基于机器学习Rosetta的全人源化Spastin重组抗体的设计和验证

目的:基于机器学习软件Rosetta实现人源化Spastin重组抗体的设计、体外制备及验证。方法:使用Rosetta设计出针对人Spastin蛋白抗原表位的全人源化抗体,获得其抗体Fab段轻链及重链可变区的氨基酸序列,优化密码子后转化为核苷酸序列得到轻、重链的全长cDNA;随后将全人源化抗Spastin的轻、重链序列分别构建于重组表达载体;在293FT真核表达体系中表达并纯化该抗体;使用Western blot方法鉴定该抗体识别人Spastin重组蛋白信号的能力;通过Rosetta建模模拟抗体与抗原的结合及构象。结果:成功构建了全人源化Spastin重组抗体;该Spastin重组抗体能够在真核系统成功表达;构建的重组抗体轻、重链能够形成完整抗体,且能够特异性识别出人Spastin蛋白信号。结论:借助Rosetta软件成功设计了一种能够特异识别Spastin的重组全人源化抗体。

抗幽门螺杆菌UreB重组全人源化单域抗体的基因工程表达及分子改造

为了构建针对幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)脲酶的单域抗体的基因工程表达系统。首先利用Pymol、ITASSER和ClussPro2等AI辅助工具分析比较了不同抗体与Hp脲酶亚单位B(UreB)之间的分子间作用力,确定了VL全人源化单域抗体UreBAb作为重点研究对象。根据大肠埃希菌密码子偏好性优化了UreBAb基因序列,并将其分别插入pET28a、pE-SUMO等表达载体,转化大肠埃希菌Rosetta(DE3)获得了重组表达菌株,通过IPTG诱导制备重组抗体蛋白,并利用提取的Hp脲酶作为抗原,分析验证了重组表达抗体的活性。SDS-PAGE检测结果显示UreBAb和SUMO-UreBAb均获得了正确的表达,纯化后的蛋白产率分别为0.34和0.41 mg/mL。单向免疫扩散实验结果证实这两种重组表达抗体均与Hp UreB抗原具有良好的亲和力,对脲酶的抑制率分别为51.27%和74.07%。进而,结合AlphaFold2、cluspro2、mCSM-AB、OSPREY和FoldX等人工智能工具,评估分析了影响抗原-抗体复合物稳定性的关键位点及其突变策略,随后进一步构建了9个UreBAb进化突变体表达菌株,活性分析结果显示,这些突变体与抗原的结合活性均得到了提高,其中以I107W突变体的活性提升最为显著,相较于野生型UreBAb,提高了24.95%。本研究为Hp全人源化单域抗体的开发奠定了良好的基础。

治疗绝经妇女骨质疏松症新药罗莫珠单抗Ⅲ期临床试验获阳性结果

安进公司和优时比公司治疗绝经后妇女骨质疏松症新药罗莫珠单抗（romosozumab）Ⅲ期临床FRAME多中心、跨国、随机、双盲、安慰剂对照、平行组研究，试验显示，可明显降低新脊椎骨折和临床骨折。该药是一种全人源化单克隆抗体，通过抑制骨硬化蛋白sclerostin活性而促进骨形成，并减少骨吸收。试验观察该单抗对绝经后骨质疏松症妇女的总髋骨和股骨颈的骨密度。

新药研究与开发

FDA批准IL-6受体拮抗剂治疗风湿药不耐受或应答不良的中重度活动性类风湿性关节炎患者FDA批准再生元与赛诺菲公司的白细胞介素-6（IL-6）受体拮抗剂Kevzara（含全人源化单克隆抗体sari-lumab的预充式皮下注射剂）治疗抗风湿药不耐受或应答不良的中重度活动性类风湿性关节炎。此药可引起严重过敏反应（表现为呼吸急促或呼吸困难）、颜面浮肿、胸痛、头晕、中重度胃痛或呕吐。

FDA授予百时美施贵宝单抗elotuzumab突破性疗法认定

百时美施贵宝（BMS）和艾伯维（AbbVie）5月19日宣布，FDA已授予实验性单抗药物elotuzumab突破性疗法认定。elotuzum．ab是一种全人源化单克隆抗体，目前正调查联合来那度胺（1enalidomide）和地塞米松（dexamethasone）用于既往已接受一种或多种疗法的多发性骨髓瘤患者的治疗。

欧盟批准SJIA治疗药物上市

2013年9月3日，诺华公司宣布EU批准Ilaris（人抗白介素-1β单克隆抗体）用于两岁以上儿童的全身型幼年特发性关节炎（SJIA）的治疗。Ilafis是一种全人源化单克隆抗体，

治疗性抗体的研究现状与未来

从全人源化抗体的研究进展,当前治疗性抗体的临床研究现状及未来治疗性抗体发展展望三方面介绍治疗性抗体的研究现状,分析未来发展趋势。首先比较了不同方式生产的全人源化抗体及其与部分人源化抗体之间的差异,详细阐述了噬菌体展示技术和转基因技术两种全人源化抗体生产关键技术的研究进展,各自的优势、不足及今后的发展方向;然后分析探讨当前治疗性抗体的临床现状、治疗性抗体的作用机制、治疗性抗体研究中靶抗原选择以及目前治疗用抗体生产和临床应用方面面临的关键技术问题;最后对未来治疗性抗体发展进行展望分析,指出小型化抗体、免疫偶联物、双功能抗体、细胞内抗体、Fc改造抗体、抗体糖基化改造及治疗性多克隆抗体将是未来抗体的重要发展方向。

中国遗传改变小鼠研发与市场在近20年的发展与变化

遗传改变小鼠是基因组经过"修饰"或"改造"的实验用小鼠,作为实验动物的重要组成在中国近20年里得到了飞速发展,被先后应用于生命科学与医学的基础研究、抗体药物评价与抗体药物研发等转化应用项目中。介绍了近20年中国遗传改变小鼠领域的国家投入、机构建设、市场发展、学术交流、工作重点及成果积累等方面的发展与变化。

抗肿瘤坏死因子-α单克隆抗体治疗炎症性肠病的专家共识（2017）

IBD是一组病因尚不十分明确的慢性非特异性肠道炎性疾病，包括UC和CD。治疗IBD的抗TNF-α单克隆抗体包括人鼠嵌合体IgG1单克隆抗体英夫利西单克隆抗体（infliximab，IFX）、全人源化单克隆抗体阿达木单克隆抗体（adalimumab，ADA）和聚乙二醇人源化单克隆抗体的抗原结合片段（fragmentofantigenbinding，Fab）赛妥珠单克隆抗体（certolizumabpegol，CZP）。

Denosumab可用于预防绝经后妇女骨质疏松所致骨折

骨质疏松症的主要发病机制是机体的骨重建失衡，骨重建是指去除骨骼局部旧骨代之以形成新骨，即破骨细胞与成骨细胞一个成对的、相耦联的细胞活动过程，骨重建是成熟骨组织的一种重要替换机制。细胞核因子KB配体活化因子受体（RANKL）对破骨细胞的生长发育及功能有着极其重要的作用。Denosumab又称AMG-162，是一种针对RANKL的完全人源化单克隆抗体，