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甘蔗单花粉全基因组扩增(WGA)与SCoT分子标记研究 被引量:6
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作者 陈平华 陈如凯 +8 位作者 许莉萍 王恒波 陈利平 林冰 施桂姣 张卓 高三基 郭晋隆 潘永保 《热带作物学报》 CSCD 2011年第11期2069-2075,共7页
从一个完整的甘蔗花粉囊中分离出单个花粉粒.利用特制取样器进行收集,采用碱裂解法释放单花粉DNA.裂解液可以直接作为WGA模板进行全基因组扩增.制备出单个花粉粒大量DNA。通过5SrRNA—ITS鉴定WGA产物真实性.并以目标起始密码子多... 从一个完整的甘蔗花粉囊中分离出单个花粉粒.利用特制取样器进行收集,采用碱裂解法释放单花粉DNA.裂解液可以直接作为WGA模板进行全基因组扩增.制备出单个花粉粒大量DNA。通过5SrRNA—ITS鉴定WGA产物真实性.并以目标起始密码子多态性标记对真实的WGA产物进行分析,显示出丰富的多态性。利用NTSYSpc软件分析花粉粒间遗传距离,并进行聚类分析,显示单花粉间遗传距离变幅为0.0888-0.3654,在相似系数0.187处.受试花粉粒中的36个明显分为2组.占总数的69%。说明减数分裂染色体重组过程中,有一定比例的基因位点为多数花粉粒所共有。根据SCoT标记聚类图可将所有供试花粉分为4大类.不同类花粉粒的分布具有一定的规律性. 展开更多
关键词 甘蔗 单花粉 基因组 SCoT分子标记 遗传分布
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不同单细胞全基因组扩增方法的比较及MALBAC在辅助生殖中的应用 被引量:13
2
作者 姚雅馨 喇永富 +4 位作者 狄冉 刘秋月 胡文萍 王翔宇 储明星 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2018年第8期620-631,共12页
单细胞全基因组扩增(whole genome amplification,WGA)是指在单细胞水平对全基因组进行扩增的新技术,其原理是将分离的单个细胞的微量全基因组DNA进行扩增,获得高覆盖率的完整的基因组后进行高通量测序,用于揭示细胞异质性。目前,WGA方... 单细胞全基因组扩增(whole genome amplification,WGA)是指在单细胞水平对全基因组进行扩增的新技术,其原理是将分离的单个细胞的微量全基因组DNA进行扩增,获得高覆盖率的完整的基因组后进行高通量测序,用于揭示细胞异质性。目前,WGA方法主要包括引物延伸预扩增(primer extension preamplification PCR,PEP-PCR)、简并寡核苷酸引物PCR(degenerate oligonucleotide primed PCR,DOP-PCR)、多重置换扩增(multiple displacement amplification,MDA)、多次退火环状循环扩增(multiple annealing and looping-based amplification cycles,MALBAC)等。本文对不同的单细胞WGA方法的原理及应用情况分别进行了阐述,并对其扩增效率进行评价和比较,包括基因组覆盖度、均一性、重现性、SNV(single-nucleotide variants)和CNV(copy number variants)检测力等。综合对比不同单细胞WGA方法后发现,MALBAC的扩增均一性最高、等位基因脱扣率最低、重现性最好,且对于CNV和SNV的检测效果最好。本文还阐述了MALBAC技术在人类单精子减数重组、非整倍体分析以及人类卵细胞基因组研究中的应用。 展开更多
关键词 单细胞基因组 MALBAC DOP-PCR MDA 单细胞
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全基因组扩增技术及其在法医个体识别中的应用 被引量:11
3
作者 蔡海强 柳海涛 +3 位作者 史斌 李安 唐文如 罗瑛 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期1119-1125,共7页
全基因组扩增(Whole genome amplification,WGA)技术是一种对全部基因组序列进行非选择性扩增的技术。近几年来,对WGA技术扩增痕量DNA检材的研究日渐深入,这些研究可望用于刑案现场采集到的痕量DNA样品的扩增,为法医个体识别提供足量的... 全基因组扩增(Whole genome amplification,WGA)技术是一种对全部基因组序列进行非选择性扩增的技术。近几年来,对WGA技术扩增痕量DNA检材的研究日渐深入,这些研究可望用于刑案现场采集到的痕量DNA样品的扩增,为法医个体识别提供足量的DNA模板。然而,对实际案件中复杂检材的扩增偏差问题一直困扰着法医工作者,寻求一个低扩增偏差、高扩增产率的WGA技术是法医工作者的主要目标。文章综述了WGA技术在法医个体识别中的研究进展及应用前景,为法医解决扩增偏差问题提供参考。 展开更多
关键词 基因组 STR 个体识别 法医
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Potyvirus属成员基因组全序列的简并引物PCR和RACE扩增方法 被引量:30
4
作者 陈炯 陈剑平 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期371-374,共4页
Based on multi-alignment of complete polyprotein amino acid sequences of genus Potyvirus,five degenerated primers were designedThey were Sprimer(5′-GGX AAY AAY AGY GGX CAZ CC-3′),pNIa(+)(5′-TNY TGG AAM CAY TGG A... Based on multi-alignment of complete polyprotein amino acid sequences of genus Potyvirus,five degenerated primers were designedThey were Sprimer(5′-GGX AAY AAY AGY GGX CAZ CC-3′),pNIa(+)(5′-TNY TGG AAM CAY TGG AT-3′),pCI2(+)(5′-GCX ACX AAX ATX ATX GAX AA-3′),pCI1(+)(5′-GTX GGX TCX GGX AAX TCX AC-3′)and pHC(+)(5′-TGY GAY AAY CAZ TTX GA-3′)(X=A,T,C or G:Y=T or C;Z=A or G;N=A or T;M=A,T or G)Using degenerated PCR and modified RACE methods,a protocol for determination of complete genome sequence of potyviruses was established and proved to be successful on five 展开更多
关键词 Potyvirus属成员 基因组分序列 PCR RACE 方法 马铃薯Y病毒属 简并引物 序列测定 方法
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人感染H7N9禽流感病毒全基因组扩增与测序方法的建立 被引量:4
5
作者 谢剑锋 赵琳 +10 位作者 张炎华 翁育伟 陈炜 王金章 何文祥 吴冰珊 黄萌 黄枝妙 朱颖 郑奎城 严延生 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期795-799,共5页
目的为了解人感染H7N9禽流感病毒基因特征从而更有效地防控疫情,需建立获得人感染H7N9禽流感病毒全基因序列的扩增和测序方法。方法采用鸡胚分离H7N9禽流感病毒,提取标本和毒株病毒RNA,自行设计引物,通过一步法RT-PCR扩增其全基因组片段... 目的为了解人感染H7N9禽流感病毒基因特征从而更有效地防控疫情,需建立获得人感染H7N9禽流感病毒全基因序列的扩增和测序方法。方法采用鸡胚分离H7N9禽流感病毒,提取标本和毒株病毒RNA,自行设计引物,通过一步法RT-PCR扩增其全基因组片段,纯化PCR产物后测定核苷酸序列,利用生物信息学软件拼接各节段序列并初步分析其特征。结果本研究中的引物能特异地扩增各基因的目的片段,通过序列拼接可以获得H7N9禽流感全基因组序列。经分析8个节段序列与近期国内流行的人感染H7N9禽流感病毒序列高度同源。结论该方法能有效地获得人感染H7N9禽流感病毒全基因组序列,可为进一步分析其基因特征奠定基础。 展开更多
关键词 H7N9禽流感 基因组 与测序 方法
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全基因组扩增技术的法医学应用价值及其结果评价 被引量:5
6
作者 邓建强 侯一平 《法医学杂志》 CAS CSCD 2005年第3期219-222,225,共5页
微量模板DNA的分析,一直是法医学特别关注和急需解决的难题之一,近年发展起来的一系列技术为解决这一问题提供了新的可能途径,本文即对微量模板DNA分析技术的进展和目前逐步发展的全基因组扩增技术的法医学应用价值、结果评价进行浅议。
关键词 法医学 DNA检验 微量分析 基因组
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全基因组扩增技术最新进展及其法医学应用现状 被引量:5
7
作者 陈玲 刘超 +1 位作者 杨电 王慧君 《国际遗传学杂志》 CAS 2007年第2期123-126,共4页
微量模板DNA的检测,是很多领域迫切需要解决的一个难题。因为DNA量不足,用现有的技术手段常无法检测成功。全基因组扩增技术可对非常微量的DNA进行均衡的扩增获得大量DNA,故被认为是目前解决这一难题的一种基本方法,已被广泛用于法... 微量模板DNA的检测,是很多领域迫切需要解决的一个难题。因为DNA量不足,用现有的技术手段常无法检测成功。全基因组扩增技术可对非常微量的DNA进行均衡的扩增获得大量DNA,故被认为是目前解决这一难题的一种基本方法,已被广泛用于法医学、单基因遗传病的诊断及疾病基因的分析等领域研究,并取得了良好的效果。现对这一技术的最新研究进展及其在法医学方面的应用现状作一综述。 展开更多
关键词 基因组 微量模板DNA 法医学
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多重置换扩增——一种新的全基因组扩增技术 被引量:8
8
作者 刘维瑜 金春莲 《国际遗传学杂志》 CAS 2007年第4期265-268,共4页
全基因组扩增技术(MDA)用于扩增大量的DNA以满足遗传检测的需要。在高通量的遗传分型中,处理有限的临床样本的基因组DNA,一直是个瓶颈问题。一种新方法——多重置换扩增,能高度忠实的复制整个基因组DNA,扩增出10~100kb大小的片... 全基因组扩增技术(MDA)用于扩增大量的DNA以满足遗传检测的需要。在高通量的遗传分型中,处理有限的临床样本的基因组DNA,一直是个瓶颈问题。一种新方法——多重置换扩增,能高度忠实的复制整个基因组DNA,扩增出10~100kb大小的片段,能提供大量均一完整的全基因组序列。MDA是一种简单、有效的方法,非常适用于遗传研究、法医学和临床诊断的需要。 展开更多
关键词 基因组 多重置换 phi29 DNA聚合酶
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全基因组扩增技术在产前诊断中的应用 被引量:4
9
作者 陈欣洁 宋艳琴 +4 位作者 陈敦金 李南 王佳燕 罗凯 陈敏 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第13期2181-2183,共3页
目的:探讨全基因组扩增技术(WGA)结合微阵列比较基因组杂交技术(Array-CGH)在低DNA浓度的产前样本中的应用价值。方法:对18例有产前诊断指征的孕妇进行侵入性产前诊断,所抽取的羊水或绒毛样本经DNA提取后因DNA浓度较低行全基因组扩增,... 目的:探讨全基因组扩增技术(WGA)结合微阵列比较基因组杂交技术(Array-CGH)在低DNA浓度的产前样本中的应用价值。方法:对18例有产前诊断指征的孕妇进行侵入性产前诊断,所抽取的羊水或绒毛样本经DNA提取后因DNA浓度较低行全基因组扩增,再应用微阵列比较基因组杂交技术分析。结果:所检测的18例样本中,有3例异常,均提示为45,X0,其余芯片结果正常。随访15例正常a CGH结果的胎儿,有9例出生后正常。结论:应用WGA技术辅助微阵列比较基因组杂交技术对早孕期超声提示异常的胎儿进行产前诊断是可行的,它不仅缩短了发报告的时间也保持了应用a CGH技术检测的敏感性和精确性。 展开更多
关键词 基因组技术 微阵列比较基因组杂交技术 产前诊断
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激光捕获显微分离-高可信度全基因组mRNA扩增技术的建立及其在食管癌细胞基因检测中的应用 被引量:1
10
作者 李沛 凌志强 +4 位作者 金戈 杨洪艳 赵继敏 黄幼田 董子明 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2006年第5期838-840,共3页
目的:建立激光捕获显微分离(LCM)-高可信度全基因组mRNA扩增(GMA)技术,并用其分析食管癌细胞基因表达的变化。方法:应用LCM直接捕获15例食管癌组织中癌细胞,提取并纯化mRNA,在T7RNA聚合酶作用下扩增成cRNA直接用于表达谱筛选。用实时荧... 目的:建立激光捕获显微分离(LCM)-高可信度全基因组mRNA扩增(GMA)技术,并用其分析食管癌细胞基因表达的变化。方法:应用LCM直接捕获15例食管癌组织中癌细胞,提取并纯化mRNA,在T7RNA聚合酶作用下扩增成cRNA直接用于表达谱筛选。用实时荧光定量RT-PCR验证MET和PTPN2基因的表达,并将LCM与组织匀浆法和显微镜下针挑法检测结果进行比较。结果:基因芯片筛选出上调基因MET,其高表达率为12/15;下调基因PTPN2,其低表达率为9/15;2个基因实时荧光定量RT-PCR检测结果与上述结果的一致率达100%。组织匀浆法、显微镜下针挑细胞法所获样品经实时荧光定量RT-PCR检测,MET结果与LCM-GMA结果的一致率分别为25%(3/12)和33%(4/12),PTPN2分别为22%(2/9)和33%(3/9)。结论:LCM-GMA技术十分有利于基因表达谱的芯片分析和单个基因表达变化的实时荧光定量RT-PCR研究。 展开更多
关键词 食管肿瘤 激光捕获显微分离细胞技术 高可信度基因组 mRNA技术 方法
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全基因组扩增技术在植入前遗传学诊断中的应用 被引量:2
11
作者 周怡雯 赵晓明 《国际生殖健康/计划生育杂志》 CAS 2009年第2期110-113,共4页
全基因组扩增技术是一种对微量DNA进行均衡扩增的方法,用于各类遗传检测,对于获取细胞数目及DNA量非常有限的植入前遗传学诊断是十分可贵的。该项技术主要包括经热循环扩增和恒温扩增两类方法,其中恒温扩增的多重置换扩增法为近几年发... 全基因组扩增技术是一种对微量DNA进行均衡扩增的方法,用于各类遗传检测,对于获取细胞数目及DNA量非常有限的植入前遗传学诊断是十分可贵的。该项技术主要包括经热循环扩增和恒温扩增两类方法,其中恒温扩增的多重置换扩增法为近几年发展起来的技术,目前多重置换扩增法在植入前遗传学诊断中的应用正备受关注。对全基因组扩增技术的常用方法,尤其对多重置换扩增法及其在植入前遗传学诊断中的应用现状做综述。 展开更多
关键词 基因组 多重置换 植入前遗传学诊断
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全基因组扩增技术的研究进展 被引量:5
12
作者 金帆 袁淑慧 黄荷凤 《国外医学(遗传学分册)》 2002年第4期189-192,共4页
全基因组扩增可增加微量 DNA分析的遗传信息量 ,为实现微量 DNA多基因位点分析和重复检测提供了可能 ,目前已应用于植入前遗传学诊断、母体外周血胎儿细胞产前遗传学分析 ,及肿瘤基因分析等领域研究 ,是一项非常有价值的技术。
关键词 基因组 植入前遗传学诊断 基因多位点 研究进展
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长距离PCR法扩增RHDV全基因组及其序列分析
13
作者 张玉颖 刘光清 +3 位作者 倪征 云涛 吴润 张淼涛 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期1-5,共5页
从人工感染RHDV致死的兔肝组织中提取病毒总RNA,应用特异性引物将病毒RNA反转录成cD-NA,以此为模板用长距离PCR法扩增RHDV全基因组,将成功扩增出的RHDV全基因组克隆到pMD18-T载体中,经PCR鉴定及酶切分析后进行序列测定。测序结果表明,J... 从人工感染RHDV致死的兔肝组织中提取病毒总RNA,应用特异性引物将病毒RNA反转录成cD-NA,以此为模板用长距离PCR法扩增RHDV全基因组,将成功扩增出的RHDV全基因组克隆到pMD18-T载体中,经PCR鉴定及酶切分析后进行序列测定。测序结果表明,JX97全基因组由7 437个核苷酸组成,包括由9个核苷酸组成5′NCR、59个核苷酸组成3′NCR和一个至少含有27个核苷酸的poly(A)尾。序列比较结果显示,RHDVJX97株的衣壳蛋白与已报道的参考毒株具有较高的序列同源性,均在90%以上,提示所有的RHDV分离株具有较近的亲缘关系。 展开更多
关键词 免病毒性出血症病 长距离 基因组
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全基因组扩增在DMD植入前遗传学诊断中的可行性研究
14
作者 徐晨明 金帆 +2 位作者 黄荷凤 陶冶 叶英辉 《中国计划生育学杂志》 2001年第5期272-275,共4页
目的:建立单细胞扩增前引物延伸法及巢式PCR技术,研究该技术在杜氏肌营养不良症植入前遗传学诊断中的可行性。方法:获取单个正常男女淋巴细胞和无杜氏肌营养不良(DMD)家族史的单个卵裂球,15碱基随机引物PEP扩增单细胞全基因组,再以巢式... 目的:建立单细胞扩增前引物延伸法及巢式PCR技术,研究该技术在杜氏肌营养不良症植入前遗传学诊断中的可行性。方法:获取单个正常男女淋巴细胞和无杜氏肌营养不良(DMD)家族史的单个卵裂球,15碱基随机引物PEP扩增单细胞全基因组,再以巢式PCR技术检测PEP反应产物中DMD基因外显子8,17,19,44,45,48及Y染色体上的睾丸决定基因SRY。结果:单个淋巴细胞和单个卵裂球的6个DMD外显子扩增成功率分别为97.2%(175/180)和100%(60/60),单个男性淋巴细胞SRY的扩增成功率为100%(15/15),而单个女性淋巴细胞无SRY的扩增(0/15)。结论:检测单细胞DMD基因外显子8,17,19,44,45,48和SRY的PEP-巢式PCR技术具有较高扩增成功率和特异性,可望应用于 DMD的植入前遗传学诊断的单细胞基因诊断中。 展开更多
关键词 杜氏肌营养不良症 基因组 前引物延伸植入前遗传学诊断
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3种单细胞全基因组扩增方法对1~4 Mb拷贝数变异检测性能的研究
15
作者 于婷 王云云 +2 位作者 费嘉 黄杰 胡泽斌 《分子诊断与治疗杂志》 2022年第9期1549-1553,共5页
目的比较3种单细胞全基因组扩增(WGA)法(SurePlex、MALBAC和MDA)对1~4 Mb拷贝数变异(CNV)的检测性能,为胚胎植入前非整倍体遗传学检测(PGT-A)选择最佳方法提供依据。方法采用3种含有已知1~4 Mb CNV的细胞系,分别以上述3种方法进行WGA扩... 目的比较3种单细胞全基因组扩增(WGA)法(SurePlex、MALBAC和MDA)对1~4 Mb拷贝数变异(CNV)的检测性能,为胚胎植入前非整倍体遗传学检测(PGT-A)选择最佳方法提供依据。方法采用3种含有已知1~4 Mb CNV的细胞系,分别以上述3种方法进行WGA扩增,对扩增产物统一采用Veriseq构建PGT-A测序文库,illumina-NextSeq550测序平台进行测序,最后采用嘉宝仁和公司的PGXCould生信平台进行信息学分析。对比各方法的PGT-A分析结果,综合评估其性能。结果3种方法均可获得足够的WGA产物,并成功构建测序文库。扩增产物浓度中,MDA>SurePlex>MALBAC,差异有统计学意义(P<0.05);建库产物浓度中,MDA>MALBAC>SurePlex,差异有统计学意义(P<0.05);3种方法测序获得有效reads平均值在10 M以上,且原始数据与基因组的比对率也均超过97%。基因组比对率、已覆盖基因组比例、SD值比较,MDA>MALBAC>SurePlex,差异有统计学意义(P<0.05)。冗余序列比例的比较,SurePlex>MALBAC>MDA,差异有统计学意义(P<0.05)。MDA法可辨识出3.59 Mb(GM24312)左右的CNV,而对于2.5 Mb(GM13325)及1.3 Mb(GM25372)很难辨识。其他两种WGA方法结果理想。结论SurePlex和MALBAC均可用于1~4 Mb的CNV检测,且Sureplex法性能更优,但MDA法检测1~4 MbCNV存在一定风险。 展开更多
关键词 植入前染色体非整倍体检测 基因组 拷贝数变异 二代测序
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全基因组扩增的应用及进展
16
作者 张媛媛 刘均洪 《杭州化工》 CAS 2003年第2期36-38,共3页
全基因纽扩增这一概念在过去几年就已经提出。当时,人们已经开始用聚合酶链反应技术(PCR)来复制具有生物学意义的基因组片断。全基因组扩增的应用非常广泛,包括法学、胚胎病理诊断、生物恐怖主义基因侦查、临床样本永久保存、微生物多... 全基因纽扩增这一概念在过去几年就已经提出。当时,人们已经开始用聚合酶链反应技术(PCR)来复制具有生物学意义的基因组片断。全基因组扩增的应用非常广泛,包括法学、胚胎病理诊断、生物恐怖主义基因侦查、临床样本永久保存、微生物多样性以及基因型等。如果没有对目标物的偏见或者非自由分类的话,可以对全基因组进行复制。这些发现为分子生物学开辟了一条新的道路。 展开更多
关键词 基因组 应用 进展 PCR 分子生物学
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乙型肝炎病毒全基因组扩增方法研究进展
17
作者 李端 闫永平 《国外医学(病毒学分册)》 2000年第2期35-37,共3页
HBV基因全长 PCR扩增为 HBV基因结构的多样性与致病性和传播途径等关系的研究提供了全新的技术 ,在 HBV研究中已显示了巨大优越性。本文对该方法的几个主要技术问题研究进展作了简要综述。
关键词 HBV基因 PCR HBV基因组
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新型鹅细小病毒四川株的全基因组扩增及遗传进化分析 被引量:5
18
作者 葛志琪 刘亚刚 +9 位作者 陈舜 朱德康 刘马峰 汪铭书 贾仁勇 孙昆峰 杨乔 吴英 赵新新 程安春 《四川农业大学学报》 CSCD 北大核心 2017年第4期574-580,共7页
【目的】了解四川地区新型鹅细小病毒(Novel goose parvovirus,NGPV)的分子生物学特征及遗传变异情况。【方法】根据Gen Bank中发表的新型鹅细小病毒的全基因组序列,设计5对兼并引物采用PCR方法分段扩增新型鹅细小病毒四川株的全基因组... 【目的】了解四川地区新型鹅细小病毒(Novel goose parvovirus,NGPV)的分子生物学特征及遗传变异情况。【方法】根据Gen Bank中发表的新型鹅细小病毒的全基因组序列,设计5对兼并引物采用PCR方法分段扩增新型鹅细小病毒四川株的全基因组序列,并利用DNAstar等生物信息分析软件对获得的基因组序列进行分子特性与遗传演变分析。【结果】获得的新型鹅细小病毒四川株(命名为SC16)全长5 109 nt,5′端ITR长408 nt,3′端ITR长407 nt,NS基因长1 884 nt,VP基因长2 199 nt。序列比对和遗传进化分析显示,SC16株与山东分离株SDLC01(KT343253.1)及QH15(KT751090.1)的基因组核苷酸同源性高达99%,与两者的亲缘关系最近,基于NS及VP蛋白的氨基酸序列系统进化树分析结果与此一致。但SC16株的5′端ITR还是发生了一定的变异:与SDLC01及QH15相比,多了几个14 nt的插入片段。【结论】研究结果丰富了NGPV的分子生物学资料。 展开更多
关键词 新型鹅细小病毒 鸭短喙侏儒综合征 基因组 遗传进化分析
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单细胞全基因组扩增技术与应用 被引量:2
19
作者 徐晓丽 吴凌娟 鄢仁祥 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2019年第4期342-352,共11页
同一组织中的细胞往往具有类似的结构和功能,然而通过对单个细胞进行测序分析后,发现每个细胞都具有一定异质性.单细胞全基因组扩增技术是进行单细胞测序的前提,该技术可用于揭示单细胞基因组结构差异,同时在肿瘤研究、发育生物学、微... 同一组织中的细胞往往具有类似的结构和功能,然而通过对单个细胞进行测序分析后,发现每个细胞都具有一定异质性.单细胞全基因组扩增技术是进行单细胞测序的前提,该技术可用于揭示单细胞基因组结构差异,同时在肿瘤研究、发育生物学、微生物学等研究中发挥重要作用,并成为生命科学研究技术的热点之一.单细胞全基因组扩增技术的难点在于单细胞的分离和全基因组的扩增.本文介绍了单细胞全基因组扩增技术中常用的单细胞分离技术和单细胞全基因组扩增技术,并对各技术间的优缺点进行比较,同时着重讨论该技术在肿瘤研究、发育生物学和微生物学研究中的应用. 展开更多
关键词 单细胞分离技术 单细胞基因组技术 比较 应用
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全基因组扩增策略在基因芯片分析SARS冠状病毒实验中的应用 被引量:2
20
作者 赵革新 任鲁风 +4 位作者 刘凤杰 何新舟 董小岩 吴小兵 侯云德 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 2004年第3期54-58,共5页
针对SARS冠状病毒的分子生物学检测是控制SARS流行的关键环节。为评价全基因组扩增对SARS微量样本检测的影响 ,采用 6 mer随机引物反转录 ,用加接头的随机引物合成第二链 ,再以接头序列为引物扩增并掺入荧光标记 ,最后与带有 70 mer探... 针对SARS冠状病毒的分子生物学检测是控制SARS流行的关键环节。为评价全基因组扩增对SARS微量样本检测的影响 ,采用 6 mer随机引物反转录 ,用加接头的随机引物合成第二链 ,再以接头序列为引物扩增并掺入荧光标记 ,最后与带有 70 mer探针的基因芯片杂交。此非特异方法基本覆盖了样本中的全部DNA ,结果发现SARS冠状病毒全基因组的扩增效果对基因芯片杂交结果的均匀性有较大影响 ,PCR循环次数增多会导致扩增均匀性的降低。分析了不同的引物对全基因组扩增均匀性的影响 ,探讨了全基因组扩增策略的缺陷。 展开更多
关键词 严重急性呼吸道综合症 SARS 冠状病毒 基因组 基因芯片
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