卡介菌基因组 DNA和卡介菌多糖核酸免疫调控活性的比较(英文)

目的 :比较研究卡介菌 (Mycobacterium bovis Bacillus Calm ette- Guérin,BCG)基因组 DNA(BCG- DNA)和卡介菌多糖核酸 (BCG- PSN)的免疫调控活性。 方法 :制备高纯度的 BCG- DNA,小鼠脾细胞 (splenocyte)和人外周血单个核细胞 (pe-ripheral blood m ononuclear cell,PBMC)分别与 BCG- DNA和 BCG- PSN共同培养 72 h,采用 EL ISA方法检测细胞培养上清中 IFN -γ的水平。结果 :所制备的 BCG- DNA纯度较高 ,DNA含量达 95 .3%。琼脂糖电泳显示 :BCG- DNA片断大小集中于2 0 0～ 2 5 0 bp。EL ISA结果表明 BCG- DNA与 BCG- PSN均可显著激活小鼠脾细胞和人外周血单个核细胞 ,有效诱导 IFN-γ的产生 (P<0 .0 1 )。当浓度达 1 0μg/ m l以上时 ,BCG- DNA免疫调控作用优于 BCG- PSN(P<0 .0 1 )。 结论 :BCG- DNA可显著诱导 Th1型细胞因子 IFN-γ的产生 。

羊肚菌多糖提取、分离纯化及免疫调节活性

对羊肚菌多糖的结构和免疫调节活性进行初步探究,采用热水浸提法提取羊肚菌粗多糖,DEAE纤维素柱层析法对粗多糖进行分离纯化,CCK-8法检测羊肚菌多糖免疫调节能力。结果显示:分离纯化后的羊肚菌多糖(ME-X)重均分子量为1. 635×10~4。ME-X能显著提高免疫细胞增殖能力,当其质量浓度为10μg/mL时,淋巴细胞T、B的增殖效果最佳,增殖率分别达到31. 18%、63. 02%;质量浓度为20μg/mL时,巨噬细胞增殖效果最好,增殖率高达63. 12%,同时该浓度值的ME-X刺激巨噬细胞吞噬中性红能力也最强,吞噬率为22. 49%。ME-X的活性探究实验表明,ME-X能有效促进免疫细胞增殖,同时能显著促进巨噬细胞的吞噬作用。

“南薯88”茎叶多糖的分离纯化,结构鉴定及其生物活性的研究

晒干的"南薯88"的茎叶,通过热水浸提,乙醇沉淀,DEAE-cellulose column柱层析分离纯化,得到"南薯88"多糖纯品(N88P-1)。通过红外光谱技术(IR),高效凝胶渗透色谱(HPGPC),高效液相色谱色谱(HPLC)和核磁共振谱(1 H NMR)等对"南薯88"多糖(N88P-1)的进行了结构鉴定;同时,对"南薯88"多糖(N88P-1)的抗氧化及免疫调控作用进行了初探。结果显示,"南薯88"多糖(N88P-1)的分子量为1 4328 D,红外光谱显示,在3 444.81 cm^(-1)出现O-H的特征伸缩振动峰,1 640.20 m^(-1)出现C=O的特征伸缩振动峰,~1H NMR谱显示δ4.93～δ4.86出现异头氢信号,高效液相色谱色谱显示N88P-1的单糖组成为1∶1的半乳糖和甘露糖。活性研究结果显示,一定范围内的N88P-1浓度可以清除ABTS^+自由基,IC_(50)值为0.48 mg/mL。N88P-1在0.25～3 mg/mL的浓度范围内与DPPH^-自由基的清除能力呈正相关,IC_(50)值为0.96 mg/mL。当N88P-1的浓度为3 mg/mL时,对ABTS^+和DPPH^-自由基的清除能力均达到最高值;免疫细胞增殖活性结果显示,N88P-1在20～80 mg/mL的浓度下,对B细胞和T细胞增殖效果为极显著(P<0.01);在10～40 mg/mL的浓度下,对巨噬细胞增殖效果为极显著(P<0.01),其中,N88P-1在40 mg/mL的浓度下对3种免疫细胞的增殖效果均达到最佳。