EZH2在维吾尔族妇女宫颈癌中的表达及临床意义

目的观察EZH2(Enhancer of Zeste Homolog 2)蛋白在维吾尔族妇女宫颈癌和对照组中的表达,探讨其与维吾尔族妇女宫颈癌临床病理因素之间的关系。方法应用免疫组化和Western blot法检测维吾尔族妇女正常宫颈或慢性宫颈炎和宫颈癌组织中EZH2蛋白的表达。结果用免疫组化检测出EZH2在维吾尔族正常宫颈和宫颈癌中的阳性率分别为28.89%和61.02%,Western blot法检测显示EZH2/GADPH在宫颈癌中为1.172 2,对照组为0.994 4,差异均具有统计学意义。宫颈癌组中EZH2与年龄、临床分期、病理分级均无关。结论 EZH2在维吾尔族妇女宫颈癌中过表达,在宫颈癌的发生、发展过程中起一定作用,其检测对宫颈癌的早期诊断有一定的参考价值。

花生AhGPAT9与AhLPAAT4基因的原核表达及Western Blot分析

酰基转移酶基因家族是甘油三酯合成的关键基因。本研究以前期克隆的AhGPAT9与AhLPAAT4基因部分序列设计引物,构建原核表达载体,转化进大肠杆菌BL21,经IPTG诱导表达,利用SDS-PAGE检测表明,重组蛋白在37℃,5h诱导条件下获得高效表达。重组蛋白经纯化和富集,对新西兰兔进行4次免疫,纯化获得的多克隆抗血清,通过间接ELISA检测,表明获得了效价比较高的多克隆抗体。通过对重组蛋白纯化后样品进行Western Blot分析,结果显示在纯化样品相应位置有明显信号,表明所制备的抗体具有很高灵敏度和特异性。并采用制备的抗体对AhGPAT9与AhLPAAT4蛋白在花生不同组织及种子不同发育时期的表达进行了Western Blot分析。为深入研究AhGPAT9与AhLPAAT4基因的功能提供了科学数据。

体外人巨细胞病毒感染细胞细胞周期素表达改变与细胞病变的关系

目的探讨人巨细胞病毒(humancytomegalovirus,HCMV)感染的人胚肺成纤维上皮细胞(humanembryolungfibroblast,HEL)细胞周期素E(cyclinE)、D(cyclinD)、A(cyclinA)、B(cyclinB)表达的改变与细胞病变的关系。方法建立体外HCMV感染细胞膜型,观察感染细胞感染12、48h后细胞病变(cytopathologiceffects,CPE);并在相同时间点收获细胞,用乙醇固定HCMV感染的宿主细胞后用PI染色,经流式细胞术(FACSVantage)根据细胞DNA倍性分选出G1、S、G2/M期细胞,然后分别取等量细胞裂解,用Westernblot分析上面各不同时相细胞中cyclins的表达。结果①培养12h,仅病毒感染组在电镜可观察到细胞肿胀,其余各组未见明显病变;②培养48h,与HCMV169感染组相比,药物干预HCMV169感染HEL两组细胞中,光镜及电镜CPE程度较轻,正常组细胞无CPE;③乙醇固定细胞经流式细胞术分选,感染12、48h细胞均以G1为主,少见S期细胞、未见G2期和M期的细胞,与正常对照组比较有显著差异(P<0.05);根据细胞DNA倍性分选出的各期细胞裂解行Westernblot检测,正常细胞未检测到cyclins,感染细胞中cyclinE、cyclinD有明显表达,未见cyclinA、cyclinB的表达。④Westernblot对分选后的感染细胞中cyclinE、cyclinD表达的检测与流式细胞术分析的结果一致。结论体外HCMV感染细?

人宫颈癌HeLa细胞核内M-CSF高表达对抗肿瘤药物的影响

目的探讨人宫颈癌HeLa细胞核内M-CSF高表达对抗肿瘤药物的影响。方法体外培养转染M-CSF人宫颈癌HeLa-M细胞、HeLa细胞、转染M-CSF空载体人宫颈癌HeLa-C细胞;分别以顺铂(0.2、2.0、20μg/mL)、紫杉醇(0.2、2.0、20μg/mL)作用于HeLa-M细胞、HeLa细胞、HeLa-C细胞48 h后,MTT法检测细胞相对活性;Western blot分析胞核内M-CSF对人宫颈癌HeLa细胞Bcl-2蛋白表达的影响。结果MTT比色法测定结果显示:在顺铂和紫杉醇单药药物浓度为20、2.0μg/mL时,HeLa-M细胞相对活性明显高于HeLa细胞、HeLa-C细胞(P<0.01),而在两药单药药物浓度为0.2μg/mL时三种细胞相对活性相比无明显差别(P>0.05)。HeLa细胞与HeLa-C细胞相比无明显统计学差异(P>0.05);Western blot法检测胞核内M-CSF明显上调人宫癌HeLa细胞Bcl-2蛋白的表达(P<0.01)。结论胞核内M-CSF能增加人宫颈癌HeLa细胞的药抗性并抑制HeLa细胞凋亡。

前列腺素合成酶2在前列腺癌和前列腺增生中的表达及其意义

目的 研究前列腺素合成酶 (COX) 2在前列腺癌和前列腺增生组织中的表达及与临床的关系。 方法 随机选择 42份前列腺增生和 16份前列腺癌患者的手术标本 ,从定性和定量两个方面分别采用免疫组织化学和蛋白印记方法对COX 2蛋白的表达进行研究。 结果 16份前列腺癌标本中 ,15份COX 2呈阳性表达 ,占 93 8% ;42份前列腺增生的组织中 ,只有 11份有COX 2的表达 ,占 2 6 % ,两者差异有非常显著意义 (直接概率法P <0 0 1)。且COX 2高表达的前列腺癌患者预后不佳。 结论 COX 2在前列腺癌组织中表达增强 。