全反式维甲酸与弹性蛋白酶对肺组织破坏的干预作用

目的采用胚肺成纤维细胞三维立体培养技术,直接观察全反式维甲酸(RA)和中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)对肺的主要成分之一胶原组织降解的干预作用。方法在胚肺成纤维细胞三维立体培养过程中加入细胞因子〔肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-1β(IL-1β)〕来诱导基质金属蛋白酶(MMPs)的表达,同时加入RA或NE干预MMPs及其组织抑制因子(TIMPs)的表达;用明胶酶谱法测定MMP-2、MMP-9,用Western blotting法测定MMP-1、MMP-3及TIMP-1、TIMP-2,同时在培养5d后测定胶原的含量及面积大小。结果TNF-α和IL-1β诱导在立体胶原内培养的胚肺成纤维细胞产生MMP-1、MMP-3和MMP-9,但是只引起少量胶原降解(P>0.05),同时加入NE,结果导致胶原几乎完全降解(P<0.01)。NE使MMP-1、MMP-2、MMP-3和MMP-9由非活化的形式转化为分子量较小的活化形式,同时,清除TIMP-1和TIMP-2。RA抑制了MMP-1的表达及MMP-3、MMP-9的活化,并削弱了NE对TIMP-1、TIMP-2的清除作用,进而抑制了胶原的降解。胶原降解后基质发生强烈收缩。结论MMPs可直接降解肺内胶原和其他间质组织,导致肺组织破坏;NE通过活化MMPs引起或加速细胞外基质的破坏;MMPs与NE的协同作用可能是肺气肿等肺组织破坏的机制。RA通过抑制MMPs的表达与活化对抗NE对肺组织的破坏作用。

全反式维甲酸对非小细胞肺癌侵袭转移的干预作用

目的:采用肺癌H460细胞三维立体培养技术,直接观察全反式维甲酸对肺的主要成分之一胶原组织降解的干预作用。方法:在肺癌H460细胞三维立体培养过程中加入细胞因子(TNF-α和IL-1β)来诱导MMPs的表达,同时加入RA干预MMPs的表达;用明胶酶谱法测定MMP-2、MMP-9,同时在培养5天后测定胶原含量大小。结果:TNF-α和IL-1β诱导培养在立体胶原内的肺癌H460细胞产生大量MMP-2和MMP-9,并促进其的活化,引起大量胶原降解(P<0.05),RA抑制了MMP-2及MMP-9的表达及活化,进而抑制了胶原的降解,对抗了细胞因子(TNF-α和IL-1β)对胶原的降解作用。结论:炎性介质(TNF-α和IL-1β)可促进MMPs的表达,肺内的胶原可以被基质金属蛋白酶分解,这一作用可以使肺癌的侵袭或转移能力得到加强;全反式维甲酸(ATRA)通过抑制MMPs的表达与活化对抗MMPs对肺组织的破坏作用,进而抑制了肺癌的侵袭与转移。