射频消融联合亚砷酸局部治疗对兔肝VX2肿瘤MVD和VEGF表达的影响

目的探讨射频消融(RFA)联合亚砷酸(AA)局部治疗对兔肝VX2肿瘤微血管密度(microvesseldensity,MVD)和血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)表达的影响。方法建立新西兰兔肝VX2肿瘤模型28只,按随机数字表法随机均分为4组,分别给予AA(AA组)、RFA(RFA组)、RFA+AA(RFA+AA组)和生理盐水(对照组)治疗,于治疗后第14d处死所有实验动物,通过免疫组织化学方法检测肿瘤组织MVD及VEGF的表达,并分析MVD与VEGF表达的相关性。结果对照组、AA组、RFA组及RFA+AA组肿瘤组织MVD依次降低,分别为(38.50±0.44)、(23.07±0.47)、(18.65±0.39)和(11.36±0.36)个/HP,4组间两两比较均P<0.05;肿瘤组织VEGF表达阳性例数比也依次降低,分别为7/7、5/7、4/7和2/7,4组间两两比较均P<0.05。VEGF表达强度与MVD成正相关关系(r=0.47,P<0.01)。结论RFA+AA联合治疗能减少肿瘤组织的MVD,抑制VEGF的表达。

超声造影定量评估兔肝VX2肿瘤新生血管与CD34、血管内皮生长因子的相关性研究

目的 分析兔肝VX2肿瘤超声造影(CEUS)定量参数与CD34和血管内皮生长因子(VEGF)的相关性,深入探讨肿瘤血管生成基础与超声造影定量参数的关系。方法 应用超声引导下经皮穿刺种植法成功复制24只兔肝VX2肿瘤模型,并通过CEUS动态观察肝肿瘤的进展过程,测定肝肿瘤超声定量参数,制作肝肿瘤标本并进行免疫组织化学染色,判定CD34和VEGF的阳性表达水平,Pearson法分析超声造影定量参数与CD34、VEGF的相关性。结果 兔肝VX2肿瘤CEUS对比剂强度、肿瘤组织与周围正常肝组织曲线增强上升斜率(AS)、达峰时间(TTP)、曲线下面积(AUC)与周围正常肝组织比较,差异有统计学意义(P <0.05),对比剂强度、AS及AUC均明显大于周围正常肝组织,VX2肿瘤TTP明显短于周围正常肝组织;TTP与CD34、VEGF呈负相关(P <0.05);对比剂强度与CD34、VEGF呈正相关(P <0.05);AS与CD34、VEGF呈正相关(P <0.05);AUC与CD34、VEGF呈正相关(P <0.05)。结论 CEUS测定的各种灌注参数,能够客观地反映肝肿瘤新生血管的生成情况及瘤内灌注特征,为影像学评估肝肿瘤血管生成、预后及复发的相关研究提供参考。

开腹及超声引导下深植入法和浅植入法建立兔肝VX2肿瘤模型的比较

目的比较开腹和超声引导下深植入法和浅植入法建立兔肝VX2肿瘤模型的成功率和异位种植率。方法选取80只新西兰白兔,按植入组织块或其悬液及穿刺深、浅分为4组,超声引导下将VX2肿瘤组织块或其悬液穿刺接种于兔左肝内(浅≤20mm,深>20mm),接种后第1、2、3周行超声检查。第3周检查后处死实验兔,行原位、异位肿瘤肉眼及病理检查。结果开腹及超声引导下运用深植入法及浅植入法造模,成模率均为100%。开腹组及超声组织块组肿瘤体积明显大于组织块悬液组。组织块深植入法,开腹组及超声组无异位种植。组织块浅植入法,超声组1例腹腔种植,开腹组未见腹腔种植。组织块悬液深植入法,开腹组无腹腔种植,超声组2例腹腔种植。组织块悬液浅植入法,开腹组2例腹腔种植;超声组5例腹腔种植,其中1例同时腹腔和腹壁种植。结论超声引导下穿刺组织块及组织块悬液接种制作兔肝VX2瘤模型方法简单,创伤小,成功率高。组织块穿刺植入法优于组织块悬液穿刺植入法,深植入法优于浅植入法。

基于遗传算法-支持向量机的兔肝VX2肿瘤光谱鉴别

兔肝VX2肿瘤是一种快速生长的肿瘤模型,可以在多种器官如肝、肺、直肠等快速生长,常用于肿瘤研究。采用可见-近红外高光谱技术对四只兔子的兔肝VX2肿瘤和正常组织进行活体和离体的反射光谱检测,然后采用支持向量机分别实现了二分类(正常肝组织和肝VX2肿瘤组织)和四分类(未出血活体正常肝组织、未出血活体VX2肿瘤组织、出血离体正常肝组织和出血离体肝VX2肿瘤组织)。根据其光谱反射曲线的特征,选择了400~1800 nm区间的数据为特征变量。为进一步提高分类准确率,分别采用5折交叉验证和遗传算法对支持向量机的核函数参数g和惩罚因子c进行了优化。其中5折交叉验证优化参数和分类结果为:二分类优化的惩罚参数c为4,核函数参数g为0.1250,其校正集和预测集的准确率都达到了100%;四分类中优化出的参数c为8,g为0.1211,其校正集和预测集的准确率分别达到了99.2424%和93.333%。遗传算法优化参数和结果为:二分类中优化的参数c为0.8456,g为0.0625,其校正集和预测集的准确率同样都达到了100%;四分类中优化的参数c为5.5307,g为0.0685,其校正集和预测集的准确率分别达到了99.2424%和100%。结果显示两种优化方法都取得了很好的效果,遗传算法优化参数对四分类的分类更为精确。为进一步提升算法速度,采用间隔选取变量的方法来不断减少特征变量,最终每隔100 nm谱段选择一个变量,共选择14个谱段作为特征变量。采用遗传算法优化支持向量机参数并对其分类进行了研究,结果表明:二分类和四分类的校正集和预测集结果准确率均为99.2424%,而且运行时间分别为11.4和20.0 s,与选择全波段的运行时间:340.3和491.0 s相比,说明多光谱技术可以进行肝VX2肿瘤组织和正常肝组织的鉴别,且分类准确率可达99%以上,而且运行时间缩短了很多。为未来多光谱技术在未来临床肿瘤诊断中实现肿瘤组织的快速实时在线检测和分类奠定了基础,显示出巨大的应用潜力。

兔肝VX_2肿瘤移植模型的复制及其意义

目的 探讨建立兔肝VX2 肿瘤模型 ,为该模型的应用提供实验依据。方法 采用VX2 细胞株复制兔肝肿瘤模型 ,并改进其制作方法 ,观察其肿瘤的生长过程 ,并检测肝功能谷丙转氨酶 (ALT)、谷草转氨酶 (AST)及总胆红素 (TB)在模型制作前、后不同时相的变化 ,同时观察脏器转移、组织病理学改变、影像学表现及实验动物的自然生存时间。结果 接种后 3周均可见到肿瘤生长 ,肿瘤直径为 1.5～ 2 .0cm左右 ,肿瘤接种成功率为 10 0 % ;彩超检查显示肝脏有结节样增强回声 ,CT示肿瘤为低密度病灶 ,增强扫描见病灶不均匀强化。移植肿瘤外观呈灰白色 ,扪之质地较硬 ,无明显的包膜 ,剖开肿瘤中心可见灶性坏死 ;光镜下见肿瘤细胞核浆比例大 ,细胞排列紊乱 ,呈浸润性生长 ;动物接种后的自然生存时间为 4 0～ 5 3d ,死亡原因主要为肿瘤生长及转移引起的多脏器功能衰竭。结论 兔肝VX2 肿瘤从病理表现、病理过程及转移均与人肝癌相似 ,该模型具有容易复制、生长周期短、成功率高及模型稳定等特点 ,是一种较理想的肝肿瘤实验动物模型。

经导管肝动脉As_2O_3治疗兔VX2移植性肝肿瘤

目的探讨As2O3经TACE途径给药治疗兔VX2移植性肝肿瘤的价值。方法将具有VX2移植肝脏肿瘤的日本大耳白兔24只随机平均分成3组,每组8只。经TACE途径分别给予UFLP1ml+As2O32mg(实验组Ⅰ)、UFLP1ml+As2O32mg+ADM1mg(实验组Ⅱ)及UFLP1ml(对照组),比较观察3组荷瘤兔在TACE术前与术后3周肿瘤体积变化及瘤组织生长情况,对肿瘤、瘤周和正常组织进行TUNEL检测,观察细胞凋亡状况。结果治疗后两实验组肿瘤体积缩小,此二组与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05),二实验组之间比较差异无统计学意义(P>0.05);对照组肿瘤体积无明显变化。两实验组肿瘤细胞坏死率和凋亡率明显高于对照组。结论As2O3经TACE途径给药能够有效抑制兔VX2移植性肝肿瘤生长,这种作用可能是通过增加肿瘤细胞坏死和凋亡来实现的。

经肝动脉应用胞必佳治疗兔VX2肝肿瘤的实验研究

目的观察胞必佳联合碘化油乳剂经肝动脉灌注对兔VX2肝肿瘤的治疗作用。方法建立24只兔VX2肝肿瘤模型,随机分为实验组、常规组和对照组,经胃十二指肠动脉至肝动脉分别灌注胞必佳(10μg/Kg)+适量超液碘化油、丝裂霉素(0.2mg/Kg)+适量超液碘化油以及生理盐水。结果术后实验组兔在生存率上优于常规组,且实验组血清肝功能指标及病理检查显示肝功能损害轻。结论经肝动脉灌注胞必佳联合碘化油乳剂对兔VX2肝肿瘤具有较好的治疗作用。

经肝动脉应用链球菌制剂沙培林治疗兔VX2肝肿瘤的实验研究

目的观察沙培林联合碘化油乳剂经肝动脉灌注对兔VX2肝肿瘤的治疗作用。方法建立27只兔VX2肝肿瘤模型,随机分为对照组、常规组和实验组,经胃十二指肠动脉至肝动脉分别灌注生理盐水、MMC(0.2mg/Kg)+适量超液化碘油以及沙培林(0.25mg/Kg)+适量超液化碘油。结果 术后实验组兔在生存率上优于常规组,且实验组血清肝功能指标及病理检查显示肝功能损害轻。结论经肝动脉灌注沙培林联合碘化油乳剂对兔VX2肝肿瘤具有较好的治疗作用。

经肝动脉应用重组人白细胞介素-2联合碘化油乳剂治疗兔VX2肝肿瘤的实验研究

目的观察重组人白细胞介素-2联合碘化油乳剂经肝动脉灌注对兔VX2肝肿瘤的治疗作用。方法建立30只兔VX2肝肿瘤模型,随机分为对照组、常规组和实验组,经胃十二指肠动脉至肝动脉分别灌注生理盐水、MMC(0.2mg/kg)+适量超液化碘油以及重组人白细胞介素-2(20万IU/m2)+适量超液化碘油。结果术后实验组兔在生存率上优于常规组,对照组、常规组和实验组介入治疗后4周的生存率分别为70.0%、80.0%和90.0%,且实验组血清肝功能指标及病理检查显示肝功能损害轻。结论经肝动脉灌注重组人白细胞介素-2联合碘化油乳剂对兔VX2肝肿瘤具有较好的治疗作用。

射频消融干预下兔VX2肿瘤病理学与凋亡的评估

目的:探索射频消融(radiofrequency ablation,RFA)干预下肝癌细胞凋亡及周围肝组织病理学变化规律,为在临床治疗中实现病理性完全消融(pathological complete ablation,PCA)提供病理学基础.方法:采用肿瘤细胞悬液肝内注入法构建兔肝VX2肿瘤模型,在直视定位下行肝VX2肿瘤单电极射频消融术,由消融中心依次逐层取材,采用HE染色观察肿瘤以及周围肝组织各个类型细胞的病理学变化,同时应用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TdT mediated-dUTP nick end labeling)法检测各部位细胞凋亡情况.结果:RFA术后,以电极为中心的周围肿瘤组织依次出现凝固性坏死区、坏死与细胞凋亡混合区、细胞凋亡区.其中凝固性坏死区、坏死与细胞凋亡混合区可见大量炎细胞浸润,单纯细胞凋亡区未见炎性细胞浸润.在坏死与细胞凋亡混合区、细胞凋亡区域可见残余存活的肝癌细胞;在肿瘤周围的肝细胞有部分坏死肝细胞,但以细胞凋亡为主,中央静脉、汇管区血管内皮细胞以及肝内小胆管上皮可见部分肝细胞凋亡.结论:通过对兔肝脏VX2肿瘤射频消融后的病理表现,为临床治疗中进一步提高射频消融清除癌灶的能力和效率提供理论基础.

放射性粒子^(125)I联合TACE治疗兔VX2肝肿瘤的实验研究

目的:通过研究不同活度的125I粒子以及联合TACE治疗兔VX2肝移植癌的疗效及其病理基础,探讨125I粒子组织间植入治疗肝癌的有效性。方法:建立兔VX2肝癌模型。60只肝癌模型兔随机分成5组,对照组(A组)植入空白剂量(0mCi)125I粒子,B组植入1.0mCi125I粒子,C组植入0.7mCi125I粒子,D组植入0.4mCi125I粒子,E组植入0.7mCi125I粒子+TACE。观察植入前后各组肿瘤体积并计算抑瘤率,切除肿瘤组织及周围正常组织进行常规病理检查。结果:各治疗组肿瘤大小在治疗前后比较具有统计学差异(P<0.01),均小于同期对照组(A组)(P<0.01)。在不同观察时期抑瘤率差别均有统计学意义(P<0.05),各个组间抑瘤率差异在治疗后2周最为明显(P<0.01),但均高于D组(P<0.01)。治疗后6周病理提示D组部分组织内仍可见少量肿瘤细胞,而其余各治疗组均未见明显的肿瘤细胞残存,B组对周围肝组织损伤较大,C组、E组适中。总体疗效E组优于其余各治疗组。结论:125I粒子联合TACE治疗肝癌效果明显优于单一的治疗方案,是肝癌目前较为理想的治疗方案,其中单个粒子活度以0.7mCi左右较为适宜。