兔出血症病毒杆状病毒载体灭活疫苗临床免疫效力试验

为了评估兔出血症病毒杆状病毒载体灭活疫苗在临床使用中的保护效力,试验选择3批次中试产品,分别在6家临床试验兔场对不同品种、不同日龄家兔进行免疫效力评价。结果显示,6家临床试验兔场试验期间均没有发生兔出血症;免疫持续期攻毒试验结果显示,疫苗对肉兔、獭兔、毛兔免疫期均可以达到7个月。结果表明,兔出血症病毒杆状病毒载体灭活疫苗(BAC-VP60株)临床效力检验合格,免疫期为7个月。

兔出血症病毒杆状病毒载体灭活疫苗安全性及效力试验

本研究旨在对实验室制备的兔出血症病毒杆状病毒载体灭活疫苗的安全性和效力进行全面系统的研究。实验室制备了5批次兔出血症病毒杆状病毒载体灭活疫苗,按照现行《中国兽药典》附录对疫苗进行了性状、无菌检验、甲醛残留量、安全及效力试验。结果显示,5批次疫苗无菌检验、甲醛残留量均合格;疫苗对肉兔、獭兔、毛兔3个品种家兔均安全,接种疫苗后30、60 d,剖检注射部位未见炎症反应,疫苗吸收良好,并且疫苗对怀孕母兔、未断奶仔兔、断奶幼兔也安全;对肉兔各项生产性能也没有影响,说明该疫苗具有较好的安全性。疫苗免疫21 d后,易感家兔和母兔均能抵抗兔出血症强毒攻击,说明该疫苗免疫原性良好。

兔病毒性出血症杆状病毒载体灭活疫苗

江苏省农业科学院兔病学科团队在兔病疫苗研究方面取得重大突破性进展,其研发的兔病毒性出血症（俗称兔瘟）杆状病毒载体灭活疫苗（BAC-VP60株）获得国家新兽药一类注册证书（[2017]新兽药证字06号）。这是我国第一个兔用基因工程疫苗,也是世界上第一个获得政府许可针对兔瘟的亚单位疫苗。

改进兔病毒性出血症灭活疫苗的研究及其应用

在红血球凝集抑制试验中,通过对受检兔血清的预处理。去除非特异性抑制和凝集物质,可准确地挑选“兔瘟”敏感兔;用终末稀释法通过兔体纯化出“兔瘟”毒力和繁殖力强的病毒株,纯化毒种较原毒种的血凝素效价提高8—22倍。对敏感兔的致死力提高562—5623倍;含毒病料研磨后。经1/2000甲醛36小时灭活后,除可通过无菌检验外,灭活前后可基本维持“HA”滴度不变,而常规用4/1000甲醛灭活后较灭活前HA滴度下降4—8倍;用纯化毒种10^(-4) 2毫升接种敏感兔致死的病料,以1/2000甲醛灭活按1:99稀释制备的。“百倍改良苗”较按1:9稀释的“常规苗”保护力提高5—15倍保存期可达14个月。免疫期可达6—12个月(生产9批360万只份“百倍改良苗”经现场应用。安全性和免疫性俱佳),取得了较高的经济和社会效益。

含兔出血症病毒VP60蛋白病毒样颗粒的兔三联灭活疫苗的研究

为研究兔出血症病毒(RHDV)VP60蛋白形成的病毒样颗粒联合多杀性巴氏杆菌(Pm)、产气荚膜梭菌(Cp)的免疫效果,将3种抗原与铝胶佐剂混合制成三联灭活疫苗,进行安全检验、最小免疫剂量测定及免疫持续期研究。结果表明,3批疫苗以4.0 mL/只免疫兔未见任何不良反应;对兔的最小免疫剂量为1.0 mL/只,免疫后14日,血清RHDV HI效价为1∶16~1∶64,攻毒后免疫兔均健活(5/5);免疫后21 d,用Pm和Cp分别攻毒,免疫兔80%以上(4/5~5/5)保护;免疫持续期可达210 d。RHDV VP60蛋白形成的病毒样颗粒可与Pm、Cp联合制备疫苗,解决了传统RHDV组织灭活苗生产过程存在的生物安全风险问题,同时实现了一针三防。

在昆虫细胞中表达能自聚成病毒样颗粒的兔出血症病毒衣壳蛋白

将兔出血症病毒衣壳蛋白VP60基因插入杆状病毒转移载体pBLUEBAC4,获得重组转移载体pBLUEBAC4-VP60。在脂质体转染试剂介导下,将重组杆状病毒转移载体pBLUEBAC4-VP60与线性化的野生型杆状病毒基因组DNA共转染对数生长期的Sf9昆虫细胞,经过三轮蚀斑纯化后,获得了克隆化的重组杆状病毒pBLUE BAC4-VP60。以重组杆状病毒感染Sf9细胞后,收获细胞培养上清和细胞裂解液上清,SDS-PAGE电泳分析显示,重组病毒pBLUEBAC4-VP60表达一分子量各为60kD左右的特异性重组蛋白,并且该重组蛋白经Westernblot检测,皆可被兔抗RHDV高免血清所识别,表明VP60蛋白基因在重组杆状病毒感染的Sf9昆虫细胞中得到了表达,并且具有与天然VP60相似的抗原性。血凝试验表明,表达的重组蛋白具有血凝特性,可以凝集人"O"型红细胞,血凝价为213。同时,该血凝性可被抗RHDV的高免血清所抑制。经电镜观察,重组病毒表达的衣壳蛋白可以在没有其他任何成分存在的条件下,在昆虫细胞内也能自然聚合成不包裹核酸的、与天然RHDV病毒粒子在物理形态上类似的病毒样颗粒(VLPs)。在与兔抗RHDV高免血清37℃作用1h后,该病毒样颗粒于电镜下观察可出现凝集成团的现象,表明该VLPs与天然RHDV在抗原性上也极为相似。

兔病毒性出血症病理组织悬液灭活工艺的试验报告

兔病毒性出血症俗称兔瘟,是由兔病毒性出血症病毒引起家兔一种急性、烈性、高度致死性传染病。该病发病率、死亡率极高,一旦暴发,会给兔场带来毁灭性的打击。目前兔病毒性出血症仍以疫苗预防为主,而制备该灭活疫苗的兔病毒性出血症病理组织悬液的灭活工艺直接影响着疫苗的质量及企业的生产成本。

兔病毒性出血症研究进展

兔病毒性出血症俗称“兔瘟”,又称兔病毒性出血热、家兔出血性肺炎等。这是兔的一种新的病毒性传染病,该病发病急、传染性强,病死率高达90％以上,不仅严重危害皮、毛、肉用家兔,而且对实验用家兔的危害也很大,据悉,近一、二年来,仅北京地区的实验家兔繁育场就有多起兔瘟疫情发生。本病只在家兔中爆发,被感染兔大多数在二月龄以上,对各种兔都具有几乎相同的易感性。四季皆能流行蔓延,一般以春、秋冬三季发病率高,夏季发病率较低。

全球首个兔用基因工程灭活疫苗在江苏省农业科学院诞生

近日,江苏省农业科学院兔病学科团队在兔病疫苗研究方面取得重大突破性进展,其研发的兔病毒性出血症（俗称兔瘟）杆状病毒载体灭活疫苗（BAC-VP60株）获得国家新兽药一类注册证书（[2017]新兽药证字06号）.这是我国第一个兔用基因工程疫苗,也是世界上第一个获得政府许可针对兔瘟的亚单位疫苗.

既往免疫兔影响猪瘟活疫苗质检效果的实验研究

目的研究既往免疫兔对猪瘟活疫苗(CSFV)质量检定结果的影响。方法选择30日龄、60日龄、90日龄接种兔出血症灭活疫苗(RHDV)的清洁级獭兔、新西兰兔,分别静脉注射1∶1000、1∶1900、1∶2800、1∶3700等不同稀释度的猪瘟活疫苗工作抗原,每个稀释度4只,通过监测兔体温反应判断是否感染猪瘟病毒,比对不同品种兔、不同免疫时间对不同剂量猪瘟病毒敏感性的差异。结果 48只实验獭兔有47只呈现定型热反应(反应率97.9%),新西兰兔只有35只(反应率为72.9%),两者差异非常显著(P<0.01);獭兔不同日龄接种组之间(P=1.000)、猪瘟病毒剂量组之间(P=1.000)差异均不显著;新西兰兔1∶1900和1∶2800剂量合并组定型热反应较1∶1000和1∶3700剂量合并组,差异显著(P<0.05)。结论獭兔比新西兰兔用来检定猪瘟活疫苗结果较好;既往免疫獭兔各日龄组、剂量组对猪瘟活疫苗质量检定结果无实际影响;新西兰兔1∶1900和1∶2800剂量合并组定型热反应相对较高。

兔瘟基因工程疫苗获批一类新兽药

日前,江苏省农业科学院兽医研究所、国家兽用生物制品工程技术研究中心等单位研制的兔出血症病毒杆状病毒载体灭活疫苗（BAC-VP60株）被农业部批准为一类新兽药.

兔用基因工程灭活疫苗在苏成功

最近,江苏省农业科学院兔病学科团队在兔病疫苗研究方面取得突破性进展,其研发的兔病毒性出血症（俗称兔瘟）杆状病毒载体灭活疫苗（BAC-VP60株）获得国家新兽药一类注册证书。

中华人民共和国农业农村部公告(第828号)

根据《兽药管理条例》《兽药注册办法》和《兽药注册评审工作程序》(农业农村部公告第392号)规定,华派生物技术(集团)股份有限公司等3家单位研制的兔病毒性出血症杆状病毒载体二价灭活疫苗(HP1-VP60株+HP2-VP60株)等2种兽药产品,已通过农业农村部组织的应急评价,现发布产品工艺规程、质量标准、说明书和标签,自发布之日起执行。批准硕腾公司转国内生产的猪圆环病毒1-2型嵌合体、支原体肺炎二联灭活疫苗兽药产品的工艺规程、质量标准、说明书和标签,自发布之日起执行。

中华人民共和国农业农村部公告(第828号)

根据《兽药管理条例》《兽药注册办法》和《兽药注册评审工作程序》(农业农村部公告第392号)规定,华派生物技术(集团)股份有限公司等3家单位研制的兔病毒性出血症杆状病毒载体二价灭活疫苗(HP1-VP60株+HP2-VP60株)等2种兽药产品,已通过农业农村部组织的应急评价,现发布产品工艺规程、质量标准、说明书和标签,自发布之日起执行。批准硕腾公司转国内生产的猪圆环病毒1-2型嵌合体、支原体肺炎二联灭活疫苗兽药产品的工艺规程、质量标准、说明书和标签,自发布之日起执行。特此公告。