党参炔苷调节TIM3/Gal9信号通路对子宫内膜癌细胞增殖、凋亡和免疫逃逸的影响

目的研究党参炔苷调节T细胞免疫球蛋白及黏蛋白结构域分子3(TIM3)/半乳糖凝集素9(Gal9)信号通路对子宫内膜癌细胞增殖、凋亡和免疫逃逸的影响。方法以CCK-8法检测0、15、30、60、90、120、150mg/L的党参炔苷处理后的子宫内膜癌细胞HEC-1-A存活率,筛选出其最佳作用浓度。将体外培养的HEC-1-A细胞随机分为对照组、党参炔苷组、TIM3敲低组、空载组、党参炔苷+TIM3过表达组,分组处理后以实时荧光定量PCR和免疫印迹检测各组细胞TIM3/Gal9通路表达;以免疫荧光染色和CCK-8法检测各组细胞增殖;以流式细胞术检测各组细胞凋亡;以免疫荧光染色检测各组细胞凋亡相关蛋白表达,比较Bax/Bcl-2。将人外周血淋巴细胞与各组细胞以不同比例共培养后以CCK-8法检测其对各组细胞的杀伤率。结果与对照组比较,党参炔苷组、TIM3敲低组细胞TIM3、Gal9 mRNA及蛋白表达、Ki67阳性率、存活率降低(P<0.05),凋亡率、Bax/Bcl-2、杀伤率升高(P<0.05);空载组细胞各指标无明显变化(P>0.05)。与党参炔苷组比较,党参炔苷+TIM3过表达组细胞TIM3、Gal9 mRNA及蛋白表达、Ki67阳性率、存活率升高(P<0.05),凋亡率、Bax/Bcl-2、杀伤率降低(P<0.05)。结论党参炔苷可通过下调TIM3/Gal9信号通路表达来抑制子宫内膜癌细胞增殖并促进其凋亡,还可减弱其免疫逃逸,进而增强免疫细胞对其的杀伤力。

党参炔苷调节AKT/GSK-3β/snail信号通路对胃癌细胞增殖、凋亡和上皮间质转化的影响

目的探究党参炔苷(LOB)调节蛋白激酶B(AKT)/糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)/Snail信号通路对胃癌(GC)细胞增殖、凋亡和上皮间质转化(EMT)的影响。方法将GC细胞株SGC7901随机分为对照组(Control组)、低浓度LOB组(LOB-L组,10μmol/L LOB)、中浓度LOB组(LOB-M组,20μmol/L LOB)、高浓度LOB组(LOB-H组,40μmol/L LOB)和高浓度LOB+AKT激活剂SC79组(LOB-H+SC79组,40μmol/L LOB+20μmol/L SC79)。CCK-8法检测5组细胞增殖能力。划痕实验检测细胞迁移能力。Transwell实验检测细胞侵袭能力。流式细胞术检测细胞凋亡。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法测定5组细胞AKT、GSK-3β、snail1 mRNA的表达。Western Blot检测5组细胞AKT/GSK-3β/snail信号通路和凋亡、EMT过程相关蛋白表达。结果与Control组比较,LOB-M组、LOB-H组SGC7901细胞OD450值(48 h、72 h)、细胞划痕愈合率、细胞侵袭数目、AKT、GSK-3β、snail1 mRNA表达和AKT、GSK-3β磷酸化水平、snail1、Bcl-2、N-cadherin、Vimentin蛋白表达显著下降(P<0.05),细胞凋亡率、Bax、E-cadherin蛋白表达显著升高(P<0.05)。SC79减弱了LOB对GC细胞增殖和EMT的抑制作用,抑制了细胞凋亡。结论LOB可能通过下调AKT/GSK-3β/snail信号通路抑制GC细胞增殖和EMT过程,促进细胞凋亡。

党参炔苷调节Shh/Gli1信号通路对胃癌细胞增殖、凋亡和上皮间质转化的影响

目的:探讨党参炔苷(LOB)调节音猬因子(Shh)/胶质细胞瘤转录因子1(Gli1)信号通路对胃癌细胞增殖、凋亡和上皮间质转化(EMT)的影响。方法:体外培养MKN-45细胞,分为对照组、LOB组(10μmol/L LOB)、SHH特异性激活剂组(PM组,1μmol/L PM)、LOB+PM组(10μmol/L LOB+1μmol/L PM);CCK-8实验检测MKN-45细胞增殖;划痕试验检测MKN-45细胞迁移;Transwell检测MKN-45细胞侵袭;流式细胞术检测MKN-45细胞凋亡;Western blot检测EMT相关蛋白和Shh、Gli1蛋白表达水平。结果:相较于对照组,LOB组吸光度(A_(450))值、划痕愈合率、细胞侵袭数目及Vimentin、Gli1、Shh、N-cadherin蛋白表达下降(P<0.05),细胞凋亡率和E-cadherin蛋白表达显著升高(P<0.05);PM组A_(450)值、划痕愈合率、细胞侵袭数目及Vimentin、Gli1、Shh、N-cadherin蛋白表达增高(P<0.05),细胞凋亡率和E-cadherin蛋白表达显著降低(P<0.05);与LOB组相比,LOB+PM组A_(450)值、划痕愈合率、细胞侵袭数目及Vimentin、Gli1、Shh、N-cadherin蛋白表达增高(P<0.05),细胞凋亡率和E-cadherin蛋白表达显著降低(P<0.05)。结论:LOB可诱导MKN-45细胞凋亡,抑制增殖和EMT,这可能与调节Shh/Gli1信号通路有关。

正交优化超声辅助法提取土党参中党参炔苷的工艺研究

目的:以土党参为试材,采用超声波辅助技术进行提取,并通过高效液相色谱法测定党参炔苷含量。在单因素试验的基础上,采用正交实验法优化土党参中党参炔苷的提取工艺。结果:表明土党参中党参炔苷的最优提取条件为甲醇浓度60%,料液比1∶40(g·ml^(-1)),提取温度60℃,提取时间40 min。结论:该工艺稳定、提取量高、重复性好,可为土党参药材中党参炔苷成分的开发应用提供参考依据。

党参中党参炔苷HPLC分析

目的 分析不同种与不同产地的党参中党参炔苷的含量 ,为党参的质量标准建立提供参考。方法 采用高效液相色谱分析 ,MetaChemRP 18色谱柱 (4. 6mm× 2 5 0mm ,5 μm) ,以乙腈 水 (2 2∶78)为流动相 ,检测波长 2 6 7nm。 结果 测定了 11批不同种与不同产地的党参中党参炔苷的含量 ,含量范围为 0 . 0 35～ 1. 314mg·g-1。结论 本方法简便、快捷、可靠 ,可用于党参的质量评价。

HPLC测定不同产地川党参中党参炔苷的含量

目的：分析不同产地的川党参中党参炔苷的含量，为川党参的质量标准建立提供参考。方法：采用高效液相色谱分析，Supelco Discovery C18色谱柱（4．6mm×250mm，5μm）；乙腈-0.5％醋酸水（20：80）为流动相，检测波长268nm。结果：24批不同种与不同产地的党参中党参炔苷含量介于0.0403～0.9667mg·g^-1。结论：该方法操作简便，结果稳定可靠，可用于川党参的质量评价。

党参饮片中党参内酯和党参炔苷的相关性研究

目的：分析不同来源党参饮片中党参内酯和党参炔苷的含量，对实验结果进行比较，找出其相关性，更好地控制党参的质量。方法：采用反相高效液相色谱法分析，色谱柱：C18（250mm×4．6mm，5μm）．以乙腈-水（70：30）为流动相，测定党参内酯的含量，检测波长为220nm；以乙腈-0．1％HAc（26：74）为流动相，测定党参炔苷的含量，检测波长为267nm。结果：在选定的色谱条件下，这2种活性成分的分离度良好，党参内酯的回归方程为Y=4．01×10^6X＋6．95×10^2，r=0．9997，平均回收率为99．9％，RSD为1．9％（n=6），线性范围为0．01～0．10μg；党参炔苷的回归方程为Y=8．51×10^5X＋1．67×10^4，r=0．9990，平均回收率为99．9％，RSD为1．0％（n=6），线性范围为0．05～0．25μg。所测样品中2种成分的含量基本在12个样品中呈相同的顺序排列。结论：党参内酯和党参炔苷含量之间有一定的相关性，这为简便快速控制党参的质量提供了依据。

山西党参药材中党参炔苷的含量分析

目的:为了更好地评价药食两用的中药党参,建立准确快速的 RP-HPLC 法测定党参药材中党参炔苷的含量。方法:采用 Kromasil C_(18)柱(4.6 mm×200 mm,5μm),流动相为乙腈-水(28:72),流速为1.0 mL·min^(-1),检测波长为267 nm。结果:党参炔苷在0.05～0.60μg范围内线性关系良好,r=0.9998,回归方程为 Y=2.26×10~6X-2.75×10~4,平均回收率为98.83%,RSD 为0.95%(n=6)。结论:本法简便快速,准确度和重现性好,可用于党参中党参炔苷的含量测定。山西党参药材中,陵川产的五花芯党参含党参炔苷的量最高。

硫熏对党参中党参炔苷含量的影响

目的:研究产地加工中硫熏对党参品质的影响。方法:用高效液相色谱法,测定党参硫熏前后党参炔苷含量。使用ZORBAX Edipse XDB-C18柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相为乙腈-水(28∶72),流速为1.0mL.min-1,柱温为30℃,检测波长为269nm。结果:硫熏后党参中党参炔苷含量均明显下降。结论:硫熏对党参药材质量有影响,出于对人体健康的长远考虑,产地加工应严格控制硫熏。

党参炔苷对胃溃疡模型大鼠胃黏膜损伤保护作用的研究

目的通过乙醇致大鼠胃溃疡模型,探讨党参炔苷对胃黏膜的保护作用。方法制备乙醇致大鼠胃溃疡模型,观察党参炔苷对该模型治疗后大鼠溃疡指数的影响。放免法检测血清中胃泌素及血浆中前列腺素含量,酶联免疫法测血清中表皮生长因子含量。结果党参炔苷小剂量组溃疡指数明显低于模型组;党参炔苷小剂量组胃泌素含量明显低于模型组,前列腺素含量明显高于模型组,表皮生长因子含量有一定程度的增高。结论预先给大鼠以党参炔苷灌胃给药,对防止乙醇引起的胃黏膜损伤有一定的作用,党参炔苷抗胃黏膜急性损伤的机制之一可能为提高前列腺素的含量,从而对抗胃泌素的泌酸作用,刺激胃黏膜合成释放表皮生长因子。

HPLC法测定不同产地党参中党参炔苷和丁香苷的含量

建立高效液相色谱法同时测定不同产地党参中党参炔苷和丁香苷含量的方法。采用Thermo scientific C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,以乙腈和水为流动相进行梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,检测波长266 nm,柱温为25℃。实验结果表明,党参炔苷与丁香苷色谱峰分离良好。二者分别在10-200μg/mL与0.5-10μg/mL范围内与峰面积呈良好的线性关系。平均加样回收率分别为100.65%与98.78%。党参炔苷和丁香苷在10个不同产地的党参中含量分别介于0.1963-1.4532 mg/g与0.0051-0.0951 mg/g。该方法操作简便、快速,结果稳定可靠,适用于党参2种主要成分的定量分析。

党参不同部位中党参炔苷的RP-HPLC分析

目的:分析不同产地党参其芦头、参体和参尾中党参炔苷的含量。方法:采用高效液相色谱分析,依利特E1515900C18色谱柱(4.6mm×200mm,5μm),以乙腈-0.1HAc(28∶72,v/v)为流动相,检测波长267.3nm。结果:在选定的色谱条件下,党参炔苷分离度好,线性范围宽,r=0.9990,平均回收率98.1,RSD=0.81(n=6)。结论:此方法简便、灵敏,可以快速检测不同样品中党参炔苷的含量,测定结果显示,党参不同部位党参炔苷含量不同。

比较和优化党参炔苷的提取工艺

目的优选党参炔苷的提取工艺。方法比较煎煮法、乙醇回流法、渗滤法,应用正交试验筛选党参炔苷的提取工艺,以提取液中党参炔苷的含量作为评价指标。结果最佳提取方法为渗漉法,加100 ml 65%乙醇浸泡48 h后渗滤,流速为9 m.lmin-1。结论优选得到的工艺简便易行,稳定性好。

HPLC测定不同产地党参中党参炔苷的含量

目的：测定不同产地党参中党参炔苷的含量，为建立党参的质量标准提供参考。方法采用HPLC，Dionex Acclaim C18色谱柱（4.6 mm＆#215;250 mm，5μm）；乙腈-水（22：78）为流动相；检测波长267 nm；柱温为30℃。结果在此色谱条件下，党参炔苷分离度良好，11批不同产地的党参中党参炔苷的含量范围为14.7～158.6μg/g。结论此法操作简便易行，结果稳定可靠，可用于评价党参的质量。

党参中党参炔苷和苍术内酯Ⅲ纯化工艺优化及抗氧化部位筛选

目的优化党参中党参炔苷和苍术内酯Ⅲ纯化工艺,并对其抗氧化部位进行筛选。方法以党参炔苷、苍术内酯Ⅲ含有量为评价指标,树脂型号、上样液质量浓度、体积流量、洗脱剂(乙醇)体积分数、体积流量、用量为影响因素,优化纯化工艺,再采用DPPH清除实验来筛选党参抗氧化部位。结果最佳条件为采用DM130大孔吸附树脂,上样液质量浓度0.125 mg/mL,体积流量6 mL/min,50%乙醇洗脱,体积流量4 mL/min,用量100 mL,党参炔苷、苍术内酯Ⅲ含有量分别提高到原来的26.9、51.2倍。50%乙醇洗脱部位的抗氧化活性强于95%乙醇洗脱部位和党参原药材,IC50分别为0.041、0.09、0.25 mg/mL。结论该方法稳定可靠,可用于纯化党参中党参炔苷和苍术内酯Ⅲ以及筛选其抗氧化部位。

RP-HPLC法测定党参内酯和党参炔苷的含量及相关性研究

目的:分析潞党参、素花党参、川党参中党参内酯和党参炔苷的含量,对实验结果进行比较,找出其相关性,以更好地控制党参的品质。方法:采用反相高效液相色谱法分析,色谱柱:DiamonsilC18柱(250mm×4.6mm,5μm)。流动相为以乙腈∶水(70∶30),测定党参内酯的含量,检测波长为220nm;以乙腈∶0.1%HAC(26∶74)为流动相,测定党参炔苷的含量,检测波长为267.3nm。结果:党参内酯的线型范围为0.014～0.280μg(r=0.9997),平均回收率为100.4%,RSD为1.90%(n=6)党参炔苷的线型范围为0.065～1.040μg(r=0.9999);平均回收率为100.8%,RSD为1.60%(n=6)。在选定的色谱条件下,这两种活性成分的分离度良好。结论:党参内酯和党参炔苷含量之间有一定的相关性。

党参药材中党参炔苷与总多糖、总皂苷含量的相关性研究

目的:研究不同产地、不同规格党参药材中党参炔苷、总多糖、总皂苷的含量,对其测定结果进行比较,分析三者之间的相关性,为评价和控制党参药材质量提供参考依据。方法:采用HPLC法测定党参炔苷,采用硫酸-苯酚比色法测定总多糖成分,采用香草醛-高氯酸比色法测定总皂苷。结果:党参炔苷在0.0085～0.425mg.mL-1(r=0.9998)范围内与峰面积呈良好线性关系,精密度良好,平均回收率100.7%;总多糖、总皂苷测定精密度及回收率亦符合要求。测定了5个不同产地、9种规格的党参药材样品。结论:党参样品中党参炔苷与总皂苷含量相关,与总多糖不成正比,这为科学评价和有效控制其质量提供了依据。

高效液相色谱法测定土党参中党参炔苷的含量

目的测定土党参中党参炔苷的含量，为土党参的质量控制及引种栽培等提供科学依据。方法采用高效液相色谱法分析，依利特-ODS2（250mm×4．6mm，5μm），以乙腈-水（20：80）为流动相，检测波长为270am。结果测定了贵州11个不同产地的土党参中党参炔苷的含量，其范围为0．686～4．035mg·g^-1。结论该方法快速简便，重复性好，可用于土党参的质量评价。

不同炮制方法对党参中党参炔苷含量的影响

党参为桔梗科植物党参Codonopsis pilosula（Franch）Nannf.素花党参Codonopsis pilosula Nannf.var.modesta（Nannf）L.T.Shen或川党参Codonopsis tangshen Oliv.的干燥根,始载于《本草从新》。党参性味甘、平,归脾、肺经,具有健脾益气,养血生津的功能,用于脾肺气虚,食少倦怠,咳嗽虚喘,气血不足,面色萎黄,心悸气短,津伤口渴,内热消渴[1]。