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用反式互补表达载体实现全抗体在CHO-dhfr-细胞中的高效表达 被引量:2
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作者 安怀杰 俞炜源 孙志伟 《生物技术通讯》 CAS 2007年第5期735-738,共4页
目的:通过弱化筛选基因二氢叶酸还原酶基因(dhfr),构建双顺反子全抗体表达载体,实现全抗体在CHO细胞中的高效表达。方法:将dhfr基因分为分别编码1~105和106~187氨基酸残基的2部分,分别通过linker与亮氨酸拉链GCN4融合,分别通过内部起... 目的:通过弱化筛选基因二氢叶酸还原酶基因(dhfr),构建双顺反子全抗体表达载体,实现全抗体在CHO细胞中的高效表达。方法:将dhfr基因分为分别编码1~105和106~187氨基酸残基的2部分,分别通过linker与亮氨酸拉链GCN4融合,分别通过内部起始位点序列与抗体轻重链基因偶联,构建成2个双顺反子表达载体pIRESLZdhfr-H和pIRESLZdhfr-L。用脂质体2000转染CHO-dhfr-细胞,用无次黄嘌呤和胸腺嘧啶脱氧核苷的IMDM筛选培养基筛选阳性克隆。结果:筛选到的阳性克隆表达水平为1.47~3.5μg/(106细胞.d),经氨甲蝶呤(MTX)梯度加压,在MTX浓度为5×10-8mol/L时,表达水平达到11.5μg/(106细胞.d)。结论:构建了基于亮氨酸拉链二聚化基础的dhfr弱化方式的双顺反子表达载体,实现了全抗体在CHO-dhfr-细胞中的高效表达。 展开更多
关键词 双顺反子表达载体 二氢叶酸还原酶基因 弱化 全抗体
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治疗性全抗体的表达及其研究进展 被引量:1
2
作者 安怀杰 刘志刚 俞炜源 《生物技术通讯》 CAS 2004年第3期299-301,共3页
治疗性全抗体是一类前景良好的治疗药物,具有潜在的巨大市场。截至2003年6月,美国FDA批准的治疗性全抗体有20种。全抗体表达是抗体工程的研究重点之一,本文对全抗体的表达及其研究进展进行了阐述。
关键词 治疗性全抗体 表达 基因 抗体 药物
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人源抗狂犬病毒中和性全抗体在昆虫细胞中的表达 被引量:3
3
作者 张世珍 梁米芳 +3 位作者 郑海发 李维 董关木 侯云德 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期193-199,共7页
将来源于噬菌体抗体库的人源狂犬病毒糖蛋白特异性单抗G10Fab的基因 ,克隆入杆状病毒人源IgG抗体表达载体 ,通过转染将重组质粒导入昆虫细胞 ,以全抗体的形式表达了一株人源抗狂犬病毒基因工程抗体G10。用亲和层析的方法纯化了表达产物 ... 将来源于噬菌体抗体库的人源狂犬病毒糖蛋白特异性单抗G10Fab的基因 ,克隆入杆状病毒人源IgG抗体表达载体 ,通过转染将重组质粒导入昆虫细胞 ,以全抗体的形式表达了一株人源抗狂犬病毒基因工程抗体G10。用亲和层析的方法纯化了表达产物 ,经与一株鼠源糖蛋白特异性单抗竞争证实 ,该单克隆抗体特异性识别狂犬病毒糖蛋白 ,亲和力约为 10 -9M。体外中和实验证明 。 展开更多
关键词 狂犬病毒 中和抗体 全抗体表达 昆虫细胞表达 体外中和活性 人源抗体
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人源抗人干扰素α1b全抗体在昆虫细胞中的表达、纯化和鉴定
4
作者 龚斌 李川 梁米芳 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期312-316,共5页
目的克隆、杆状病毒/昆虫表达系统表达人源抗人干扰素α1b(huIFN-α1b)全抗体基因,获得全抗体蛋白。方法利用PCR技术以gIII-scFv融合表达的噬菌粒质粒为模板,分别克隆了5株抗体基因的轻链和重链;经Nco I/Xho I和Sac I/Hind III分别酶... 目的克隆、杆状病毒/昆虫表达系统表达人源抗人干扰素α1b(huIFN-α1b)全抗体基因,获得全抗体蛋白。方法利用PCR技术以gIII-scFv融合表达的噬菌粒质粒为模板,分别克隆了5株抗体基因的轻链和重链;经Nco I/Xho I和Sac I/Hind III分别酶切,与经过相同酶切的pAC-K-CH3载体连接构建了昆虫细胞sf9表达载体pAC-K-CH3-H-L;经测序鉴定正确后,转染进入昆虫细胞sf9进行异源表达。采用免疫荧光(IFA)和ELISA对全抗体的表达和结合情况进行初步鉴定。采用Protein-A亲和层析柱对收获的全抗体IgG蛋白进行纯化,将纯化后的抗体蛋白进行SDS-PAGE电泳和Western blotting鉴定。结果成功扩增了人源抗人干扰素α1b抗体轻链和重链基因;免疫荧光(IFA)鉴定表明5株重组质粒在昆虫细胞sf9表达出了全抗体蛋白,ELISA鉴定表明其中3株与huIFN-α1b特异性结合;经Protein-A亲和层析柱纯化后每升细胞培养上清收获了5~20 mg的蛋白,Western blotting鉴定表明3株纯化的全抗体蛋白和huIFN-α1b特异性结合。结论通过杆状病毒/昆虫表达系统获得了3株人源抗人干扰素α1b(huIFN-α1b)全抗体蛋白。 展开更多
关键词 杆状病毒/昆虫表达系统 人干扰素α1b IgG全抗体 表达 纯化
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失血性休克复苏液体的演进——低效价抗体O型全血正重新成为首选的应急通用桥接复苏液体
5
作者 王鸿捷 郭永建 《中国输血杂志》 CAS 2024年第8期953-964,共12页
血液复苏是严重失血患者的关键急救措施。血液复苏液体的选用,经历了从全血到晶体液/胶体液、晶体液联合红细胞、等比例血液成分的演进过程。近20年来,采用低效价抗体O型全血(low titer group O whole blood,LTOWB)作为血液复苏的首选... 血液复苏是严重失血患者的关键急救措施。血液复苏液体的选用,经历了从全血到晶体液/胶体液、晶体液联合红细胞、等比例血液成分的演进过程。近20年来,采用低效价抗体O型全血(low titer group O whole blood,LTOWB)作为血液复苏的首选应急通用桥接复苏液,已发展成为大趋势。我们对全血在严重失血患者的应用历史和现状做一介绍,并提出我国采用LTOWB作为首选应急通用血液的进一步论证和验证研究建议。 展开更多
关键词 低效价抗体O型 血液复苏 严重失血
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人源腺病毒伴随病毒Ⅱ型单克隆抗体Fab段及其全抗体的研制 被引量:1
6
作者 姚李四 王涛 +4 位作者 梁米芳 袁振华 纪燕 吴小兵 李德新 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期240-243,共4页
目的 运用噬菌体表面表达技术 ,获得基因工程抗腺病毒伴随病毒抗体Fab、IgG。方法 从酶联免疫吸附试验阳性的人外周血中分离淋巴细胞 ,提取总RNA ,逆转录cDNA ,聚合酶链反应扩增人IgGFab轻、重链基因 ,利用pComb3载体构建噬菌体抗体... 目的 运用噬菌体表面表达技术 ,获得基因工程抗腺病毒伴随病毒抗体Fab、IgG。方法 从酶联免疫吸附试验阳性的人外周血中分离淋巴细胞 ,提取总RNA ,逆转录cDNA ,聚合酶链反应扩增人IgGFab轻、重链基因 ,利用pComb3载体构建噬菌体抗体库。用纯化的腺病毒伴随病毒为固相抗原筛选抗体Fab段 ,并在E coli中进行分泌性表达。通过ELISA和间接免疫荧光试验、筛选和鉴定Fab抗体 ,并进行序列测定。然后将其重链和轻链基因克隆到全抗体表达载体pAC L Fc上 ,转染昆虫sf 9细胞 ,利用杆状病毒 昆虫细胞系统实现全抗体的分泌型表达 ,免疫沉淀试验鉴定它的抗蛋白。结果 分离到一株Fab克隆AAVs 31,腺病毒伴随病毒抗原和抗Fab抗体直接ELISA检测阳性 ,间接免疫荧光试验呈阳性 ,序列分析结果表明是一新的序列 ,所获得的基因为人源IgGFab基因 ,由Gamma链和Kappa链组成。表达的全抗体ELISA反应、免疫荧光反应和间接免疫荧光试验均为阳性 ,免疫沉淀试验结果显示它结合病毒颗粒 ,不结合任一VP1、VP2、VP3单独衣鞘蛋白。结论 用噬菌体表面表达技术首次获得了抗腺病毒伴随病毒Ⅱ型单克隆抗体Fab段 ,并在真核系统中表达了其全抗体 。 展开更多
关键词 人源腺病毒 病毒Ⅱ型 单克隆抗体全抗体 噬菌体表面表达技术 基因工程 全抗体
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腺病毒介导的全抗体基因治疗卵巢癌的实验研究 被引量:16
7
作者 郭明高 姜明红 +5 位作者 杨琴 李月敏 崔贞福 李林芳 吴孟超 钱其军 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第14期1147-1151,共5页
目的 探讨应用基因治疗方法表达完全抗体的可行性及其对肿瘤的治疗作用。方法构建携带曲妥珠单抗 [Trastuzumab ,商品名 :赫赛汀 (Herceptin) ]全抗体基因的腺病毒载体 ,利用重组技术获得增殖缺陷型腺病毒Ad SG Her ,用Ad SG Her转染... 目的 探讨应用基因治疗方法表达完全抗体的可行性及其对肿瘤的治疗作用。方法构建携带曲妥珠单抗 [Trastuzumab ,商品名 :赫赛汀 (Herceptin) ]全抗体基因的腺病毒载体 ,利用重组技术获得增殖缺陷型腺病毒Ad SG Her ,用Ad SG Her转染人正常肝细胞株L 0 2 ,判断体外肝细胞是否可以表达Herceptin抗体 ;将卵巢癌SK OV 3细胞接种于裸鼠皮下 ,3d后把 4 0只成瘤裸鼠随机分为3个治疗组和 1个对照组 ,每组各 10只。治疗组裸鼠尾静脉分别注射不同滴度的Ad SG Her :治疗A组注射 2× 10 9空斑形成单位 ( pfu) /只 ,B组注射 1× 10 9pfu/只 ,C组注射 5× 10 8pfu/只。用酶联免疫吸附试验 (ELISA)分别在体外转染Ad SG Her后的第 3天和第 7天 ,以及裸鼠接受Ad SG Her治疗后的第 3、7、10、14、2 1、2 8、35天检测Herceptin的表达量 ;通过间接免疫荧光法 (IFA)和Western印迹法分别检测血清中的抗体与Her2过表达卵巢癌细胞株SK OV 3结合的特异性以及所表达全长抗体的完整性 ;同时观察不同滴度的Ad SG Her对荷SK OV 3实体瘤裸鼠的治疗作用。结果 构建的带有全长Herceptin基因的重组腺病毒Ad SG Her ,在体外及体内均能高效表达人源化抗体Herceptin。Western印迹显示 展开更多
关键词 腺病毒 介导作用 全抗体基因 基因治疗 卵巢癌 肿瘤 HERCEPTIN 赫赛汀
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抗甲肝病毒人源基因工程全抗体分子在杆状病毒中的表达 被引量:2
8
作者 曹经瑗 梁米芳 +6 位作者 孟庆玲 王晓芳 许永刚 郭可謇 詹美云 毕胜利 李德新 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期20-23,共4页
目的 探讨人源抗甲型肝炎病毒全抗体分子在杆状病毒中的表达。方法 将获得的人源抗甲肝病毒中和性抗体Fab段基因克隆入含信号肽及Fc的杆状病毒表达载体中并在杆状病毒细胞中表达。结果 获得了中和性人源抗甲肝病毒全抗体分子的表达... 目的 探讨人源抗甲型肝炎病毒全抗体分子在杆状病毒中的表达。方法 将获得的人源抗甲肝病毒中和性抗体Fab段基因克隆入含信号肽及Fc的杆状病毒表达载体中并在杆状病毒细胞中表达。结果 获得了中和性人源抗甲肝病毒全抗体分子的表达产物并进行了纯化 ,轻重链表达产物位置大小正确 ,HAFc16抗体能与具有中和活性的鼠抗甲肝病毒单克隆抗体产生竞争抑制反应 ,并能在体外中和甲肝病毒 ,另一株HAFc78抗体同样具有体外中和甲肝病毒的活性 ,但系抗不同位点的抗体。结论 获得的人源抗甲肝病毒全抗体分子表达产物具有很好的体外中和甲肝病毒的活性 ,且为抗不同位点的抗体 ,为这些抗体的进一步开发及应用打下了基础 ,为防止甲型肝炎暴发流行提供应急措施。 展开更多
关键词 甲肝病毒 基因工程 杆状病毒 肝炎抗体 全抗体分子
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人源抗乙型肝炎病毒基因工程全抗体的研制 被引量:2
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作者 郭瑜 梁米芳 毕胜利 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期105-108,F002,共5页
目的 研制人源化抗乙型肝炎表面抗原 (HBsAg)的IgG全抗体。方法 采用噬菌体抗体库技术 ,从乙肝疫苗免疫后健康人外周血淋巴细胞中提取抗体基因建立抗体库 ,用纯化的HBsAg筛选Fab抗体 ;再将获得的抗体轻、重链构建到杆状病毒表达载体p... 目的 研制人源化抗乙型肝炎表面抗原 (HBsAg)的IgG全抗体。方法 采用噬菌体抗体库技术 ,从乙肝疫苗免疫后健康人外周血淋巴细胞中提取抗体基因建立抗体库 ,用纯化的HBsAg筛选Fab抗体 ;再将获得的抗体轻、重链构建到杆状病毒表达载体pAc κ Fc中 ,转染SF9细胞表达IgG全抗体并进行纯化。免疫荧光检测抗体的表达 ,竞争抑制ELISA检测其与抗原的结合活性及特异性。结果 获得了一株抗乙肝表面抗原的Fab抗体 ;在转染后的SF9培养上清中收获到了IgG抗体 ,竞争ELISA证实该抗体针对HBV表面抗原的特异性抗体。结论 本实验得到了一株人源抗HBsAg的IgG抗体 ,并进行了纯化。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 基因工程 人源重组抗体 IgG全抗体 检测
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抗人角蛋白全IgG基因真核表达载体的构建及表达
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作者 夏汝山 王刚 +2 位作者 樊建勇 李巍 刘玉峰 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期693-695,707,共4页
目的 :构建抗角蛋白抗体基因的真核表达载体 ,并在CHO(dhfr-)细胞中表达。方法 :从含抗角蛋白抗体基因的原核Fab表达载体中 ,扩增VH 及VL 基因。以回收的PCR产物为模板 ,用重叠PCR扩增带有前导序列的VH、VL 基因。经XbaI/BamHI和XhoI/Hi... 目的 :构建抗角蛋白抗体基因的真核表达载体 ,并在CHO(dhfr-)细胞中表达。方法 :从含抗角蛋白抗体基因的原核Fab表达载体中 ,扩增VH 及VL 基因。以回收的PCR产物为模板 ,用重叠PCR扩增带有前导序列的VH、VL 基因。经XbaI/BamHI和XhoI/HindIII酶切后 ,分别插入真核表达载体pWD中 ,构建重组载体pWDκH。经PCR和测序鉴定正确后 ,用lipofectAMINE 2 0 0 0转染CHO(dhfr-)细胞。取培养上清检测抗人角蛋白全IgG的表达。结果 :构建了抗人角蛋白基因的真核表达载体pWDκH ,并在CHO(dhfr-)细胞中表达。结论 :在CHO(dhfr-)细胞中成功地表达了具有抗原结合活性的抗人角蛋白IgG 。 展开更多
关键词 基因工程 抗角蛋白全抗体 CHO(dhfr^-)
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人源抗H7N9血凝素中和抗体IgG的制备及鉴定 被引量:4
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作者 陈雅 熊四平 +8 位作者 唐奇 王怡雯 耿以如 顾慧 徐亚如 周荧 仇镇宁 冯振卿 朱进 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期874-879,892,共7页
目的 :将从全人源Fab噬菌体抗体库筛选获得的抗H7N9血凝素Fab抗体基因进行基因工程改造,以表达全分子抗H7N9血凝素中和抗体Ig G,并验证其对H7N9型禽流感病毒的中和活性。方法:用H7N9型禽流感病毒血凝素筛选全人源Fab噬菌体抗体库,构建... 目的 :将从全人源Fab噬菌体抗体库筛选获得的抗H7N9血凝素Fab抗体基因进行基因工程改造,以表达全分子抗H7N9血凝素中和抗体Ig G,并验证其对H7N9型禽流感病毒的中和活性。方法:用H7N9型禽流感病毒血凝素筛选全人源Fab噬菌体抗体库,构建全分子Ig G抗体重、轻链表达载体,共转染293 Free Style(293F)细胞,表达并纯化Ig G抗体。应用ELISA及Western blot实验检测抗体免疫学活性,微量中和实验及鸡胚预防保护实验检测其中和活性,血凝抑制试验判断其结合血凝素亚基。结果:成功筛选出1株全人源抗H7N9血凝素Fab抗体基因并构建Ig G真核表达载体。获得的全分子Ig G抗体重、轻链序列正确,并可特异性结合H7N9血凝素。微量中和实验证明其对H7N9型禽流感病毒有良好中和活性,中和滴度为15.6μg/m L。鸡胚预防保护实验显示抗体用量为200μg时可达100%保护率。血凝抑制试验表明其结合血凝素HA2亚基。结论:制备的重组全人源全分子抗H7N9血凝素Ig G抗体可特异性识别H7N9型禽流感病毒血凝素,对H7N9型禽流病毒有显著的中和作用,为进一步研发用于禽流感防治的抗体药物奠定基础。 展开更多
关键词 H7N9 分子抗体 血凝素 中和抗体
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人抗狂犬病毒抗体在毕赤酵母中的分泌表达 被引量:3
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作者 王丁丁 包晓群 +7 位作者 宿晓云 王文加 许天敏 焦平 陈磊 常伟勤 苏曼曼 颜炜群 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期720-722,共3页
目的经分步整合法在巴氏毕赤酵母中表达人抗狂犬病毒全分子抗体。方法分别构建人重链和轻链抗体表达质粒,以分步整合法电转化X33酵母菌,甲醇诱导表达后进行ELISA筛选及Western blot分析。结果SDS-PAGE、Western blot检测均在分子量约55k... 目的经分步整合法在巴氏毕赤酵母中表达人抗狂犬病毒全分子抗体。方法分别构建人重链和轻链抗体表达质粒,以分步整合法电转化X33酵母菌,甲醇诱导表达后进行ELISA筛选及Western blot分析。结果SDS-PAGE、Western blot检测均在分子量约55kD及25kD处出现特异性条带,ELISA检测显示所获全分子抗体具有良好的狂犬病毒抗原结合活性,表达量约8~10mg/L。结论在毕赤酵母菌中可经甲醇诱导产生具狂犬病毒抗原结合活性的分泌型人全分子抗体。 展开更多
关键词 分子抗体 毕赤酵母 狂犬病 分泌表达
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重组人抗乙型肝炎表面抗体表达的研究
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作者 宿晓云 王毅 +3 位作者 王芳 丛中一 王秀娟 颜炜群 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第16期1611-1612,共2页
目的应用毕赤酵母表达体系,表达、制备人抗乙型肝炎表面抗原全分子抗体。方法以抗-HBs抗体阳性个体为对象构建抗体表达文库,筛选抗-HBs抗体轻链和重链可变区序列,并将其重组至同一表达载体pPICZαIgG,转化X33酵母菌,甲醇诱导表达后进行E... 目的应用毕赤酵母表达体系,表达、制备人抗乙型肝炎表面抗原全分子抗体。方法以抗-HBs抗体阳性个体为对象构建抗体表达文库,筛选抗-HBs抗体轻链和重链可变区序列,并将其重组至同一表达载体pPICZαIgG,转化X33酵母菌,甲醇诱导表达后进行ELISA筛选鉴定及免疫印迹分析。结果Western印迹检测在分子量约140kD处出现特异性染色条带,ELISA结果表明所获得抗体分子具有良好的乙型肝炎表面抗原结合活性。结论在毕赤酵母菌中可经甲醇诱导产生具抗原结合活性的完整分泌型抗-HBs抗体。 展开更多
关键词 分子抗体 毕氏酵母 分泌表达 乙型肝炎表面抗原
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医药废水中大肠杆菌抗体制备及检测方法 被引量:1
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作者 范治国 庄惠生 王倩煜 《净水技术》 CAS 2011年第2期68-71,共4页
该文研究制备了大肠杆菌全菌体抗体,经纯化后抗体蛋白含量为2.50 mg/mL,测得全菌体抗体的效价大于25 600,并使用自制的抗体,建立了测定医药废水中大肠杆菌的间接酶联免疫吸附(ELISA)方法。间接ELISA方法的最佳测定条件为:抗原最佳包... 该文研究制备了大肠杆菌全菌体抗体,经纯化后抗体蛋白含量为2.50 mg/mL,测得全菌体抗体的效价大于25 600,并使用自制的抗体,建立了测定医药废水中大肠杆菌的间接酶联免疫吸附(ELISA)方法。间接ELISA方法的最佳测定条件为:抗原最佳包被浓度为200倍,一抗和酶标二抗的稀释浓度分别为稀释12 800倍和2 000倍,以0.5%牛血清白蛋白(BSA)作为封闭液,封闭时间为2 h。在最佳测定条件下,大肠杆菌在1×10^3-1×10^9 cfu/mL表现出良好的线性关系。采用所建立的间接ELISA方法检测了实际医药废水中的大肠杆菌,检测限为10^3 cfu/mL。 展开更多
关键词 大肠杆菌 菌体抗体 医药废水 间接酶联免疫吸附测定法
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羊口疮的研究 被引量:5
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作者 沈正达 靳诚 +13 位作者 沈斌元 王锡祯 罗德英 卢洪英 潘光炎 滕振文 陈燕军 宋勇 白吉荣 左玉婷 胡永浩 王蒲 汪清 常泽生 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 1989年第1期1-16,共16页
本文报道了对羊口疮的病原学、流行病学、实验病理学、血清学诊断以及免疫预防等问题所进行的系列研究结果。应用电镜技术,首次在国内观察到了羊口疮的病原——羊口疮病毒。对该病毒的某些生物学特性和理化学特性进行研究的结果表明,该... 本文报道了对羊口疮的病原学、流行病学、实验病理学、血清学诊断以及免疫预防等问题所进行的系列研究结果。应用电镜技术,首次在国内观察到了羊口疮的病原——羊口疮病毒。对该病毒的某些生物学特性和理化学特性进行研究的结果表明,该病毒的感染范围比较广泛,对干燥耐受性强,对热、紫外光和福马林敏感;在奶山羊睾丸细胞上生长良好,CPE变化显著,并有多倍性现象;通过系统取样和超薄切片,在电镜下观察到了病毒在培养细胞中的主要复制过程,以及培养细胞本身的亚微结构变化。试用差速离心联用30—45%蔗精密度梯度超速离心,能有效地提纯病毒,为纯化痘类病毒提供了一种较为理想的方法。中性无离子去污剂TritonX—100与2—巯基乙醇联合,可使病毒裂解,便于分离囊膜蛋白亚单位;用SDS—PAGE分析法,发现病毒最少可泳动出28条多肽区带,而病毒的囊膜亚单位则由18条多肽区带组成。将病毒亚单位作为抗原免疫羔羊,可激发羊只产生抗全病毒抗体和迟发性变态反应,这在国内属首次报道。流行病学的调查表明,羊口疮在甘肃省存在历史已久,分布广泛,对养羊业危害严重;病的自然感染主要见于绵羊和山羊,以羔羊最为易感,除口唇感染外,未见其他临诊病型;采取不同地区的病羊痂皮在羊体作交叉免疫试验,未发现病毒有型别差异。人工感染病羊的血常规检查和血清蛋白的电泳分析未见异常;病理组织学变化以表皮的网状变性、真皮的炎性浸润和结缔组织增生为最特征。首次在国内将反向间接血凝、对流免疫电泳、酶联免疫吸附,琼脂凝胶扩散以及血清中和等五种血清学方法用于羊口疮的诊断,填补了国内在这方面的空白,其中前三种方法在当时的国外文献中也未见有报道。以改良、完善现行方法为目的,对活毒苗免疫接种法作了系统的研究,证明是一种行之有效的应急性免疫措施,有在疫区推广应用的价值;对灭活苗所进行的探索性试验表明,灭活的病毒似能激发羊体产生一定程度的免疫,为今后进一步提高灭活苗的免疫效果以及研究其在实践中应用的可能性打下了有益的基础。 展开更多
关键词 羊口疮 电镜技术 多倍性 病毒抗体 迟发性变态反应
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3种ELISA方法与微量细胞中和试验检测SARS-CoV-2抗体滴度的相关性分析 被引量:3
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作者 蒋国润 赵恒 +7 位作者 廖芸 范胜涛 李丹丹 张莹 于丽 王丽春 李琦涵 徐兴丽 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期719-723,共5页
目的分析不同方法检测严重急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory symptom coronavirus 2,SARSCoV-2)疫苗免疫后抗体滴度的相关性,为其特异性抗体检测提供方法学依据。方法采用微量细胞中和试验及3种ELISA方法(分别以S蛋白... 目的分析不同方法检测严重急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory symptom coronavirus 2,SARSCoV-2)疫苗免疫后抗体滴度的相关性,为其特异性抗体检测提供方法学依据。方法采用微量细胞中和试验及3种ELISA方法(分别以S蛋白、N蛋白和灭活全病毒颗粒为抗原)检测SARS-CoV-2灭活疫苗临床试验血清样品的IgG抗体阳转率及中和抗体滴度,并进行微量细胞中和试验与3种ELISA方法的相关性分析。结果中和抗体、S抗体、N抗体和全病毒抗体检测所得抗体阳转率分别为84.3%、91.3%、65.2%和46.6%,抗体几何平均滴度分别为16.6、945.9、72.7和18.8。3种ELISA方法(分别以S蛋白、N蛋白和灭活全病毒颗粒为抗原)与微量细胞中和试验检测结果的相关系数(r)分别为0.494、0.371和0.181。结论检测SARS-CoV-2 S抗体水平能在很大程度上反映以抗体水平升高为特征的体液免疫反应的激活情况。 展开更多
关键词 严重急性呼吸综合征冠状病毒2 中和抗体 S抗体 N抗体 病毒抗体
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上海市虹口区中小学生和成人百日咳抗体水平监测 被引量:4
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作者 钱晓华 汤素文 +2 位作者 张莉 张捷 赵根明 《上海预防医学》 CAS 2017年第7期533-537,共5页
目的了解上海市虹口区中小学生和成年人群中百日咳抗体水平,为预防控制百日咳提供依据。方法随机抽取中小学生214人,成年人85人,孕妇24人,应用酶联免疫吸附试验,检测中小学生和成年人(包括孕妇)百日咳全抗体;调查青少年百日咳疫苗免疫... 目的了解上海市虹口区中小学生和成年人群中百日咳抗体水平,为预防控制百日咳提供依据。方法随机抽取中小学生214人,成年人85人,孕妇24人,应用酶联免疫吸附试验,检测中小学生和成年人(包括孕妇)百日咳全抗体;调查青少年百日咳疫苗免疫史和持续2周及以上咳嗽史。对百日咳抗体水平、抗体阳性率和高抗体水平进行统计分析。结果百日咳全抗体几何平均滴度水平(GMT)29.85 U/mL,人群百日咳全抗体阳性(IgG≥50 U/mL)率37.15%,总人群百日咳高抗体水平(IgG≥100 U/mL)阳性率17.65%。各年龄组百日咳全抗体GMT、抗体阳性率和高抗体水平阳性率均有明显差异,且随年龄增长均呈明显上升趋势。社区人群百日咳抗体水平明显高于孕妇和中小学生。1年内有持续2周以上咳嗽史的中小学生百日咳全抗体GMT、抗体阳性率和高抗体水平均明显高于无2周以上咳嗽史者。结论虹口区中小学生和成年人群中可能存在被漏诊或未发现的百日咳感染病例,现行百日咳疫苗免疫程序对青少年持久的保护作用不够,有待进一步开展医院/社区百日咳病例的前瞻性主动监测,为中小学生和成年人群加强接种百日咳疫苗提供科学依据。 展开更多
关键词 百日咳全抗体水平 抗体阳性率 抗体水平 持续2周以上咳嗽史 百日咳疫苗
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Analysis of Oseltamivir Resistance Substitutions in Influenza Virus Glycoprotein Neuraminidase using a Lentivirus-Based Surrogate Assay System
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作者 Jennifer Tisoncik-Go Katie S Cordero Lijun Rong 《Virologica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2013年第2期81-91,共11页
Influenza A virus poses a great threat to global health, and oseltamivir (trade marked as Tamiflu), which targets influenza surface glycoprotein neuraminidase (NA), is used clinically as a major anti-influenza treatme... Influenza A virus poses a great threat to global health, and oseltamivir (trade marked as Tamiflu), which targets influenza surface glycoprotein neuraminidase (NA), is used clinically as a major anti-influenza treatment. However, certain substitutions in NA can render an influenza virus resistant to this drug. In this study, using a lentiviral pseudotyping system, which alleviates the safety concerns of studying highly pathogenic influenza viruses such as avian influenza H5N1, that utilizes influenza surface glycoproteins (hemagglutinin or HA, and NA) and an HIV-core combined with a luciferase reporter gene as a surrogate assay, we first assessed the functionality of NA by measuring pseudovirion release in the absence or presence of oseltamivir. We demonstrated that oseltamivir displays a dose-dependent inhibition on NA activity. In contrast, a mutant NA (H274Y) is more resistant to oseltamivir treatment. In addition, the effects of several previously reported substitution NA mutants were examined as well. Our results demonstrate that this lentivirus-based pseudotyping system provides a quick, safe, and effective way to assess resistance to neuraminidase inhibitors. And we believe that as new mutations appear in influenza isolates, their impact on the effectiveness of current and future anti-NA can be quickly and reliably evaluated by this assay. 展开更多
关键词 Influenza virus Neuraminidase (NA) OSELTAMIVIR Drug resistance
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野战血站应对战时大量输血的策略探讨
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作者 易海 王魁英 +7 位作者 甘新宇 李黎 张倩 向姣 程宁 武文 苏毅 彭涛 《华南国防医学杂志》 CAS 2022年第6期457-459,495,共4页
目的 探讨野战血站应对战时大量输血的策略。方法 复习文献资料,从野战血站职能及体系构建,战创伤大量输血诊治进展及野战血站血液保障综合策略等方面进行系统性探讨。结果 野战血站承担了战时大量输血的任务,我军野战血站目前血液保障... 目的 探讨野战血站应对战时大量输血的策略。方法 复习文献资料,从野战血站职能及体系构建,战创伤大量输血诊治进展及野战血站血液保障综合策略等方面进行系统性探讨。结果 野战血站承担了战时大量输血的任务,我军野战血站目前血液保障以O型红细胞悬液及AB型血浆为主。应急全血采集也是血制品的重要来源,要充分进行输血前评估及输血后评价,并通过信息化、整体布局和系统联动,全方位应对野战条件下的大量输血问题。结论 本文提出战时大量输血的综合应对措施,为战时大量输血救治提供理论参考。 展开更多
关键词 野战血站 大量输血 应对策略 应急采血 抗体滴度
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Effects of mass layer imperfect bonding on the electrical impedance of a quartz crystal microbalance 被引量:2
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作者 CHEN YangYang WANG Ji +1 位作者 DU JianKe YANG JiaShi 《Science China(Physics,Mechanics & Astronomy)》 SCIE EI CAS 2013年第11期2186-2191,共6页
We study electrically forced vibrations of a crystal plate of AT-cut quartz carrying a thin mass layer operating as a quartz crystal microbalance for mass sensing.The mass layer is imperfectly bonded to the crystal pl... We study electrically forced vibrations of a crystal plate of AT-cut quartz carrying a thin mass layer operating as a quartz crystal microbalance for mass sensing.The mass layer is imperfectly bonded to the crystal plate with their interface described by the so-called interface-slip model which allows a discontinuity of the tangential interface displacement.Mindlin’s equations for piezoelectric plates are used.An analytical solution is obtained.The electrical impedance is calculated.The effects of an elastic interface and a viscoelastic interface are examined. 展开更多
关键词 PIEZOELECTRIC PLATE VIBRATION sensor
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