输尿管损伤后狭窄新西兰兔动物模型的构建

目的构建输尿管损伤动物模型,筛选输尿管损伤后纤维化进程中敏感的组织标志物,为进一步研究输尿管损伤后狭窄继发上尿路梗阻提供条件。方法采用双极电凝法构建输尿管损伤成年雄性新西兰兔动物模型。损伤后2周获取患侧输尿管组织及对侧正常输尿管组织,观察狭窄段的大体形态,并行苏木精-伊红(H-E)染色观察狭窄段纤维化程度。应用实时定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术,检测内皮生长因子(EGF)、转化生长因子(TGF)-β、角化生长因子(KGF)、Ⅰ型胶原(ColⅠ)a1、ColⅠa2、Ⅲ型胶原(ColⅢ)和纤维连接蛋白(FN)在受累输尿管中的表达水平,并与对侧正常输尿管组织对比,寻找较敏感的纤维化指标。结果动物模型构建成功。动物模型构建过程中,狭窄侧输尿管组织中EGF、TGF-β、FN、ColⅠa1及ColⅠa2水平均显著高于正常侧输尿管组织(P值分别<0.05、0.01)。结论双极电凝法构建输尿管损伤后狭窄新西兰兔动物模型可行。众多细胞因子中,EGF、TGF-β、ColⅠa1、ColⅠa2及FN在输尿管瘢痕形成中起重要作用,可能作为未来干预输尿管损伤后纤维化的药物靶点。

不同抗凝药对血液灌流脓毒症兔动物模型的比较研究

目的比较3种不同抗凝药对血液灌流脓毒症兔动物模型的作用。方法采用盲肠结扎穿孔法建立脓毒症兔动物模型,分为应用抗凝剂进行血液灌流的肝素组、枸橼酸组、水蛭素组和不应用抗凝剂血液灌流的手术组以及健康兔的假手术组,对各组造模前及灌流的0、10、30、601、20 min各时间点进行检测凝血酶原时间(PT)、部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、纤维蛋白原(FIB)。结果枸橼酸组和水蛭素组均无皮肤黏膜出血以及手术创口渗血,滤器无凝血;肝素组有1只手术创口渗血和1只眼睑黏膜出血,滤器无凝血;各药物组之间的动物生存时间无统计学差异。手术组的PT、APTT、TT和FIB明显低于假手术组(P<0.001),灌流过程中灌流器均堵塞导致蠕动泵无法转动,灌流时间为(44.45±13.27)min。灌流开始后随着灌流时间的延长,各灌流组检测指标值均逐渐下降,至灌流结束后(120 min),肝素组的各检测指标值下降最快,水蛭组的各检测指标值下降最平缓。结论在血液灌流中应用各抗凝药均能在一定程度上改善凝血障碍,枸橼酸作用平稳且无出血事件,安全有效。

双能CT肺栓塞检出的兔动物模型双源CT扫描的实验研究

目的评价双能量CT诊断肺栓塞（PE）的可行性及其附加价值。材料与方法本研究已获得动物实验委员会批准，并根据动物保护指南的规定进行操作。对8只新西兰兔进行了常规CT平扫和双源CT增强扫描。将明胶海绵颗粒注射入兔肺动脉，再进行对比剂增强双源CT肺血管成像．获得血流（BF）图和融合图像。在双源CT检查后即刻处死兔子，取出肺组织用10％福尔马林固定，进行详细的病理检查．记录PE的发生部位和受累肺叶数量。

兔耳增生性瘢痕动物模型的建立与应用

目的:观察外科感染常见致病细菌对兔耳腹侧创面愈合后增生组织块形成的影响。方法:在兔耳腹侧制作72个直径为1 cm的圆形全层皮肤缺损创面,待其愈合后形成增生性瘢痕组织块作为兔耳增生性瘢痕动物模型,进行形态学和组织学观察。另选同等大小兔耳腹侧240个创面,将其随机分成对照组和实验组,实验组又分为金黄色葡萄球菌污染组、大肠杆菌污染组、绿脓杆菌污染组,观察各组创面愈合情况与增生块发生等情况。结果:人为造成兔耳腹侧创面后可出现类似人增生性瘢痕的增生组织块,出现率为66.7%;4组平均愈合时间分别为(13.367±1.025)d、(19.283±1.091)d、(13.967±0.948)d、(16.233±0.981)d,实验组与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01);4组增生块出现率分别为64%、90%、75%及80%。金黄色葡萄球菌污染组增生块出现率与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);各组创面愈合时间与增生块出现率呈正相关(r=0.169,P<0.01)。结论:增生性瘢痕兔耳动物模型制作简单,模型稳定,重复性强,可作为人增生性瘢痕形成机制与防治研究的动物模型;外科感染常见致病细菌可延长兔耳创面愈合时间,增加兔耳创面愈合后增生块的出现率是促进增生性瘢痕形成的重要因素。

康妇炎胶囊对兔盆腔炎性疾病后遗症模型治疗的初步研究

目的利用盆腔炎性疾病(PID)后遗症模型初步探讨中药康妇炎胶囊对盆腔炎后遗症治疗的效果。方法采用逆行宫腔插管灌注细菌法建立兔PID后遗症模型19只,分为4组给药,空白对照组5只(对照组)、罗氏芬干预组5只(西药组)、罗氏芬+康妇炎胶囊干预组5只(混合组)、康妇炎胶囊干预组4只(中药组),观察模型血象、体重、静脉血急性期炎症因TNF-a、慢性期炎症因子TGF-β1、腹腔镜定期监测盆腔变化及子宫输卵管病理切片。结果中药组在急性期可观察到抑菌杀菌作用,但在急性期后期疗效不佳,难以抑制炎症进展;西药组在急性期有明显效果,后遗症期效果不显著,未改变PID结局;混合组在控制急性期和后遗症期PID均有较明显效果,可改善PID结局。结论中药康妇炎胶囊对PID急性期可抑菌杀菌;当与抗生素联合应用,在控制PID急性期和后遗症期均有较明显的效果。

高黏滞血症模型兔血管内皮细胞分泌功能变化及活血化瘀中药干预作用研究

目的 :观察活血化瘀中药对高黏滞血症血管内皮分泌功能的影响 ,探索中药治疗该病的作用机制。方法 :采用复合因素 (高分子右旋糖酐、肾上腺素、牛血清白蛋白 )、长时间 (112 d)造高黏滞血症兔模型 ,随机分为益气活血、滋阴活血和活血化瘀 3个治疗组 ,观察高黏滞血症血管内皮细胞分泌功能及 3类活血组方的干预作用。结果 :(1)模型组、空白对照组高黏滞血症模型兔血浆血栓素 B2 (TXB2 )和内皮素浓度显著升高 ,而 6 -酮 -前列腺素 F1α浓度显著降低。(2 )活血化瘀类中药能显著降低高黏滞血症模型血浆 TXB2 水平。 (3)益气活血、滋阴活血及活血化瘀组方对高黏滞血症模型兔血浆 6 - keto- PGF1α水平有不同程度的升高趋势。(4 )益气活血及单纯活血化瘀类中药能显著降低高黏滞血症模型兔血浆内皮素水平。结论 :血管内皮细胞可能是活血化瘀中药治疗作用靶点之一。

一种简易兔心肌梗死模型的建立

目的：探讨一种建立兔急性心肌梗死（MI）模型的简易方法。方法：健康成年雌兔20只,在无气管插管和呼吸机的情况下,正中纵行剪开下段胸骨,同时保持肋骨和胸膜腔完整,在左心耳缘下5~10mm内缝扎左室支（LVB）,建立MI模型,结扎LVB30min后查心电图（ECG）。4周后,行ECG、心脏彩超检查。符合MI心脏彩超和ECG造模成功标准的兔,视为造模成功;并制作心肌病理切片,行HE染色、Masson三色染色,观察病理变化。结果：结扎LVB后,兔ECG出现心肌缺血改变;术后4周动物存活率85%,造模成功率70%,左室舒张末内径（LVEDD）、左室收缩末内径（LVESD）、左室缩短分数（LVFS）与术前差异均有统计学意义（P〈0.05）,病理切片显示心肌梗死。结论：采用纵剪胸骨下段、结扎LVB的方法制作兔MI模型,该方法具有操作简便、模型可靠、成功率高、重复性好、术后能长期存活的优点。

高脂饲料喂养加静脉注射小牛血清白蛋白建立兔动脉粥样硬化模型

背景:目前单纯饲喂高脂饲料建立动脉粥样硬化狭窄模型较常见。目的:采用高脂饲料喂养加静脉注射小牛血清白蛋白建立兔动脉粥样硬化模型。方法:分别单纯高脂饮食、高脂饲料+脂肪乳灌胃以及高脂饲料+小牛血清白蛋白3种不同的方法喂养兔构建动脉硬化模型,设立正常对照组,予普通饲料喂养。结果与结论:各组兔血清胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白和高密度脂蛋白水平较正常对照组显著升高(P<0.01)。单纯高脂组可出现高脂血症,未发现典型的动脉粥样硬化病变;高脂+脂肪乳灌胃组可形成纤维斑块;高脂+小牛血清白蛋白组可形成较成熟的动脉粥样硬化斑块。结果证实,高脂饲料加静脉注射小牛血清白蛋白可形成较成熟的动脉粥样硬化斑块,可成功建立动脉粥样硬化兔模型。

3种急性肺损伤兔模型的比较

目的:比较3种常用的急性肺损伤(ALI)动物模型造模效果。方法:24只健康成年日本大白兔随机分为3组,每组8只,气管插管后,行机械通气。盐酸造模组(HCL组):经气管导管给予0.1mol/L的盐酸3ml/kg;脂多糖造模组(LPS组):通过中心静脉30min内缓慢滴注LPS1mg/kg;肠系膜上动脉缺血再灌注复合腹腔内放置粪便组(SMA组):钳闭肠系膜上动脉30min,期间腹腔内放置肠内容物(1ml/kg)与血(1ml/kg)的混合物。连续描记平均动脉压(MAP)和心率(HR)的变化;检测基础(T0)及造模后1,2,4,6,8h(T1,T2,T4,T6和T8)的动脉血气和血清内IL-1β的浓度;实验结束测定血清内肺表面活性物质相关蛋白A(SP-A)的浓度。结果:PaO2在T1,T2时点,HCL组较LPS组和SMA组明显降低(P<0.01);在T4时点3组无统计学差异;在T6,T8时点HCL组和SMA组较LPS组明显降低(P<0.01)。MAP和HR在HCL组和LPS组内各时点无统计学差异;SMA组内与T0时点相比较,T4～T8时点的MAP较低(P<0.01)、HR较快(P<0.01)。IL-1β浓度在HCL组各时点无统计学差异,而LPS组和SMA组则随着时间的发展,IL-1β的浓度逐渐变化;血清内SP-A的浓度,SMA组明显高于另外两组(P<0.01)。结论:与盐酸支气管滴注造模和脂多糖中心静脉滴注造模相比,肠系膜上动脉缺血再灌注复合腹膜内放置粪便法,既可持续保持PaO2水平较低,也可保证血清内炎性因子浓度较高,更可能会发展为急性呼吸窘迫综合征(ARDS)。

兔自体原位肺移植模型的建立

目的 :为深入研究供肺保护中缺血 再灌注的损伤机制 ,建立模拟的兔肺自体原位移植模型。 方法 :选用新西兰大白兔 35只 ,阻断左肺门 2h后 ,依次开放左肺静脉和动脉 ,阻断右侧肺门 ,监测实验过程中动脉血氧分压 (PaO2 )、动脉血二氧化碳分压 (PaCO2 )、动脉血氧饱和度 (SaO2 )、平均动脉压 (MAP)、中心静脉压 (CVP)的变化。 结果 :实验过程循环稳定 ,再灌注前、后的PaO2 差异有显著性意义 (P <0 .0 5 )。 结论 :该模型用于研究供肺的缺血 再灌注损伤简便易行、经济实用 ,是一种理想的小动物肺移植模型。

小口径人工血管置换手术的兔实验模型构建

目的构建出能够更好的模拟冠心病搭桥术后桥血管血流动力学改变的动物实验模型。方法 16只新西兰大白兔随机分为两组。利用4 mm内径,长度为3 cm的膨体聚四氟乙烯血管置换兔的腹主动脉,切口位置分别选择在腹主中下1/3切口和下腹部切口,对比两组动物的基本情况、手术的时间、需要结扎的侧支血管数量、术中大出血的几率、术后血管吻合后的波动情况及血管通畅几率,并完善手术的注意事项和术后的动物处理方法等。结果两组动物在体质量,腹主动脉直径无明显差异(P>0.05)。在手术时间方面,选择切口在中下1/3组有一增长的趋势,但无统计学差异(P>0.05)。切口选择在腹部中下1/3组在需要结扎的分支血管数量少于下腹部切口组,术后血管两端吻合口波动良好的比率大于下腹部切口组。两组在出血的几率,术后7 d的栓塞几率方面无明显差异(P>0.05)。结论利用兔制备小口径血管的置换模型可行,可根据动物表现和彩超检查及时发现小口径血管通畅与否。

重组合异种骨对兔股骨头缺血坏死模型实验修复过程的影响

目的 本文旨在探讨含骨形态发生蛋白(BMP)的重组合异种骨是否对液氮冷冻兔股骨头缺血坏死模型有促进修复作用。方法 本实验采用新西兰大白兔24只,雌雄各半,体重2kg。用液氮冷冻法造成左侧股骨头坏死,并且在同侧股骨颈后方头颈交界处钻直径2mm孔至软骨下,随机分成实验组和对照组各12只,实验组术中植入重组合异种骨(RBX)30mg/只(含BMP1.5mg),对照组术中植入同体积的牛松质骨,于术后2、4、8周分别处死实验组和对照组各4只动物,观察有关指标。结果(1)X线检查结合计算机相对骨密度分析:2周时两组股骨头骨密度均未见增高,4、8周时均增高,但手术侧实验组股骨头相对骨密度显著高于对照组(P<0.05)。(2)单光子骨密度(BMD)测定:4周以后手术侧实验组股骨头骨密度显著高于对照组(P<0.05)。(3)组织学观察:4周时实验组手术侧股骨头内纤维组织增生,有大量的软骨形成和成骨细胞增生明显,新骨形成多于对照组,8周时实验组手术侧股骨头内坏死骨组织修复大部分已完成,表面软骨再生。而对照组坏死骨修复仍在大部分区域内进行,植骨仍有部分未被吸收。结论 重组合异种骨对液氮冷冻兔股骨头坏死实验修复过程有明显的促进作用。

超声造影剂联合高强度聚焦超声损伤兔肝VX2移植瘤的可行性研究

目的研究超声造影剂作为一种增效剂,增强高强度聚焦超声的生物学效应,损伤兔肝VX2移植瘤的可行性。方法30只荷瘤兔随机分为二组,单纯高强度聚焦超声辐照组和联合辐照组,超声造影剂剂量为0.05ml/kg。结果联合辐照组的辐照时间明显缩短(P<0.05),损伤肿瘤体积大大增加(P<0.01),损伤效率高于单纯高强度聚焦超声辐照组(P<0.01)。结论超声造影剂可以提高高强度聚焦超声损伤效率,靶区组织的声学特性、组织结构或者功能状态可以影响高强度聚焦超声治疗剂量。

仙人掌提取物对兔耳增生性瘢痕组织块中胶原Ⅰ、Ⅲ及基质金属蛋白酶-1表达的影响

目的:探讨仙人掌提取物对兔耳腹侧创面增生性瘢痕组织块中胶原Ⅰ、Ⅲ及基质金属蛋白酶-1表达的影响。方法:选取新西兰大耳白兔20只,随机分为仙人掌组和空白对照组,每组各10只。在每只兔耳腹侧中线两侧分别做近、中、远各3个直径约1.0cm、间隔约为1.0cm的全层皮肤缺损创面(深达软骨膜表面);每只兔左右耳各6个创面,每组120个创面,共240个创面。分别在仙人掌组创面上喷洒仙人掌提取物,空白对照组创面喷洒0.9%生理盐水。测定并比较术后不同时间点各组增生性瘢痕组织块胶原Ⅰ、胶原Ⅲ、基质金属蛋白酶-1(MMP-1)含量表达。结果:各组兔耳腹侧创面愈合后均不同程度出现类似人增生性瘢痕的增生性瘢痕组织块。仙人掌组术后22、54d时增生性瘢痕组织块中胶原Ⅰ含量表达低于空白对照组(P<0.01或0.05);仙人掌组术后22、39d时增生性瘢痕组织块中胶原Ⅲ含量低于空白对照组(P<0.01或0.05),术后54d时则高于空白对照组(P<0.01)。仙人掌组术后22d时MMP-1表达高于空白对照组(P<0.01),术后54d时则低于空白对照组(P<0.01)。结论:仙人掌提取物具有降低兔耳腹侧增生性瘢痕组织块中胶原Ⅰ表达,促进胶原Ⅲ表达,使MMP-1表达升高,从而减轻瘢痕增生,促使已形成的增生性瘢痕组织块软化、吸收的作用。

部分医源性异物对兔耳腹侧创面增生组织块形成的影响

目的:观察研究部分医源性异物对兔耳腹侧创面愈合后增生组织块形成的影响,为临床防止瘢痕形成的医源性因素提供理论参考。方法:选用成年新西兰大耳白兔32只于其双耳腹侧制作创面,将其随机分成缝线组、滑石粉组、锯末组、对照组,分别用医用缝线、滑石粉、锯末沾染创面,对照组不予任何干预。观察各组创面的愈合过程;于各组创面愈合后不同时间点切取标本镜检,测定不同时间点创面愈合后增生瘢痕组织块内组织成纤维细胞数、转化生长因子(TGF-β1)阳性表达。结果:放置常见医源性异物滑石粉、缝线于兔耳腹侧创面后,创面愈合后增生性组织块的发生率较对照组明显增高,组织学表现为增生块在术后30天时有大量成纤维细胞增殖、四组增生块组织成纤维细胞数、TGF-β1表达在术后30天较显著,随着时间推移增生性组织块在术后60天后逐渐减少;检测增生块中TGF-β1表达与兔耳增生性瘢痕成纤维细胞增殖具有正性调控作用。结论:常见医源性异物滑石粉和缝线沾染兔耳创面可促进组织TGF-β1表达增强、促使组织成纤维细胞增多,进而促使增生瘢痕组织块形成过多。外伤中常见的异物锯末沾染兔耳腹侧创面后也可形成类似医源性异物的兔耳增生性瘢痕组织块。提示在临床手术中尽可能少的遗留缝线线头于创口内,尽可能祛除手套表面黏附的滑石粉,外伤清创时尽量祛除创面内异物有助于预防增生性瘢痕的形成。

静脉注射伊曲康唑防治兔侵袭性曲霉病的初步研究

目的 :评价静脉滴注伊曲康唑防治兔侵袭性曲霉病的价值。方法 :建立免疫抑制兔侵袭性曲霉病 (IA)模型 ,动物接种烟曲霉孢子后 (治疗实验 )或前 (预防实验 )静脉滴注伊曲康唑 (15mg·kg-1·d-1)进行治疗或预防 ,以两性霉素B(1mg·kg-1·d-1)和氟康唑 (2 0mg·kg-1·d-1)为对照 ,用酶联免疫吸附试验 (ELISA)法检测连续采集的兔血清标本中的半乳甘露聚糖(GM) ,结合累积病死率、动物组织真菌负荷量对治疗和预防效果进行评价。结果 :与未治疗对照组相比 ,静脉滴注伊曲康唑组和两性霉素B组均能降低血清GM含量和组织真菌负荷量 ,两组间差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ,但氟康唑组无显著降低血清GM含量和动物组织真菌负荷量。预防性静脉滴注伊曲康唑组其血清GM含量和组织真菌负荷量比对照组明显降低。结论 :静脉滴注伊曲康唑有显著防治兔IA的作用。

睾酮对兔骨折愈合的实验研究

目的研究雄性激素对骨折愈合的影响。方法制作雄性兔股骨骨折模型54只,内固定后随机分为3组,A组手术切除性腺,B组肌注丙酸睾丸酮,每周2次;C组作空白对照。于15、30、45d分别随机取样6只进行雄性激素、血钙、血磷、X线摄片及骨折标本的光镜观察,对其进行统计分析。结果A与C组比较在X线片的检查中15、30、45d时骨痂明显少于C组(P<0.05);检验:雄性激素两组有显著性差异;血钙、血磷无显著性差异;光镜观察:A较C组更晚地出现骨折愈合的组织学改变,A组有骨质疏松征象。B与C组比较,均无显著性差异(P<0.05)。结论雄性激素对骨折愈合有重要作用,缺乏会阻碍骨折愈合,有骨质疏松倾向。丙酸睾丸酮对雄性激素正常兔骨折愈合无明显促进作用。

区域性角膜内皮损伤动物模型的建立

目的建立重复性好的区域性角膜内皮细胞（CECs）损伤兔眼动物模型。方法依据电脑绘制的CECs损伤区域模拟图，对应兔眼角膜上皮面标记，于透明角膜缘做穿刺口，导入自制刮除器刮除局部CECs，刮除的同时以含低分子肝素的乳酸林格氏液持续灌注前房，以保持前房稳定、清洗刮除的CECs及避免纤维素性渗出所引发的虹膜粘连。结果共7只兔眼，所设计的十字交叉区域性CECs损伤动物模型都顺利完成制作。从制作透明角膜缘穿刺口开始至制模结束，耗时平均（11．82±1．07）min。台盼蓝染色证实CECs刮除范围与制模前角膜上皮面标记平均吻合指数为（94．71±2．17）％。所有模型眼刮除区域的后弹力层组织均保持完好，无因纤维素性渗出而导致模型制作终止或晶状体虹膜损伤的现象发生。结论本研究提出了一种建立区域性CECs损伤动物模型的有效、可控、便捷的方法，且具有较好的可重复性。

载银硅灰石涂层抗菌性能实验研究

目的通过动物实验验证载银硅灰石涂层体内抗菌性能。方法将22只新西兰大白兔随机分为两组,随机取一侧股骨髁,试验组植入载银硅灰石钛板,对照组植入普通硅灰石钛板。术后第12天于术侧膝关节腔内注射金黄色葡萄球菌（ATCC25923）菌液10-8CFU。两组实验钛板的抗菌性能经实验兔肛温、体重变化,X线摄片结果,钛板、螺钉、骨组织、周围软组织以及组织液细菌培养结果,局部骨组织病理切片观察结果进行表征。两组实验钛板的表面特性经扫描电镜观察进行分析。结果两组实验兔在第12天注射金黄色葡萄球菌后体温均上升,试验组金黄色葡萄球菌阳性率显著低于对照组,细菌培养阳性的钛板表面可见明显细菌生物膜附着,部分病理切片样本革兰染色阳性,与其细菌培养结果相符。结论载银硅灰石涂层与普通硅灰石涂层相比,具有显著的体内抗菌性能。