健骨胶囊对兔骨性关节炎软骨组织中蛋白聚糖含量的影响

目的:探讨健骨胶囊对骨性关节炎模型兔关节软骨组织中蛋白聚糖含量的影响。方法:建立早期软骨退变降解的骨性关节炎动物模型,将模型动物分为模型组、健骨胶囊低、中、高剂量组和正常对照组,采用生物化学方法测定蛋白聚糖的含量。结果:给骨性关节炎模型兔连续喂服健膏胶囊14 d后,可显著地提高兔膝关节软骨中蛋白聚糖含量。结论:健骨胶囊可能对骨性关节炎有一定的改善和治疗作用。

温针灸对兔膝骨性关节炎模型滑膜组织中TLR4/NF-κB信号通路诱导下滑膜修复作用机制的实验研究

目的通过观察温针灸对兔右膝骨性关节炎模型关节软骨滑膜组织中TLR4、NF-κB表达量的影响,探讨温针灸治疗膝骨性关节炎的机制。方法随机将40只兔分为空白组、模型组、双氯芬酸钠组、温针灸组,每组10只,采用右后肢石膏管型固定法制作膝骨性关节炎模型,于造模成功后第3 d开始进行干预治疗。空白组不做任何处理,常规饲养;模型组不治疗,每天以石膏固定1次,时间15 min。温针灸组给予患侧鹤顶、后三里、内外膝眼、阳陵泉5个穴位行温针灸治疗,15 min/1次,1次/d。双氯芬酸钠组将药品研末、溶解在纯净水中,并以15 mg/kg体重的浓度灌胃。6 d为1个疗程,观察2个疗程,治疗结束后取材。通过HE染色法观察各组膝关节软骨的病理变化,并进行Mankin′s评分;采用ELISA法检测各组兔膝关节滑膜组织中NF-κB、TLR4的表达水平。结果与空白组兔比较,各组兔膝关节Mankin′s评分、NF-κB、TLR4的含量均增高(P<0.05),与模型组兔相比,温针灸组和双氯芬酸钠组兔膝关节Mankin′s评分和NF-κB、TLR4的含量均有所下降(P<0.05)。结论温针灸可改善兔膝关节软骨退行性变,减轻炎症反应,其机制可能与改善兔膝关节软骨形态,降低滑膜组织中NF-κB、TLR4的表达量相关。

拔伸松动手法对兔膝关节骨性关节炎早中晚期P38MAPK信号通路及相关因子的影响

目的研究拔伸松动手法对膝关节骨性关节炎模型兔早中晚期关节软骨中分子量为p38丝裂原活化蛋白激酶(P38MAPK)信号通路及相关因子的影响,从细胞分子水平研究推拿手法对早中晚期膝关节骨性关节炎的作用机制。方法健康成年白兔90只,体质量1.8~2.5 kg,雌雄不限,重量分布均一。随机分为3组,每组10只:拔伸松动法组、模型组、空白组。采用Videman T造模方法,管型石膏伸直位固定兔右后肢膝关节2、4、6周,复制膝关节骨性关节炎早期、中期和晚期的模型。造模完成后3 d,治疗组以拔伸松动手法干预,治疗20次后取标本,采用反转录·聚合酶链反应(RT-PCR)、蛋白质印迹法(Western Blot)、免疫组织化学(IHC)法检测P38MAPK信号通路及相关因子的表达水平。结果经过治疗后早期治疗组关节软骨和模型组比较基质金属蛋白酶1(MMP1)、基质金属蛋白酶13(MMP13)、前列腺素E受体2(PTGER2)、环氧化酶2(COX2)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、P38MAPK的mRNA表达、蛋白表达水平以及平均光密度值(IOD)略有降低,MMP13的mRNA表达水平和PTGER2蛋白表达水平差异有统计学意义(P<0.05)。经过治疗后中期治疗组关节软骨和模型组比较MMP1、MMP13、COX2、PTGER2、P38MAPK的蛋白表达水平以及平均光密度值(IOD)明显降低,MMP1、MMP13、PTGER2、P38MAPK的蛋白表达水平组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。经过治疗后晚期治疗组关节软骨和模型组比较MMP1、MMP13、PTGER2、COX2、iNOS、P38MAPK的mRNA表达、蛋白表达水平以及平均光密度值(IOD)显著降低,MMP1、MMP13、COX2、P38MAPK的mRNA表达、蛋白表达水平差异有统计学意义(P<0.05),PTGER2和iNOS蛋白表达水平无差异。结论拔伸松动法可通过下调兔KOA早中期P38MAPK信号通路的表达,影响MMP1、MMP13、iNOS、COX2、PTGER2等相关因子的表达水平,改善KOA软骨细胞功能,有利于损伤软骨组织的修复。

中药洗剂对兔膝骨性关节炎模型组织形态学及关节液中MMP-3的影响

目的:探讨中药洗剂对兔膝骨性关节炎(OA)模型组织形态学及关节液中基质金属蛋白酶-3(MMP-3)的影响。方法:将新西兰大白兔40只,雌雄不限,体质量(2.50±0.10)kg,随机分为4组:A组(正常对照组)、B组(模型对照组)、C组(中药洗剂组)、D组(扶他林软膏组),每组10只。适应性喂养7天后,B、C、D组兔膝关节腔内注入木瓜蛋白酶造成OA及滑膜炎病变模型。术中注意不刺激关节软骨及滑膜;A、B组造模成功后每天用热水袋热敷膝关节,早晚各1次,C组造模成功后用中药洗剂热敷膝关节,早晚各1次,D组造模成功后用扶他林软膏涂抹后每天用热水袋热敷膝关节,早晚各1次,以上各组均外敷右膝关节表面,每次均为40分钟,治疗8周后,测关节液中MMP-3的含量。结果:1)中药洗剂、扶他林软膏都能明显改善兔膝关节功能活动;2)模型对照组血清MMP-3含量高于正常对照组(P<0.05),中药洗剂可降低关节液MMP-3水平;中药洗剂组、扶他林软膏组与模型对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),但中药洗剂组与扶他林软膏组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:1)中药洗剂外敷与扶他林软膏外擦对兔膝骨性关节炎均有治疗作用;2)中药洗剂可降低关节滑液中MMP-3含量,对骨性关节炎具有治疗作用。

消定膏对兔骨性关节炎关节液中TNF-α的影响

目的:探讨消定膏对兔骨性关节炎关节液中TNF-α的影响。方法:新西兰大白兔40只,雌雄不限,体重(2.50±0.10)kg,随机分成4组,空白组、模型组、对照组、治疗组4组,每组10只。适应性喂养7d后,模型组、对照组、治疗组按照日本鬼头康彦等的兔膝关节腔内注入木瓜蛋白酶造成OA及滑膜炎病变模型方法造模。获得稳定的骨关节炎性滑膜炎模型。术中注意不刺激关节软骨及滑膜。造模成功后空白组不做处理。对照组外涂扶他林软膏,治疗组外敷消定膏,模型组外敷凡士林,空白组亦于右膝关节表面外敷凡士林。结果:模型组、对照组、治疗组与空白组比较差异有统计学意义(P<0.05),对照组、治疗组与模型组相比差异有统计学意义(P<0.05),对照组和治疗组比较差异无统计学意义(P>0.05);结果说明消定膏与西药扶他林乳胶剂均可降低兔炎关节液中TNF-α的含量。结论:1.消定膏外敷与扶他林乳胶剂外擦对兔膝骨性关节炎均有治疗作用。2.中药消定膏外敷,可对兔膝骨关节炎软骨退变起明显缓解作用;能显著降低家兔关节液中TNF-α的含量,从而发挥对膝骨性关节炎的防治作用。

脂肪间充质干细胞结合透明质酸钠对兔骨性关节炎治疗的实验研究

[目的]探讨通过脂肪间充质干细胞结合透明质酸钠治疗兔膝关节骨性关节炎。[方法]通过制备兔膝关节骨性关节炎的经典动物模型及体外培养兔脂肪间充质干细胞。将制备完成的模型分为四组,每组10只:A组为对照组,不予处理;B组给予脂肪间充质干细胞复合纤维蛋白胶(FG)局部移植治疗;C组给予关节腔注射透明质酸钠治疗;D组给予脂肪间充质干细胞复合纤维蛋白胶(FG)加关节腔注射透明质酸钠治疗。治疗3周后处死实验动物检查治疗情况。[结果]通过对实验动物膝关节内蛋白多糖、MMP-13、Ⅱ型胶原的mRNA检测发现,脂肪间充质干细胞加透明质酸钠注射对早期膝关节骨性关节炎具有治疗效果。蛋白多糖、Ⅱ型胶原的表达均较对照组有所升高,MMP-13的表达较对照组下降。[结论]脂肪间充质干细胞加透明质酸钠注射对早期膝关节骨性关节炎具有治疗效果。

“拔伸松动手法”对兔膝骨性关节炎电镜下软骨超微结构的影响

目的研究拔伸松动手法对兔膝骨性关节炎电镜下软骨超微结构的影响。方法采用成年日本大白兔,按Videman T的造模方法制作兔膝骨性关节炎模型,随机分成拔伸松动手法组、注射透明质酸钠组、模型组及空白组,观察治疗后兔膝骨性关节炎电镜下软骨超微结构的改变。结果与模型组比较,拔伸松动手法治疗有利于兔膝骨性关节炎损伤软骨细胞的修复,并可促进软骨表面结构的修复。结论拔伸松动手法可促进兔膝骨性关节炎损伤软骨细胞和软骨表面结构的修复,是该法治疗膝关节骨性关节炎的客观依据。

自拟组方补肾固筋方对膝骨性关节炎兔血清及关节液白细胞介素-1、肿瘤坏死因子-α的影响

目的观察自拟组方补肾固筋方对膝骨性关节炎(KOA)兔血清及关节滑液白细胞介素(IL)-1、肿瘤坏死因子(TNF)-α的表达及调节机制。方法选取9个月龄健康雄性新西兰大白兔44只,随机盲法分为正常组、模型组、西药组、中药组,每组11只,除正常组外均采用改良Hulth造模法造模成功后连续给药12 w,取空腹血清及造模膝关节前方部分滑膜组织、股骨内侧髁软骨及软骨下骨及滑液,采用酶联免疫吸附(ELISA)检测血清及关节滑液IL-1、TNF-α的含量及变化。结果肉眼观察西药组关节间隙狭窄程度介于模型组和中药组之间,关节表面粗糙,软骨下骨赘生成明显;中药组关节间隙较其他各组稍窄,关节表面触之稍粗糙伴轻微骨赘生成;中药组光镜下见软骨细胞大小均匀排列整齐,模型组软骨细胞大小不均且呈簇状排列;模型组血清及关节液IL-1、TNF-α含量升高(P<0.01)。两个给药组与模型组比较血清及关节液IL-1、TNF-α含量降低(P<0.01),两给药组之间无明显差异(P>0.05)。结论补肾固筋方可以明显降低血清和关节滑液IL-1、TNF-α的分泌水平。

骨愈灵影响兔膝骨性关节炎模型血液IL-1β随机平行对照研究

[目的]观测骨愈灵影响兔膝骨性关节炎模型血液IL-1β。[方法]使用随机平行对照方法,32只大耳白兔喂养3d,称重后使用随机数字表分为4组,空白组、模型组、骨愈灵组、洛索洛芬钠组,8只/组。采用改良经典Hulth造模方法造模,术后每日强迫家兔活动30min,分2次进行,术后6周后即可得到膝关节骨性关节炎模型。各组药物均混合入10m L温开水中灌胃。骨愈灵组234mg。洛索洛芬钠组7mg。空白组与模型组:10m L/d,温开水。各组喂养9周,即药物治疗3周后进行动物取材。水合氯醛麻醉,取心脏血约3m L。观测血液白介素1β(IL-1β)。[结果]模型组大耳白兔血液白介素1β(IL-1β)高于空白对照组(P<0.01)。与模型组相比,骨愈灵组、洛索洛芬钠组IL-1β明显降低(P<0.01),骨愈灵组与洛索洛芬钠组比较,IL-1β明显降低(P<0.01)。[结论]骨愈灵能明显降低大耳白兔膝骨性关节炎血液中IL-1β含量,治疗兔膝骨性关节炎有疗效。

传统中药补肾固筋方对膝骨性关节炎IL-1、TNF-α的作用机制

目的观察补肾固筋方对兔膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)血清及关节液IL-1、TNF-α的表达影响及调节机制。方法新西兰兔76只,随机分为正常组、模型组、西药组、中药组,除正常组外均用改良Hulth法造,取血清及膝关节前方部分滑膜组织、股骨内髁关节软骨及软骨下骨,ELISA法IL-1、TNF-α含量。结果西药组关节间隙狭窄,介于模型组和中药组之间,关节面粗糙,骨赘明显;中药组关节间隙稍窄,关节面稍粗糙伴轻微骨赘。模型组血清及关节液IL-1、TNF-α含量比正常组升高(P<0.01)。两个给药组血清及关节液IL-1、TNF-α含量比模型组降低(P<0.01),两给药组之间差异无显著性。结论补肾固筋方通过降低骨关节炎中IL-1、TNF-α的分泌水平促进软骨修复,为临床应用提供科学的实验依据。

补肾固筋方对膝骨性关节炎模型兔血清及关节液IL-1、TNF-α表达的影响

目的观察补肾固筋方对骨性关节炎(knee osteoarthritis,KOA)模型兔血清及关节液IL-1、TNF-α表达的影响。方法选取8月龄左右健康雄性新西兰大白兔36只,随机分为正常组、模型组、西药组、中药组,每组10只,除正常组外均采用改良Hulth A造模法造模,西药组给予美洛昔康(每日药量6 mg/kg),中药组给予补肾固筋方每日药量53 g/kg,连续给药8周,取血清及膝关节前方部分滑膜组织、股骨内髁关节软骨及软骨下骨,ELISA法检测血清及关节液IL-1、TNF-α含量。结果西药组关节间隙狭窄,介于模型组和中药组之间,关节面粗糙,骨赘明显;中药组关节间隙稍窄,关节面稍粗糙伴轻微骨赘。与正常组比较,模型组血清及关节液IL-1、TNF-α含量升高(P<0.01)。与模型组比较,两个给药组血清及关节液IL-1、TNF-α含量降低(P<0.01),两给药组之间比较,差异无统计学意义。结论补肾固筋方通过抑制IL-1、TNF-α的分泌,延缓软骨退变,促进软骨基质的合成和软骨修复。

超微肿痛贴对兔膝骨性关节炎关节液中TNF-α影响的研究

目的:观察超微肿痛贴对兔膝骨性关节炎中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平的影响,研究其治疗膝骨性关节炎的机制。方法:将40只实验兔随机分为4组各10只,即超微肿痛贴组、狗皮膏药组、模型组、正常组。采用改良Hulth造模法制备膝骨性关节炎模型,治疗6周后抽取关节液,采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定各组兔膝关节液中TNF-α水平。结果:与正常组比较,超微肿痛贴组及狗皮膏药组中TNF-α的表达均有明显下降(P<0.01),且治疗组改善情况明显优于对照组(P<0.05)。结论:超微肿痛贴以及狗皮膏药可通过降低膝关节液中TNF-α水平对兔膝骨性关节炎起防治作用。