肿瘤相关巨噬细胞的免疫重塑——中药抗肿瘤治疗的新靶点

0引言近年来研究表明,肿瘤间质中的巨噬细胞（tumor-associated macrophages,TAM）具有抗肿瘤和促进肿瘤的双向作用,其密度与多数肿瘤的血管生成、肿瘤的发生、发展及预后等相关[1]。目前,中医药对表型及功能调节、逆转TAM促肿瘤生长作用等方面研究尚缺乏相关资料，

芪连扶正胶囊干预肺癌干细胞白细胞介素-10、转化生长因子-β_1表达对免疫重塑的影响

目的:观察芪连扶正胶囊干预肺癌干细胞免疫相关因子白细胞介素-10(IL-10)、转化生长因子-β_1(TGF-β_1)表达对其免疫重塑的影响。方法:选取体外常规培养肺癌A549细胞,免疫磁珠法分选干细胞,制备芪连扶正胶囊含药血清,按实验分组干预,免疫酶联吸附试验法检测各组IL-10、TGF-β_1的表达,RT-PCR法检测各组IL-10 mRNA、TGF-β_1mRNA的表达。结果:对照组、芪连扶正胶囊组、顺铂组、芪连扶正胶囊+顺铂组的IL-10表达依次为(119.03±6.99)%,(108.91±8.07)%,(96.71±5.78)%,(56.41±7.95)%;TGF-β_1表达依次为(174.79±7.95)%,(160.51±8.03)%,(141.28±6.97)%,(97.34±7.63)%;IL-10mRNA表达依次为(1.06±0.19)%,(0.85±0.18)%,(0.67±0.16)%,(0.47±0.12)%;TGF-β_1mRNA表达(1.27±0.26)%,(1.01±0.20)%,(0.77±0.14)%,(0.50±0.10)%。结论:芪连扶正胶囊可降低肺癌干细胞IL-10、TGF-β_1表达,改善细胞免疫抑制状态,调节免疫重塑,进而抑制肺癌转移。

益气养阴方对Lewis肺癌移植模型小鼠免疫重塑相关因子表达的影响

目的观察益气养阴方对Lewis肺癌移植模型小鼠免疫重塑相关因子表达的影响。方法30只近交系C57BL/6纯系小鼠行Lewis肺癌细胞移植造模后随机分为三组:模型组、中药组及西药组,每组10只。模型组仅造模;中药组造模后予灌胃益气养阴方悬液(含生药2g/mL),1天1次,每次0.4mL;西药组将Nivolumab按照0.273mg/10g溶于0.2mL生理盐水中腹腔注射,每2周1次;各组均常规喂食。造模后第2天开始给药,给药3周。第7天开始观察记录各组小鼠瘤体大小(每3天测1次瘤体大小)。观察期满后各组小鼠断颈处死,留取各组小鼠肿瘤组织,ELISA法测定肿瘤组织匀浆白细胞介素-10(IL-10)、转化生长因子-β(TGF-β)、转录因子p3(Foxp3)含量,流式细胞仪检测小鼠外周血CD4+CD25+Treg细胞比例。结果中药组及西药组肿瘤体积增长均减慢,两组抑瘤率比较(23.07%比37.55%),差异无统计学意义(P>0.05);与模型组比较,中药组及西药组肿瘤组织IL-10含量(1915.79±114.13)pg/mL、(1712.71±157.25)pg/mL比(2257.78±63.00)pg/mL;TGF-β含量(99.59±18.64)pg/mL、(66.83±9.75)pg/mL比(142.33±8.16)pg/mL;Foxp3表达(0.83±0.11)、(0.35±0.09)比(0.98±0.08),均明显下降(P均<0.05);与中药组比较,西药组肿瘤组织IL-10含量(1712.71±157.25)pg/mL比(1915.79±114.13)pg/mL,TGF-β含量(66.83±9.75)pg/mL比(99.59±18.64)pg/mL,Foxp3表达(0.35±0.09)比(0.83±0.11),均明显降低(P均<0.05);与模型组比较,中药组及西药组小鼠外周血CD4+CD25+Treg细胞比例(1.07±0.12)%、(0.50±0.26)%比(1.17±0.38)%,明显降低(P<0.05),西药组小鼠外周血CD4+CD25+Treg细胞比例(0.50±0.26)%较中药组(1.07±0.12)%降低更明显(P<0.05)。结论益气养阴方可抑制Lewis肺癌移植模型小鼠肿瘤生长,其机制可能与降低肿瘤组织Foxp3表达,减少CD4+CD25+Treg细胞分化,降低IL-10、TGF-β表达,改善细胞免疫抑制状态相关。

芪连扶正胶囊编辑肺癌干细胞免疫重塑的研究

目的:观察芪连扶正胶囊对肺癌干细胞免疫相关因子表达的影响,探讨相关机制。方法:体外常规培养肺癌A549细胞,免疫磁珠法分选干细胞,制备芪连扶正胶囊含药血清,按实验分组干预,Elisa检测各组IL-10、TGF-β1的表达情况,Western blot检测Foxp3表达情况,RT-PCR检测TGF-β1mRNA的表达情况。结果:对照组、芪连扶正胶囊组、顺铂组、芪连扶正胶囊+顺铂组的IL-10表达量、TGF-β1表达量、Foxp3表达量及TGF-β1mRNA表达量均依次降低,与对照组相比,各药组均有显著性差异(P<0.05或P<0.01),其中芪连扶正胶囊+顺铂组差异最明显,二者有协同作用。结论:芪连扶正胶囊可降低肺癌干细胞IL-10、TGF-β1、Foxp3表达,改善细胞免疫抑制状态,调节免疫重塑,进而抑制肺癌转移。

生物基因免疫重塑疗法治疗复发性尖锐湿疣的疗效观察

目的分析生物基因免疫重塑疗法治疗复发性尖锐湿疣的疗效。方法收集来我院就诊接受生物基因免疫重塑疗法治疗的复发性尖锐湿疣患者132例作为生物基因免疫重塑疗法组,纳入同时期接受光动力治疗的患者108例作为对照组,比较两组间疗效、复发率差异。结果生物基因免疫重塑疗法组的治愈率和有效率均高于对照组,复发率则低于对照组,P<0.05。结论生物基因疗法治疗复发性尖锐湿疣疗效好,复发率低,同时适用于普通疣体和巨大疣体的治疗。

C·A生物基因免疫重塑疗法治疗120例生殖器疱疹的临床观察

目的观察C·A生物基因免疫重塑疗法治疗生殖器疱疹的疗效。方法 240例复发性生殖器疱疹患者随机分为两组,治疗组(120例)和对照组(120例),对照组口服阿昔洛韦片治疗,治疗组则在服用阿昔洛韦片的基础上加载C·A生物基因免疫重塑疗法治疗。观察患者临床症状及细胞免疫改善情况。结果治疗组成功率高达100.00%高于对照组的79.65%(P<0.05)。治疗后,治疗组IFN-γ、IL-2水平高于对照组,SIL-2R水平低于对照组(P<0.05)。跟踪随访结果显示,治疗组接受治疗后3、6、12个月复发率低于对照组(P<0.05)。结论C·A生物基因免疫重塑疗法通过对机体免疫系统的调节来治疗生殖器疱疹,具有治愈率高、复发率低的优点。

生物基因免疫重塑疗法治疗复发性生殖器疱疹的疗效观察

目的观察生物基因免疫重塑疗法治疗复发性生殖器疱疹的疗效。方法收集2014年3月～2015年6月来我院就诊的复发性生殖器疱疹病例368例,随机分为两组,对照组167例,研究组201例。对照组采用常规治疗,研究组则加载生物基因免疫重塑疗法治疗,比较两组间疗效及复发情况差异。结果经过治疗后研究组治愈率和总有效率高于对照组,皮损愈合时间、疼痛持续时间、瘙痒持续时间短于对照组,复发率低于对照组（P〈0.05）。结论生物基因免疫重塑疗法治疗复发性生殖器疱疹,能有效缩短病程、降低复发率,临床有效率高达100.00%,解决了生殖器疱疹易复发的难题。

扶正散结方调控Lewis肺癌小鼠TAMs免疫重塑作用的相关研究

目的:探讨扶正散结方对Lewis肺癌小鼠肿瘤相关巨噬细胞有关细胞因子的调控作用。方法:建立Lewis肺癌小鼠模型,称瘤重,算抑瘤率;应用免疫组化法检测各组肿瘤组织中CD68+浸润程度;采用ELISA法测定小鼠血清中IFN-γ,TGF-β,IL-4,IL-13,IL-6,IL-10,IL-12,TNF-α的含量。结果:与荷瘤模型组相比,其他各组均较高,分别为DDP组(50.28%)、中药预防组(34.37%)、中西结合组(66.76%),差异具有统计学意义(P<0.05)。CD68+浸润程度差异不具统计学意义。各组荷瘤小鼠血清中IFN-γ,IL-6,IL-12含量均较空白对照组低,而IL-4,IL-13,TGF-β含量均较空白对照组高,且在不同药物干预下,部分相关细胞因子含量具有显著性差异(P<0.05),中药预防组、中西医结合组与荷瘤对照组差异亦具有统计学意义(P<0.05),而TNF-α,IL-10含量,与荷瘤对照组比较,不具统计学意义。结论:扶正散结方可以通过下调肺癌免疫微环境中IL-4,IL-13,TGF-β等,上调IFN-γ等细胞因子,从而逆转TAMs的免疫重塑作用,控制肿瘤生长。

基于免疫重塑探讨活血药、益气活血药对肿瘤转移影响差异

肿瘤转移是肿瘤治疗失败的重要原因,其分子机制与肿瘤细胞对免疫细胞及免疫抑制微环境进行重塑,从而塑造出适宜肿瘤细胞侵袭及生长的土壤。活血化瘀是肿瘤治疗中的重要治则之一,但活血药对肿瘤转移的影响一直在临床应用上存在争议。该文通过系统总结近年来活血药及益气活血药在肿瘤转移中的对比研究,从免疫重塑角度对活血药、益气活血药抗肿瘤转移的分子机制差异进行了论述,为临床合理应用活血药、益气活血药提供了科学依据。

中医药对肿瘤免疫抑制微环境的调控作用及分子机制研究

中医药是我国肿瘤治疗的重要手段之一,其治疗肿瘤的主要优势在于改善机体的内环境,重塑肿瘤相关微环境。该作用特点与近年来现代医学对肿瘤的治疗研究以肿瘤微环境为治疗新靶标的研究策略不谋而合。本文介绍了肿瘤免疫抑制微环境的形成和作用,并从重塑肿瘤微环境免疫抑制细胞和增强肿瘤免疫应答两方面介绍了中医药对肿瘤免疫微环境的调控作用及其分子机制,揭示了中医药调节肿瘤免疫微环境的双向性和多靶点机制,为中医药抗肿瘤和临床实践提供新的理论依据。

肿瘤的免疫监视和免疫编辑

免疫系统和肿瘤的相互作用中,免疫系统发挥了双重作用。机体的免疫监视作用能抑制非病毒源性肿瘤的发展,同时部分肿瘤在发展过程中经历了免疫系统的重塑,其免疫表型发生改变从而利于其进展。因此,把机体的免疫监视理论作用完善为“免疫编辑”。本篇将对肿瘤免疫编辑的三个过程:清除、平衡和逃逸进行概述,藉此为肿瘤的攻克提供有效的免疫治疗策略。

从“免疫编辑”角度探讨恶性肿瘤的五期演变生物学基础

免疫逃逸是肿瘤的十大特征之一,在肿瘤的发生发展中发挥着至关重要的作用。免疫编辑指肿瘤细胞通过免疫清除-免疫平衡-免疫逃逸的模式,对机体免疫系统进行重塑与编辑,将肿瘤微环境中的免疫细胞“改造”成免疫抑制细胞,实现免疫逃逸。五期演变是李杰教授对肿瘤病机发展的总结,认为肿瘤的渐次发展遵循“虚-寒-毒-闭-衰”的核心病机,其中“郁”贯穿始终,癌毒是核心。该文以免疫编辑为切入点,将肿瘤细胞的表型特征与李杰老师的五期演变核心病机相结合,揭示恶性肿瘤五期演变的生物学基础,分析从虚到寒阶段的突出变化是机体免疫监视功能下降,从毒到闭阶段的突出变化是免疫逃逸,而五期演变的最终阶段——衰,是机体免疫衰竭的最终结局,郁是肿瘤免疫编辑的助推剂。以此提出扶正解毒法调控免疫编辑截断肿瘤的五期演变,益气温阳扶正气,恢复机体免疫监视功能;解毒宣闭转毒势,逆转免疫逃逸;以和为法,维持免疫细胞/免疫抑制细胞的动态平衡;解郁之法,截断肿瘤免疫编辑,为中医药的微观辨证施治提供一定的借鉴。在未来的研究中,还需要对益气温阳法、解毒宣闭法、两者联合及解郁法对免疫编辑调控的具体机制进一步地探索,寻找出特异性的中药及作用靶点,为中医药调控肿瘤免疫编辑提供更加充分的证据。

免疫编辑理论与中医药抗肿瘤免疫

机体的免疫功能与肿瘤的产生发展关系密切,免疫编辑理论的提出使肿瘤细胞与免疫系统的相互关系更加全面,免疫系统具有免疫监视、清除功能,从而消灭和杀伤肿瘤细胞,但同时也会对肿瘤细胞产生"筛选"作用,一定程度上可能更加促进了肿瘤细胞向恶性程度的分化和进展,而肿瘤细胞也会对机体的免疫系统产生重塑作用,进而改变机体的免疫环境;中医药具有提高机体免疫监视清除功能,增强机体对肿瘤细胞的杀伤能力,还可以打破机体免疫耐受,逆转肿瘤细胞免疫逃逸,增强机体的抗肿瘤免疫效能。