强 +3 位作者 吴浩清 严锋 华晓莹 华铮 《临床血液学杂志》 CAS 2002年第2期67-68,共2页
目的 :观察末端脱氧核苷酸转移酶 (TdT)及淋巴细胞系列相关抗原双标记细胞在脑脊液中的检出对中枢神经系统白血病 (CNS L)的临床意义。方法 :采用免疫荧光标记技术配合流式细胞术 ,检测初治或完全缓解期急性淋巴细胞白血病脑脊液中TdT... 目的 :观察末端脱氧核苷酸转移酶 (TdT)及淋巴细胞系列相关抗原双标记细胞在脑脊液中的检出对中枢神经系统白血病 (CNS L)的临床意义。方法 :采用免疫荧光标记技术配合流式细胞术 ,检测初治或完全缓解期急性淋巴细胞白血病脑脊液中TdT及淋巴系列相关抗原双标记细胞及其治疗后的变化。结果 :6 4例中 8例脑脊液检出上述免疫双标记细胞 ,均为急性淋巴细胞白血病 ,其中 1例无CNS L临床迹象 ,免疫双标记细胞占3.38% ,经治疗后免疫双标记细胞在脑脊液均明显减少或消失。结论 :脑脊液中免疫双标记细胞的检出对CNS L的诊断及治疗指导具有重要的临床意义 。 展开更多
关键词 中枢神经系统白血病 急性淋巴细胞白血病 末端脱氧核甘酸转移酶 流式细胞术 免疫标记细胞 免疫荧光标记技术 流式细胞术 脑脊液
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逆行荧光物标记神经元技术及其应用 被引量:1
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作者 董新文 《解剖学通报》 1983年第1期53-57,共5页
近年来,辣根过氧化物酶(Horseradish Peroxidase)追踪神经联系法(HRP法)在国内已得到广泛应用。很明显,这个技术的应用对我国神经形态学研究的发展有所促进。几年前,Kuypers和他的共同工作者又报导了一种新的追踪神经通路的方法——逆... 近年来,辣根过氧化物酶(Horseradish Peroxidase)追踪神经联系法(HRP法)在国内已得到广泛应用。很明显,这个技术的应用对我国神经形态学研究的发展有所促进。几年前,Kuypers和他的共同工作者又报导了一种新的追踪神经通路的方法——逆行荧光物标记法(1)(retrograde furesent labelig method)。 展开更多
关键词 荧光 激发光 动物 神经元 神经组织 标记 神经细胞 标记 组织化学技术 组化 黑质 中脑
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利用量子点免疫荧光双标法在石蜡包埋组织中进行抗原的检测 被引量:7
16
作者 陈洪雷 朱小波 +1 位作者 李蓓芸 余保平 《中华病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期420-422,共3页
在组织切片中利用免疫荧光标记抗原是一种广泛使用的方法。在大多数研究中,使用的荧光染料是一些有机分子如FITC、TRITC、Cy3等。在整个高强度照明期间,由于相对很快的不可逆的光漂白作用,这些有机染料的使用受到限制,而且,它们具... 在组织切片中利用免疫荧光标记抗原是一种广泛使用的方法。在大多数研究中,使用的荧光染料是一些有机分子如FITC、TRITC、Cy3等。在整个高强度照明期间,由于相对很快的不可逆的光漂白作用,这些有机染料的使用受到限制,而且,它们具有狭窄的激发和宽广的发射光谱,也即最佳的激发波长可能在发射高峰附近。而在传统的免疫荧光双标染色法中,因为有机染料必须在不同波长下激发,然后利用图像处理软件进行图像叠加,才能获得合成的最后的荧光双标染色结果。与传统有机荧光染料相比,荧光半导体纳米颗粒——量子点(quantumdots)有几个独特的优势:(1)具有大小和成分可调的发射光谱,从可见光到红外线波长; 展开更多
关键词 免疫荧光标法 标记抗原 石蜡包埋组织 量子点 有机荧光染料 检测 发射光谱 图像处理软件
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免疫荧光双标记在心肌石蜡切片中的应用
17
作者 陈绪军 肖明第 +4 位作者 吕志前 卢成宝 薛松 袁忠祥 徐根兴 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第7期603-604,共2页
关键词 免疫荧光标记 心肌石蜡切片 缺血性心肌病 心肌连接蛋白
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免疫荧光双标法在小鼠表皮干细胞分子标记筛选中的应用 被引量:3
18
作者 陈萌 任宁 +2 位作者 刘文君 秦晓敏 李劲松 《山东大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2011年第4期65-69,共5页
目的用标记滞留细胞(LRCs)及免疫荧光双标记法进行小鼠表皮干细胞可靠分子标记的筛选。方法选择出生5 d的昆明小乳鼠进行腹腔注射5-溴,2-脱氧尿嘧啶(5-bromodeoxyuridine,BrdU),隔日注射,连续7 d。于注射后第90天进行取材,在冰冻切片上... 目的用标记滞留细胞(LRCs)及免疫荧光双标记法进行小鼠表皮干细胞可靠分子标记的筛选。方法选择出生5 d的昆明小乳鼠进行腹腔注射5-溴,2-脱氧尿嘧啶(5-bromodeoxyuridine,BrdU),隔日注射,连续7 d。于注射后第90天进行取材,在冰冻切片上分别进行BrdU与整合素β1、P63和CD34的双重免疫荧光标记,观察这些标记物与BrdU的符合度。结果 90 d后小鼠皮肤上皮细胞中仍有少数阳性细胞,主要存在于毛囊的隆突部位,另有少数阳性细胞散落在基底层。免疫荧光双标的结果示,Brdu与整合素β1双标阳性的细胞占所有整合素β1阳性细胞的81%,占所有Brdu阳性细胞的94%;Brdu与P63双标阳性的细胞占所有P63阳性细胞的65%,占所有Brdu阳性细胞的86%;Brdu与CD34双标阳性的细胞占所有CD34阳性细胞的30%,占所有Brdu阳性细胞的62%。结论整合素β1与BrdU的符合率最高,P63其次。β1和P63是这些分子标记物中筛选干细胞最好的指标。 展开更多
关键词 标记滞留细胞 表皮干细胞分子标记 免疫荧光
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AQP4与Kir4.1在大鼠眼内组织的共表达 被引量:6
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作者 陈海 孙善全 +3 位作者 汪克建 陈通 谭戈 杨美 《第四军医大学学报》 北大核心 2008年第3期214-216,共3页
目的:探讨AQP4与Kir4.1在大鼠眼内的定位分布及二者的共表达.方法:用免疫组织化学及激光扫描共聚焦显微技术检测AQP4与Kir4.1在大鼠眼内的分布.结果:免疫荧光显示,AQP4与Kir4.1在大鼠视网膜和睫状体内的分布形式相似;免疫荧光双标显示,A... 目的:探讨AQP4与Kir4.1在大鼠眼内的定位分布及二者的共表达.方法:用免疫组织化学及激光扫描共聚焦显微技术检测AQP4与Kir4.1在大鼠眼内的分布.结果:免疫荧光显示,AQP4与Kir4.1在大鼠视网膜和睫状体内的分布形式相似;免疫荧光双标显示,AQP4与Kir4.1在视网膜Mller细胞及睫状突无色素上皮细胞的顶膜面及基底膜面呈重叠分布.结论:AQP4与Kir4.1在大鼠视网膜Mller细胞及睫状突无色素上皮细胞共表达,提示二者可能具有协同作用,参与房水的产生以及视网膜内水、K+运输平衡的调节. 展开更多
关键词 睫状体/细胞学 视网膜 水通道蛋白 钾通道 内向整流 免疫荧光组织化学与荧光双标记
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结缔组织生长因子在增生性玻璃体视网膜病变增生膜中的表达 被引量:7
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作者 郭长梅 惠延年 +4 位作者 王雨生 阎峰 韩泉洪 崔志利 马吉献 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2005年第2期128-131,共4页
目的观察结缔组织生长因子(CTGF)在增生性玻璃体视网膜病变(PVR)增生膜中的表达,并鉴别增生膜中阳性细胞来源。方法采用SABC免疫组织化学方法对玻璃体切割手术获得的43例PVR增生膜进行CTGF蛋白的检测,并采用免疫荧光双标记技术在阳性表... 目的观察结缔组织生长因子(CTGF)在增生性玻璃体视网膜病变(PVR)增生膜中的表达,并鉴别增生膜中阳性细胞来源。方法采用SABC免疫组织化学方法对玻璃体切割手术获得的43例PVR增生膜进行CTGF蛋白的检测,并采用免疫荧光双标记技术在阳性表达的增生膜和正常人眼球标本中判定CTGF阳性细胞来源。结果免疫组织化学显示PVR增生膜中阳性细胞形态多是一类胞体为长圆形或多角形,胞浆丰富的上皮样细胞。17例C2-C3级膜中12例阳性,26例D1-D3级膜中19例阳性,其染色反应为阴性"-"、弱阳性"+"、阳性"2+"和强阳性"3+"的分别有5、3、6、3例和7、5、8、6例,总阳性率分别为70.6%和73.1%。统计学分析CTGF阳性表达与膜分级问无相关性(P>0.1)。免疫荧光双标记法显示PVR增生膜中有RPE、巨噬细胞、神经胶质细胞,CTGF阳性细胞来源于RPE细胞;正常眼球RPE层不表达CTGF。结论正常眼球RPE层不表达CTGF,PVR形成过程中RPE细胞在TGF-β1等生长因子的刺激下,CTGF表达上调,表明CTGF参与了PVR增生膜的形成和发展。 展开更多
关键词 增生性玻璃体视网膜病变 结缔组织生长因子 增生膜 SABC免疫组织化学方法 免疫荧光标记 CTGF 玻璃体切割手术 RPE细胞 细胞来源 神经胶质细胞 TGF-β1 阳性表达 PVR 标记技术 上皮样细胞 统计学分析 眼球标本 细胞形态
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