酶联免疫斑点试验检测技术(Elispot)在诊断结核性脑膜炎中的应用

目的评价酶联免疫斑点技术(Elispot)检测外周血结核杆菌抗原特异性r干扰素(IFN-r)水平在结核性脑膜脑炎中的应用价值。方法回顾性分析本院73例结核性脑膜脑炎患者及16例非结核性脑膜脑炎患者外周血Elispot结果,同时分析脑脊液腺苷脱氨酶(ADA)水平、TB-DNA(PCR)结果,比较三种技术在诊断结核性脑膜炎的作用。结果 Elispot在诊断结核性脑膜脑炎中的敏感性及准确性高于脑脊液ADA、TB-DNA(PCR)检测,差异具有统计学意义(P<0.05);而特异性比较三者无明显差异(P>0.05)。结论 Elispot技术在结核性脑膜脑炎中具有良好的辅助诊断价值,其诊断价值优于脑脊液ADA、TB-DNA(PCR)检测。

酶联免疫斑点试验检测技术(Elispot)在诊断结核性脑膜炎及Ⅲ型肺结核中的应用价值

目的评价酶联免疫斑点技术(Elispot)检测外周血结核杆菌抗原特异性r干扰素(IFN-r)水平在结核脑膜脑炎及Ⅲ型肺结核患者诊断中的应用价值。方法利用Elispot技术分别对383例结核病人(包括73例结核性脑膜炎患者、310例Ⅲ型肺结核患者)、97例健康人外周血结核杆菌抗原特异性r干扰素(IFN-r)水平进行定量检测。结果 Elispot技术在结核病中诊断敏感性为81.46%,特异性为85.57%;结核脑膜脑炎组Elispot阳性率为61.64%;Ⅲ型肺结核患者组Elispot阳性率为86.13%;健康对照组Elispot阳性率为10.31%;各组间比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 Elispot技术在结核病诊断中具有良好的辅助诊断价值,在Ⅲ型肺结核中的诊断价值优于结核性脑膜脑炎。

酶联免疫斑点检测和结核菌素试验在初治肺结核中的辅助诊断价值

目的比较酶联免疫斑点检测(ELISPOT)和结核菌素试验(TST),探讨ELISPOT在初治肺结核中的辅助诊断价值。方法选取初治肺结核123例和非结核疾病病例102例作为结核组和对照组,应用6kD早期分泌靶向抗原/10kD培养滤过蛋白融合蛋白(ESAT-6/CFP-10)作为抗原对受试者外周血单个核细胞进行ELISPOT(即ESAT-6/CFP-10-ELISPOT),检测斑点形成细胞(SFCs)的数量;同时对受试者行TST。结果结核组ESAT-6/CFP-10-ELISPOT形成的SFCs数显著高于对照组(P=0.000)。结核组中ESAT-6/CFP-10-ELISPOT的敏感度91.1%(111/123)、特异度80.4%(82/102)、阳性似然比4.60、阴性似然比0.12、阳性预测值0.85、阴性预测值0.87,TST的敏感度65.6%(59/90)、特异度45.1%(46/102)、阳性似然比1.31、阴性似然比0.76、阳性预测值0.51、阴性预测值0.60。ESAT-6/CFP-10-ELIS-POT的敏感度和特异度显著高于TST(均P=0.000)。菌阳肺结核组和菌阴肺结核组间ESAT-6/CFP-10-ELISPOT形成SFCs数量差异无显著性(P=0.166),两组ESAT-6/CFP-10-ELISPOT的敏感度分别为91.8%(67/73)和88.0%(44/50),二者比较差异无显著性(P=0.448)。结论ESAT-6/CFP-10-ELISPOT有可能作为辅助诊断初治肺结核的较为准确方法,并为菌阴肺结核提供一定的诊断依据,但诊断的特异度可能受结核潜伏感染影响。TST对初治肺结核的诊断价值较小。

酶联免疫斑点(ELISPOT)技术的应用(讲座)

此文重点介绍近年来建立起来的另一酶免疫分析技术——酶联免疫斑点 (ELISPOT)技术的基本原理及操作步骤 。

酶联免疫斑点试验检测技术在血液病合并痰涂片抗酸杆菌阴性结核病诊断中的应用

目的评价酶联免疫斑点试验(ELISPOT)检测外周血中结核分枝杆菌抗原特异性γ干扰素水平,在诊断免疫功能低下的血液病合并痰涂片抗酸杆菌阴性的结核病患者时的应用价值。方法采用以结核分枝杆菌特异性重组ESAT-6和CFP-10融合蛋白为刺激抗原的ELISPOT检测技术,分析了51例发热的血液病怀疑合并痰涂片抗酸杆菌阴性结核病患者的外周血,作能分泌结核特异的γ干扰素的T淋巴细胞测定,以传统的诊断方法为对照。结果确诊血液病合并结核病24例,排除活动性结核病27例;ELISPOT的灵敏度为73.6%,高于PPD皮肤试验的54.5%(P<0.05),高于抗结核抗体试验的37.5%(P<0.01);准确度82.6%高于抗结核抗体的62.5%(P<0.05),高于PPD的77.77%;特异度88.88%,与抗结核抗体检测(87.5%)及PPD(93.75%)相似;ELISPOT与抗结核抗体、PPD试验结果联合分析,其诊断率为79.2%。此外,ELISPOT检测结果与性别、年龄、结核病史、抗结核抗体、机体免疫状态、外周血淋巴细胞数等影响因素之间的相关性进行了初步探讨。结论ELISPOT是血液病患者合并活动性结核的重要辅助诊断工具。

结核T细胞酶联免疫斑点试验诊断结核感染的临床应用

目的探讨结核T细胞酶联免疫斑点试验(T-SPOT.TB)诊断结核感染的临床应用价值。方法选择结核分枝杆菌感染者103例及非结核病对照者30例,用酶联免疫斑点试验检测外周血单个核细胞经结核特异性蛋白6KD早期分泌靶向抗原,以及培养滤液蛋白10刺激产生γ-干扰素的T淋巴细胞数,并与血清抗结核抗体、结核菌素皮肤试验结果比较。结果 T-SPOT.TB诊断结核感染的敏感性和特异性为95.15%、93.33%;阳性预则值和阴性预测值为98.00%、84.85%;阳性似然比和阴性似然比为14.27%、0.05%,均优于血清抗结核抗体、结核菌素皮肤试验(P<0.01),但方法间一致性较弱(Kappa<0.40,P<0.001),差异有统计学意义。结论 T-SPOT.TB检测在结核分枝杆菌(MTB)感染的筛查,快速早期辅助结核病诊断和排除感染方面意义重大。

酶联免疫斑点试验在骨关节结核中的辅助诊断价值

目的探讨评价酶联免疫斑点试验(ELISPOT)在骨关节结核病中的辅助诊断价值。方法对骨关节结核病组30例和对照组21例患者,应用ELISPOT试验检测结核菌特异性6kD早期分泌靶向抗原(ESAT-6)和10kD培养滤过蛋白(CFP-10)刺激后外周血中释放γ-干扰素的特异性T细胞。同时对关节穿刺液或手术标本进行涂片、培养、聚合酶链反应(PCR)检测结核菌特异DNA以及病理检查诊断。结果骨关节结核病患者中ELISPOT检测敏感性为96.7%(29/30),特异性为76.2%(16/21),阳性预测值、阴性预测值和阳性似然比分别为85.3%、94.2%和2.86。抗酸杆菌涂片、结核菌培养、PCR和病理诊断的敏感性分别为23.3%(7/30),30.0%(9/30),46.7%(14/30)和93.3%(28/30)。结论 ELISPOT检测方法在骨关节结核病中具有一定的辅助诊断价值,其敏感性明显高于临床常规检测方法。

酶联免疫斑点试验对活动性结核病的诊断价值

目的探讨酶联免疫斑点试验(ELISPOT)在活动性结核病中的辅助诊断价值。方法选取活动性结核病患者36例(结核病组)和非结核病患者(对照组)38例,收集受试者外周血单核细胞进行ELISPOT检测,同时对部分受试者进行结核菌素皮肤试验(TST)。结果结核病组中ELISPOT的灵敏度为91.7%(33/36),特异度为81.6%(31/38)。TST的灵敏度为48.1%(13/27),特异度为57.9%(22/38)。同时完成ELISPOT和TST检测的27例结核病患者中,ELISPOT阳性检出率为88.9%(24/27),明显高于TST检出率的48.1%(13/27,P=0.021);对照组中,ELISPOT阳性检出率为18.4%(7/38),明显低于TST检出率的42.1%(16/38,P<0.05)。结论 ELISPOT诊断活动性结核病的准确性较高,可作为结核病的辅助诊断方法。

结核病诊断中酶联免疫斑点试验检测试剂临床应用的风险评估与控制

通过对可能影响γ干扰素释放试验（IGRA）的酶联免疫斑点试验（ELISPOT）检测结果的受试者、检测方法、环境设施和仪器等因素的风险识别与分析，提示ELISPOT检测试剂在临床结核病诊断应用中可能产生的风险，并提出相应的风险控制措施，以降低该类试剂的检测风险。

应用酶联免疫斑点试验检测入伍新兵结核潜伏感染

目的 应用酶联免疫斑点试验（ELISPOT）检测入伍新兵结核潜伏感染情况，评价ELISPOT在检测结核潜伏感染中的价值。方法以结核菌素纯蛋白衍生物（PPD）皮肤试验为对照，应用ELISPOT试剂盒检测366例2009年驻京部队入伍新兵外周血中分泌结核菌抗原特异性y干扰素（IFN-y）的T淋巴细胞数。对PPD和ELISPOT均为阴性的入伍新兵接种卡介苗，10个月后再做PPD皮肤试验和ELISPOT，比较结果。结果366例入伍新兵中，PPD皮肤试验和ELISPOT阳性率分别为44．81％和31．69％。202例PPD皮肤试验阴性和164例PPD皮肤试验阳性者中，分别有53例（26．24％）和63例（38．41％）ELISPOT阳性，两者的一致率为57．92％（212／366），两者的检测结果差异具有统计学意义（X^2=14．34，P〈0．001）。在接种过卡介苗者中，PPD皮肤试验阳性率为58．53％（127／217），ELISPOT阳性率为29．1）3％（63／217），斑点形成细胞数为32．44±26．52；在未接种卡介苗者中，PPD皮肤试验阳性率为24．83％（37／149），ELISPOT阳性率为35．57％（53／149），斑点形成细胞数为41．81±30．48。110例PPD和ELISPOT均为阴性的人伍新兵接种卡介苗1（1个月后，PPD皮肤试验阳转率为78．18％，而ELISPOT检测均为阴性。结论ELISPOT具有较高的特异性和敏感性，能真实反映入伍新兵的结核潜伏感染情况，可推广应用。

酶联免疫斑点试验诊断结核性胸膜炎的临床应用价值

目的 探讨酶联免疫斑点试验（ELISPOT）诊断结核性胸膜炎的临床应用价值.方法 选择2011年8月～2012年8月武汉市医疗救治中心住院21例结核性胸膜炎患者（结核组）和18例肺癌胸膜转移患者（恶性肿瘤组）,利用ELISPOT法检测两组患者胸水对结核特异性抗原刺激产生反应,分泌γ干扰素的效应T淋巴细胞的阳性率.结果 ELISPOT结果显示结核组胸水中T淋巴细胞检测阳性率为85.7％（18/21）,明显高于恶性肿瘤组[16.7％（3/18）],差异有统计学意义（P＜0.05）.ELISPOT的敏感性与特异性分别为85.7％、83.3％.结论 ELISPOT灵敏性和特异性较高,对于结核性胸膜炎具有一定的临床诊断价值.

T细胞酶联免疫斑点试验在结核病诊断中的应用

目的:探讨结核感染T细胞酶联免疫斑点试验(T-SPOT.TB)在结核病快速诊断的临床应用价值。方法:选取74例结核病患者(疾病组)和48例非结核病(对照组)对照,同时采用结核杆菌涂片、结核抗体(TB-Ab)、结核菌素试验(TB-PPD)及结核感染T细胞酶联免疫斑点试验(T-SPOT.TB)进行检测,并比较四种检测方法对结核病的诊断价值。结果:T-SPOT.TB法的敏感性为75.68%、特异性为91.67%、阳性预测值为93.33%、阴性预测值为70.97%,均明显高于TB-PPD法的55.41%、56.25%、66.13%、45.00%和TB-Ab法的36.49%、68.75%、64.29%、41.25%,涂片染色镜检阳性率仅为9.46%。结论:T-SPOT.TB是诊断结核感染的快速、敏感的方法,在结核性疾病早期诊断中有重要价值。

结核T细胞酶联免疫斑点试验在诊断结核病中的临床应用价值

目的:分析结核T细胞酶联免疫斑点试验(T-STOP.TB)对结核病的诊断及临床应用价值。方法:收集结核病患者160例,非结核病患者46例。利用酶联免疫斑点试验检测经结核特异性抗原(ESAT-6/CFP-10)刺激并分泌γ-干扰素的结核致敏T淋巴细胞的数量、涂片抗酸染色以及检测红细胞沉降率。结果:T-STOP.TB敏感度91.3%,特异度95.7%,阳性预测值98.6%,阴性预测值75.9%,均高于红细胞沉降率,且差异具有统计学意义(P<0.05);T-STOP.TB敏感度及阴性预测值高于涂片抗酸染色,差异具有统计学意义(P<0.05);T-STOP.TB特异度及阳性预测值与涂片抗酸染色相当,差异没有统计学意义(P=0.495,P=1.0);结核组T-SPOT.TB实验两种抗原阳性斑点数目均高于对照组,且差异具有统计学意义(Z=-14.258,Z=-13.620,P=0.00);ESAT-6抗原的斑点数cut-off值取17.5时,诊断结核的灵敏度和特异度分别可达到81.9%和98.7%;CFP-10抗原的斑点数cut-off值取19.0时,诊断结核的灵敏度和特异度分别可达到76.9%和98.7%。结论:T-STOP.TB是灵敏度高、特异性好的方法,可用于检测患者是否存在结核感染的辅助诊断。

酶联免疫斑点试验诊断结核的敏感性和特异性研究

应用T-SPOT·TB检测临床确诊的106例结核患者和24例健康体检者,与抗酸染色(AFB)、结核菌纯蛋白衍生物试验(PPD)、结核抗体检查结果进行比较分析。结果显示,T-SPOT.TB敏感性为93.4%,特异性为95.8%。AFB、PPD、结核抗体敏感性分别为36.8%、57.5%、39.6%,特异性分别为100.0%、83.3%、91.7%。T-SPOT.TB敏感性与三者相比,差异有统计学意义(P<0.01),特异性与三者相比,差异无统计学意义。表明酶联免疫斑点T-SPOT.TB实验检测结核敏感性强、特异性高,是快速诊断结核感染的有效手段。

应用斑点酶联免疫吸附试验快速检测饲料中的沙门氏菌

选用硝酸纤维素(N C)膜作固相载体,建立检测沙门氏菌的斑点酶联免疫吸附试验诊断方法,检测成品饲料100份,对沙门氏菌的最低检出量为400个/m L,沙门氏菌阳性检出率43.00%(43/100),常规分离培养阳性检出率为38.00%(38/100),两者符合率为83.72%,差异不显著(P>0.05)。试验表明该方法简便、特异、快速、结果直观,便于在基层推广使用。

酶联免疫斑点试验在脊柱结核辅助诊断应用中的影响因素探讨

目的分析脊柱结核患者酶联免疫斑点试验(ELISPOT)结果的相关临床影响因素。方法选取2015年1月至2017年10月脊柱结核感染组患者85例(病例组)和非脊柱结核疾病患者71例(对照组),抽取受试者外周静脉血,应用ELISPOT技术,使用结核分枝杆菌特异性融合抗原CFP-10/ESAT-6作为刺激物进行检测,并详细记录患者基本资料、临床表现等信息,分析临床因素对ELISPOT结果的影响。结果ELISPOT诊断在病例组中的阳性率为83.5%,进一步分析得出:在老年脊柱结核患者中(年龄≥60岁)的阳性率为72.7%,而在年龄<60岁脊柱结核患者中的阳性率高达90.4%,两组结果比较差异具有统计学意义(P<0.05)。身体质量指数(BMI)偏低(BMI≤16kg/m2)脊柱结核组斑点形成细胞(SFC)数目[(25.3±12.8)个]比BMI17~25kg/m2组[(45.2±36.7)个]明显减少,差异有统计学意义(P<0.05);病例组影像学上合并有椎旁脓肿的患者其SFC数目为(48.6±35.8)个,相比较单纯椎体破坏无合并椎旁脓肿者的(25.8±22.9)个,差异有统计学意义(P<0.05)。结论在脊柱结核的实验室辅助诊断中,以结核分枝杆菌特异性融合抗原CFP-10/ESAT-6作为刺激物的ELISPOT试验发挥着一定作用,其诊断结果可能受到年龄、BMI、椎旁脓肿等临床因素影响。

护理干预对T细胞酶联免疫斑点试验结果阳性风湿性疾病患者心理状况的影响

目的:探讨护理干预对T细胞酶联免疫斑点试验结果(T-SPOT.TB)阳性风湿性疾病患者心理状况的影响。方法:将收治的64例T-SPOT.TB阳性风湿性疾病患者进行护理干预,采用汉密顿焦虑量表(HAMA)评定患者在得知T-SPOT.TB结果的次日和1周后的心理状况。结果:本组患者均顺利完成连续性治疗,正常出院。干预后HAMA总分及焦虑、害怕、紧张、失眠、记忆或注意障碍各因子得分明显低于干预前(P<0.01)。结论:及时的护理干预可有效缓解T-SPOT.TB阳性风湿性疾病患者焦虑、害怕、紧张等负性情绪,提高患者满意度。

酶联免疫斑点试验对肺结核诊断的临床价值

目的探讨酶联免疫斑点试验(ELISPOT)在肺结核临床诊断中的应用价值。方法回顾性分析2013年12月至2014年12月入住新疆医科大学第一附属医院符合本研究条件的患者172例,根据诊断标准将其分为肺结核组96例(其中确诊组18例,临床诊断组78例),肺炎组76例,两组患者均进行ELISPOT、胸部CT检查,部分患者行TB-DNA、TB-Ab、痰涂片检查,分析和比较ELISPOT的诊断价值。结果 96例肺结核患者中92例ELISPOT阳性,76例肺炎患者中67例ELISPOT阴性,其灵敏度95.83%,特异度88.16%,阳性似然比7.44,阴性似然比0.05,阳性预测值91.09%,阴性预测值94.37%,约登指数0.84,Kappa值0.85。肺结核组与肺炎组患者的ELISPOT比较差异有统计学意义(P<0.05)。ELISPOT检查结果显示,确诊组阳性率为94.44%,临床诊断组阳性率为96.15%,两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。ELISPOT灵敏度均高于TB-DNA、TB-Ab、痰涂片、胸部CT,差异有统计学意义(P<0.05)。ELISPOT特异度与TB-DNA、TB-Ab比较差异无统计学意义(P>0.05),但高于胸部CT,低于痰涂片,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 ELISPOT较高的灵敏度及特异度可以成为临床诊断活动性肺结核的有效工具,较高的阴性预测值对排除活动性肺结核有重要参考价值。

酶联免疫斑点试验对老年骨关节结核临床诊断的应用价值

目的探究酶联免疫斑点试验对老年骨关节结核临床诊断的应用价值。方法 70例老年骨关节结核患者,按照诊断方式的不同分为观察组和对照组,各35例。观察组患者给予酶联免疫斑点试验诊断,对照组患者给予结核抗体检测。比较两组临床诊断价值。结果观察组患者的检测敏感性、阳性预测值、阳性似然比、阴性预测值、特异性分别为94.29%、85.71%、8.57%、91.43%、77.14%;对照组分别为77.14%、62.86%、5.71%、85.71%、54.29%。观察组检测敏感性、阳性预测值、特异性优于对照组(P<0.05)。两组阳性似然比、阴性预测值比较,差异无统计学意义(P>0.05)。观察组患者的结核菌培养、聚合酶链反应、抗酸杆菌涂片阳性率分别为31.43%、51.43%、25.71%;对照组患者的结核菌培养、聚合酶链反应、抗酸杆菌涂片阳性率分别为25.71%、42.86%、20.00%。两组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论酶联免疫斑点试验诊断老年骨关节结核,效果明显优于常规性的结核抗体检测,值得推广应用。

酶联免疫斑点试验联合结核抗原检测在艾滋病合并结核感染中的意义研究

目的研究酶联免疫斑点试验联合结核抗原检测在艾滋病合并结核感染中的意义。方法选取2015年6月至2016年6月该院收治的84例患者为研究对象,以患者是否合并结核感染为依据,分为两组,各42例,对比单一检测法、酶联免疫斑点试验联合结核抗原检测法的诊断效果。结果结核组的联合检测阳性率高于单一检测,差异显著;组间联合检测效果相比,差异显著。结论与单一检测方相比,艾滋病合并结核感染患者经酶联免疫斑点试验联合结核抗原检测,提高了诊断效果,避免了漏诊与误诊,临床上值得推广。