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蛋白免疫印迹法在G蛋白检测中的应用 被引量:33
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作者 熊仁平 周元国 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第2期145-148,共4页
目的:建立一项用蛋白免疫印迹法测定鸟苷酸结合蛋白(G蛋白)含量的技术。方法:取冷冻组织块200mg置于4℃预冷的匀浆缓冲液中匀浆、离心后,SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分离,电转移法转移至硝酸纤维素膜上,经5%脱脂奶粉封闭... 目的:建立一项用蛋白免疫印迹法测定鸟苷酸结合蛋白(G蛋白)含量的技术。方法:取冷冻组织块200mg置于4℃预冷的匀浆缓冲液中匀浆、离心后,SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分离,电转移法转移至硝酸纤维素膜上,经5%脱脂奶粉封闭后,依序与抗G蛋白抗体和辣根过氧化物酶标记的IgG反应,化学发光法检测。结果:所得的G蛋白目标带清晰、明显,重复性好。不同种属大鼠主动脉、心房、心室、脑组织中Goα和Giα均为单一带,Fischer344大鼠Gsα主动脉为4条带,Sprague-Dawley和WKY/SHR大鼠主动脉Gsα为3条带,心房和心室Gsα为3条带,Fischer344和Wistar大鼠脑组织中Gsα只有两条带。Wistar大鼠肺组织浆和膜中Gqα、Giα均为单一带,Gsα两条带;肺组织膜中Goα为单一带,肺组织浆中未能检出Goα。结论:用Westernblot技术可较好地检测G蛋白含量和带型分布。不同种属动物及组织G蛋白亚型的含量和带型分布是不完全相同的。 展开更多
关键词 G蛋白 大鼠 蛋白免疫印迹
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蛋白免疫印迹法检测胃癌组织Cyr61和HIF-1α蛋白的表达及其临床意义 被引量:2
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作者 许之美 司君利 +3 位作者 钮自宇 王贺 亓玉琴 隋爱华 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第14期1620-1624,共5页
目的侵袭转移是恶性肿瘤最重要的生物学行为之一,也是导致死亡率增加的主要原因,而肿瘤细胞发生转移的机制一直是研究的热点。研究旨在检测富含半胱氨酸61(Cyr61)蛋白和低氧诱导因子-1α(HIF-1α)蛋白在胃癌组织中的表达水平,探讨两者... 目的侵袭转移是恶性肿瘤最重要的生物学行为之一,也是导致死亡率增加的主要原因,而肿瘤细胞发生转移的机制一直是研究的热点。研究旨在检测富含半胱氨酸61(Cyr61)蛋白和低氧诱导因子-1α(HIF-1α)蛋白在胃癌组织中的表达水平,探讨两者与胃癌侵袭转移的关系。方法将标本分成3组,分别为49例胃癌组、49例配对的癌旁组(距癌2 cm)和49例配对的正常组(距癌5 cm以上),用免疫组织化学和蛋白免疫印迹(Western blot)方法检测Cyr61和HIF-1α的蛋白表达水平,并分析两者与胃癌的临床病理特征的关系。结果免疫组织化学检测显示Cyr61在胃癌细胞的胞浆中表达,HIF-1α在胃癌细胞的胞浆/胞核中表达。进一步用Western blot检测结果显示,胃癌中Cyr61蛋白的表达水平(0.2767±0.02200)高于癌旁组织(0.2145±0.02209)和正常组织(0.1055±0.02082),癌旁组织高于正常组织(均P<0.01);胃癌中HIF-1α蛋白的表达水平(0.2663±0.02682)高于癌旁组织(0.2120±0.04087)和正常组织(0.1008±0.03867)(均P<0.01),癌旁组织高于正常组织(P<0.01)。Cyr61和HIF-1α蛋白表达的增强与肿瘤的分化程度、淋巴转移及TNM分期相关(均P<0.05)。SPERMAN等级相关分析证明了Cyr61蛋白和HIF-1α蛋白的表达呈明显正相关(r=0.411,P<0.05)。结论 Cyr61蛋白和HIF-1α蛋白在胃癌组织中呈高表达,可能与胃癌的侵袭转移有关。联合检测Cyr61蛋白和HIF-1α蛋白对指导胃癌临床及判断预后有重要价值。 展开更多
关键词 胃肿瘤 富含半胱氨酸61 低氧诱导因子-1Α 免疫组织化学 蛋白免疫印迹
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蛋白免疫印迹法(WB)试验结果与HIV感染关系的分析 被引量:4
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作者 杨晓虹 许海生 《中国实用医药》 2010年第13期25-26,共2页
目的通过对蛋白免疫印迹法(WB)试验结果的观察,确定个体是否感染HIV以及HIV感染的状况。方法对60份抗-HIV初筛阳性血清使用蛋白免疫印迹法(WB)进行确认实验。结果在被检测样品中,HIV-1型确认试验阳性54例,占90%;HIV-1型确认试验阳性,且... 目的通过对蛋白免疫印迹法(WB)试验结果的观察,确定个体是否感染HIV以及HIV感染的状况。方法对60份抗-HIV初筛阳性血清使用蛋白免疫印迹法(WB)进行确认实验。结果在被检测样品中,HIV-1型确认试验阳性54例,占90%;HIV-1型确认试验阳性,且提示HIV-2阳性感染1例,占1.6%;HIV-1型确认试验弱阳性(不确定)3例,占5%;HIV-1型确认试验阳性2例,占3.3%。结论蛋白免疫印迹法(WB)试验确定个体有无HIV感染以及HIV感染情况提供依据。 展开更多
关键词 HIV感染 蛋白免疫印迹(WB) 条带
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免疫印迹法检测绵羊朊蛋白prp^c的研究 被引量:1
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作者 乔俊文 赵德明 +3 位作者 吴长德 王志刚 周向梅 王秀菊 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2008年第1期23-24,共2页
关键词 蛋白免疫印迹 化学检测 prp^c 蛋白 病理组织学检查 海绵状脑病 绵羊 流行病学调查
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蛋白免疫印迹法试验结果与HIV感染关系的探讨 被引量:1
5
作者 胡秀杰 包小兵 宋艳文 《职业与健康》 CAS 2005年第8期1162-1163,共2页
目的通过对蛋白免疫印迹法(WB)试验结果的观察,确定个体是否感染HIV以及HIV感染状况。方法对50份抗-HIV初筛阳性血清使用WB法进行确认实验。结果在被检测样品中,HIV-1型确认试验阳性45例,占90%;HIV-1型确认试验阳性,且提示HIV-2阳性感染... 目的通过对蛋白免疫印迹法(WB)试验结果的观察,确定个体是否感染HIV以及HIV感染状况。方法对50份抗-HIV初筛阳性血清使用WB法进行确认实验。结果在被检测样品中,HIV-1型确认试验阳性45例,占90%;HIV-1型确认试验阳性,且提示HIV-2阳性感染1例,占2%;HIV-1型确认试验弱阳性(不确定)2例,占4%;HIV-1型确认试验阴性2例,占4%。结论WB法试验为确定个体有无HIV感染以及HIV感染状况提供依据。 展开更多
关键词 HIV感染 蛋白免疫印迹(WB) 条带 关系
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大鼠肝组织中P-糖蛋白的免疫印迹检测方法 被引量:1
6
作者 吴琼 杨友辉 +5 位作者 杨健 薛维娜 李勇军 何彬 兰燕宇 刘亭 《贵州医药》 CAS 2018年第1期9-10,F0003,共3页
目的探讨Western Blot检测P-糖蛋白表达的实验优化条件。方法随机选择6只雄性SD大鼠,给予荭草花提取物0.4g/(kg·d)灌胃,连续灌胃6d。采用钙盐沉淀法提取6只大鼠肝微粒体,利用BCA法进行蛋白定量后,制备蛋白上样样品。比较不同样品... 目的探讨Western Blot检测P-糖蛋白表达的实验优化条件。方法随机选择6只雄性SD大鼠,给予荭草花提取物0.4g/(kg·d)灌胃,连续灌胃6d。采用钙盐沉淀法提取6只大鼠肝微粒体,利用BCA法进行蛋白定量后,制备蛋白上样样品。比较不同样品处理方法、转膜方法的检测效果。结果与高温变性相比,样品经室温变性上样可检测到目的条带。湿法电转法较半干法电转法转膜效果好,且湿转条件选择120V,2h较为好。结论样品室温变性处理、120V,2h的湿转转膜条件,是检测P-糖蛋白较优的Western Blot方法。并且在经荭草花提取物给药后的6只SD大鼠肝组织内P-糖蛋白的表达呈现一定的差异。 展开更多
关键词 蛋白免疫印迹 P-糖蛋白
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765份HIV-1抗体阳性吸毒者标本蛋白免疫印迹带型分析 被引量:19
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作者 刁丽梅 李杰 +4 位作者 王晔 林萍 鄢心革 于国龙 林鹏 《岭南皮肤性病科杂志》 2007年第4期205-207,共3页
目的:分析HIV-1抗体阳性吸毒者的WB带型,了解我省吸毒人群WB带型的分布特征。方法:对本实验室2001至2003年的HIV-1抗体阳性吸毒者的WB带型进行统计分析。结果:765份HIV-1抗体阳性吸毒者的WB带型中,gp160、gp120、p24、p66、p51带型的出... 目的:分析HIV-1抗体阳性吸毒者的WB带型,了解我省吸毒人群WB带型的分布特征。方法:对本实验室2001至2003年的HIV-1抗体阳性吸毒者的WB带型进行统计分析。结果:765份HIV-1抗体阳性吸毒者的WB带型中,gp160、gp120、p24、p66、p51带型的出现率都在96%以上,gp41、p31带型的出现率分别为93.86%和91.37%;WB全带型出现率为57.12%(437/765);性别与WB带型的出现率差异无统计学意义;不同年龄组与出现p24带型差异有统计学意义(Х2=19.5,P<0.01)。结论:抗env和gag基因编码蛋白的抗体gp160、gp120、gp41、p24阳性率高,是确证HIV-1感染的必备条件;我省的HIV亚型、传播途径和WB带型之间的关系有待进一步的研究。 展开更多
关键词 HIV-1抗体 蛋白免疫印迹(WB) WB带型 吸毒者
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N-甲基-D-天冬氨酸受体-丝裂原活化蛋白激酶信号通路对心脑缺血再灌注损伤后细胞凋亡的调控作用及其机制 被引量:1
8
作者 廖伟 黎云鹏 +2 位作者 潘亮发 余俊键 刘子由 《中国当代医药》 CAS 2023年第2期20-25,F0004,共7页
目的探究N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体-丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路对心脑缺血再灌注损伤后细胞凋亡的调控作用及其机制。方法选择健康SD大鼠40只,采用随机数字表法将其分为对照组、心脏骤停/复苏组、地卓西平马来酸盐(MK801)干... 目的探究N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体-丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路对心脑缺血再灌注损伤后细胞凋亡的调控作用及其机制。方法选择健康SD大鼠40只,采用随机数字表法将其分为对照组、心脏骤停/复苏组、地卓西平马来酸盐(MK801)干预组、MEK特异性抑制剂(U0126)干预组、联合干预组,每组各8只。除对照组外,其余组大鼠建立心脏骤停-心肺复苏模型,在复苏72 h取各组血样本进行血清白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、肌酸激酶(CK)活性、丙二醛(MDA)测定,并测定各组大鼠脑梗死面积占比、心肌细胞凋亡率以及脑组织和心肌组织的N-甲基-D-天门冬氨酸受体1(NMDAR-1)、p38丝裂素活化蛋白激酶(p38MAPK)、磷酸化氨基末端蛋白激酶(p-JNK)、磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK)蛋白表达情况。结果心脏骤停/复苏组的脑梗死面积占比、心肌细胞凋亡率高于对照组、MK801干预组、U0126干预组、联合干预组,差异有统计学意义(P<0.05)。联合干预组的脑梗死面积占比、心肌细胞凋亡率低于MK801干预组、U0126干预组,差异有统计学意义(P<0.05)。联合干预组复苏72 h后的血清IL-1β、TNF-α、CK-MB、MDA低于MK801干预组、U0126干预组、心脏骤停/复苏组,差异有统计学意义(P<0.05)。联合干预组复苏72 h后的心肌组织、脑组织NMDAR1、p38MAPK、p-JNK、p-ERK蛋白表达低于MK801干预组、U0126干预组、心脏骤停/复苏组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论NMDA受体-MAPK信号通路可能参与介导心脑缺血再灌注损伤后细胞凋亡的调控过程,其机制是通过调节机体炎症反应实现的。 展开更多
关键词 心脑缺血再灌注损伤 N-甲基-D-天冬氨酸受体-丝裂原活化蛋白激酶信号通路 细胞凋亡 免疫蛋白印迹法
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男性HIV感染者HIV-1抗体蛋白印迹带型分析 被引量:4
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作者 陈嘉琳 梁光 +2 位作者 柯广强 何惠群 王洁 《中国热带医学》 CAS 2008年第9期1479-1480,共2页
目的分析HIV-1型抗体阳性者蛋白印迹带型,了解男性艾滋病病毒感染者(HIV)带型分布特征。方法检测2000~2007年艾滋病感染者HIV-1抗体蛋白印迹带型特征并进行统计分析。结果男性艾滋病感染者HIV-1抗体蛋白印迹带型gp160、gp120、p24阳性... 目的分析HIV-1型抗体阳性者蛋白印迹带型,了解男性艾滋病病毒感染者(HIV)带型分布特征。方法检测2000~2007年艾滋病感染者HIV-1抗体蛋白印迹带型特征并进行统计分析。结果男性艾滋病感染者HIV-1抗体蛋白印迹带型gp160、gp120、p24阳性率分别为97.0%~100%,gp41、p66、p51、p31为92.3%~94.5%,p55、p17分别为63.2%和77.1%。男性感染者在21~岁组和41~83岁组带型阳性率差异无统计学意义(P>0.05);男性感染者P31、P55、P17带阳性率注射吸毒组高于性途径感染组,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.005,P<0.005),其余带型阳性率差异均无统计学意义(P>0.05);性途径感染者男性和女性带型阳性率差异无统计学意义(P>0.05)。结论男性HIV感染者HIV-1抗体P31、P55、P17带阳性率,注射吸毒感染者高于性途径感染者,与别的学者报道有差别,有待对人群中病毒亚型分布的研究。 展开更多
关键词 HIV-1型抗体 蛋白免疫印迹 WB带型 男性
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人巨细胞病毒感染对宿主细胞周期蛋白表达影响的实验研究
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作者 刘楠 余艳红 +1 位作者 钟梅 闻良珍 《中国优生与遗传杂志》 2007年第5期26-27,共2页
目的观察人巨细胞病毒(HCMV)感染对宿主细胞周期蛋白(Cyclins)表达的影响。方法用HCMV感染同步化于G0/G1期的人胚肺成纤维细胞(HEL),分别于感染后0 h、3 h、6 h、12 h、24 h、48 h、72 h、96 h终止培养。用免疫蛋白印迹法(Western Blot... 目的观察人巨细胞病毒(HCMV)感染对宿主细胞周期蛋白(Cyclins)表达的影响。方法用HCMV感染同步化于G0/G1期的人胚肺成纤维细胞(HEL),分别于感染后0 h、3 h、6 h、12 h、24 h、48 h、72 h、96 h终止培养。用免疫蛋白印迹法(Western Blot)检测CyclinE、CyclinA、CyclinD1蛋白的表达。结果HCMV感染接触抑制细胞12 h时CyclinE蛋白被诱导,感染后24 h出现CyclinE峰值;HCMV不能诱导CyclinA蛋白表达;CyclinD1没有被诱导,且在感染后24 h开始下降。结论HCMV感染同步化于G0/G1期的细胞后,诱导CyclinE蛋白明显升高,激活CyclinE/Cdk2激酶,使细胞周期越过G1/S限制点,将细胞周期阻止于晚G1期。 展开更多
关键词 HCMV感染细胞周期蛋白免疫蛋白印迹法
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胡桃醌对人胃癌细胞SGC-7901凋亡相关基因p53蛋白表达的影响 被引量:2
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作者 王若汗 李庆杰 +1 位作者 成光宇 张凤清 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2020年第14期3090-3094,共5页
目的研究胡桃醌导致人胃癌细胞(SGC-7901)凋亡的机制。方法通过细胞计数试剂盒(CCK)8筛选细胞,利用高通量测序获取胡桃醌处理的SGC-7901与对照组细胞的基因表达数据并筛选差异基因。然后通过Western印迹及实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)... 目的研究胡桃醌导致人胃癌细胞(SGC-7901)凋亡的机制。方法通过细胞计数试剂盒(CCK)8筛选细胞,利用高通量测序获取胡桃醌处理的SGC-7901与对照组细胞的基因表达数据并筛选差异基因。然后通过Western印迹及实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测胡桃醌对SGC-7901凋亡相关基因p53蛋白表达。结果不同浓度的胡桃醌诱导SGC-7901凋亡后p53基因的mRNA表达显著增强,胡桃醌浓度越高其表达量就越高。结论胡桃醌导致SGC-7901凋亡的机制可能是诱导细胞凋亡水平而发挥的,与调节凋亡相关基因p53表达相关。 展开更多
关键词 胡桃醌 免疫蛋白印迹法 细胞凋亡 细胞计数试剂盒-8 P53
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蛋白免疫印迹法同时检测大、小分子蛋白的实验条件改进 被引量:16
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作者 陈彩萍 冯志奇 +3 位作者 宋壮 陈超 温小安 袁浩亮 《现代生物医学进展》 CAS 2016年第24期4618-4621,共4页
目的:蛋白免疫印迹法是现代生物医学研究中广泛应用于蛋白定性和半定量分析的实验技术。然而,常规采用传统单一浓度凝胶的蛋白免疫印迹法在应用过程中仍有不足之处,如不能同时检测分子量很大和很小的蛋白,因而有必要探索一种增大凝胶有... 目的:蛋白免疫印迹法是现代生物医学研究中广泛应用于蛋白定性和半定量分析的实验技术。然而,常规采用传统单一浓度凝胶的蛋白免疫印迹法在应用过程中仍有不足之处,如不能同时检测分子量很大和很小的蛋白,因而有必要探索一种增大凝胶有效分离范围的检测方法。本文提出采用组合凝胶来实现更大范围分子量蛋白的同时检测。方法:比较双浓度的组合凝胶与单一浓度凝胶的分离范围以及分析采用组合凝胶,蛋白免疫印迹法对大、小分子蛋白的检测效果。结果:12%/7.5%组合凝胶和15%/7.5%组合凝胶的分离范围显著大于相应的单一浓度凝胶。通过12%/7.5%组合凝胶,蛋白免疫印迹法同时检测到15-300 k Da范围内的大、小分子蛋白。结论:组合凝胶有助于蛋白免疫印迹法对分子量相差很大的蛋白进行同时检测分析,具有很强的实用性。 展开更多
关键词 蛋白免疫印迹 蛋白分析 组合凝胶 分离胶
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中国莱姆病伽氏疏螺旋体蛋白免疫印迹法诊断标准的研究 被引量:11
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作者 蒋毅 万康林 +1 位作者 耿震 侯学霞 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期594-598,共5页
目的研究中国莱姆病伽氏疏螺旋体基因型蛋白免疫印迹法(WB)的阳性诊断标准。方法采用中国莱姆病螺旋体伽氏疏螺旋体基因型参照菌株PD91作抗原,建立WB检测方法。采用Gel-Pro凝胶分析软件进行结果分析。病例组和对照组各组蛋白条带的频数... 目的研究中国莱姆病伽氏疏螺旋体基因型蛋白免疫印迹法(WB)的阳性诊断标准。方法采用中国莱姆病螺旋体伽氏疏螺旋体基因型参照菌株PD91作抗原,建立WB检测方法。采用Gel-Pro凝胶分析软件进行结果分析。病例组和对照组各组蛋白条带的频数分布比较采用χ2检验或Fisher′s精确检验,WB检测莱姆病阳性诊断标准确定采用ROC曲线。结果共检测127例莱姆病病例和504例对照的血清标本,经统计学分析得出我国莱姆病伽氏疏螺旋体检测中WB阳性诊断标准为:对于IgGP83/100、P58、P39、P30、OspC、P17、P66、OspA中至少有一条蛋白条带显色即可诊断为阳性,此标准敏感度为73.2%,特异度为99.4%;对于IgMP83/100、P58、OspA、P30、OspC、P17、P41中至少有一条蛋白条带显色则可诊断为阳性,此标准敏感度为50.4%,特异度为93.1%。结论建立了中国莱姆病伽氏疏螺旋体基因型WB阳性诊断标准,用于莱姆病的WB诊断具有较好的特异性。 展开更多
关键词 莱姆病 伽氏疏螺旋体 蛋白免疫印迹 诊断标准 莱姆病螺旋体 疏螺旋体 诊断标 标准 中国 FISHER
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Western blot免疫印迹法检测磷酸化蛋白表达条件优化研究 被引量:7
14
作者 韩晓杰 段婷婷 +4 位作者 庞雨 徐玉东 王宇 杨永清 尹磊淼 《现代生物医学进展》 CAS 2017年第21期4047-4050,4037,共5页
目的:探讨Western blot免疫印迹法不同转膜方法和不同抗原抗体比例对磷酸化蛋白表达的检测效果。方法:选择肌球蛋白轻链(myosin light chain,MLC)及其磷酸化蛋白作为研究对象,比较半干转印法、湿转法和1:3000、1:5000、1:10000等抗体稀... 目的:探讨Western blot免疫印迹法不同转膜方法和不同抗原抗体比例对磷酸化蛋白表达的检测效果。方法:选择肌球蛋白轻链(myosin light chain,MLC)及其磷酸化蛋白作为研究对象,比较半干转印法、湿转法和1:3000、1:5000、1:10000等抗体稀释比例对磷酸化蛋白检测效果的影响。结果:半干转印法(恒压16V,30 min)观察到蛋白信号断续;而同样样品利用湿转法(恒压130 V,1h)检测发现信号连续且强度明显增高;对于磷酸化蛋白,半干转印法无法观察到磷酸化蛋白信号;而同样样品湿转法检测出现连续信号。统一利用湿转方法进行后续蛋白磷酸化检测,当抗体稀释比为1:3000时,结果出现非特异性条带;降低抗体稀释比为1:5000时无非特异性条带,且蛋白信号效果较好;抗体稀释比为1:10000时条带图像出现弥散且背景较高。结论:选择合适的转膜方式和抗原抗体比例有助于磷酸化蛋白表达检测。 展开更多
关键词 蛋白免疫印迹 半干转印 湿转 抗原抗体比例
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H9亚型禽流感病毒基质蛋白M1单克隆抗体的制备与鉴定 被引量:6
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作者 戴晓光 滕巧泱 +6 位作者 黄海碧 王朝霞 张树梅 张旭 徐大伟 申之义 李泽君 《中国动物传染病学报》 CAS 2010年第3期8-12,共5页
本研究用纯化的H9N2亚型禽流感病毒免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合。对杂交瘤细胞及时筛选,阳性孔经3次有限稀释法克隆,成功获得3株能稳定传代并分泌抗H9亚型禽流感病毒基质蛋白M1单克隆抗体的杂交瘤细胞:3G8、2F6、5F... 本研究用纯化的H9N2亚型禽流感病毒免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合。对杂交瘤细胞及时筛选,阳性孔经3次有限稀释法克隆,成功获得3株能稳定传代并分泌抗H9亚型禽流感病毒基质蛋白M1单克隆抗体的杂交瘤细胞:3G8、2F6、5F2。间接ELISA方法检测,3株单克隆抗体的腹水间接ELISA效价达106以上。构建了真核表达载体pCAGGS-M1并转染于MDCK细胞,以用于腹水的Western blot和间接免疫荧光鉴定。间接免疫荧光结果表明,3株单克隆抗体皆与真核表达蛋白M1反应。这些单克隆抗体的制备为后期研究M1蛋白在流感病毒复制与出芽过程中的重要生物学功能奠定了基础。 展开更多
关键词 H9亚型禽流感病毒 基质蛋白M1 单克隆抗体 间接免疫荧光 蛋白免疫印迹
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P53和Bcl-2家族蛋白在胰腺癌中的表达 被引量:3
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作者 吴幸 崔海宁 +4 位作者 明松林 王正文 欧树安 陈兴超 余壮明 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2009年第4期368-372,共5页
目的:探讨胰腺癌组织(pancreatic carcinoma,PC)中P53和Bcl-2家族(Bcl-2,Bax,Bcl-xL,Bcl-xS)蛋白表达及与细胞凋亡的关系.方法:免疫组化法检测35例PC中P53蛋白表达,将PC分为P53阴性表达组(第1组,n=18)和P53阳性表达组(第2组,n=17);Weste... 目的:探讨胰腺癌组织(pancreatic carcinoma,PC)中P53和Bcl-2家族(Bcl-2,Bax,Bcl-xL,Bcl-xS)蛋白表达及与细胞凋亡的关系.方法:免疫组化法检测35例PC中P53蛋白表达,将PC分为P53阴性表达组(第1组,n=18)和P53阳性表达组(第2组,n=17);Western blot检测两组PC中P53,Bcl-2,Bax,Bcl-xL和Bcl-xS蛋白表达,TUNEL法检测第1组中凋亡指数(AI).结果:Bcl-2蛋白在P53阳性PC表达上调,而在P53阴性PC表达下调(P=0.047);Bax和Bcl-xL蛋白在两组PC中表达都明显上调(P=0.274,0.334);Bcl-xS在P53阳性表达PC明显下调,在P53阴性表达组明显上调(P=0.01);在P53阴性和阳性表达PC,AI分别为12.1±2.47和9.1±1.48(P=0.023);Bcl-2家族各成员表达与AI无相关性,而Bcl-2/Bax比率与AI有明显的相关性(P<0.01).结论:Bcl-2是依赖P53调节的抗凋亡蛋白,Bcl-xS是依赖P53调节的促凋亡蛋白,而P53主要通过调节Bcl-2/Bax比率发挥凋亡调节作用. 展开更多
关键词 胰腺肿瘤 P53 Bcl-2 Bax BCL-XL Bcl—xS 蛋白免疫印迹 原位缺口末端标记
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蛋白免疫印迹法检测胃癌中Cyr 61和HIF-1α蛋白的表达及其临床意义 被引量:3
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作者 许之美 司君利 +2 位作者 王贺 亓玉琴 隋爱华 《临床消化病杂志》 2010年第6期323-326,共4页
目的本研究旨在检测Cyr61蛋白和HIF-1α蛋白在胃癌组织中的表达水平,探讨二者与胃癌侵袭转移的关系。方法将标本分成3组,分别为49例胃癌组,49例配对的癌旁组(距癌2cm)和49例配对的正常组(距癌5cm以上),用蛋白免疫印记(Western blot)方... 目的本研究旨在检测Cyr61蛋白和HIF-1α蛋白在胃癌组织中的表达水平,探讨二者与胃癌侵袭转移的关系。方法将标本分成3组,分别为49例胃癌组,49例配对的癌旁组(距癌2cm)和49例配对的正常组(距癌5cm以上),用蛋白免疫印记(Western blot)方法检测Cyr61和HIF-1α的蛋白表达水平,并分析二者与胃癌的临床病理特征的关系。结果胃癌中Cyr61蛋白的表达水平(0.2767±0.02200)显著高于癌旁组织(0.2145±0.02209)和正常组织(0.1055±0.02082),癌旁组织明显高于正常组织(P均<0.001);胃癌中HIF-1α蛋白的表达水平(0.2663±0.02682)显著高于癌旁组织(0.2120±0.04087)和正常组织(0.1008±0.03867)(P均<0.001),癌旁组织明显高于正常组织(P<0.001)。Cyr61和HIF-1α蛋白表达的增强与肿瘤的分化程度、淋巴转移及TNM分期显著相关(P均<0.05)。Sperman等级相关分析证明了Cyr61蛋白和HIF-1α蛋白的表达呈明显正相关(r=0.411,P<0.05)。结论 Cyr61蛋白和HIF-1α蛋白在胃癌组织中呈高表达,且Cyr61蛋白和HIF-1α蛋白表达的增强可促进胃癌的侵袭转移。联合检测Cyr61蛋白和HIF-1α蛋白对指导胃癌临床诊治及判断预后有重要价值。 展开更多
关键词 胃肿瘤 CYR61 HIF-1Α 侵袭转移 蛋白免疫印迹
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化湿行瘀清热方剂对口腔扁平苔藓患者唾液中差异蛋白的影响 被引量:5
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作者 刘铁军 张杨杨 +2 位作者 刘健 张梅洁 许彦枝 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第13期2231-2235,共5页
目的:筛选鉴定口腔扁平苔藓(OLP)治疗前后唾液中的差异蛋白,探讨化湿行瘀清热方剂对口腔扁平苔藓患者唾液中差异蛋白的影响。方法:收集OLP患者化湿行瘀清热方剂治疗前后的唾液,提取唾液总蛋白,应用双向荧光差异凝胶电泳和液相色谱-质谱... 目的:筛选鉴定口腔扁平苔藓(OLP)治疗前后唾液中的差异蛋白,探讨化湿行瘀清热方剂对口腔扁平苔藓患者唾液中差异蛋白的影响。方法:收集OLP患者化湿行瘀清热方剂治疗前后的唾液,提取唾液总蛋白,应用双向荧光差异凝胶电泳和液相色谱-质谱联用技术筛选鉴定差异蛋白,蛋白质印迹法检测差异蛋白的表达情况。结果:筛选鉴定出OLP患者化湿行瘀清热方剂治疗前后6种差异蛋白:分泌型IgA、血清白蛋白、IgM、唾液淀粉酶、碳酸酐酶6、锌α2糖蛋白。OLP患者治疗后较治疗前唾液中IgA表达量升高,血清白蛋白、IgM、碳酸酐酶6和锌α2糖蛋白治疗后较治疗前表达量下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 :OLP患者化湿行瘀清热方剂治疗前后唾液中存在差异蛋白,并可能在OLP的发生发展中起着重要作用。 展开更多
关键词 口腔扁平苔藓 唾液 蛋白质组学 双向荧光差异凝胶电泳 液相色谱-质谱技术 蛋白免疫印迹
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伯氏疏螺旋体与苍白密螺旋体、钩端螺旋体的免疫交叉反应抗原研究 被引量:1
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作者 蒋毅 杨勇 +3 位作者 顾黎莉 侯学霞 耿震 万康林 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2005年第5期386-388,382,共4页
目的研究莱姆病螺旋体与梅毒、钩端螺旋体较常出现的交叉反应抗原,明确产生交叉反应的蛋白抗原成分,为精确蛋白免疫印迹法检测莱姆病的阳性判断标准提供参考依据。方法以中国莱姆病螺旋体伽氏疏螺旋体基因型代表菌株PD91作抗原,用蛋白... 目的研究莱姆病螺旋体与梅毒、钩端螺旋体较常出现的交叉反应抗原,明确产生交叉反应的蛋白抗原成分,为精确蛋白免疫印迹法检测莱姆病的阳性判断标准提供参考依据。方法以中国莱姆病螺旋体伽氏疏螺旋体基因型代表菌株PD91作抗原,用蛋白免疫印迹法对梅毒病人和钩端螺旋体病人的血清进行抗体(IgG和IgM)检测。结果共检测梅毒病人血清196份和钩端螺旋体病人血清68份。伯氏疏螺旋体与苍白密螺旋体抗原在75kDa,60kDa,43kDa,41kDa处有交叉,交叉反应阳性率分别为IgG8.2%、20.4%、9.2%、17.3%,IgM7.7%、10.2%、8.7%、9.7%;伯氏疏螺旋体与钩端螺旋体抗原的交叉发生在75kDa,60kDa,41kDa,交叉反应阳性率分别为IgG1.5%、1.5%和13.2%,IgM8.8%、2.9%、17.6%。结论莱姆病螺旋体蛋白抗原中75kDa,60kDa,43kDa和41kDa蛋白成分与梅毒和钩端螺旋体存在交叉反应。 展开更多
关键词 莱姆病螺旋体 梅毒螺旋体 钩端螺旋体 蛋白免疫印迹 交叉反应
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慢性铅暴露对小鼠脑皮质区ERK蛋白表达的影响 被引量:2
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作者 郝凤进 高双 +3 位作者 袁莹 阎敬 郭庆国 陈晓薇 《贵阳医学院学报》 CAS 2008年第1期16-18,共3页
目的:研究不同浓度乙酸铅染毒对发育期不同时段小鼠脑皮质区细胞外信号调节激酶(extracellular signalregulated kinases,ERK)活力表达的影响。方法:分组饲养小鼠,对照组喂以蒸馏水;实验组于交配后改喂含不同浓度乙酸铅(2.4、4.8、9.6mm... 目的:研究不同浓度乙酸铅染毒对发育期不同时段小鼠脑皮质区细胞外信号调节激酶(extracellular signalregulated kinases,ERK)活力表达的影响。方法:分组饲养小鼠,对照组喂以蒸馏水;实验组于交配后改喂含不同浓度乙酸铅(2.4、4.8、9.6mmol/L)的水溶液。新生鼠通过母乳摄入铅,断乳后幼鼠自行饮水摄入铅。新生鼠按生后不同日龄(P7,P14,P21,P28)取脑皮质。利用ERK磷酸化抗体,通过蛋白免疫印迹法检测不同日龄、不同染铅浓度小鼠等量脑皮质中ERK活力表达。结果:Western blot结果显示,低浓度铅(2.4mmol/L)使ERK表达升高,中浓度铅(4.8mol/L)使ERK表达量降低,铅浓度升高至9.6mmol/L时随着铅浓度升高ERK表达量不再降低相反有所回升。结论:ERK1/2的水平随铅浓度升高而逐渐降低,铅对ERK的影响在发育后期比发育前期影响大。 展开更多
关键词 铅中毒 神经系统 小鼠 细胞外信号调节激酶 蛋白免疫印迹
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